Technische Grundlagen Elemente der Gefrierbruch-/ Gefrier Etch in Biological Elektronenmikroskopie

Ziel des folgenden Versuchs ist es, eine Nachbildung einer Kohlenstoff-Platin-Probe von biologischen oder anderen Materialien für die Untersuchung mittels Transmissionselektronenmikroskopie zu erzeugen. Um dies zu erreichen, werden Proben, die als Doppel- und Einzelrepliken präpariert werden, ultraschnellen Gefrierraten unterzogen, um die Bildung von Eiskristallen zu begrenzen. Dann wird die gefrorene Probe durch ferngesteuerte Manipulation bei flüssigem Stickstoff, den sogenannten Temperaturen, im Hochvakuum gebrochen, wodurch die Membran durch die Lipiddoppelschicht gespalten wird, wodurch eine extrazelluläre Fläche und eine Fläche entsteht, die proximal zum zytoplasmatischen Aspekt liegt.

Als optionaler Zusatzschritt. Die zugrunde liegenden Merkmale können sichtbar gemacht werden, wenn Wasser von der Oberfläche der gebrochenen Probe geätzt wird, indem der kühlende Mikrotomarm über dem Probentisch positioniert wird, um einen Temperaturunterschied zu erzeugen, der dazu führt, dass Wasser von der Oberfläche abhebt. Als nächstes wird eine Nachbildung durch Verdampfen von Kohlenstoff und Platin über die gebrochene Oberfläche erzeugt.