Name: Bestimmung der spontanen lokomotorischen Aktivität in Drosophila melanogaster (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-04-10T16:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 6 s
Description: Lernen Sie die Quantifizierung spontaner Lokomotorik bei Drosophila melanogaster mit Infrarot-Strahlenmonitoren und Datenanalysesoftware. Diese Methode ermöglicht zuverlässige Verhaltensstudien in der Verhaltensbiologie und Genetik.

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Diese Arbeit wurde durch ein Stipendium der National Institutes of Health (AG023088 BR) unterstützt.

Hinweis: Die Canton-S-Stamm ist der Standard von der Bloomington Stock Center-Wildtyp-Hintergrundlinie. 1. Lebensmittelzubereitung und Rezept für 1000 ml Nahrung Hinweis: Dieser Abschnitt beschreibt das Protokoll für die Zubereitung von Speisen. Große Metall-Töpfe verwendet werden, um etwa 18 L von Lebensmitteln zu einer Zeit vorzubereiten. Das hier beschriebene Protokoll verwendet wird verkleinert und 1000 ml H 2 O. Das Essen wird zweimal autoklaviert. <ol><li> Mischen Sie 113 g Saccharose und 28 g Bierhefe in 643 ml Wasser. Lassen Zutaten auf einer heißen Platte Satz bei 25 ° C mit einem Rührstab in der gesamten 15 Minuten mischen. </li><li> Autoklav Lebensmittel-Lösung für 20 min. </li><li> Mischen Sie 49 g Maismehl und 8,1 g Agar-Agar in 268 ml Wasser und fügen Sie zu dem in Schritt 1.2 beschrieben autoklaviert Futtermischung. Gut mischen mit einem großen Löffel oder einem Schneebesen. </li><li> Autoklav Futtermischung für weitere 20 min. </li><li> Legen Sie das Essen auf einem Teller abkühlen lassen und unter ständigem Mischen mit einem Rührstab. Ichf zusätzliche Lösungen sollten Lebensmittel wie Mifepriston (RU486) hinzugefügt werden, halten Sie die Speisen auf einer heißen Platte bis auf 60 ° C eingestellt und fügen Lösung, wenn das Essen die erforderliche Temperatur erreicht hat. </li><li> Lösen Sie 2,4 g tegosept in 10,7 ml 100% EtOH und auf eine kalte Platte zu halten mit einem Rührer vollständig auflösen und mischen Sie für ca. 15 min. </li><li> In tegosept Lösung auf Nahrung, wenn die Temperatur der Lebensmittel ist 60 ° C und gut mischen. </li><li> Verwenden einer Pumpe oder eines Futterspender zu etwa 10 ml der Nahrung in einer großen Fläschchen gießen. Durch die Verwendung eines Futterspender kann man Lebensmittel gleichzeitig in 100 breit, Kunststofffläschchen (1 Fach) zu einem Zeitpunkt, zu gießen. </li><li> Decken Sie die Röhrchen mit Kimwipes und Käse Tuch und lassen Sie Lebensmittel bei Raumtemperatur für 12-24 Stunden abkühlen. Halten Sie das Essen bei 4 ° C lagern und innerhalb von 3-4 Wochen. Wärmen Sie die Lebensmittel auf Raumtemperatur vor der Verwendung für Fliegen Arbeit. </li></ol> 2. Herstellung von Glasflaschen <ol><li> Zubereitet wird nach der in Schritt 1 genannten Protokolls. </li&gt; <li> Aliquot von 5 ml Nahrung in jeder Schmal, Glasfläschchen, die die richtige Größe für die Bevölkerung Monitoren. Diese Menge an Nahrung sollte niedrig genug, um unter der niedrigsten Ring der Bevölkerung Monitor sein. </li><li> Nachdem das Essen kühlt auf Raumtemperatur decken die Fläschchen mit Schwamm Stecker und halten Sie sie bei 4 ° C bis zu 2 Wochen. Da die Menge der Nahrung in einem Glasfläschchen eher gering ist, ist es am besten, um das Essen in ein oder zwei Wochen nutzen, um das Eintrocknen verhindern. </li><li> Warm up die Fläschchen auf Raumtemperatur vor dem Gebrauch. </li></ol> 3. Wartung der Kinder Flies <ol><li> Wachsen die Fliegen im breiten Kunststofffläschchen mit Standard-Labor Essen und halten die Fläschchen in einer feuchten, temperaturgesteuerten Klimakammer bei 25 ° C auf einem 12 Stunden Licht / Dunkel-Zyklus. Die Tageslichtzeit beginnt um 6:00 Uhr in diesem Labor. </li><li> Am Morgen klar Erwachsenen fliegt von den Ampullen aus dem Eltern Fliegen werden nicht erhoben. </li><li> Sammeln Sie neu geschlüpften flies und trennen sie nach Geschlecht auf eine CO 2-Pad innerhalb von 8 Stunden nach dem Schlüpfen, um sicherzustellen, dass die weiblichen Fliegen sind Jungfrauen. Fliegen beginnen zu 8 Stunden nach dem Schlüpfen paaren. </li><li> Wenn die Jungfrau männlichen und weiblichen Fliegen sind zwischen 5 und 10 Tage alt, legte 10 männliche und 10 weibliche Fliegen in einem Fläschchen mit Standard-Lebensmittel einige Stückchen aktive Hefe an der Spitze. Hinweis: Steuern der Dichte der Larven unter Verwendung der gleichen Anzahl von entfernt und sie in einer Ampulle für zwei Tage. Die Zugabe von Hefe fördert aktiv die Eiererzeugung. </li><li> Halten Sie die Fliegen um sich zu paaren und Eier zu legen in einem temperaturgesteuerten Klimakammer bei 25 ° C mit einem 12 Stunden Licht / Dunkel-Zyklus für 2 Tage. Richten Sie 5-10 Fläschchen der elterlichen Fliegen. </li><li> Übergeben Sie die Fliegen zu einem neuen Kunststoffröhrchen jeden zweiten Tag und halten die Fläschchen mit den Eiern in einem Brutschrank bei 25 ° C </li></ol> 4. Sammlung von Experimental Fliegen <ol><li> Nach 9 Tagen entfernt werden beginnen, aus den Fläschchen schlüpfen, wo der Parental Fliegen Eier gelegt (in Schritt 3.6 beschrieben.). Klar und entsorgen Sie die Fliegen, die während des ersten Tages geschlüpften und zurück, um die Fläschchen Inkubator. Die meisten der Fliegen am Tag 1 geschlüpften Weibchen sind. Eine synchronisierte Population von Fliegen werden an Tag 2 schlüpfen. </li><li> Innerhalb von 24 h Ort neu geschlüpften Fliegen auf CO 2-Pads und sammeln 25 männliche und 25 weibliche Fliegen pro Fläschchen mit einem Pinsel oder Metalllöffel. Halten Sie Fliegen auf CO 2 Pads für eine kurze Zeit, um alle Auswirkungen von CO 2 zu minimieren. Notieren Sie sich den Tag des Schlüpfens auf dem Fläschchen. Bauen Sie mindestens 5 Wiederholungs Fläschchen für Versuche und für Kontrollgruppen. </li><li> Die Durchstechflaschen in temperaturgesteuerten Klimakammern bei 25 ° C mit einem 12 Stunden Licht / Dunkel-Zyklus. </li><li> Übergeben Sie die Fliegen zu einem neuen Kunststoffröhrchen jeden zweiten Tag mit einem Trichter. </li><li> Altern die Fliegen, bis die gewünschte Alters für Experimente erreicht ist. </li></ol> 5. Einrichten der Mobility-Monitore <ol><li> Legen Sie diePopulation überwacht in einem temperaturkontrollierten Inkubator. </li><li> Verbinden Sie jeden Monitor mit einer 4-Draht Telefonkabel an die Stromversorgung Interface Unit (PSIU) über 5-Wege-Verteiler (Multiline), die bis zu 5 verbinden einzelne Monitore mit einer Öffnung in der PSIU. Siehe 1A und 2B. </li><li> Schließen Sie das PSIU zu einer Linie Steckdose (100-240 V). Stecken Sie den Netzstromanschluss in einem der 2 Gegen PSIU-Buchsen. Das angrenzende grüne Licht leuchtet grün, wenn richtig angeschlossen. </li><li> Schließen Sie das PSIU dem Universal Serial Bus (USB)-Hardware. Verbinden Sie das USB-Kabel zwischen dem USB-Hardware mit einem Macintosh-oder Windows-PC für die Datenaufzeichnung. Am besten wäre es, einen Computer nur für die Datenerhebung gewidmet haben, da Sammlung läuft seit Tagen auf einmal. </li><li> Laden Sie die USB-Software (PSIUdrivers.zip). USB-Treiber-Software wird von der Power Supply-Schnittstelle verwendet und muss nur einmal heruntergeladen werden. Es synthetisiert einDatenverbindung zwischen dem Computerprogramm und den PSIU / Aktivitätsmonitore. Für einen PC-Nutzung und ein COM-Port für einen Macintosh verwenden eine einfache serielle Schnittstelle. </li><li> Laden Sie das Computer-Programm für Macintosh OSX (Intel) oder für Windows PC (XP/Vista/7) Programme, die von folgenden von der Hersteller Hinweise 308.pdf Verfügung gestellt. </li><li> Starten Sie den Computer-Programm und stellen Sie das Programm, indem Sie auf den Einstellungen, Leuchten oder Monitore. Das Programm läuft bis der Benutzer &quot;quit&quot;, um das Programm zu stoppen. Wenn das Computer-Programm oder der Computer heruntergefahren wird die Monitore werden weiterhin Strahlunterbrechungen zählen, aber die zählt nicht aufgezeichnet, bis das Programm neu gestartet werden. In diesem Fall wird die erste Lesung enthalten alle zählt seit dem letzten Mal die PSIU schickte die Daten an den Computer. </li><li> Wählen Sie die Registerkarte Einstellungen und wählen Sie das Serial Port, PSIU für Macintosh und COM für den PC. </li><li> Wählen Sie das Intervall, das Lesen von Sekunden reicht, Minuten oder eine Stunde. </li> &lt;li&gt; Wählen Sie die Monitore: Jeder Monitor hat seine eindeutige Nummer, die vom Hersteller angegeben wird. Wählen Sie die Monitor-Range, zu den Zahlen auf die Monitore des Herstellers entspricht. </li><li> Die Lichter Feld: Stellen Sie sicher, dass alle Monitore ordnungsgemäß angeschlossen sind, die durch eine grüne Licht neben der Monitornummer auf der Software markiert. Ein rotes Licht zeigt an, dass die Verbindung unterbrochen wird, und eine Black Box zeigt an, dass das System ausgeschaltet ist oder nicht richtig eingerichtet. </li></ol> 6. Einrichten des Experiment <ol><li> Entfernen Sie Lebensmittel, die Glasflaschen von 4 ° C und lassen Sie sie auf Raumtemperatur erwärmen. </li><li> Separate männlichen und weiblichen Fliegen im gleichen Alter auf CO 2-Pad. Zur Alterung Studien ist es möglich, Mobilitätsstudien schon nach 3 Tagen Alter beginnen. </li><li> Setzen Sie 10 oder 10 männlich weibliche Fliegen in jedes Glasfläschchen haltige Speisen. Verwenden Sie mindestens drei Flaschen von jeder experimentellen und Steuerleitung von Fliegen und für jedes Geschlecht. </li><li> Halten Sie den viALS auf ihrer Seite entfernt, bis die Wiederherstellung von CO 2, die entfernt sind, keine in der Lebensmittel stecken. Separate Fliegen bei etwa 8.00 und lassen sie für ca. 2 Stunden bei Raumtemperatur von CO 2 zu erholen. </li><li> Die Durchstechflaschen im Inneren der Bevölkerung Monitore in den Gründerzentren untergebracht. </li><li> Entsorgen Sie die innerhalb der ersten 24 Stunden nach der gesammelten Daten die Fliegen in den Inkubator stellen sie an die neue Umgebung anpassen können. </li><li> Übergeben Sie die Fliegen nach 3 oder 4 Tage für neue Fläschchen, um das Trocknen der Lebensmittel zu vermeiden. Wenn Fliegen sind anfällig für Tod oder Alter sind 40 Tage oder älter, übergeben Sie die Fliegen nach 2 Tagen und Nutzungsdaten für Tag 2 gesammelt. Auch nutzen mehr als drei Fläschchen pro Gruppe, um eine ausreichende Wiederholungen zu gewährleisten. Daten aus Flaschen mit toten Fliegen sollte ignoriert werden und nicht in der Analyse enthalten. </li></ol> 7. Ausführen der Aktivität Monitore und Berechnung des Gesamt spontane Aktivität <ol><li> Präferenzen wählen - das Intervall für die Datensammlung &lt;.br /&gt; Hinweis: Das Computerprogramm ermöglicht das Erfassen der Daten in Intervallen von 1 Sekunde bis 60 Minuten. 10 und 30 Minuten-Perioden gefunden, um angemessene Informationen über Mobilität, ohne dass eine überwältigende Anzahl von Zeitpunkten zu liefern. Bei den ausgewählten Zeitraum, wird das Programm die aktuelle Gesamtzahl für jeden Monitor zu senden an den Computer und beginnen wieder von Null zu zählen. Das Computerprogramm speichert die Daten in einem neuen Ordner durch den Computer-Daten-System. Die in jedem Monitor gesammelten Daten werden separat gespeichert und einzelne Textdokumente für jedes Fläschchen hergestellt. Die Daten werden kontinuierlich gesammelt, solange das Programm arbeitet. </li><li> Am Ende des Experiments, scannen Sie die Daten mit Hilfe der FileScan110X für Macintosh OSX (Intel) oder SystemMB108 für Windows PC-Programm (XP/Vista/7). Hinweis: Die Scan-Programm eliminiert doppelte Lesungen und stellt sicher, dass die Aufnahmen abgeschlossen sind. </li><li> Speichern Sie die innerhalb einer bestimmten Zeit und p gesammelten DatenEITRAUM von Tagen. Wählen Sie eine experimentelle Namen und kopieren Sie die Dateien vom Computer Datenordner für die Analyse. Hinweis: Zu diesem Zeitpunkt kann die Aktivität Abständen geändert und verschiedene, umgewandelt werden. Die Originaldaten werden in der Computerdaten-Ordner gespeichert und kann bleiben, solange sie nicht gelöscht werden abgerufen werden. </li></ol> 8. Datenanalyse <ol><li> Kopieren Sie die in der Textdateien gesammelten Daten in Spalten der Excel-Tabellen für die Datenanalyse. Von dieser Software gesammelten Daten sind in Spalten, die Zahlen, die Gesamtaktivität in einem einzigen Monitor über einen Zeitraum von Zeit, die der Prüfer ausgewählt enthalten. Hinweis: für jeden Monitor gesammelten Daten sind in separaten Textdateien. Es gibt 32 Spalten für jeden Monitor. Die ersten sechs Spalten sind leer und enthalten nur 0; nächsten drei enthalten die am unteren Ring erhobenen Daten, in der Mitte und am oberen Ring. Der Rest der Kanäle können gelöscht werden, da sie keine Daten enthalten. Jeder Ring gibt einEinzelwert pro Zeit. Siehe Screenshot der Rohdaten in Abbildung 2. </li><li> Berechnung des Gesamtaktivität innerhalb einer gewünschten Zeit für jeden Monitor, der die Summe der Aktivität in drei verschiedenen Höhen von Infrarotstrahlen gesammelt darstellt. Hinweis: Der Zeitraum kann von einigen Stunden, 24 Stunden oder mehrere Tage reichen. </li><li> Bestimmen Sie den Mittelwert der Bewegungsaktivität und die Standardabweichung zwischen den drei Monitoren, die drei biologischen Replikate zu vertreten. Anmerkung: Die Daten können für statistische Signifikanz unter Verwendung einer Reihe von Tests untersucht werden. Eines zweiseitigen Students-t-Test, eine Einweg-Varianzanalyse (ANOVA) und einem Tukey HSD post-hoc-Test verwendet werden könnten, um die Auswirkungen der verschiedenen Umwelt-oder genetische Manipulationen auf 24 Stunden spontane Bewegungsaktivität 16 zu bestimmen. Es gibt eine Anzahl von anderen Programmen, die verwendet werden können, und sind zuvor veröffentlicht worden 17. </li></ol>

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</ol>

Wir haben nichts zu offenbaren.

Spontane Bewegungsaktivität der Fliegen wird von vielen Faktoren wie Alter, genetische Hintergrund und Geschlecht 2,13,18,19 beeinflusst. Außerdem können Umweltfaktoren wie Kaloriengehalt des Nahrungsmittels, der Temperatur der Umgebung, die Zugabe von verschiedenen Medikamenten, und Tag / Nacht-Lichtzyklus fly-Aktivität beeinflussen. Zum Beispiel männlichen Fliegen im gleichen Alter haben eine höhere spontane körperliche Aktivität im Vergleich zu Frauen (Abbildung 1). Daher sollte entfernt i...

Fruchtfliegen, Drosophila melanogaster, sind als wertvolle Modellorganismus, um Mechanismen, die komplexe Verhaltensweisen, wie Lernen und Gedächtnis, soziale Interaktion, Aggression, Drogenmissbrauch, Schlaf, sensorische Funktion, Balz, Paarung und 1,2 studieren verwendet. Ein Verhalten, das durch mehrere Protokolle untersucht worden ist, ist die spontane Bewegungsaktivität. Negative Geotaxis war eines der ersten Verfahren zur Messung Drosophila Aktivität entwickelt, und dieses Protokoll beinhaltet die Messung des Prozentsatzes der Fliegen, die eine bestimmte Höhe der Flasche zu erreichen, nachdem Fliegen wurden auf den Boden des Behälters 1,3 geschüttelt. Dieses Verfahren hat Vorteile, einfach, kostengünstig, und da es keine spezielle Ausrüstung kann in jedem Labor durchgeführt werden müssen. Es hat sich als ein wertvolles Screening-Werkzeug, um Effekte von verschiedenen genetischen Manipulationen auf Fliege Mobilität 3 Studie verwendet worden. Es ist jedoch zeit-und arbeitsintensiv einnd hat die Möglichkeit der Verzerrung durch variable Schütteln der Fläschchen und Menschenaufnahmen. Die negative Geotaxis Verfahren wurde auf durch Entwicklung der Negative Geotaxis (RING)-Methode Schnelle Iterative 4,5, die Fotografien der Fliege Ampullen nach Schütteln der Fliegen auf den Boden nimmt verbessert. Der Vorteil dieses Protokolls ist die Empfindlichkeit und die Möglichkeit zum Testen einer Vielzahl von Flug Fläschchen gleichzeitig. Allerdings hat dieses Protokoll immer noch die Potenzial für menschliche Fehler und misst nur negativ Geotaxis. Andere Laboratorien haben einfache Beobachtung in Kulturfläschchen verwendet werden, um die Bewegungsaktivität 6 zu bestimmen. Kürzlich mehrere Videoaufzeichnungssystemen zur Messung der Bewegungsaktivität fly entwickelt worden. Eine Videoüberwachungsprotokoll bietet Zeit für die Einstellung vor der Aufnahme 7. Die von Slawson et al. Verwendet auch eine Luftimpuls auf movemen stoppent bis zum Beginn der Aufzeichnung, die potentiell ein Stressor den Tieren 7 sein könnte. Diese Methode liefert Informationen über Durchschnittsgeschwindigkeit, Höchstgeschwindigkeit, Zeit in Bewegung, etc. Ein weiteres dreidimensionales Tracking-System misst die maximale Geschwindigkeit der einzelnen Fliegen bei ~ 0,2 Sekunden des freien Fluges 8 Start. Ein dreidimensionales Videoüberwachungsprotokoll verwendet Linie, die GFP und mehrere Kameras mit Filtern und somit die Detektion der Fluoreszenz zu fliegen Mobilität 9 bestimmen ausgerüstet. Fliegen in diesem Protokoll sind in der Regel zylindrisch Flugmuster, die potentiell durch die Form von Drosophila Kulturgefäße 10 aufweisen. Dieses Verfahren wurde mit einer Kuppel, die Messung spontaner Bewegung von zwei Fliegen 11 kann verbessert werden. Eine Hochdurchsatz-Verfahren, das eine Kamera verwendet, um automatisch zu überwachen und zu quantifizieren, die individuelle und soziale Verhalten von Drosophila ist ebenfalls beschrieben 12 gewesen. Zou etal. entwickelten eine Verhaltens Monitor-System (BMS), die zwei computergestützten Kameras verwendet, um Verhalten und Lebensdauer Bewegungen wie Ruhe aufzunehmen, bewegen, fliegen, Essen, Trinken, oder Tod von einzelnen Tephritiden Fruchtfliegen 13. Mehrere andere Video-Systeme wurden entwickelt, um Fliegen 14,15 Verhaltensaktivität überwachen. Hier beschreiben wir ein Verfahren zur Quantifizierung von Drosophila Aktivität, die Bevölkerung Monitoren verwendet. Diese Monitore sind in der Temperatur-und Feuchte-kontrollierten Inkubatoren bei 25 ° C auf einem 12-stündigen Tag-Nacht-Lichtzyklus untergebracht. Jede Population Monitor hat Infrarotstrahlen in Ringen in drei verschiedenen Höhen angeordnet war. Jedes Mal, wenn eine Fliege in die Ringe bewegt er den Infrarotstrahl, der von einem Mikroprozessor unabhängig Datensätze erfasst und zählt die Aktivität des in der Phiole entfernt bricht. Ein Mikroprozessor lädt die Gesamtaktivität in dem Fläschchen mit dem Computer in benutzerdefinierten intervals das könnte von 1 Sekunde bis 60 Minuten variieren. Das hier beschriebene Verfahren bietet ausreichend Zeit entfernt, um an die neue Umgebung anpassen und ermöglicht die gleichzeitige Messung der spontanen lokomotorischen Aktivität von nicht weniger als 120 Populationen entfernt. Zusätzlich beschreiben wir, Zubereitung der Speisen, fliegen Wartung, Einrichtung der Mobilität Bevölkerung Monitore in temperaturgesteuerten Inkubatoren und potenziellen Faktoren, die die Ergebnisse beeinflussen können. Diese Methode kann verwendet werden, um zu untersuchen, wie die verschiedenen Umwelt-oder genetische Veränderungen beeinflussen spontane Bewegungsaktivität der Fliegen werden.

<table><tbody><tr><td>Saccharose FCC Lebensmittelqualität 100 LB,</td> <td>Fisher Scientific MP Biomedicals</td><td>ICN90471380</td><td></td></tr><tr><td>Brewer' s Hefe</td><td>Fisher Scientific MP Biomedicals</td><td>ICN90331280</td><td></td></tr><tr><td>Drosophila Agar</td><td>Fine SciMart</td><td>DR-820-25F</td><td></td></tr><tr><td>Maismehl</td><td>Fisher Scientific MP Biomedicals</td><td>ICN90141125</td><td></td></tr><tr><td>Methyl4-hydroxybenzoat, Tegosept</td><td>Sigma</td><td>H5501-5KG</td><td></td></tr><tr><td>EtOH</td><td>Pharmco-AAPER</td><td>111000200</td><td></td></tr><tr><td>Aktive Trockenhefe</td><td>Fisher Scientific</td><td>ICN10140001</td><td></td></tr><tr><td>Fly CO2 Pad</td><td>LabScientific</td><td>BGSU-7</td><td></td></tr><tr><td>Stereomikroskop</td><td>Olympus</td><td>SZ40</td><td></td></tr><tr><td>Drosophila Kohlendioxid (CO2) Tank</td><td>Airgas</td><td>UN1013</td><td></td></tr><tr><td>Kleiner Pinsel zum Schieben der Fliegen</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Schalenfläschchen breit</td><td>Fischer Scientific</td><td>AS519</td><td></td></tr><tr><td>Buzzplugs für breite Kunststofffläschchen</td><td>Fischer Scientific</td><td>AS275</td><td></td></tr><tr><td>Glasfläschchen (25 x 95 mm)</td><td>Fischer Scientific Kimble 60931-8</td><td>AS-574</td><td></td></tr><tr><td>Schwammstopfen für Glasfläschchen</td><td>SciMart</td><td>DR-750<</td><td></td></tr><tr><td>i>Drosophila Lebensmittelspender</td><td>Applied Scientific (Fischer </td><td>AS780Q</td><td></td></tr><tr><td>DPM Drosophila Populationsmonitor</td><td>Trikinetics Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gleichstrom-Netzteil mit Netzkabel</td><td>Trikinetics Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PSIU9 Die Netzteil-Schnittstelleneinheit</td><td>Trikinetics Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Telefonkabel und 5-polige Verteiler</td><td>Trikinetics Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>USB-Hardware (Universal Serial Bus)</td><td>Trikinetics Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Macintosh oder Windows-PC mit UCB-Anschluss</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>DAMSystem308X Datenerfassungssoftware für Macintoch OSX (Intel)</td><td>www.trikinetics.com</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DAMSystem308 Datenerfassungssoftware für Windows PC (XP/Vista/7)</td><td>www.trikinetics.com</td><td></td><td></td></tr><tr><td colspan="4">[header]</td></tr><tr><td>DAMFileScan108X Software für Macintosh</td><td></td><td></td><td></td>www.trikinetics.com</tr><tr><td>DAMFileScan108X Software für Windows PC (XP/Vista/7)</td><td>www.trikinetics.com</td><td></td><td></td></tr><tr><td>USB Software (PSIUdrivers.zip)</td><td>www.trikinetics.com</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DAMSystem Notes 308<</td><td>a href="http://www.trikinetics.com/Downloads/DAMSystem%20Notes%20308.pdf">(http://www.trikinetics.com/Downloads/DAMSystem%20Notes%20308.pdf</a></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

bestimmung der spontanen lokomotorischen aktivität in<em&gt; drosophila melanogaster</em

Determination of the Spontaneous Locomotor Activity in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster als Modellorganismus eine hervorragende Umwelt-und genetischen Manipulationen, die das Verhalten beeinflussen studieren verwendet. Ein solches Verhalten ist spontane Bewegungsaktivität. Hier beschreiben wir unser Protokoll, Drosophila Population überwacht und ein Verfolgungssystem, das eine kontinuierliche Überwachung der spontanen lokomotorischen Aktivität von Fliegen können für mehrere Tage in einer Zeit verwendet. Dieses Verfahren ist einfach, zuverlässig und objektiv und kann verwendet werden, um die Auswirkungen des Alterns, des Geschlechts, Änderungen der Kaloriengehalt von Lebensmitteln, Zugabe von Drogen oder genetische Manipulationen, die menschliche Krankheiten nachahmen untersuchen.

<html> Die spontane Bewegungsaktivität bei Drosophila Fliege hängt von Geschlecht (3A), Kaloriengehalt der Nahrung (3B) und der Hell / Dunkel-Zyklus. Sobald das Licht ausgeschaltet fly Aktivität dramatisch abnimmt. 3A veranschaulicht von 24 Stunden nach der Bewegungsaktivität Aufnahmen von männlichen und weiblichen Fliegen. Ein Stern auf der x-Achse markiert den Zeitpunkt, wenn das Licht ausgeschaltet wurde und der Übergang zum Dunkel-Zyklus. 3B...

Drosophila melanogaster sind nützlich bei der Untersuchung genetischer oder umwelt Manipulationen, die Verhaltensweisen wie spontane Bewegungsaktivität beeinflussen. Hier beschreiben wir ein Protokoll, das Monitore mit Infrarot-Strahlen und Datenanalyse-Software, um die spontane Bewegungsaktivität zu quantifizieren nutzt.

Bestimmung der spontanen lokomotorischen Aktivität in<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Drosophila melanogaster has been used as an excellent model organism to study environmental and genetic manipulations that affect behavior. One such ...

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens besteht darin, die spontane motorische Aktivität von Fruchtfliegen zu quantifizieren. Dies wird erreicht, indem zunächst experimentelle Fliegen gesammelt und altern gelassen werden. Der zweite Schritt besteht darin, Populationsmonitore in einem temperaturgeregelten Inkubator einzurichten und die entsprechende Software herunterzuladen.Anschließend werden die Fliegen in Glasgefäße überführt und in Populationsmonitore gestellt, in denen die Aktivitätsmessungen durchgeführt werden. Der letzte Schritt besteht in der Analyse der Daten. Letztendlich dienen Populationsmonitore dazu, Unterschiede in der spontanen körperlichen Aktivität von Fliegen aufzuzeigen.Der Hauptvorteil dieser Technik im Vergleich zu bestehenden Methoden wie der negativen Geo-Achse besteht darin, dass sie eine einfache, zuverlässige und objektive kontinuierliche Erfassung der spontanen körperlichen Aktivität mehrerer Fliegenpopulationen ermöglicht. Diese Methode kann uns helfen zu bestimmen, wie unterschiedliche Manipulationen die Fliegen beeinflussen. Die spontane körperliche Aktivität, die die Durchführung des Verfahrens demonstriert, wird von Suzanne Kowski, einer Laborassis

determination-spontaneous-locomotor-activity-drosophila

Research

Forschung

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowissenschaften

Die Untersuchung der komplexen Bewegungsapparat Verhalten...

Hochauflösendes Video Tracking von Locomotion in Adult Drosophila melanogaster

Wir beschreiben Verfahren zur Erfassung täglichen Bewegungsaktivität...

Assaying Bewegungsaktivität zu zirkadianen Rhythmen Study and Sleep Parameter in Drosophila</em

Dieses Video beschreibt eine einfache Methode zur Quantifizierung der Fortbewegung von Fliegen und zeigt den durchgeführten Kletter-Assay. Der Fly-Climbing-Assay ist ein allgemeiner Test der motorischen Funktion, der auf einer negativen Geotaxis-Reaktion beruht.

Fly Climbing Assay: Eine Methode zum Testen der allgemeinen Fortbewegung bei Drosophila melanogaster

Dieses Video beschreibt, wie man frei laufende Fliegen verfolgen kann, um ihre allgemeine Fortbewegungsfähigkeit zu beurteilen. Das vorgestellte Protokoll demonstriert die Einrichtung des Assays und die Datenanalyse mit Hilfe von Video-Tracking-Software.

Verfolgung frei laufender Fliegen: Eine Methode zur Beurteilung der Fortbewegung bei Drosophila

Dieses Video beschreibt das Drosophila-Aktivitätsmonitor-System (DAM), das zur Verfolgung der Bewegungsaktivität verwendet wird. Die Forscher verwenden Aktivitätsdaten, die vom DAM gesammelt wurden, um den zirkadianen Rhythmus bei Fruchtfliegen zu untersuchen. Der vorgestellte Protokollclip zeigt, wie man Fliegen in das Gerät lädt und Aktivitätsdaten für zirkadiane Experimente aufzeichnet.

Drosophila Activity Monitor (DAM): Eine Methode zur Messung der Bewegungsaktivität bei Fliegen

Mit einer Webcam und einer Kombination aus kostenlosen und kostengünstigen Software-Programme können Lokomotive Muster in Drosophila melanogaster analysiert werden, um Unterschiede in der Geschwindigkeit, Distanz, Zeit und der verschiedenen motorischen Aktivitäten zu erkennen.

Ein Low-Cost-Methode für die Analyse von Beschlagnahme-ähnliche Aktivität und Bewegung in<em&gt; Drosophila</em

Parkinson-Krankheit ist eine neurodegenerative Erkrankung, die aus der Degeneration der dopaminergen Neuronen im Zentralnervensystem führt, wodurch Bewegungsfehler. Rotenon Modellen der Parkinson-Krankheit in Drosophila. In diesem Dokument werden zwei Tests, die sowohl spontan als auch erschrecken-induzierten Bewegungsmangel durch Rotenon verursacht charakterisieren.

Methoden zur Charakterisierung Spontan und Startle-induzierte Locomotion in einer Rotenon-induzierten Parkinson-Krankheit Modell der<em&gt; Drosophila</em

Dieser Bericht beschreibt eine Methode zur Messung der Larvenaktivität von Drosophila mit dem TriKinetics Drosophila Activity Monitor. Das Gerät nutzt Infrarotstrahlen, um die Bewegungen von bis zu 16 einzelnen Tieren zu erkennen. Die Daten können analysiert werden, um Bewegungsparameter wie Raten und die Positionen der Tiere in den Assay-Kammern darzustellen.

Die Messung der Aktivität in der Larven<em&gt; Drosophila</em&gt; Activity Monitor

Das vorliegende Protokoll bewertet die Bewegungsaktivität von Drosophila , indem es die Bewegung von Fliegen in einer handgefertigten Arena unter Verwendung der Open-Source-Software Fidschi verfolgt und analysiert, die mit Plugins kompatibel ist, um Pixel jedes Frames basierend auf hochauflösenden Videoaufzeichnungen zu segmentieren, um Parameter wie Geschwindigkeit, Entfernung usw. zu berechnen.

Eine einfache Technik zur Bestimmung der lokomotorischen Aktivität in Drosophila

Das Protokoll stellt eine kostengünstige Methode mit hohem Durchsatz zur Beurteilung der Neurotoxizität in der Fruchtfliege durch die Quantifizierung der Bewegungsstörung als Alternative zu herkömmlichen Säugetiermodellen dar. Ziel ist es, die neurotoxischen Wirkungen von pharmazeutischen Wirkstoffen, Umwelteinflüssen oder genetischen Veränderungen anhand eines sensitiven, reproduzierbaren und ethisch günstigen Modells zu bewerten.

Verhaltensanalyse der lokomotorischen Dysfunktion bei Drosophila melanogaster als Aussage für Neurotoxizität

Dieses Protokoll bietet einen Rahmen zur Bewertung stressinduzierter Verhaltensänderungen bei Drosophila melanogaster. Die Kombination komplementärer Assays ermöglicht die Quantifizierung von Aktivität, Erkundung und Entscheidungsfindung für einzelne Fliegen. Der Ansatz ist flexibel und kann an eine Vielzahl von Studien angepasst werden, die Stressbiologie, Stoffwechsel und neurobehaviorale Funktionen untersuchen.

Multimodale verhaltensbezogene Phänotypisierung stressbedingter depressionähnlicher Zustände bei Drosophila melanogaster

Lernen Sie die Quantifizierung spontaner Lokomotorik bei Drosophila melanogaster mit Infrarot-Strahlenmonitoren und Datenanalysesoftware. Diese Methode ermöglicht zuverlässige Verhaltensstudien in der Verhaltensbiologie und Genetik.

Bestimmung der spontanen lokomotorischen Aktivität in

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