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JoVE Journal Biology
Cytological Analysis of Spermatogenesis: Live and Fixed Preparations of Drosophila Testes

Die zytologische Analyse der Spermatogenese: Live-und Fest Zubereitungen aus Drosophila Hoden

Full Text
30,080 Views
10:30 min
January 20, 2014

DOI: 10.3791/51058-v

Poojitha Sitaram1, Sarah Grace Hainline1, Laura Anne Lee1

1Department of Cell and Developmental Biology,Vanderbilt University Medical Center

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Verfahren zur Isolierung und Herstellung von Drosophila Hoden Proben (leben und fest) für die Bildgebung durch Phasenkontrast-und Fluoreszenzmikroskopie sind hierin beschrieben.

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist die Präparierung und Aufbereitung der oph-Hoden für die Mikroskopie. Dies wird erreicht, indem zunächst Hodenpaare aus dem Hinterleib männlicher Fliegen präpariert werden. Der zweite Schritt besteht darin, die Hoden auf dem entsprechenden Entwicklungsniveau zu zerreißen und die Hoden zu quetschen, um die Zellen darin freizusetzen.

Anschließend werden die gequetschten Hoden fixiert und dann in primären und sekundären Antikörpern inkubiert. Der letzte Schritt besteht darin, das Gewebe für die Bildgebung auf einen Objektträger zu montieren. Letztendlich wird die Phasenkontrast- oder Immunfluoreszenzmikroskopie verwendet, um Zellen in verschiedenen Stadien der Spermatogenese auf Defekte und Morphologie zu untersuchen und die subzellulären Lokalisationen verschiedener Proteine zu beobachten.

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Grundlegendes Protokoll Issue 83 Drosophila melanogaster Dissektion Hoden Spermatogenese Meiose Keimzellen Phasenkontrastmikroskopie Immunfluoreszenz

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