Membrane Potential Dye Imaging von Ventromedial Hypothalamus Neuronen aus erwachsenen Mäusen zu Glucose Sensing Studieren

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, die Glukosemessung in ventralen medialen Hypothalamus- oder VMH-Neuronen älterer Mäuse zu bewerten, wobei der Membranpotential-empfindliche Farbstoff als Index für die neuronale Aktivität verwendet wird. Dies wird erreicht, indem zunächst eine Herzperfusion durchgeführt wird, um Blut aus dem Gehirn einer anästhesierten Maus zu spülen, bevor das Gehirn entfernt wird. Der zweite Schritt besteht darin, koronale Hirnschnitte zu erstellen und die VMH zu präparieren.

Anschließend werden die VMH-Neuronen dissoziiert und auf Deckgläsern kultiviert. Der letzte Schritt besteht darin, die Fluoreszenz der Neuronen zu messen, da die Glukose in Gegenwart des Membranpotentialfarbstoffs verringert wird. Letztendlich wird jede Neuronenänderung in der Fluoreszenz verwendet, um die Reaktion des glukosegehemmten Neurons auf Glukoseveränderungen zu quantifizieren.