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DOI: 10.3791/51774-v
Yong Wang*1,2, En Cai*1,2, Janet Sheung1,2, Sang Hak Lee1,2, Kai Wen Teng2,3, Paul R. Selvin1,2,3
1Department of Physics,University of Illinois at Urbana-Champaign, 2Center for the Physics of Living Cells,University of Illinois at Urbana-Champaign, 3Center for Biophysics and Computational Biology,University of Illinois at Urbana-Champaign
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Einzel Fluorophore mit Nanometer-Präzision mit FIONA lokalisiert werden. Hier eine Zusammenfassung der FIONA-Technik wird berichtet, und wie die Durchführung FIONA Experimente beschrieben.
Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, zu demonstrieren, wie man Fluoreszenzbildgebung mit einer Genauigkeit von einem Nanometer oder Fiona-Experimenten durchführen kann. Dies wird erreicht, indem zunächst die erforderliche Ausrüstung eingerichtet und die Optik für Totalreflexion, Fluoreszenz, Mikroskopie oder Rasen ausgerichtet wird. Der nächste Schritt besteht darin, CY 3D NA auf der Innenfläche einer Probenkammer zu immobilisieren und CY 3D NA-Einzelmoleküle mit Nanometergenauigkeit zu lokalisieren.
Anschließend wird Fiona eingesetzt, um die Bewegung eines einzelnen verkürzten Myosins zu untersuchen, das mit einem Quantenpunkt markiert ist. Letztendlich wurde die Schrittweite von Myosin, während es weitergeht, Acton mit 36 Nanometern durch Fiona-Analyse gemessen. Obwohl diese Methode Einblicke in molekulare Motoren geben kann, kann sie auch auf andere Systeme angewendet werden, z. B. auf die Verfolgung von Rezeptoren auf der Membran von Zellen.
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