RNA-Isolierung aus Maus Pankreas: Eine Ribonuklease-reichen Gewebe

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, RNA mit hoher Integrität aus der Bauchspeicheldrüse der Ribonuklease-Kammmaus zu isolieren. Dies wird erreicht, indem die Bauchspeicheldrüse schnell aus dem Kadaver einer euthanasierten Maus entfernt wird. Als nächstes wird die Bauchspeicheldrüse in ein Lysereagenz getaucht und das Gewebe wird homogenisiert.

Nach der Zentrifugation wird die RNA unter Verwendung von Standardprotokollen aus dem Überstand isoliert und die RNA-Inhibitorlösung wird der endgültigen RNA-Lösung zugesetzt. Der letzte Schritt besteht darin, die Homogenisatorklingen sorgfältig zu reinigen, indem Sie alle in den Klingen gefangenen Gewebestücke entfernen und dann eine Reihe von Ethanol- und Wasserwäschen durchführen. Letztendlich ermöglicht dieses Verfahren die Isolierung von RNA für die Bauchspeicheldrüse der Maus mit einer RNA-Integritätszahl von mehr als sieben, die für die routinemäßige Genexpressionsanalyse verwendet werden kann.