Name: Bildgestützte Konvektion-enhanced Lieferung in Agarose-Gel-Modelle des Gehirns (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-05-14T13:45:00.000+00:00
Duration: 9 min 14 s
Description: Lernen Sie die konvektionsverstärkte Zufuhr in Agarose-Gel-Modellen des Gehirns für die neurologische Forschung. Diese Methode ermöglicht direkte Infusion von Therapeutika zur Behandlung neurologischer Erkrankungen.

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Die Autoren möchten von der MRT-Einrichtungen des Semmes-Murphey Klinik, Memphis, Tennessee sowie der Neurochirurgischen Abteilung an der Universität von Tennessee Health Science Center in Memphis, Tennessee danke den Mitarbeitern.

1. Herstellung von Gel Phantoms und Dye <ol><li> Planen 0,2% Agarose-Gel durch Auflösen von 2 g 0,1%-Agarose-Pulver in 1000 ml deionisiertem Wasser. Rühren Sie die Lösung für ca. 1 min auf gute Durchmischung zu gewährleisten; Mikrowelle und sofort die Lösung in 3-Minuten-Intervallen für 9 min oder bis klar ist, Rühren zwischen den Intervallen. </li><li> Während das Agarosegel flüssig ist, die Lösung auf 5 cm x 5 cm x 5 cm Behälter. Lassen Sie Platz an der Spitze des Behälters mit Wasser hinzufügen und damit die Agarose-Gel zu kühlen und zu begleichen. </li><li> Sobald die Agarose-Gel (ca. 1-2 Std.) verfestigt, fügen Sie 1 cm Wasser an die Spitze des Gels und im Kühlschrank lagern. Es ist am besten, um das Gel innerhalb von 24-48 h Mischen verwenden, aber es kann gespeichert werden für bis zu einer Woche im Kühlschrank 10. </li><li> Vorbereitung eines Radiokontrastmittel in einer 60 ml-Spritze, die aus 50 ml der 0,017% Bromphenolblau-Farbstoff (BPB) und 2 mM Gadoteridol Radiokontrastmittel. <ol><li> Kombinieren 8,5 mg Farbstoff BPB zu 50 ml VE-Wasser, um eine 0,017% BPB-Lösung zu schaffen. </li><li> In 0,2 ml 0,5 M Gadoteridol Lager an die 50 ml 0,017% BPB Lösung, um eine 2 mM Gadoteridol Lösung zu schaffen. </li></ol></li></ol> 2. Vorbereitung der Infusion System <ol><li> Spritzenpumpe Infusionssystem (bevorzugte Methode): Zur Herstellung einer Spritzenpumpe, befestigen den Infusionskatheter direkt mit der Spritze durch den Drucksensor, wodurch das Totvolumen der Infusionsleitung. Die Spülfunktion der Spritzenpumpe verwendet werden, um die Linie der Luft klar unter Verwendung eines Bolus größer als der Füllvolumen des Katheters mit einer Rate von 10 ul / min. </li><li> Schlauchpumpe Infusionssystem (alternative Methode): Verbinden Sie die Spritze mit der Radio-Kontrastmittel mit der Infusionspumpe. Befestigen Sie den Drucksensor an der Pumpenausgang mit dem Wandler an die IV-Monitor angebracht. Anfügen einer 16 G Infusionskatheter an dem offenen Ende des Drucksensors. Hinweis: Die Spitze des 16 G Infusionskatheter hat einen InnendurchmesserMesser von 0,2 mm und einem Außendurchmesser von 0,35 mm. Die Spitze ist aus Quarzglas und die Spitzenlänge beträgt 3 mm. Es erhöht sich auf etwa 0,75 mm und geht seit 15 mm, werden die Schritte der Katheter in einer Art und Weise verjüngt auf 1,6 mm oder 16 G. </li><li> Bereiten Sie sich für Infusion durch Spülen des Systems für ca. 15 min bei 16.667 ml / min, um Luftblasen zu entfernen. Die 16.667 ul / min Durchflussmenge darf nicht überschritten werden, da die Maschine Infusion aufgrund der hohen Leitungsdruck einzustellen. Nach Anbringen des Infusionskatheter zur Linie Verlassen der Infusionspumpe, Spülungsleitungen von Luft durch die Verwendung der Funktion &quot;Bolus&quot; auf der Infusionspumpe. </li><li> Befestigen Sie die Infusionskatheter montieren und Flugbahn Rahmen auf das Gel Phantombehälter (5 cm x 5 cm x 5 cm) und in der MRT. </li></ol> 3. CED Gel Infusions-und MR-Scanning <ol><li> Null den Druckwert (mmHg) durch die IV-Monitor vor Beginn der Infusion aufgezeichnet. </li><li> Legen Sie die Infusionskatheter in die Agarose-Gel-with die Infusionspumpe läuft bei der niedrigsten Strömungsgeschwindigkeit möglich, in diesem Fall 1,667 ul / min. </li><li> Beginnen die MR-Scan, mit den in Tabelle 1 aufgeführten Parameter und die Infusion mit einer Geschwindigkeit von 1,667 ml / min. Infuse das Gel mit einer konstanten Rate, bis das Gesamtvolumen infundiert 60 ul (ca. 38 min) erreicht. </li><li> Scannen des Gels kontinuierlich in 3 Minuten und 50 Sekunden Abständen. Notieren Sie sich die Druckwerte alle 60 sek. Sobald das Volumen infundiert 60 ul erreicht, schalten Sie die Infusionspumpe; und vollständige MRT-Untersuchungen während weiterhin Druckwerte aufzuzeichnen. </li></ol> 4. MR Datenanalyse <ol><li> Für die Analyse der MR-Bilder, verwenden Sie ein entsprechendes DICOM-Viewer mit ROI-Segmentierung Funktionalität. </li><li> Wählen Sie den richtigen Rahmen in jedem Scan durch den Querschnitt des Katheters, wie in Abbildung 1 zu sehen ist markiert. </li><li> Mit Hilfe der &quot;ROI - Rechteck&quot;-Werkzeug, wählen Sie den größten Teil des Gels, das keine keineTeil der Infusionsstelle. Die Software ausgeben wird eine mittlere Pixeldichte mit Standardabweichung. Finden Sie den Wert, der drei Standardabweichungen vom Mittelwert entspricht. Dieser Wert wird als der Schwellenwert zur Bestimmung, wann Kontrast mit einem Vertrauen von 99,7% vorliegt verwendet. </li><li> Mit Hilfe der &quot;ROI - Kreis&quot; Werkzeug, umkreisen die Infusionsstelle mit einem ausreichend großen Kreis und geben diesem einen eindeutigen Namen. </li><li> Wählen Sie den Kreis und mit dem &quot;ROI - Set Pixelwerte zu&quot; Werkzeug in Schritt 4.3 in die Eingangsschwellenwert &quot;, wenn aktuelle Wert größer als:&quot;-Box und Häkchen nur diese Zeile. Dann in &quot;auf diesen neuen Wert:&quot; geben Sie einen großen Wert (25.000). Stellen Sie die Pixeldichte, um den Bereich von der vorher definierten Schwelle umfasste auswählen. </li><li> Weiter mit dem &quot;ROI - Region wachsen (2D/3D Segmentierung)&quot;-Werkzeug, wählen Sie 2D-Anbaugebiet, das Vertrauen Algorithmus mit Anfangsradius Parameter = 2, und Pinsel ROI. Klicken Sie in der Infusionsstelle für die Software, um die gesamte Fläche zu berechnen of diese Region. </li><li> Unter der Annahme einer sphärischen Infusions Wolke berechnen das Volumen der Diffusion aus der Umgebung über die folgende Gleichung: V = 4/3π (√ (Fläche / π)) 3 </li></ol>

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</ol>

Die Autoren erklären, dass sie keine finanziellen Interessen konkurrieren.

<html> Die kritischen Schritte für den Erfolg der Infusion sind: Spülen der Infusionsleitung von Luft, das Mischen der Agarose-Gel, die Analyse der MR-Daten, mit kleinen Innendurchmessern Katheter mit abgestuften Katheterkonstruktionen, um einen Rückfluß zu minimieren und eine Minimierung der Druck, der durch den Filz Gel oder Gewebe, in das das Arzneimittel infundiert. Wie zuvor erwähnt, die Haupt Nachteil für den Erfolg der Infusion Infusionsleitung Luft. Richtig und gründlich Spülen des Infusionsleitung von Luft ist e...

Konvektion Enhanced Delivery (CED) wurde als Behandlungsoption für ein breites Spektrum neurologischer Erkrankungen einschließlich bösartiger Hirntumoren, Epilepsie, Stoffwechselerkrankungen, neurodegenerativen Erkrankungen (wie Parkinson-Krankheit) 1, Schlaganfall und Trauma 2 vorgeschlagen. CED beschäftigt Druck Schüttstrom für den Vertrieb eines Arzneimittels oder anderen Infusionslösung. CED bietet sichere, zuverlässige, homogene und Lieferung von molekularen Verbindungen, die von niedrig bis hoch, in klinisch relevanten Mengen 3. Traditionelle Arzneimittelabgabe an Hirngewebe ist stark durch die Blut-Hirn-Schranke 4 beschränkt. Von den engen Verbindungen zwischen Endothelzellen, aus denen sich die Kapillaren in das Gehirn, die Blut-Hirn-Schranke Blöcke polaren und hochmolekulare Moleküle vom Betreten des Parenchym des Gehirns gebildet. Direkt intraparenchymal Gehirn Infusion über CED können die Einschränkungen der bisherigen therapeutischen Drug-Delivery-Modalitäten zu überwindenund ermöglicht die Verwendung von Therapeutika, die die Blut-Hirn-Schranke nicht überqueren würde, und haben daher bisher nicht als praktikable Behandlungsmöglichkeiten 5 gewesen. Forscher der US-amerikanischen National Institutes of Health (NIH) beschrieben CED in den frühen 1990er Jahren als ein Mittel zur Erreichung größere therapeutische Wirkstoffkonzentrationen als durch Diffusion allein 6-8. Die ersten Verfahren der CED beteiligt Implantieren eines oder mehrerer Katheter in das Gehirn, den Anschluss einer Infusionspumpe mit dem Katheter und Pumpen der therapeutische Mittel direkt in die Zielregion. Die erhöhte Bruchverteilung und relativ stabile Konzentration wird berichtet, auftreten, wie der positive Druck, der durch die Infusionspumpe bewirkt, dass die Gewebe zu erweitern und damit für das Eindringen des Drogen 9. Die grundlegende Technik für CED ist weitgehend das gleiche wie es zuerst beschrieben wurde. Fortschritte in der Katheter-Design 10, Infusionstechnik <sup&gt; 11, Zeile 2 Drucküberwachung und Echtzeit-Überwachung für MRI Brain Shift 12, 13 zu korrigieren, optimieren mehrere Infusionen kollinear 14, und Monitor für Infusions Verlust 15 haben die Sicherheit und Wirksamkeit der Behandlung 10 erhöht. Zusätzliche Bedeutung hat Design auf dem Katheter und Infusions Strategie, einschließlich Durchsatz gelegt. Erfolgreiche CED, mit begrenzten Katheterrückfluss-und Gewebeschäden, mit Katheter Design und Infusionsrate korreliert. Die Verwendung eines Katheters mit einem kleinen Durchmesser und einer niedrigen Infusionsgeschwindigkeit auf Rückfluss entlang der Gehirnkatheter Schnittstelle sowie Schadensbegrenzung an der Katheterspitze 16 zu begrenzen. MR-Bildgebung bietet visuelle Bestätigung der korrekten Position für Infusionskatheter Platzierung, und damit Medikamentenabgabe, aber dabei auch für die Korrektur der Infusions Reflux oder abweichende Liefer 17. MR-Bilder können auch verwendet werden, um zu approximieren und verfolgen die Verteilungsvolumina (Vd werden) Des infundierten Medikaments. Vd unter Verwendung eines MR-Bildgebungssignalstärkewert größer als drei Standardabweichungen über dem Mittelwert von der umgebenden nicht-infundierten Gel als Schwellenwert für die Segmentierung 18 berechnet. Vd ist ein nützliches Maß für CED weil es das Volumen des Arzneimittels im Gehirn verteilt darstellt. Zusammen mit dem infundierten Volumen (Vi), kann ein Verhältnis erzeugt werden (Vd / Vi) Quantifizieren der von der infundierten Volumen Medikament bedeckt. Agarose-Gel-Phantome imitieren mehrere entscheidende mechanischen Eigenschaften des menschlichen Gehirns wichtig für das Verständnis, wie CED: Vd, Gel-Katheter-Interaktionen, poroelastischen Eigenschaften und Infusions Cloud Morphologie 10. Mischungen von 0,2% Agarosegel wurde gezeigt, dass in vivo Veränderungen der lokalen Porenanteil durch Gel Dilatation durch CED verursacht imitieren. Eine ähnliche Porenanteil menschliche Gehirn fördert ähnliche Wechselwirkungen und genaue Messungen von Vd 19. Zusätzlich, ähnlich den Konzentrationen agarose Gele wie 0,6% und 0,8% haben ähnliche Profile Infusionsdruck an das Gehirn 20 gezeigt. Ferner werden die durchscheinenden Agarosegelen den Vorteil einer Echtzeit-Darstellung der Katheterplatzierung und Infusions Rückfluß. Agarose-Gel-Phantome sind relativ preiswert zu produzieren. Die Kosten für die Agarose-Gel-Phantome Schlüssel zur Zukunft weit verbreitete neurologische Ausbildung während der Operation. Aufgrund dieser Eigenschaften Agarosegelen eine nützliche Ersatz Replizieren viele der wichtigsten Attribute des menschlichen Gehirns Infusionen ohne die Verwendung von Hirngewebe. Wie oben angegeben, Bild-geführte CED in Agarose-Gel-Modelle bietet eine vorteilhafte In-vitro-Verfahren zur Prüfung, Forschung und Ausbildung. Der Zweck dieses Artikels ist es zu beschreiben, wie Agarose-Gel Phantome neu zu erstellen, um geeignete CED Test-und Analyseprotokolle erläutern und gemeinsame Fehler bei der CED-Infusionen zur Behandlung von neurologischen Erkrankung konfrontiert sind.

<table><tbody><tr><td>Prohance</td><td>Bracco</td><td></td><td>Gadoteridol Röntgenkontrastmittel</td></tr><tr><td>Bromphenolblau-Farbstoff</td><td>Biorad</td><td>161-0404</td><td>Farbstoff für die Visualisierung von Infusionen</td></tr><tr><td>Agarose-Gelpulver</td><td>Biorad</td><td>161-3101EDU</td><td>Agarose-Pulver zur Herstellung von Gelen</td></tr><tr><td>Medrad Veris MR Vitalparameter-Monitor</td><td>Medrad</td><td></td><td>MR sicherer Infusionsdruckmonitor</td></tr><tr><td>16 G SmartFlow-Katheter</td><td>SurgiVision</td><td></td><td>Infusionskatheter</td></tr><tr><td>Medrad Continuum MR Infusionssystem</td><td>Medrad</td><td></td><td>MR sichere Infusionspumpe</td></tr><tr><td>SMART Frame MRT geführter Trajektorienrahmen</td><td>ClearPoint</td><td></td><td>Infusionskatheterrahmen</td></tr><tr><td>Osirix Bildgebungssoftware und DICOM Viewer</td><td>Osirix Imaging Software</td><td></td><td>OsiriX 32-Bit DICOM Viewer</td></tr></tbody></table>

bildgestützte konvektion-enhanced lieferung in agarose-gel-modelle des gehirns

Image-guided Convection-enhanced Delivery into Agarose Gel Models of the Brain

Konvektion Enhanced Delivery (CED) wurde als Behandlungsmöglichkeit für eine Vielzahl von neurologischen Erkrankungen vorgeschlagen. Neuroinfusion Katheter CED ermöglicht Druck Schüttstrom, größere Mengen von Therapeutika auf eine intrakranielle Ziel als herkömmliche Arzneimittelverabreichungsmethoden zu liefern. Der klinische Nutzen der Echtzeit-MRT-geführte CED (RCED) liegt in der Fähigkeit, genau zu zielen, zu überwachen Therapie und Komplikationen zu identifizieren. Mit Ausbildung ist RCED effiziente und Komplikationen minimiert werden. Die Agarose-Gel-Modell des Gehirns bietet eine zugängliche Tool für CED Prüfung, Forschung und Ausbildung. Simulierte Gehirn RCED ermöglicht Praxis der Scheinoperation während auch visuelle Rückmeldung der Infusion. Analyse der Infusion gestattet Berechnung der Verteilung Fraktion (Vd / Vi), so dass der Trainee, um die Ähnlichkeit des Modells zu überprüfen, verglichen mit menschlichen Hirngewebe. Dieser Artikel beschreibt unsere Agarose-Gel-Phantom Gehirn und weist auf wichtige michtrics während einer CED Infusions-und Analyseprotokolle beim Adressieren häufigsten Fallstricke bei CED konfrontiert Infusion zur Behandlung von neurologischen Erkrankungen.

Interpretation und Analyse von CED Infusionen umfassen mehrere wichtige Faktoren wie Verteilungsfraktion und Infusions Reflux. Die Verteilung Bruchrechnung hängt stark von der Berechnung der Vd. Daher genaue Interpretation der MR-Bilder, ist kritisch. Wir schlagen ein halbautomatisches Verfahren zum zuverlässigen Wiedergeben dieser Messungen wie oben aufgeführt. Diese Verfahren objektiv bestimmen die Querschnittsfläche des Infusions Wolke und eine ungefähre Radius. Während variabel, in Agarose-Gel die Infusion Wolke oft...

Konvektion Enhanced Delivery (CED) wurde als Behandlungsmöglichkeit für eine Vielzahl von neurologischen Erkrankungen vorgeschlagen. Um Fachkräfte des Gesundheitswesens für die Annahme der CED vorzubereiten, werden zugänglich Ausbildungsmodelle notwendig. Wir beschreiben die Verwendung von Agarose-Gel als solches Modell des menschlichen Gehirns, die für Tests, Forschung und Ausbildung.

Bildgestützte Konvektion-enhanced Lieferung in Agarose-Gel-Modelle des Gehirns

Convection-enhanced delivery (CED) has been proposed as a treatment option for a wide range of neurological diseases. Neuroinfusion catheter CED allows ...

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens besteht darin, eine Schulungsressource für die konvektionsunterstützte Applikation in AGROS-Gel-Modellen des Gehirns bereitzustellen. Dies wird erreicht, indem zunächst ein genaues AGROS-Gel-Modell des Gehirns korrekt vorbereitet wird. Der zweite Schritt besteht darin, die Leitung und die Katheter für die Infusion vorzubereiten, wobei sichergestellt werden muss, dass sich keine Luft in der Leitung befindet, da diese die Infusion beeinträchtigen könnte.Der nächste Schritt besteht darin, die Infusion zu beginnen, wobei sorgfältig vor Rückfluss geschützt wird und die Tropfgeschwindigkeit kontinuierlich überwacht sowie eine Wolke mittels MRT aufgezeichnet wird. Nach Abschluss der Infusion ist der letzte Schritt die Analyse der vom MRT bereitgestellten Daten der Infusion. Letztendlich wird die MRT-Datenanalyse verwendet, um das Verteilungsvolumen und das VD-zu-VI-Verhältnis darzustellen, das durch die Infusion erreicht wurde.Der Hauptvorteil dieser Technik im Vergleich zu bestehenden Methoden der pharmakologischen Therapie liegt darin, dass sie eine direkte Masseninfusion von Wirkstoffen ermöglicht, deren therapeutische Anwendung aufgrund ihrer pharmakokinetischen Eigenschaften und der Blut-Hirn-Schranke bisher begrenzt war. Die Bedeutung dieser Technik reicht bis zur Behandlung von Stoffwechselstörungen bei Hirntumoren. Bei neurodegenerativen Erkrankungen wie Morbus Parkinson, Schlaganfall und traumatischen Verletzungen haben historische Behandlungsansätze auf Pharmakotherapie oder direkte chirurgische Eingriffe gesetzt. Dieses Verfahren könnte die Anwendung von Substanzen ermöglichen, die bisher bei Krankheiten nur eingeschränkt verwendbar waren. Zum Beginn lösen Sie zwei Gramm 0,1 % AROS-Pulver in 1000 Milliliter deionisiertem Wasser auf. Um ein 0,2 %iges AROS-Gel herzustellen, rühren Sie die Lösung eine Minute lang, um eine gleichmäßige Durchmischung zu gewährleisten, und geben Sie die Lösung anschließend in Drei-Minuten-Intervallen für insgesamt neun Minuten in die Mikrowelle, oder bis die Lösung klar ist, wobei Sie zwischen den Intervallen jeweils umrühren. Danach gießen Sie die Lösung in Behälter mit einem Volumen von fünf Kubikzentimetern, wobei oben im Behälter Platz verbleibt, um Wasser hinzuzufügen. Lassen Sie das AGROS-Gel anschließend eine bis zwei Stunden lang abkühlen und sich absetzen.Nachdem sich das Agarosegel erstarrt hat, einen Zentimeter Wasser auf das Gel geben und über Nacht gekühlt lagern. Das Gel innerhalb von 24 bis 48 Stunden nach der Zubereitung verwenden. Anschließend 8,5 Milligramm Bromphenolblau, oder BPB-Farbstoff, mit 50 Millilitern entionisiertem Wasser vermischen, um eine 0,017 %ige BPB-Lösung herzustellen.Fügen Sie als Nächstes 0,2 Milliliter einer 0,5-molaren Gato-Erol-Standardlösung zu 50 Millilitern der 0,017 %igen BPB-Lösung hinzu, um eine zwei Millimolar starke Gato-Toradol-Röntgenkontrastmittellösung herzustellen. Geben Sie anschließend 50 Milliliter des Röntgenkontrastmittels in eine 60-Milliliter-Spritze. Schließen Sie die Spritze, die das R&ouml;ntgenkontrastmittel enth&auml;lt, an die Infusionspumpe an. Befestigen Sie danach den Drucksensor am Pumpenausgang, wobei der Wandler am Infusionsmonitor angeschlossen ist.Dann befestigen Sie einen Infusionskatheter mit 16 Gauge am offenen Ende des Drucksensors. Spülen Sie das System etwa 15 Minuten lang mit 16,667 Mikrolitern pro Minute aus. Um Luftblasen zu entfernen, überschreiten Sie nicht die Flussrate von 16,667 Mikrolitern pro Minute, da sonst die Infusion aufgrund eines hohen Leitungsdrucks automatisch gestoppt wird.Befestigen Sie als Nächstes die Infusionskatheter-Halterung und den Trajektorie-Rahmen am Gel-Phantom-Behälter und stellen Sie diesen in das MRT-Gerät. Nullen Sie den vom IV-Monitor aufgezeichneten Druckwert, bevor Sie mit der Infusion beginnen. Führen Sie danach den Infusionskatheter in das Aros-Gel ein, wobei die Infusionspumpe mit der niedrigstmöglichen Flussrate, 1,667 µL/min, läuft. Starten Sie die MR-Aufnahme mit den hier aufgeführten Parametern und setzen Sie die Infusion mit einer Rate von 1,667 µL/min fort, bis das insgesamt applizierte Volumen 60 µL erreicht hat.Scannen Sie das Gel kontinuierlich in aufeinanderfolgenden Intervallen. Notieren Sie die Druckwerte alle 60 Sekunden. Sobald das infundierte Volumen 60 Mikroliter erreicht hat, schalten Sie die Infusionspumpe aus und beenden Sie die MR-Untersuchung.Während weiterhin Druckmesswerte aufgezeichnet werden, verwenden Sie den eRx-DICOM-Viewer mit Funktionen zur Analyse von Bildregionen oder ROI-Segmentierung, um MR-Bilder zu analysieren. Wählen Sie dann den korrekten Frame in jedem Scan aus, der durch den Querschnitt des Katheters markiert ist. Verwenden Sie anschließend das ROI-Rechteckwerkzeug, um den größten Teil des Gels auszuwählen.Das schließt keinen Teil der Infusionsstelle ein. Die Software gibt eine mittlere Pixeldichte mit Standardabweichung aus. Anschließend identifizieren Sie den Wert, der drei Standardabweichungen vom Mittelwert entfernt liegt.Dieser Wert dient als Schwellenwert zur Bestimmung des Vorhandenseins von Kontrast mit einer Konfidenz von 99,7 %. Verwenden Sie als Nächstes das ROI-Kreis-Werkzeug, um die Infusionsstelle einzukreisen. Benennen Sie den Kreis anschließend eindeutig und wählen Sie ihn aus. Nutzen Sie das Werkzeug „Pixelwerte im ROI-Bereich festlegen“ und geben Sie den Schwellenwert in das Feld „wenn der aktuelle Wert größer ist als“ ein. Aktivieren Sie zudem das Kontrollkästchen nur für diese Zeile.Tragen Sie dann einen hohen Wert in das Feld für den neuen Wert ein. Setzen Sie die Pixeldichte zurück, um den durch die Schwelle erfassten Bereich auszuwählen. Wählen Sie anschließend mit dem ROI-Grow-Regionwerkzeug den zweidimensionalen Wachstumsbereich aus, verwenden Sie den Konfidenzalgorithmus mit Anfangsradius, Parameter zwei, und klicken Sie mit dem Pinsel-ROI innerhalb der Infusionsstelle, damit die Software die Gesamtfläche dieses Bereichs berechnet.Luft ist schädlich für das Verfahren und kann durch die Überwachung des Infusionsdrucks erkannt werden. Ein zentraler Parameter zur Identifizierung von Luft in der Infusionsleitung, wie dieser Graph zeigt. Luft in der Infusionsleitung wurde nach 15 Minuten festgestellt.Nach 17 Minuten zeigte sich ein Druckanstieg. Magnetresonanztomographische Aufnahmen zeigen das Wachstum der Infusionswolke und die eingeschlossene Luftblase. Diese Bilder zeigen das Gel vor der Einführung des Katheters sowie nach Beginn der Infusion und Einführung des Katheters.Die anschließende Zeitrafferaufnahme erfolgt in Vier-Minuten-Intervallen. Bei Durchführung dieses Verfahrens ist es wichtig, sorgfältig auf die Vorbereitung der Leitung zu achten, insbesondere darauf, Luft in der Leitung zu vermeiden. Ebenso wichtig ist es, während der Katheterplatzierung und zu Beginn der Infusion eine langsame und gleichmäßige Infusionsgeschwindigkeit beizubehalten, um einen Lufteintritt in die Leitung und einen Katheterreflux zu vermeiden.Nachdem Sie sich dieses Video angesehen haben, sollten Sie nun ein gutes Verständnis dafür haben, wie die konvektionsunterstützte Applikation als neue Methode der Arzneimittelabgabe ans Gehirn verwendet wird.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Dieses Protokoll beschreibt, wie Harz eingebettet Hirngewebe vorbereitet und in den drei Dimensionen in den fokussierten Ionenstrahl abgebildet werden, Rasterelektronenmikroskop.

Fokussierten Ionenstrahl-Fräs-und Rasterelektronenmikroskopie des Hirngewebes

Hier beschreiben wir eine schnelle und einfache Methode, um Bild fluoreszenzmarkierten Zellen in semi-dicken Hirnschnitten. Durch die Fixierung, Schneiden und optisch Clearing Hirngewebe beschreiben wir, wie Standard-epifluoreszenten oder konfokale Bildgebung verwendet werden, um einzelne Zellen und neuronalen Netzwerken im intakten Nervengewebe zu visualisieren.

Eine schnelle Annäherung an High-Resolution Fluoreszenz-Imaging in Semi-Thick Hirnschnitten

Hier beschreiben wir ein effizientes und vielseitiges Protokoll zur Induktion, Überwachung und Analyse neuartiger Glioblastome (GBM) unter Verwendung von Transposon-DNA, die in die Ventrikel von neugeborenen Mäusen injiziert wird. Zellen der subventrikulären Zone, die das Plasmid aufnehmen, transformieren, vermehren und Tumore mit histopathologischen Merkmalen des menschlichen GBM erzeugen.

Transposon-vermittelte Integration von Plasmid-DNA in die Subventrikularzone von neugeborenen Mäusen zu Novel Modelle von Glioblastoma generieren

Die Entwicklung der neuen (US) Ultraschallsonden basierend auf kapazitive Micromachined Ultraschall Wandler (CMUT) Technologie erfordert eine frühzeitige realistische Bewertung von imaging-Funktionen. Wir beschreiben ein wiederholbares experimentelle Protokoll für US-Bildaufnahme und Vergleich mit Magnet-Resonanz-Bilder, mit einem ex Vivo bovine Gehirn als bildgebende Ziel.

Ein experimentelles Protokoll zur Bewertung der Leistung des neuen Ultraschallsonden basierend auf CMUT Technologie in Anwendung auf die Bildgebung des Gehirns

Dieses Protokoll enthält Anweisungen für die direkte Beobachtung von radial migrierenden kortikalen Neuronen. In der utero- Elektroporation werden die organotypische Scheibenkultur und die konjunkturelle Bilddarstellung kombiniert, um die Effekte der Überexpression oder der Abregulation von Genen von Interesse bei der Migration von Neuronen direkt und dynamisch zu untersuchen und ihre Differenzierung während der Entwicklung zu analysieren.

Zeitraffer-konfokale Bildgebung der Migration von Neuronen in der organotypischen Scheibe Kultur der embryonalen Maus Gehirn mit<em&gt; In Utero</em&gt; Elektroporation

Lasermikrodissektion (LMD) ist eine empfindliche und hochreproduzierbare Technik, die verwendet werden kann, um Wege aufzudecken, die Gliomheterogenität und Invasion vermitteln. Hier beschreiben wir ein optimiertes Protokoll zur Isolierung diskreter Bereiche aus Gliomgewebe mittels Laser LMD, gefolgt von transkriptomischer Analyse.

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Eine MRT-basierte Toolbox für neurochirurgische Planung bei nichtmenschlichen Primaten

Dieses Protokoll demonstriert eine einfache und robuste Methode zur Untersuchung des In-situ-Axonwachstums und der Wachstumskegeldynamik. Es beschreibt, wie ex vivo physiologisch relevante akute Hirnschnitte hergestellt werden können und stellt eine benutzerfreundliche Analysepipeline zur Verfügung.

In situ Visualisierung des Axonwachstums und der Wachstumskegeldynamik in akuten ex vivo embryonalen Hirnschnittkulturen

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Untersuchung der räumlichen Interaktion zwischen Astrozyten und Neuronen in geräumten Gehirnen

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Verwendung des Gehirns von Kükenembryonen als Modell für in vivo und ex vivo Analysen des Verhaltens menschlicher Glioblastomzellen

Eine innovative Methode, um dehnbare Gehirnmatrizen zu bauen, um entweder koronale oder sagittale Schnitte zu schneiden, wird für die Anwendung bei Neugeborenenferkeln beschrieben. Dieser preisgünstige Ansatz verwendet Acrylplatten, die mit Vorlagen aus Agarose-Gel-Gehirnformen geschnitzt wurden, trägt mehrere Arten an und ermöglicht eine Erweiterung, um das Gehirnwachstum zu ermöglichen.

Herstellung einer erweiterbaren Gehirnmatrix, die über Entwicklungsstadien hinweg anpassbar ist

Lernen Sie die konvektionsverstärkte Zufuhr in Agarose-Gel-Modellen des Gehirns für die neurologische Forschung. Diese Methode ermöglicht direkte Infusion von Therapeutika zur Behandlung neurologischer Erkrankungen.

Bildgestützte Konvektion-enhanced Lieferung in Agarose-Gel-Modelle des Gehirns

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