Name: Trockenblut Sammlung von Gesundheits-Biomarker zur Teilnahme am Bevölkerungsstudien maximieren (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-01-28T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 20 s
Description: Lernen Sie die Trockenblutpunkt-Sammlung für Biomarker-Analysen in Bevölkerungsstudien. Diese Methode ist kostengünstig, weniger invasiv als Venenpunktion und ermöglicht Forschung in schwierigen Umgebungen.

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Eunice Kennedy Shriver National Institute of Child Health: Diese Arbeit wurde von der Arbeit, Familie und Gesundheit Network (www.WorkFamilyHealthNetwork.org), die durch einen Kooperationsvertrag durch die National Institutes of Health und der Centers for Disease Control and Prevention finanziert wird unterstützt und die menschliche Entwicklung (Förder # U01HD051217, U01HD051218, U01HD051256, U01HD051276), National Institute on Aging (Zuschuss # U01AG027669), Amt für Verhaltenswissenschaften Forschung und Wissenschaft, dem National Heart, Lung and Blood Institute (R01HL107240) und Nationale Institut für Arbeits Sicherheit und Gesundheit (Förder # U01OH008788, U01HD059773). Zuschüsse aus dem William T. Grants-Stiftung, Alfred P Sloan Foundation und der Verwaltung für Kinder und Familien haben, zusätzliche Mittel zur Verfügung gestellt. Der Inhalt dieser Veröffentlichung sind allein in der Verantwortung der Autoren und stellen nicht notwendigerweise die offizielle Meinung der Institute und Büros.

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Des Wissenschaftlichen Beirats der Matsutani Amerika dient als Berater und Sachverständiger für Dinsmore LLC, und erhielt Beratung; Orfeu Buxton hat einen Ermittler initiierte Zuschuss von Sepracor Inc erhalten (jetzt Sunovion; ESRC-0977, ClinicalTrials.gov Identifier NCT00900159) Gebühren von der Wake Forest University Medical Center.

Biomarker sind sehr nützliche Werkzeuge in mehreren Disziplinen einschließlich der Medizin, Zellbiologie, Genetik, Psychologie, Soziologie, Demographie und Sozialepidemiologie. In jeder Disziplin, wurde Frühphase Gültigkeit und Zuverlässigkeit Biomarker-Forschung verwendet, um sowohl verborgene Krankheitsrisiken aufzudecken und bieten Längs Vorhersage der gesundheitlichen Folgen. In diesen Fällen Biomarkern, die präzise sind, dauerhaft (dh sie kann die Verzögerung zwischen Probenahme und Durchführung der Labortest überleben die Biomarker zu extrahieren), und vielseitig (dh in einer Vielzahl von Modellen) erforderlich. Während DBS Sammlung ist ein relativ einfaches Verfahren, können verschiedene Techniken zur Maximierung der Menge der gesammelten Punkte. Vor der Sammlung beginnt, wodurch die Hand eines Teilnehmers ist warm, und damit, dass die Blutgefäße geweitet werden, wird die Durchblutung zu helfen, wenn der Finger punktiert. Mit Handwärmern oder mit einemTeilnehmer führen ihre Hände unter warmes Wasser kann bei diesem Prozess helfen. Melken mit dem Finger vor der Abholung wird Blut in die Fingerspitze zu ziehen und warm die Hand, um den Blutfluss zu helfen. Melken ist ein Prozess, der mit der Praxis verbessert. Sammler sollten Technik verwenden, was sie am meisten komfortabel und effektiv zu finden, aber die häufigste Ansatz beinhaltet Melken Hand des Teilnehmers mit der anderen Hand des Sammlers. Diese Methode ermöglicht die Sammler-Daumen tief in die Handfläche des Teilnehmers zu arbeiten, während die andere Hand kann der Teilnehmer Handgelenk zu stabilisieren. Als ein Beispiel, ob man die Entnahme von Blut aus einem Finger der linken Hand auf den Teilnehmer, der Kollektor würde der Teilnehmer Handgelenk mit der linken Hand und Milch mit der rechten Hand zu stabilisieren. Häufige Fehler gemacht, während Melken gehören nicht mit einem festen Griff und zog die Haut über der Hand und nicht in die Muskeln arbeiten, um Blut in Richtung Fingerspitze ziehen. Es ist auch wichtig, um den Stift zu vermeidenching den Finger mit dem Melken von Hand oder dicht Greif des Teilnehmers mit dem Handgelenk nonmilking Hand, die beide den Blutfluss behindern. Beim Durchstechen der Finger, machen die Punktions so tief wie möglich durch festes Drücken Sie die Lanzette in den Finger vor der Entlassung. Eine flache Punktion führt zu weniger Blutfluss und schneller Blutgerinnung. Nach Punktion der Finger ist der Schlüssel schnell arbeiten. Thin Blut führt zu leichter Sammlung und größere Flecken. Nach der Punktion, das Blut wird dickflüssiger und bis Blutgerinnung. Je weniger Zeit benötigt, um die Blutflecken auf der Karte, desto größer ist ihr Volumen zu sammeln. Idealerweise Blut der Teilnehmer wird dünn genug, die werden von ihrem eigenen Gewicht fallen Tropfen sein, aber das wird nicht der Fall für alle Teilnehmer sein, wie Blut mancher Menschen ist dicker oder Blutgerinnsel schneller als andere. Wenn das Blut zu dick, um vom Finger fallen, muss der Filterkarte zum Blut für die Sammlung gebracht werden. When bringt die Karte dem Blut, ist es wichtig, um die Karte in Kontakt mit den Tropfen zu halten, während es von dem Finger hängen so lange möglich, nicht nur den Blut Abtupfen auf die Karte. Dies wird Pull Blut aus dem Finger helfen, die Größe des Spots zu maximieren. Diese Technik erfordert eine ruhige Hand, um den Kontakt zwischen dem Blut und der Karte zu erhalten. Mit beiden Händen ein, um die Teilnehmer der Hand und ein stabilisieren, um die Karte zu halten, und ohne die Hände in Kontakt mit einem anderen hilft, die Karte und das Blut zusammen zu stabilisieren. Erweiterte Forschungsbereichen, wie z. B. Herz-Kreislauf Risikobewertung, haben lange auf Biomarker wie C-reaktives Protein (CRP), Insulin und glykosyliertes Hämoglobin (HbA1c) zur Risikofrüherkennung und Prävention sowie Biomarker &quot;harter Endpunkte&quot; verlassen für Herz-Kreislauf-Erkrankungen (CVD) Risiko-und CVD-assoziierte Mortalität 12. Klinische Epidemiologie bewertet häufig Biomarker prospectively vorherzusagen kardiometabolischen Risiko Ergebnisse wie Herzerkrankungen und Typ-II-Diabetes. Vielleicht ist die am weitesten verbreitete aller Biomarker ist die Framingham-Risiko-Score, ein Verbundstoff, der den Blutdruck, HDL-Cholesterin und Gesamt-Cholesterin Ebenen, die Nützlichkeit der Vorhersage CVD 13 gezeigt hat, umfasst. Allerdings hat der Framingham-Score einige technische Kontroversen erlebt und hat Einschränkungen in Studien über die Verknüpfung von sozialen und Umweltfaktoren für die Gesundheit, was auf die Notwendigkeit genauer und spezifische Biomarker für kardiovaskuläre Forschung Zusammenhang konzentriert. Es gibt eine Reihe von kommerziell erhältlichen Kits unter Verwendung von ELISA oder ähnliche Techniken für die Bestimmung von DBS-Proben zur Verfügung. Erforderlich für die Bestimmung von DBS Proben sind die Verwendung von spezifischen und optimiert Elutionsschritte die getrockneten Proben in Lösung 2 zu bringen. Dies ist ein expandierendes Forschungsgebiet als Assays für mehrere Analyten werden derzeit entwickelt ein. Unter thE-Assays bereits validiert und ist weit verbreitet sind Cholesterin 2, CRP 10,14,15, IgE16, EBV 9,15, Leptin 17 und 18 cyotkines. Es gibt eine Reihe von Laboratorien spezialisiert auf den Test von DBS, darunter die University of Washington Institut für Labormedizin (UW Lab Med) Biomarker Laboratory (Regie: Mark Wener). Bedenkt man, dass ein Panel von Biomarkern, sondern als ein einsamer Biomarker, ist besonders nützlich in den Bereichen Herz-Kreislauf-und Diabetes-Forschung, müssen Biomarker, mit einer Vielzahl von Kontextfaktoren, um ihren Nutzen zu maximieren zusammen betrachtet werden. Biomarker-Forschung kann teuer aber sowohl finanziell als auch in der Zeit für die Datensammlung sein. Während also ist es wichtig, Biomarker, genau, robust und vielseitig wählen, Arbeit und Familie Biomarker-Forschung muss in praktische indem Sie Biomarker, die kostengünstig, geeignet sind verwurzelt sein, und kann schnell gesammelt werden with Leichtigkeit. Darüber hinaus praktische Überlegungen oft zu einer Unfähigkeit, gleichzeitig Preis, Qualität und Geschwindigkeit zu maximieren innerhalb eines Verfahrens führen. Hier liegen die nächsten Schritte in der Gesundheitsforschung im Bereich Biomarker-und Bevölkerungsstudien. Der Bereich der Biomarker-Forschung wird derzeit in einer Phase der dramatischen Wachstum, jedoch ist die meiste Arbeit noch kommen.

Biomarker können wertvolle Informationen über biologische Prozesse von der normalen auf pathogene, die klinisch erkennbaren Krankheits 1 beitragen können vorsehen. In der Forschung Einstellungen werden getrocknete Blutflecken (DBS) immer bevorzugt, Venenpunktion als Methode für das Sammeln von Biomarkern in Vollblut. DBS-Kollektion ist einfach, relativ schmerzlose, weniger invasive dann Venenpunktion, und erfordert nur minimale Speicherbedarf (dh Proben müssen nicht sofort eingefroren werden und kann für eine lange Zeit in einem stabilen Umfeld vor dem Test Gefrierschrank gelagert werden). DBS-Proben für eine Vielzahl von unterschiedlichen Analyten, wie Cholesterin, C-reaktives Protein, glycosyliertes Hämoglobin, Epstein-Barr-Virus-Antikörper und verschiedene Cytokine untersucht werden. Venenpunktion ist seit langem der Gold-Standard für die Sammlung von Biomarkern in Blut. Allerdings Beschaffung, Lagerung und Versand von Blutproben erfordert adherenCE nach einer Reihe von Protokollen und Gesundheits Codes, die nicht möglich sein können, in bestimmten Forschungsprotokollen. Phlebotomists müssen amtlich beglaubigt werden bei der Blutabnahme, während DBS Probenahmeverfahren einfacher sind und nicht den offiziellen Zertifizierung benötigen. Venöse Blutentnahme erfordert auch mehr Ausrüstung, als dies DBS Sammlung (dh Nadeln, Schläuche, Drehkreuze), und Post-Erhebungsaufwand. Venenpunktion Proben verarbeitet werden müssen (dh Serum oder Plasma aus der Blutprobe durch Zentrifugieren oder Stehen bei Raumtemperatur für einen bestimmten Zeitraum extrahiert) und zwischen -20 ° C und -70 ° eingefroren sofort damit C, um den Abbau von Analyten verhindern , während DBS Proben müssen einfach an der Luft getrocknet und dann kann bei Raumtemperatur für eine Woche oder mehr, je nach Analyt gespeichert werden, vor der Übertragung auf einem Gefrierfach 2. DBS-Proben sind weniger teuer als Venenpunktur sammeln Proben für den oben beschriebenen Gründen. DBS-Proben auchnehmen weniger Platz und reduziert Transport-und Lagerkosten vor dem Test. Die Verwendung von Speichel als Biomarker hat sich Schlüssel in biobehavioral Studien. Speichel bietet eine einfache, nicht-invasive Methode, um Biomarker zu sammeln und hat sich zum Standard für die Feldarbeit an der Mess Cortisol oder Cotinin 3-5 ab. Urin ist eine weitere Probe, die nicht-invasiv gesammelt werden können und in der Bevölkerung Ebene Studien für Tests von Melatonin oder für Toxikologie verwendet werden. Während sowohl Urin und Speichel bieten geradlinig Erhebungsverfahren, die in der Lage, von den Teilnehmern selbst durchgeführt werden, können nicht alle Analyten in diesen Medien gemessen werden. DBS bieten eine einfache, kostengünstige Alternative zu Venenpunktion und sind ein zunehmend umgesetzt Recherche-Tool in Feld-und Bevölkerungsstudien 6.

<table><tbody><tr><td>Asepti II Microbial Wipes</td><td>EcoLab</td><td>D12330345</td><td>3rd Party Versand</td></tr><tr><td>Biohazard Abfallsäcke</td><td>VWR</td><td>14220-092</td><td>Hochfeste autoklavierbare Polypropylen-Biohazard Beutel, 2 mil</td></tr><tr><td>Biohazard Abfallfass</td><td>Tyco</td><td>58578-092</td><td>8 g Schiebedeckel</td></tr><tr><td>Behälter für scharfe Gegenstände</td><td>BD Medical</td><td>BD305487</td><td>1,4 qt</td></tr><tr><td>Chux</td><td>VWR</td><td>82020-845</td><td>Saugfähige Bankunterlagen</td></tr><tr><td>Handschuhe</td><td>VWR</td><td>XSmall: 89038-267</td><td>Puderfreie, latexfreie Nitrilhandschuhe</td></tr><tr><td></td><td></td><td>Small: 89038-268</td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td>Medium: 89038-270</td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td>Large: 89038-272</td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td>XLarge: 89038-274</td><td></td></tr><tr><td>Händedesinfektionsmittel (z.B. Purell)</td><td>Johnson Johnson</td><td>89040-210</td><td>Versand durch 3rd Party</td></tr><tr><td>Alkoholtücher</td><td>Webcol und Curity</td><td>82003-856</td><td>Vorbereitungspads</td></tr><tr><td></td><td>Gaze</td><td>Versalon 82004-826</td><td>Vliesschwämme</td></tr><tr><td>Pflaster</td><td>Nutramax Stat Strips</td><td>15431-475</td><td></td></tr><tr><td>Lanzetten</td><td>Owen Mumford</td><td>82028-060</td><td>3,0 mm, 21 G&nbsp;</td></tr><tr><td>Proteinpapier-Sammelkarten</td><td>Whatman</td><td>Custom-build</td><td>903 Protein Saver Collection</td></tr><tr><td>Papier Trockenmittel</td><td>VWR</td><td>61161-319</td><td>Feuchtigkeitsschwämme</td></tr><tr><td>Probenbeutel</td><td>Lab Guard Wiederverschließbare Biohazard Bags, ITW Minigrip</td><td>56766-370</td><td>6 Zoll x 9 Zoll</td></tr><tr><td>Probenaufbewahrungskühler</td><td>Iglu</td><td>Playmate Mini</td><td>4 qt; direkt vom Hersteller</td></tr></tbody></table>

trockenblut sammlung von gesundheits-biomarker zur teilnahme am bevölkerungsstudien maximieren

Dried Blood Spot Collection of Health Biomarkers to Maximize Participation in Population Studies

Biomarker sind direkt gemessene biologische Indikatoren der Krankheit, Gesundheit, Krediten oder anderen biologischen Informationen. In der Bevölkerung und Sozialwissenschaften, Biomarker müssen leicht zu bekommen, Transport zu sein, und zu analysieren. Getrocknetes Blut erfüllen diesen Bedarf und kann im Feld mit hohen Ansprechraten gesammelt werden. Diese Elemente sind besonders wichtig in Längsstudiendesigns einschließlich Interventionen wo Abrieb ist entscheidend, um zu vermeiden, und hohe Ansprechraten verbessern die Interpretation der Ergebnisse. Trockenblut Probensammlung ist einfach, schnell und relativ schmerzlos, dann weniger invasive Venenpunktion, und erfordert nur minimale Feldspeicheranforderungen (dh Proben müssen nicht sofort eingefroren zu sein und kann für eine lange Zeit in einer stabilen Umgebung, bevor Gefrierschrank gelagert werden Assay). Die Proben können für eine Vielzahl von unterschiedlichen Analyten, wie Cholesterin, C-reaktives Protein, glycosyliertes Hämoglobin, werden zahlreiche Cytokine und o analysierendether Analyten, sowie bieten genetischen Materials. DBS Kollektion ist dargestellt, wie in mehreren aktuellen Studien beschäftigt.

<img alt="Figur 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50973/50973fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50973/50973fig1.jpg" /> Abbildung 1. Getrocknete Blutfleck Probe. Eine Sammlung Karte ist mit vier, gültig gesammelten Punkte in der Trocknungsprozess gezeigt. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50973/50973fig1highres.jpg" target="_blank">Klicken Sie hier für eine größere Ansicht.</a> <img alt="Figur 2" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50973/50973fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50973/50973fig2.jpg" /> Abbildung 2. Gute und schlechte Blutfleck Proben getrocknet. Ergebnisse der erfolgreichen (rechts) und erfolgreich (links) DBS Sammlung gezeigt. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50973/50973fig2highres.jpg" target="_blank">Klicken Sie hier, um größere im sehen</a>Alter. <img alt="Fig. 3" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50973/50973fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50973/50973fig3.jpg" /> Abbildung 3. Managers &#39;Einstellungen &amp; Practices-Mitarbeiter mit Herz-Kreislauf-Krankheit Risiko 6 zugeordnet. Diese Zahl hat sich von Berkman, LF, Buxton, OM, Ertel, K. &amp; Okechukwu, Praktiken C-Manager im Zusammenhang mit Balance-Familie zu arbeiten verändert wurde vorherzusagen Mitarbeiter Herz-Kreislauf Risiko-und Schlafdauer in der erweiterten Pflege-Einstellungen. Journal of Occupational Health Psychology 115, 316-329 (2010). Mitarbeiter, Manager mit mittleren oder niedrigen Arbeit und Familie Partituren der Offenheit und Kreativität für die Hilfe bei der Arbeit ihrer Mitarbeiter und Familien Notwendigkeit ausgesetzt, haben statistisch signifikant erhöhtes Chancen mit zwei oder mehr kardiovaskulären Risiken (aktuelle Raucher, Übergewicht, Bluthochdruck oder Hypertension, hoher Cholesterinspiegel und hoher glykosyliertes Hämoglobin (Hb A1C) oder Diabetes Diagnose). Top-und Mitteltafeln zeigen Mittelwerte ± Standardabweichungen für Gesamtcholesterin von getrockneten Blutfleck und Hb A1C von Point of Care Gerät (die auch zuverlässig durch getrocknete Blutflecken gemessen werden kann) beurteilt beurteilt. Das untere Feld zeigt Herz-Kreislauf Risiko von Manager-Score. Analyse, um Krankenschwestern und andere Mitarbeiter mit direktem Pflege beschränkt darauf hin, dass die Exposition gegenüber Managern mit geringer Kreativität und Offenheit in der Arbeitswelt-Familienfragen kann besonders wichtig für diese Personen (oder für niedrige WF-Score = 6,4, p = 0,01). Alle Modelle steuern, für Alter, Geschlecht, Lohn, Bildung, Rasse / Ethnizität, und Baustelle. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50973/50973fig3highres.jpg" target="_blank">Klicken Sie hier für eine größere Ansicht.</a>

Biomarker sind direkt gemessene biologische Indikatoren von Krankheit oder Gesundheit. In der Bevölkerung und Sozialwissenschaften, Biomarker müssen leicht zu bekommen, Transport zu sein, und zu analysieren. Getrocknete Blut Spot (DBS) Sammlung erfüllt dieses Bedürfnis kann im Feld mit hohen Ansprechraten gesammelt und für eine Vielzahl von Biomarkern analysiert werden.

Trockenblut Sammlung von Gesundheits-Biomarker zur Teilnahme am Bevölkerungsstudien maximieren

Biomarkers are directly-measured biological indicators of disease, health, exposures, or other biological information. In population and social sciences, ...

Das Ziel des folgenden Verfahrens besteht darin, getrocknete Blutproben oder DBS als einfache, kostengünstige Alternative zur Venenpunktion zu sammeln. Dies wird erreicht, indem der Teilnehmer zunächst seine Hände wärmt. Danach wird ein Finger ausgewählt und gereinigt.Die Hand und der Finger werden massiert, um die Durchblutung an der Einstichstelle zu erhöhen. Anschließend wird der Finger mit einem Sicherheitslancett durchstochen und Bluttropfen auf Filterpapier aufgefangen. Zum Schluss wird die Einstichstelle gereinigt und verbunden.Einmal wenn die Proben getrocknet sind, wird die gesammelte Probe zur Lagerung oder zum Versand verpackt. Letztendlich können erfolgreich gesammelte getrocknete Blutproben auf eine Reihe von Biomarkern analysiert werden, wie beispielsweise Cholesterin, C-reaktives Protein und glykosyliertes Hämoglobin. Der Hauptvorteil dieser Methode gegenüber der Venenpunktion besteht darin, dass die Sammlung von getrockneten Blutproben einfach, relativ schmerzarm und weniger invasiv als die Venenpunktion ist.Obwohl die Beherrschung dieser Technik mehr Zeit erfordert, kann sie innerhalb weniger Tage durch Anleitung und Training erlernt und umgesetzt werden. Da sie leicht zu beschaffen, zu transportieren und zu analysieren sind, ermöglichen getrocknete Blutflecken die Untersuchung von Biomarkern auf Feld- und Bevölkerungsebene in Forschungsarbeiten, bei denen die Gewinnung von Venenblutproben schwierig oder nicht durchführbar ist. Aus getrockneten Blutflecken gemessene Biomarker können wertvolle Informationen über biologische Prozesse liefern, die Gesundheit oder das Risiko für chronische Erkrankungen zugrunde liegen.Beim Sammeln von getrockneten Blutproben (Dried Blood Spot) denken Sie immer daran, persönliche Schutzausrüstung wie einen Laborkittel, Handschuhe, lange Hosen, geschlossene Schuhe, eine schützende Unterlage unter dem Blutentnahmeplatz und gegebenenfalls Schutzbrille zu verwenden. Nach Einholung der Einwilligung fragen Sie, welche Hand der Teilnehmer bevorzugt, und wählen dann einen Finger für die Blutentnahme aus. Danach bitten Sie den Teilnehmer, seine Hände aneinanderzureiben, um sie zu wärmen und die Durchblutung anzuregen.Reinigen Sie den ausgewählten Finger zweimal mit einem Alkoholtupfer, wobei der Alkohol jedes Mal vollständig trocknen muss. Entsorgen Sie die Tupfer wie alle verwendeten Sammelmaterialien unverzüglich in einem Behälter für biohazard-Abfall. Befestigen Sie nun den Arm der Versuchsperson, um Bewegungen während der Probenentnahme zu verhindern, und halten Sie die Hand der Versuchsperson bequem unter Herzhöhe, um die Arm- und Handmuskulatur zu entspannen.Um den Blutfluss zu fördern, verwenden Sie Daumen und Zeigefinger, um die Hand und den ausgewählten Finger sanft zu massieren, indem Sie ihn langsam und fest zusammendrücken, während Sie den Griff von der Handfläche zur Fingerspitze hin bewegen. Ziehen Sie das Blut in Richtung Fingerspitze. Drücken Sie dann ein Mikrolanzett fest gegen den Finger des Probanden senkrecht zur Fingerkuppe und zwischen der Fingermittellinie und den Nagelbetten auf der ulnaren Seite des Fingers und lösen Sie die Lanzette aus.Entsorgen Sie die verwendete Lanzette unverz&uuml;glich im spitzenfesten Beh&auml;lter und wischen Sie den ersten Blutstropfen mit einem sterilen Gazetupfer ab. Entsorgen Sie anschlie&szlig;end das Gazetupfer und massieren Sie vorsichtig die Hand, beginnend am Handgelenk und entlang der Finger bis zur Fingerspitze, wobei die Hand des Teilnehmers unterhalb des Herzens mit einer leichten Abw&auml;rtsneigung gehalten wird. Massieren Sie den Finger, bis ein gro&szlig;er Blutstropfen an der Fingerspitze h&auml;ngt, und positionieren Sie dann vorsichtig ein St&uuml;ck Sammelpapier unter dem Finger, sodass der Tropfen durch sein eigenes Gewicht abf&auml;llt.Falls das Blut zu viskos ist oder die Tropfen zu klein sind, um von selbst abzufallen, bringen Sie das Sammelpapier langsam in Kontakt mit dem Blutstropfen, um es durch Kapillarwirkung aufzusammeln, ohne den Finger mit dem Sammelpapier zu berühren. Um eine Gerinnung zu verhindern, massieren Sie weiterhin den Finger der Versuchsperson, um den Blutfluss aufrechtzuerhalten. Nachdem die getrockneten Blutflecken gesammelt wurden, reinigen Sie die Einstichstelle von überschüssigem Blut. Verbinden Sie dann die Einstichstelle, um eine mögliche Kontamination zu verhindern. Stellen Sie sicher, dass die Sammelkarte frei stehen kann, damit Luft hinter der Probe zirkulieren kann. Legen Sie die Sammelkarte auf eine schützende Unterlage.Die Karten mit Abstand zueinander platzieren, um eine gute Luftzirkulation zwischen ihnen zu gewährleisten. Die Proben mindestens 15 bis 30 Minuten zum Trocknen liegen lassen. Ein dunkelrotbrauner Fleck zeigt eine ausreichende Trockenheit für die Lagerung an.Nachdem bestätigt wurde, dass die Proben trocken sind, schließen Sie die Abdeckung der Sammelkarte. Legen Sie danach einen Trockenmittelbeutel in einen Biohazard-Probenbeutel und platzieren Sie die Sammelkarte in den Beutel, wobei darauf zu achten ist, dass die Blutproben den Außenbereich nicht berühren. Glätten Sie den Beutel, um überschüssige Luft zu entfernen, und verschließen Sie ihn anschließend fest. Wenn alle Schritte zur Blutentnahme abgeschlossen sind, entfernen Sie die persönliche Schutzausrüstung. Schließen Sie den Beutel mit der Probe anschließend in einen Kühlbehälter für den Transport oder eine vorübergehende Lagerung ein, wobei erhöhte Temperaturen vermieden werden müssen. Hier sind gültige Trockenblutproben dargestellt.Die Proben haben einen Durchmesser von mindestens 0,375 Zoll, gemessen von der Rückseite der Sammelkarte aus, und sind auf beiden Seiten des Sammelbereichs ungefähr gleich groß, was zusammen eine vollständige Durchtränkung des Filterpapiers anzeigt. Problematische getrocknete Blutflecken werden in diesen Abbildungen zum Vergleich gezeigt. Beispielsweise sollten Flecken einander nicht überlappen, da Überlappungen zu einer Überschussmenge an Probe führen.Die Verhinderung von Wissen über das Blutproben-Volumen, Flecken sollten nicht im Sammelbereich verschmiert werden, da dies eine unvollständige Sättigung darstellt und typischerweise mit unzureichendem Durchtritt zur gegenüberliegenden Seite des Papiers einhergeht. Eine erfolgreiche Anwendung von DBS-Proben in Studien auf Populationsebene ermöglicht die Analyse von Biomarkern, bei denen die Entnahme mittels Venenpunktion nicht praktikabel wäre. Diese Grafiken veranschaulichen eine solche Anwendung in einer Studie zum kardiometabolischen Erkrankungsrisiko von Arbeitnehmern, wie es durch einen flexiblen Führungsstil vorhergesagt wird.Beispielsweise zeigte sich in diesem Experiment, dass der Gesamtcholesterinspiegel in den DBS-Proben mit einem signifikant erhöhten Risiko für zwei oder mehr kardiovaskuläre Risikofaktoren bei Mitarbeitern korrelierte, deren Vorgesetzte mittlere oder niedrige Work-Family-Scores aufwiesen. Nachdem Sie dieses Video angesehen haben, sollten Sie verstehen, wie man Trockenblutproben sicher, korrekt sammeln, verpacken und lagern kann. Sobald diese Technik beherrscht ist, kann sie in weniger als 10 Minuten durchgeführt werden und verursacht für die Teilnehmer nur geringe Unannehmlichkeiten.Während des Durchführens dieses Verfahrens ist es wichtig, alle Standardvorkehrungen einzuhalten. Persönliche Schutzausrüstung sollte stets verwendet werden, und kontaminiertes Material sowie biologischer Abfall müssen ordnungsgemäß entsorgt werden. Indem wir Biomarker dort sammeln, wo Menschen leben oder arbeiten – frei lebende Menschen, wenn man so will – und dies auf eine Weise tun, die für sie nicht unangenehm ist, können wir eine stärkere Beteiligung an unseren Forschungsstudien erreichen.Wir sind außerdem in der Lage, die Mechanismen zu bewerten, durch die unsere Umwelt und sozialer Kontext Gesundheit und Krankheit beeinflussen.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Wir skizzieren eine Methodik für die Verarbeitung von Vollblut, um eine Vielzahl von Komponenten für die weitere Analyse zu erhalten. Wir haben ein optimiertes Protokoll optimiert, das eine schnelle gleichzeitige Verarbeitung von Vollblutproben mit hohem Durchsatz in einer nicht-klinischen Umgebung ermöglicht.

Schnelle Fraktionierung und Isolierung von Vollblutkomponenten in Proben aus einer Gemeinschaft basierende Einstellung Erhalten

Hier beschreiben wir einen Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie-Tandem-Massenspektrometrie (HPLC-MS/MS) Assay zur Quantifizierung des Immunsuppressivums Tacrolimus in getrockneten Blutflecken mit einem einfachen manuellen Proteinfällungsschritt und Online-Säulenextraktion.

Die Quantifizierung des Immunsuppressivums Tacrolimus auf Getrocknetes Blut mittels LC-MS / MS

Die Vorbereitung und Verarbeitung von getrocknetem Blutflecken (DBS) für ihre letzten Endes sind immer noch schlecht für die meisten diagnostischen Anwendungen standardisiert. Um dieses Defizit zu überwinden, ist ein umfassende Schritt für Schritt Protokoll vorgeschlagen und anschließend bewertet im Hinblick auf ihre Wirksamkeit für die Erkennung von Markierungen von Virusinfektionen.

Getrocknete Blutflecken - Vorbereitung und Verarbeitung für den Einsatz in Immunoassays und Molekulare Techniken

Dieses Protokoll beschreibt eine einfache und nützliche Methode zum Speichern von peripherem Blut und Serum/Plasma für nachgelagerte Analysen wie Einzel-Nukleotid Polymorphie (SNP) Bewertung und ELISA-Assay.

Getrocknete Blut und Serum Spots als ein nützliches Werkzeug für die Lagerung der Probe, Cancer Biomarkers zu bewerten

Dieses Protokoll beschreibt die klinisch implementierbare Vorbereitung von hochwertigen PBMC- und Plasma-Bioproben am klinischen Studienort, die für die translationale Biomarkeranalyse verwendet werden können.

Herstellung von peripheren mononukleären Blutzellpellets und Plasma aus einer einzigen Blutentnahme an klinischen Studienstellen für die Biomarkeranalyse

Wir beschreiben die konsistenten, qualitativ hochwertigen Verfahren, die während der gesamten Luft- und biologischen Probenahmeprozesse an indischen Feldstandorten während einer großen randomisierten kontrollierten Studie verwendet werden. Erkenntnisse, die aus der Überwachung der Anwendung innovativer Technologien gewonnen werden, die für die Expositionsabschätzung in ländlichen Regionen angepasst sind, ermöglichen bessere Felddatenerfassungspraktiken mit zuverlässigeren Ergebnissen.

Visualisierung von Felddatenerfassungsverfahren für Expositions- und Biomarkerbewertungen für die Studie des Household Air Pollution Intervention Network in Indien

Es wird ein Protokoll zur Bestimmung von Biomarkern mit geringer Abundanz aus getrockneten Serumproben vorgestellt, das am Beispiel des Biomarkers Progastrin-freisetzendes Peptid (ProGRP) veranschaulicht wird. Antikörperbeschichtete magnetische Beads werden zur selektiven Aufreinigung und Anreicherung eines proteotypischen ProGRP-Peptids verwendet. Das eingefangene Peptid wird anschließend mittels Flüssigchromatographie-Tandem-Massenspektrometrie analysiert.

Microsampling in der gezielten Massenspektrometrie-basierten Proteinanalyse von Proteinen mit geringer Abundanz

Dieses Protokoll beschreibt die Entnahme und Erhaltung von Blutproben von neonatalen und pädiatrischen Patienten sowie die Anwendung von scRNA-seq, Proteomik und spektraler Flowzytometrie zur Charakterisierung der Immunzellpopulationen aus diesen Proben.

Kartierung der Infant-Immunität mit minimalem Input: Integratives Einzelzell- und multiomisches Profiling

Wir beschreiben ein Rattenmodell der Posttraumatischen Belastungsstörung (PTSD), die die anhaltenden Veränderungen im neuroendokrinen Funktion und die verzögerte langfristige, übertriebene Angstreaktion, die charakteristisch für PTBS-Patienten zeigt. Das Tiermodell und hier beschriebenen Methoden sind nützlich zum Korrelieren Biomarkern in Gehirnkernen, die mechanistische sind, aber nicht bei Patienten gemessen werden, wobei Biomarkern in peripheren weißen Blutzellen, welches kann.

Biomarker in einem Tiermodell für die Aufdeckung Neural, hämatologischen und Behavioral Korrelate der PTSD

Hoher Durchsatz Validierung mehrerer Biomarker-Kandidaten können durch sequentielle ELISA durchgeführt werden, um Einfrieren / Auftauen zu minimieren und die Nutzung von wertvollen Plasmaproben. Hier zeigen wir, wie man nacheinander durchführen ELISAs für sechs verschiedene validierte...

High Throughput Sequential ELISA zur Validierung von Biomarkern des akuten Graft-Versus-Host Disease

Lernen Sie die Trockenblutpunkt-Sammlung für Biomarker-Analysen in Bevölkerungsstudien. Diese Methode ist kostengünstig, weniger invasiv als Venenpunktion und ermöglicht Forschung in schwierigen Umgebungen.

Trockenblut Sammlung von Gesundheits-Biomarker zur Teilnahme am Bevölkerungsstudien maximieren

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