Heterotope Hilfs Ratte Leber-Transplantation mit strömungs geregelt Pfortader Arterialisation in akutes Leberversagen

Akutes Leberversagen stellt in der klinischen Medizin ein schwerwiegendes Problem dar, das zu einer Sterblichkeitsrate von 60 bis 80 % bei akutem Leberversagen führt. Die zusätzliche Lebertransplantation ist eine vielversprechende alternative Therapie. Nach der Regeneration der nativen Leber kann die Immunsuppression abgebrochen und das Lebertransplantat explantiert oder der Atrophie überlassen werden.

Die Operationstechnik der Leberhilfstransplantation ist jedoch umstritten. Die APOL-Methode, d.h. die orthotope Implantation von Hilfssegmenten, vermeidet die meisten technischen Probleme, die auftreten könnten. Diese Methode erfordert jedoch umfangreiche Resektionen sowohl der nativen Leber als auch des Transplantats.

Im Jahr 1998 initiierten Erhart und sein Team die heterotope Hilfslebertransplantation mit dem Namen halt. Durch den Einsatz einer Pfortaderarteria, PVA, zeigte diese Technik vielversprechende erste klinische Ergebnisse. Wir haben zu Forschungszwecken eine Stopp-Technik mit flussregulierter Pfortaderarterie bei der Ratte entwickelt. Dieses Video veranschaulicht im Detail diese neue Versuchstechnik: Es wurden 224 Syngen-Rüden mit einem Gewicht von 250 bis 350 Gramm betrieben.

Die Operationen von Spender und Empfänger wurden unter Inhalationsanästhesie durchgeführt. Die Vollnarkose der Tiere wurde mit oph Fluor in einem Plexiglaskasten induziert, der mit dem Anästhesiegerät verbunden war, bei einem Sauerstoffdurchflussmesser von einem Liter pro Minute. Der Verdampfer hatte eine Konzentration von 5%leichtigkeit Fluor.

Die Narkose wurde bei 1,5 % gehaltenDie Genehmigung der lokalen Ethikkommission wurde für alle Versuche eingeholt, die in Übereinstimmung mit den Tierschutzrichtlinien phia durchgeführt wurden. Während des folgenden Vorgangs. Die Pfortader wird über die rechte Nierenarterie arteriell versorgt.

Der Blutfluss in der arteriellen Pfortader wird durch einen Gestank mit einem Innendurchmesser von 0,3 Millimetern und einer Länge von acht Millimetern reguliert. Pilotversuche hatten gezeigt, dass ein Stentdurchmesser von 0,3 Millimetern einen durchschnittlichen Blutfluss in der arteriellen Pfortader ergibt. Das liegt im oberen physiologischen Bereich.

Die hepatische Mikrozirkulation wird durch OPS-Bildgebung visualisiert, eine Reflexionsspektroskopie-Technik, die eine Echtzeit-Beobachtung der hepatischen Mikrozirkulation in vivo ermöglicht. Ohne den Einsatz von Kontrastmitteln unter physiologischer Kochsalzlösung wird die Sonde schonend auf der Oberfläche des rechten Leberlappens positioniert. Hier ist es wichtig, das Leberparenchym nicht zu komprimieren.

Die Operation des Spenders wird zunächst nach medianer Laparotomie demonstriert. Der linke laterale Lappen und der Medianlappen des Transplantats werden reseziert, wie von Higgins beschrieben. Hier sehen Sie die Präparation des Hepato Zwölffingerdarmbandes.

Der Gallengang wird zuerst ligiert, um eine Verstopfung und Erweiterung des kleinen Gallengangs zu induzieren. Die Gastroduodenalvene in der Arterie wird ligiert und durchtrennt. Anschließend werden der Truncus cic, die Arteria hepatica communis, die linke Magenarterie und die Arteria splenicus isoliert.

Dabei werden die linke Magenarterie und die Milzarterie durchtrennt. Hier sehen Sie den Truncus CIC und hier die Arteria hepatica communis. Der verstopfte Gallengang wird eingeschnitten und ein 20-Gauge-Stent wird in ihn eingeführt.

Die Positionierung des Stents muss die Drainage des gesamten Hiller-Gallengangssystems gewährleisten. Der Gallengang wird distal zum Stent durchtrennt. Das infrahepatische Segment der Vena Cable ist direkt über der rechten Nierenvene isoliert.

Hier sehen Sie den Tus nach der Präparation, nach der Ligatur Von der Aorta über dem Truncus coeliacus. Die Pfortader wird geklemmt und eingeschnitten. Nun wird der Perfusionskatheter eingeführt und die Perfusion mit 30 Millilitern Histidin-Tryptophan-Gito-Glu-Lösung durchgeführt.

Das Zwerchfell und die Sup-Leberkabelvene sind durchtrennt, damit das Purat abfließen kann. Der CIC-Rumpf wird zusammen mit einem Aortenpflaster herausgeschnitten und mit Histidin-Tryptophan-Ketoglutarat-Lösung gespült. Die infrahepatische Kabelvene wird direkt über der rechten Nierenvene durchtrennt.

Dann wird ein Stent mit einem Durchmesser von 0,3 Millimetern in die Pfortader gesetzt und mit der Ligatur fixiert. Die Pfortader wird distal zum Duft bewegt. Hier sehen Sie den Gallengang, die Pfortader, den Truncus coeliacus und die infrahepatische Caval-Vene.

Nach der Ligatur der suprahepatischen Kavalvene wird sie zusammen mit einer Zwerchfellmanschette durchtrennt. Das Transplantat wird explantiert und in Histidin-Tryptophan-Ketoglutaratlösung bei vier Grad Celsius gelagert. In einer Plastiktüte auf Eisecke werden Nähte in die infrahepatische Kavalvene gelegt. Als Nächstes wird der Empfängervorgang veranschaulicht.

Nach der Laparotomie und Präparation wird zunächst die infrahepatische Kavalvene, die rechte Nierenarterie, isoliert. Dann wird der Harnleiter ligiert und durchtrennt. Nachdem die rechte Nierenarterie an ihrem Ursprung abgeklemmt wurde, wird die rechte Nierenvene ligiert.

Nach der Durchtrennung beider Nierengefäße wird die Nephrektomie durchgeführt. Anschließend wird die rechte Nierenarterie gekürzt und mit Heparin-Kochsalzlösung gespült Nach proximaler und distaler Klemmung der infrahepatischen Kabelvene. Die rechte Nierenvene wird proximal zur Ligatur durchtrennt.

Auf diese Weise entsteht ein ovales Lumen in der infrahepatischen Kabelvene. Das Transplantat wird unterhalb der nativen Leber platziert. Die infrahepatische Kabelvene des Spenders ist von Ende zu Seite mit der Kabelvene des Empfängers anastomosiert und mit einer Ethylen-Laufnaht mit acht oh Ethylen versehen.

Nach dem Spülen mit Heparin-Kochsalzlösung wird der Stent in der Pfortader in die rechte Nierenarterie eingeführt. Die Pfortader und die Nierenarterie sind mit zwei Nähten verbunden. Die Verwendung eines Stents mit einem Innendurchmesser von 0,3 Millimetern und einer Länge von acht Millimetern ermöglicht eine arterielle venöse Anastomose mit standardisierten strömungsgeregelten Inflow-Raten.

Der Verbindungsstent wird in der Nierenarterie mit einer Ligatur fixiert, um eine Reperfusion zu ermöglichen. Zuerst wird der arterielle Clamp entfernt, gefolgt von den beiden venösen Clamps. Nun sehen Sie die Mikrozirkulation im Moment der Reperfusion, die von den interlobulären Gefäßen ausgeht, sich entlang der Sinusoide fortsetzt und bis zur Zentralvene des Leberläppchens reicht.

Hier sehen Sie nun das reperfundierte Transplantat, die arterielle Pfortader und den Gallengang. Die infrarenale Aorta wird präpariert und dann geklemmt und eingeschnitten. Eine End-to-side-Anastomose zwischen der Aorta und dem Truncus coeliacus mit Hilfe eines Aortenpflasters wird mit einer 10 O Ethylen-Laufnaht durchgeführt.

Nach dem Anlegen einer Beutelschnurnaht wird ein kleiner Schnitt in die Zwölffingerdarmwand gesetzt. Anschließend wird der mit einem Stent versehene Gallengang in den Duo-Denim eingeführt und die Naht des Geldbeutels festgezogen. Zum Schluss werden der Zwölffingerdarm und der Gallengang mit zwei Nähten fest zusammengehalten.

Hier sehen Sie das reperfundierte Transplantat und die native Leber, die vollständig subreseziert worden war, um ein akutes Leberversagen nachzuahmen. Den Tieren wurde postoperativ alle acht bis 12 Stunden subkutan Buprenorphin injiziert. Zwei Tage lang.

Die perioperative Überlebensrate betrug 90 % und die sechswöchige Überlebensrate 80 %In der ersten postoperativen Woche starben vier Ratten an einer Peritonitis aufgrund einer Luxation des Stents und einer Gallenleckage. Darüber hinaus starben sieben Ratten an Lungenentzündung, intraabdominalem Abszess oder Ileus. Die überlebenden Tiere befanden sich in einem ausgezeichneten Allgemeinzustand.

Sechs Wochen nach der Operation lagen die Parameter der Lebersynthese im Normbereich. Hier sehen Sie die Wissenschaftler sechs Wochen nach heterotoper Hilfslebertransplantation der Ratte mit einer arteriellen Pfortader. Sechs Wochen nach der Operation regenerierte sich die native Leber und zeigte eine Gewichtszunahme von 2,3 plus oder minus 0,8 Gramm auf 9,8 plus oder minus ein Gramm.

Zu diesem Zeitpunkt war der GRAT atrophisch und das Lebergewicht sank von 3,3 plus oder minus 0,8 Gramm auf 2,3 plus oder minus 0,8 Gramm. Das Gesamtgewicht beider Lebern lag sechs Wochen nach dem Stopp innerhalb des physiologischen Verhältnisses von Lebergewicht zu Körpergewicht in der histopathologischen Färbung mit Hämatin eoin. Es wurden regelmäßige Hepatozyten beobachtet, die weder Ödeme noch Fettdegeneration aufwiesen.

Alle Diagramme zeigten eine leichte Proliferation von Galle, duktiler und Cholangitis aufgrund von Schlammbildung. Nur in zwei Diagrammen konnte eine niedriggradige interper-CTUs hepatozelluläre Nekrose beobachtet werden. Die Verwendung eines Stents mit einem Innendurchmesser von 0,3 Millimetern und einer Länge von acht Millimetern ergibt nach der Reperfusion der arteriellen Pfortader einen durchschnittlichen portalen Blutfluss, der im oberen physiologischen Bereich liegt.

Die Gallendrainage ist die Achillesferse der Lebertransplantation. Bei der Lebertransplantation von Ratten sterben die Empfänger oft innerhalb der ersten postoperativen Tage an Gallenverlust und Bauchfellentzündung. Wir führen das Colo Doho od Stoma mit einem Stent, einer Naht pro Faden und zwei zusätzlichen Nähten durch, die es gegen Auslaufen und Trennen sichern.

Mit dieser Technik wurden die biliären Komplikationen auf 4% reduziertIn dieser aktuellen Studie wurde eine subtotale Resektion der nativen Leber durchgeführt. Wir verwenden diese Methode, die zuerst von amond beschrieben wurde, um ein akutes Leberversagen zu induzieren. Im Gegensatz zur Anwendung von hepatotoxischen Mitteln ist diese Methode standardisiert und zeigt keine Nebenwirkungen auf andere Organsysteme oder auf das Transplantat.

Im Gegensatz zur orthotopen Lebertransplantation gibt es keine endleberische Phase. Bei der heterotopen Lebertransplantation können die Anas ohne Zeitdruck durchgeführt werden. Darüber hinaus gibt es in der heterotopen Position keine Interferenz durch die sich bewegende Membran.

Darüber hinaus wird die Pfortader des Empfängers nicht eingeklemmt, wodurch eine venöse Stauung des Dünndarms, der Milz, der Bauchspeicheldrüse und des Magens vermieden wird. Mit dieser Technik konnten wir vielversprechende Langzeitergebnisse in Bezug auf Transplantat, Morphologie und Funktion erzielen, heterotope Hilfslebertransplantation von Ratten mit flussreguliertem Portal. Die Venenarterie ist eine innovative Technik, die nur wenige Fallstricke bietet und leicht zu erlernen ist.

Diese Technik ist geeignet, um die Wirkung der Pfortader, der arteriellen hepatischen Hyperperfusion und der Blutflussregulation auf die Mikrozirkulationsfunktion und -morphologie der Leber zu untersuchen. Dieses Modell ermöglicht zukünftige Studien zur Leberregeneration im Wettbewerb zwischen der Leber.