4. März 2014
Persistent Praxis verbessert die Präzision der Bewegungen koordiniert. Hier stellen wir ein Single-Pellet Erreichen Aufgabe, die bestimmt ist, die Lernen und Gedächtnis von Mäusen forelimb Mann beurteilen.
Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, Mäuse mit einer 4-M-spezifischen motorischen Fähigkeit zu trainieren. Dies bietet ein gutes Verhaltensmodell, um das motorische Lernen und das Gedächtnis zu bewerten. Bei Mäusen besteht der erste Schritt darin, den Mäusen zu ermöglichen, sich mit der Trainingskammer und den Futterpellets vertraut zu machen.
Als nächstes werden die Futterpellets in Reichweite des Formschlitzes gebracht, und nach der Formphase wird das bevorzugte Glied für die Entnahme bestimmt. Die Mäuse werden mit der Einzelkugel-Greifaufgabe trainiert und die Anzahl der richtigen Griffe mit der bevorzugten Pfote wird aufgezeichnet. Letztendlich bietet dieses Protokoll ein Verhaltensparadigma, um Gehirnveränderungen auf vielen Ebenen während des motorischen Lernens und der Gedächtnisbildung zu untersuchen.
Diese Methode kann helfen, Schlüsselfragen im Bereich der Neurowissenschaften zu beantworten, z. B. wie motorisches Lernen mit struktureller Plastizität und molekularen Veränderungen im Gehirn von Mäusen korreliert und wie verschiedene neurologische Erkrankungen die Feinmotorik stören Für die besten Ergebnisse. Führen Sie diese Aufgabe an einem ruhigen Ort ohne Lärm oder Ablenkungen durch. Eine speziell angefertigte Trainingskammer aus klarem Plexiglas mit drei vertikalen Schlitzen wird zum Formen und Training verwendet.
Ein Schlitz befindet sich an der Formkante und zwei Schlitze an der gegenüberliegenden Trainingskante, um die Hirsesamen an Ort und Stelle zu halten. Während der Formgebung wurde ein gekipptes Tablett aus drei Glasobjektträgern konstruiert. Während der Trainingseinheiten wird eine Food-Plattform genutzt. Vertiefungen an der linken und rechten Seite der Plattform halten das Hirsekorn an Ort und Stelle.
Diese Divots entsprechen dem linken und rechten Schlitz in der Trainingskammer der Maus und werden für das Training von Dominanten für Lims verwendet. Weitere nützliche Gegenstände, die Sie während des Eingriffs zur Hand haben sollten, sind eine Pinzette, eine Waage und eine Stoppuhr. Zwei Tage vor Beginn des Formgebungsverfahrens schränken die Futtermittel die Tiere ein, ein reduziertes Körpergewicht von etwa 90 % des Ausgangswerts am ersten Tag zu halten.
Setzen Sie zwei Mäuse gleichzeitig in die Trainingskammer und lassen Sie sie sich daran gewöhnen. Geben Sie etwa 20 mil Samen pro Maus in die Kammer und lassen Sie die Mäuse 20 Minuten lang erkunden. Am nächsten Tag setzen Sie die Tiere einzeln in Kammern und versorgen sie am nächsten Tag mit jeweils ca. 20 mil Samen.
Die formgebende Kante wird verwendet, um die Dominanz der Gliedmaßen zu bestimmen. Platzieren Sie die eingeteilte Seite der Kammer nach unten. Drücken Sie anschließend die mit Hirsesamen gefüllte Futterschale gegen die Vorderwand der Trainingskammer.
Wenn Sie fertig sind, platzieren Sie eine einzelne Maus in der Kammer. Lassen Sie das Tier das Saatgut durch den Trainingsschlitz aufnehmen und notieren Sie die für die Entnahme verwendeten Werte. Die Formgebungsperiode gilt als abgeschlossen, wenn zwei Kriterien erfüllt sind.
Zunächst führt die Maus innerhalb von 20 Minuten 20 Greifversuche durch. Zweitens werden mehr als 70 % dieser Reichweiten mit einem Viergliedmaßen durchgeführt. Wenn die Maus ihre Zunge benutzt, um die Samen in die Kammer zu bekommen, schiebe das Tablett leicht nach hinten, um das Greifen von vier Gliedmaßen zu fördern.
Wenn die Maus nicht innerhalb einer Woche fertig geformt werden kann, lassen Sie sie aus dem Experiment fallen. Um die Trainingseinheit zu beginnen, konfigurieren Sie die Trainingskammer mit dem Doppelschlitz nach unten. Wenn sie fertig sind, setzen Sie die Mäuse einzeln in den Käfig. Legen Sie einzelne Samen auf die Futterplattform in das Divot, das der bevorzugten Pfote entspricht, die während der Formgebungsphase festgelegt wurde.
Sobald der Seed an Ort und Stelle ist, beobachten Sie das Greifverhalten der Maus und bewerten Sie die Ergebnisse. Ein Erfolg ist gewertet, wenn die Maus mit der bevorzugten Pfote greift, den Samen einholt und frisst. Erzielen Sie einen Drop, wenn die Maus mit der bevorzugten Pfote greift, den Samen greift, ihn aber fallen lässt, bevor sie ihn in den Mund nimmt.
Greift die Maus mit der bevorzugten Pfote nach dem Samenkorn, verfehlt ihn aber oder stößt ihn von der Halteplatte, wird dies als Fehlschlag gewertet. Eine Maus kann auch dann greifen, wenn kein Saatgut auf der Futterplattform platziert ist. Diese gelten als vergebliche Reichweiten und werden nicht angerechnet.
Die Gesamtzahl der vergeblichen Versuche, Mäuse zu entmutigen, trainiert Mäuse, zum anderen Ende der Trainingskammer zurückzukehren, bevor sie den nächsten Samen ablegen. Wenn eine Maus mit der nicht bevorzugten Pfote greift, gelten diese Griffe als kontralaterale Griffe und werden nicht auf die Gesamtzahl der Griffe angerechnet. Trainieren Sie die Mäuse täglich für 30 Greifversuche an der bevorzugten Gliedmaße oder 20 Minuten, je nachdem, was zuerst eintritt.
Nach dem täglichen Training bringen Sie die Mäuse wieder in ihren heimischen Käfig zurück. Das Körpergewicht von Mäusen sollte während der gesamten Versuche genau überwacht werden. Hier wird der Körpergewichtsverlust einer einzelnen Maus während Nahrungsentzug, Formgebung und Training gezeigt.
Diese Ergebnisse zeigen, dass sich sowohl die durchschnittliche Erfolgsquote über die Trainingszeit als auch die durchschnittliche Erfolgsgeschwindigkeit verbessert. Die Erfolgsquoten für eine Overs Shaped und eine nicht lernende Maus sind hier dargestellt. Dieses Diagramm vergleicht die motorische Leistung von vortrainierten und naiven erwachsenen Mäusen während einer viertägigen Umschulungsphase.
Wenn Sie dieses Verfahren ausprobieren, ist es wichtig, daran zu denken, die Bedingungen für Tierversuche zu standardisieren. Dies kann erreicht werden, indem Umweltstörungen minimiert werden, derselbe Trainer verwendet wird, dieselbe Maus gehandhabt wird und während der gesamten Experimente zu den gleichen Tageszeiten trainiert wird.
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Diese Studie stellt eine Einzelkügelchen-Erreichbarkeitsaufgabe vor, die entwickelt wurde, um das motorische Lern- und Gedächtnisvermögen der Vordergliedmaßen bei Mäusen zu bewerten. Die Aufgabe beurteilt die Präzision koordinierter Bewegungen durch wiederholtes Üben.
Quantitative Verhaltensparadigmen wie die Einzel-Futterpellet-Erreichbarkeitsaufgabe ermöglichen eine exakte Beurteilung von motorischem Lernen und Gedächtnis in präklinischen Modellen und unterstützen die Zielvalidierung sowie die mechanistische Risikominimierung in neurobiologischen Entwicklungsprozessen. Dieser Ansatz liefert reproduzierbare, messbare Ergebnisse, die die frühe Entdeckungsforschung und translationsmedizinische Untersuchungen zur motorischen Funktion und neurologischen Erkrankungen voranbringen. Standardisierte Verhaltensassays sind entscheidend für die Portfolio-Priorisierung und eine zuverlässige Vorhersagekraft in der ZNS-Wirkstoffforschung.
Dieses Verhaltensparadigma ist in den Kontinuum von der frühen Entdeckung bis zur präklinischen Phase eingebettet und schafft eine Brücke zwischen der Identifizierung molekularer Zielstrukturen und deren funktioneller Validierung in vivo.