Name: Menschlichen Skelettmuskelbiopsie Verfahren unter Verwendung der modifizierten Technik Bergström (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-09-10T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 20 s
Description: Erfahren Sie die modifizierte Bergström-Technik zur Muskelbiopsie am Vastus lateralis. Diese Methode ermöglicht die Gewinnung von Gewebeproben für histologische und biochemische Analysen zur Untersuchung der Muskelphysiologie.

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Keine Finanzierung zu erklären.

Die beschriebenen Skelettmuskel Verfahren folgt den Richtlinien der Appalachian State University Institutional Review Board. HINWEIS: Das Team besteht aus einem Operator (Ph.D. oder MD in der Biopsietechnik trainiert), und mindestens eine, aber im Idealfall drei oder mehr Techniker. Der Betreiber ist für die Durchführung und Überwachung aller Aspekte der Skelettmuskelbiopsie Verfahren verantwortlich. Ein Techniker (Techniker # 1) ist für die Unterstützung der Betreiber mit allen Aspekten der Muskel Extraktion unmittelbar verantwortlich. Dazu gehören vor allem die &quot;nicht-sterilen Händen&quot; und eine Saugwirkung mit einer sterilen Spritze. Ein zweiter Techniker (Techniker # 2) greift im Gespräch mit Subjekt und Massagen gegenüberliegende Bein des Patienten während des Eingriffs zu der Person Angst zu minimieren. Der dritte Techniker (Techniker # 3) ist für die Handhabung und Verarbeitung der Skelettmuskelprobe verantwortlich. Nachgeschalteten analytischen Maßnahmen vorschreiben, wie viele additionalen Techniker sind für die Verarbeitung erforderlichen / Vorbereitung der Skelettmuskelprobe. 1. Gegenstand Vorbereitung <ol><li> Sammeln, vorzubereiten und zu organisieren, die für die Muskelbiopsie Verfahren (Tabelle 1) angegebenen Materialien. Dekontaminieren und sterilisieren Bergström Nadel (Außenkanüle und Innen Trokar) und den Kolben nach den üblichen 16. </li><li> Überprüfen Sie die Einverständniserklärung mit dem Thema. Die Skelettmuskelbiopsie Teil der Einwilligung in die Form an der Appalachian State University verwendet zu beteiligen, ist in der Online-Ergänzung 1 zur Verfügung gestellt. <ol><li> Sprechen Sie das Thema über die allgemeinen Aspekte der Muskelbiopsie Verfahren mit Fokus auf mögliche Risiken des Verfahrens, Vorbereitung der Haut, die Anwendung des Narkosemittels, typische Empfindungen. Weisen Sie den Gegenstand sorgfältig die Einwilligung in Form mitmachen und unterschreiben, um zu bestätigen, dass das Studiendesign und Verfahren verstanden werden. </li></ol></li><li> Bestätigen, dass die sorbehaltlich ist nicht allergisch auf &quot;___ Caine&quot; vom Typ Medikamente (zB Lidocain). </li><li> Weisen Sie den Gegenstand auf einem gepolsterten Tisch mit dem Oberschenkel liegen in Rückenlage ausgesetzt. Legen Sie zwei Einweg-Absorptions Underpads mit Kunststoffunterlage unter der Person Bein. Positionieren Sie das Bein in einer entspannten Art und Weise mit einem kleinen Handtuchrolle unter der Ferse, so dass das Knie vollständig ausgefahren ist (erhöhte ~ 1 cm), so Platzieren der vastus lateralis in einer verkürzten Position. </li><li> Haben die Betreiber anweisen, das Thema vorübergehend ausgesetzt Vertrag die Oberschenkelmuskulatur, so dass die Biopsiestelle visualisiert werden können. Hinweis: Die vastus lateralis Biopsiestelle wird nur auf die Fascia lata (illiotibial Band), etwa ein Drittel der Entfernung zwischen der Spitze der Patella und Trochanter major 7 vordere. </li><li> Haben die Betreiber Marke knapp unter (~ 0,5 cm) der Einschnittstelle mit einer feinen Spitze Permanentmarker. </li><li> Haben der Betreiber bestimmen die ungefähre Hautfaltendicke von pincHing die Hautfalte. </li><li> Haben die Betreiber und Techniker waschen ihre Hände mit Seife und warmem Wasser und Einmalhandschuhe anziehen. </li><li> Haben der Betreiber entfernen die Haare von einem Bereich ~ 15 cm x 15 cm um die Biopsiestelle (über Klipper). Hinweis: Abschneiden der Haare von der Biopsiestelle verhindert, dass Haare immer in den Einschnitt während des Verfahrens und während des Schließens, und Haarentfernung ermöglicht einen besseren Kontakt zwischen den Bandverschlüsse und der Haut (siehe 3.4). </li><li> Haben die Betreiber sterilisieren Sie den Bereich mit Tupfer mit einem Antiseptikum vorgeweicht, (wie PVP-Jod oder Chlorhexidinglukonat für Themen allergisch auf Jod / Schalentiere). Beginnen Sie in der Mitte und arbeiten in konzentrischen Kreisen auf der Außenkante des ausgeschnittenen Bereich. Zumindest jedes Mal wiederholen, zweimal mit einem neuen Pre-getränkten Wattestäbchen. </li></ol> 2. Biopsie <ol><li> Haben die Betreiber von Einmalhandschuhen zu entfernen, waschen Sie die Hände mit Seife und warmem Wasser, und Don sterilen chirurgischen gloves unter aseptischen Bedingungen. </li><li> Techniker haben # 1 vorhanden den sterilen Lochtuch an den Betreiber. Haben die Betreiber unter aseptischen Bedingungen, legen Sie das Tuch über die Biopsiestelle, um einen sterilen Bereich zu halten. </li><li> Techniker haben # 1 vorhanden der Betreiber eine 5 ml-Spritze mit einer 21 G Nadel ausgestattet, während aseptische Technik. Reinigen Sie die Oberseite des Lidocain Fläschchen mit einem Alkoholtupfer. <ol><li> Haben der Betreiber unverzüglich zurückzutreten 5 ml Lidocain. Entfernen Sie die 21 G-Nadel aus der Spritze und entsorgen Sie die Nadel in einen Behälter für scharfe Gegenstände. </li><li> Techniker haben # 1 vorhanden die Betreiber mit einer 1 ½-Zoll-25 G-Nadel unter Beibehaltung aseptische Technik. Haben die Betreiber Ort des 1-Zoll ½ Nadel auf die Spritze und evakuieren die Luftblasen aus der Spritze. </li></ol></li><li> Techniker haben # 1 Spray Äthylchlorid auf der Einschnittstelle (~ 0,5 cm über der Marke fester Tinte auf der Haut), bis die Haut scheint &quot;blanchieren&quot;. <ol><li> Have der Bediener die Nadel etwa horizontal auf die Haut in die Dermis, saugen die Nadel, und dann zu infiltrieren mit ~ 100 ul von Lidocain, eine &quot;Blase&quot; 2-4 mm Durchmesser zu produzieren. <ol><li> Haben die Betreiber absaugen die Nadel (die Kolben der Spritze etwas zurückziehen), um zu bestätigen, dass die Nadel nicht in einem Blutgefäß platziert. Wenn Blut in der Spritze erscheint, ziehen Sie die Nadel, verwerfen in einem Behälter für scharfe Gegenstände, und beginnen wieder bei 2,3. </li><li> Haben die Betreiber vorab die Nadel in das subkutane Gewebe, aspirieren die Nadel und dann infiltrieren das Gewebe mit ~ 1 ml Lidocain, eine Blase zu bilden. Sobald die Blase hat sich gelegt, legen Sie die 1 ½-Zoll-Nadel auf der Lidocain-Spritze geladen senkrecht in die Einschnittstelle, Stoppen oberflächlich an der Faszie. Hinweis: Das Subjekt kann eine leichte augenstechendes Gefühl auf der ersten Injektion von Lidocain (ähnlich einem Bienenstich) fühlen. </li></ol></li><li> Sicherzustellen, dass der OPERAToder hat der Muskel nicht infiltrieren mit lidocoine weil es myotoxische 17-19 ist. </li><li> Haben die Betreiber die Nadel absaugen und dann langsam injizieren die restlichen 4 ml Lidocain beim Herausziehen der Nadel aus dem Oberschenkel. Zeigen steriler Gaze über der Injektionsstelle und lassen Sie das Thema zu entspannen, während das Lokalanästhetikum wirksam wird. </li></ol></li><li> Nach 2-3 min, haben Techniker # 1 vorhanden der Betreiber ein Skalpell, während aseptische Technik. <ol><li> Haben die Betreiber leicht Sonde die Biopsiestelle mit der Spitze des Skalpells, um zu bestätigen, dass der Bereich betäubt. Falls notwendig, injizieren weitere 3-4 ml Lidocain in den Einschnitt Website finden 2.4.1.2. </li></ol></li><li> Haben die Betreiber eine gerade 1 cm Schnitt durch die Haut und das Unterhautgewebe (~ 2-3 mm über der Tintenmarkierung) parallel zum Femur. <ol><li> Haben die Betreiber legen das Skalpell tiefer, um einen Schnitt durch die Faszie in den Muskel zu machen. Tun Sie dies einmal in jede Richtung<html> . Hinweis: Das Subjekt kann einen Stich oder Druck mit dem tieferen Schnitt, wenn das Skalpell Schnitte in den Muskel spüren. </li><li> Haben Techniker # 2 eingreifen das Thema im Gespräch und massieren Sie die anderen Bein. </li></ol></li><li> Haben die Betreiber Ort eine großzügige Menge von steriler Gaze über der Schnittführung und Biopsiestelle und gelten direkten Druck auf den Schnitt, um Blutungen zu verringern. <ol><li> Techniker haben # 1 Schließen Sie das 3-Wege-Metall-Hahn auf die Einweg-60-ml-Spritze und dem 30 cm Verlängerungsschlauch (Abbildung 1). </li><li> Techniker haben # 1 schließen Sie ein Ende des konischen Kunststoffschlauch Verbinder in das freie Ende des Verlängerungsschlauch und fest stecken Sie das andere Ende des konischen Kunststoffschlauch Verbinder in das große Ende einer 200 ul Pipettenspitze mit ~ 15-18 mm die Spitze abgeschnitten. </li></ol></li></ol>jpg &quot;width =&quot; 500 &quot;/&gt; Abbildung 1. Die Bergström Nadel. (A) Die Bergström Nadel (5 mm) ist der (a) Außenkanüle und (b) Innen Trokar besteht, sind die damit verbundenen Komponenten (c) Kolben, (d) 200 ul Pipettenspitze mit ~ 15-18 mm abgeschnitten , (e) verjüngt Kunststoffleiste, (f) 3-Wege-Absperrhahn Metall, (g) 30 cm Verlängerungsschlauch, und (h) 60 ml Einwegspritze. (B) Die Bergström Adel (5 mm) und die zugehörigen Komponenten zusammengebaut. ( c) Der innere Trokar des Bergström Adel (5 mm) etwa 1 cm zurückgezogen wird das Fenster der äußeren Kanüle. <ol start="9"><li> Nachdem die Blutung nachgelassen hat, haben Techniker # 1 Öffnen Sie die Beutel Autoklav sterilisiert und präsentieren die 5 mm Biopsienadel und der inneren Trokar (Abbildung 1) an den Betreiber unter Beibehaltung aseptische Technik. <ol><li> Haben die Betreiber die Nadel (Außenkanüle und Innen Trokar) montieren, prüfen Sie die Ausrichtung und Gleiten. </li> &lt;/ Ol&gt; </li><li> Haben die Betreiber fest zu halten die Nadelanordnung (Außenkanüle und Innen Trokar) mit beiden Händen, um die innere Trokar am Drehen zu hindern. Techniker haben # 1 Stecken Sie das Schnittpipettenspitze in die Oberseite des inneren Trokar Teil der Biopsienadel mit einer leichten Drehbewegung nach unten. Stellen Sie sicher, dass die Techniker # 1 der Betreiber oder der Biopsienadel, nur die Pipettenspitze nicht berühren. </li><li> Haben die Betreiber führen die Biopsie-Nadel in das Gewebe durch den Schnitt. Suchen Sie den Schnitt in der Faszie (eine erworbene &quot;Feel&quot;) mit der Spitze der Biopsienadel. Vorab die Nadel kurz hinter der Blende und Winkel der Nadel nach unten zu dem Boden, während die Nadel in den Muskel schoben. Hinweis: Themen kann einige leichte Beschwerden (zB &quot;tiefen Druck&quot; oder leichte Krämpfe Empfindung) als der Schnitt durch die Faszie wird mit der Spitze der Biopsienadel und die Nadel wird in den Muskel erweiterte Erfahrung. <ol> &lt;li&gt; Techniker # 2 Weisen Sie den unter &quot;locker&quot; zu bleiben und ihre Oberschenkelmuskulatur nicht bis zum Vertragsabschluss, während der Bediener voran die Nadel in den Muskel. </li></ol></li><li> Sobald die Biopsie-Nadel in Position ist, haben die Betreiber Signal Techniker # 1, um die Wegwerf 60-ml-Spritze zu öffnen. <ol><li> Techniker haben # 1 schnell ziehen Sie die Einweg-Spritze 60 ml offen für die 40-50 ccm Marke um einen Sog in der Biopsienadel zu schaffen. </li><li> Haben die Betreiber ziehen Sie den inneren Trokar aus ca. 1 cm, um das Fenster der Außenkanüle öffnen und gleichzeitig die Position des Außen Trokar in den Muskel. Haben die Betreiber schnell schließen Sie die innere Trokar zu schneiden (Clip) und sammeln die Muskelprobe. Haben die Betreiber Signal Techniker # 1 bis Absaugung freizugeben. </li><li> Techniker haben # 1 öffnen Sie den Hahn in den Raum, um die Saugwirkung zu lösen. </li><li> Haben die Betreiber drehen die Biopsienadel 90 ° und wiederholen Sie den Vorgang. Falls erforderlich, haben die Betreiber repeat die Rotationsverfahren bis zu (für insgesamt 4 Clips) 3x. </li></ol></li><li> Haben der Betreiber direkten Gegendruck auf der Einschnittstelle mit steriler Gaze beim Entfernen der Biopsienadel aus dem Oberschenkel, man aufpassen, nicht an der Blende oder der Haut zu fangen. Wenn erheblichen Widerstand zu spüren ist, umgeschnitten, während eine Drehbewegung auf die innere Trokar. </li><li> Nach dem Entfernen der Biopsienadel aus dem Oberschenkel, haben die Betreiber ziehen Sie den inneren Trokar zurück 1 cm, um visuell inspizieren das Lumen des äußeren Kanüle zu schätzen, wenn eine ausreichende Menge an Gewebe gesammelt wurde. <ol><li> Haben die Betreiber der Hand der Biopsienadel auf Techniker # 1. Zur Aufrechterhaltung aseptischer Technik sorgen dafür, dass Techniker # 1 berührt nur die Nadel, nicht der Betreiber. Techniker haben # 1 Hand die Biopsienadel auf Techniker # 3. </li></ol></li><li> Techniker haben # 3 Entfernen Sie die Gewebe aus der Biopsienadel. <ol><li> Techniker haben # 3 Mit den Kolben (Abbildung 1) und ein Paar feine Spitze Pinzetteum sicherzustellen, dass alle Muskelgewebe von der inneren und äußeren Trokar-Kanüle entfernt. </li><li> Techniker haben # 3 schnell die Probe wiegen, um zu bestätigen, dass eine ausreichende Menge von Muskelgewebe gesammelt und legen Sie die Proben auf einem eiskalten Dissektion Block. </li></ol></li><li> Techniker haben # 3 sorgfältig sezieren sichtbar Bindegewebe und Fett aus den Muskelproben. Techniker haben # 3 Bereiten Sie die Muskelproben für die Lagerung nach Downstream-Analysen. Zum Beispiel sollten sofort Proben in einem Kryoröhrchen und rasten in flüssigem Stickstoff einfrieren, montieren und frieren für die Histologie, oder in einem Kryoröhrchen mit RNase-Inhibitor, usw. </li><li> Falls erforderlich, wiederholen Sie den Vorgang mit einer zweiten Biopsie-Nadel sterilisiert, während aseptische Technik. </li></ol> 3. Schließung <ol><li> Haben der Betreiber direkten Druck auf Biopsiestelle mit steriler Gaze und einer Packung Eis für 10-15 min an. </li><li> Sobald die Hämostase erreicht ist, haben die Betreiber den Einsatz Alkohol prep Pads getrocknetes Blut aus der Gegend um den Schnitt zu entfernen. </li><li> Techniker haben # 1 vorhanden ein Rohr von topischen chirurgischen Klebstoff und Applikator für den Bediener. Haben die Betreiber das Rohr des chirurgischen Klebstoff und Applikator montieren, ohne den Auftragsspitze oder die Spitze des Rohres. </li><li> Haben die Betreiber ziehen der Schnitt geschlossen mit einer Hand, während eine einzelne Schicht von chirurgischen Klebstoff über der Spitze des trockenen Schnitt mit der anderen Hand. Nach der Klebstoff aushärtet (~ 90 sec), gelten Band closuresperpendicular zum Einschnitt. Alternativ schließen Sie den Schnitt mit zwei sterilen 4-0 Nähten. </li><li> Haben der Betreiber direkten Druck ausüben, indem Februar von 03 bis 04 &quot;x 2&quot; nicht-steriler Gaze-Pads auf der Einschnittstelle und mit selbsthaftenden Klebefolie. </li><li> Haben die Betreiber bieten das Thema verbale und schriftliche Anweisungen zur richtigen Wundversorgung, normale und abnormale Reaktionen und Aktivität Leitlinien für die folgenden 1-4 Tage (siehe Online-supplement 2). </li></ol>

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</ol>

Die Autoren haben keine Interessenkonflikte.

Dieses Video bietet eine Schritt-für-Schritt-Zusammenfassung der an der ASU Human Performance Laboratory verwendet Skelettmuskelbiopsie Verfahren. Dieses Verfahren, mit kleinen Modifikationen, wurde genutzt, um rund 1.600 Muskelbiopsien in den letzten 13 Jahren zu sammeln. Die Muskelbiopsie Proben wurden wichtige Daten in der Sporternährung auf Basis Untersuchungen vorgesehen, was zu wichtigen Forschungs Entdeckungen. Es gibt viele Techniken, um kritische bewusst sein, wenn die Durchführung ...

Die perkutane oder &quot;halboffen&quot; Biopsietechnik wird verwendet, um die Skelettmuskulatur Gewebeproben von menschlichen Patienten und Versuchspersonen erhalten. Duchenne (1806-1875) wird als der erste, der eine Nadel mit einem Trokar zu konstruieren, um die Skelettmuskulatur von lebendigen Subjekten durch perkutane Biopsie 1 zu erhalten gutgeschrieben. In den 1960er Jahren eingeführt Bergström einer perkutanen Biopsienadel ähnlich dem von Duchenne 2-4 beschrieben. Zwanzig Jahre später, Evans et al. 5 modifiziert die Technik durch Anlegen eines Unterdrucks durch die Schneide Trokar des Bergström Nadel. Diese Modifikation kann die Ausbeute des Gewebes 3-bis 5-fach 6,7 zu erhöhen und in der biomedizinischen Forschung und der klinischen Einstellungen verwendet. Diese Technik hat, und weiterhin die Diagnose von Myopathien und unser Verständnis der Struktur und Funktion der Skelettmuskulatur zu fördern. Die perkutane Biopsie Muskel-Technik ist straightforward. Wenn es richtig gemacht, nur unter Einhaltung aseptischer Technik, sind die damit verbundenen Risiken minimal. Die Muskelbiopsie Verfahren wird als Untersuchungswerkzeug für Forschungsprojekte betrachtet. Einige akademische Institutionen ermöglichen geschulten Dozenten Forscher mit einem Ph.D., mit direktem Arzt Aufsicht, um die Muskelbiopsien erhalten und andere eine Bord-zertifiziert Arzt, um die Technik durchzuführen. Die ASU-Biopsie-Team hat erfolgreich über 1.600 Muskelbiopsien während der letzten 13 Jahre durchgeführt 8-15. Der Zweck dieses Video ist, das modifizierte Bergström Nadel perkutan Muskelbiopsietechnik 5 beschreiben Skelettmuskelproben aus den vastus lateralis Personen erhalten.

<table><tbody><tr><td>Bergstr&ouml; m Biopsienadel, 5 x 100 mm</td><td>Stille Surgical Inc.</td><td>119-29187-50</td><td>1 Stück</td></tr><tr><td>Durasorb blaues Pad</td><td>Fisher</td><td>22-031-340</td><td>Etui mit 300</td></tr><tr><td>Prep Rasierer Einweg</td><td>Moore Medical</td><td>89760</td><td>1 Stück</td></tr><tr><td>Rasiercreme</td><td>Moore Medical</td><td>92869</td><td>1 Dose</td></tr><tr><td>Alkoholtupfer</td><td>Moore Medical</td><td>98721</td><td>Box/200</td></tr><tr><td>Povidon-Jod-Tupfer (3er Pack)</td><td>Moore Medical</td><td>90691</td><td>Packung à 50</td></tr><tr><td>Gesichtsmasken</td><td>Fisher</td><td>19-039-690</td><td>Packung à 50</td></tr><tr><td>sterile Handschuhe; Gr. 6,5</td><td>Moore Medical</td><td>68128</td><td>Schachtel à 50 Paar</td></tr><tr><td>Sterile Handschuhe; Gr. 7,0</td><td>Moore Medical</td><td>68129</td><td>Schachtel à 50 Paar</td></tr><tr><td>Sterile Handschuhe; Gr. 8,5</td><td>Moore Medical</td><td>68132</td><td>Schachtel à 50 Paar</td></tr><tr><td>Fenestiertes Handtuchtuch</td><td>Moore Medical</td><td>92712</td><td>Beutel mit 50</td></tr><tr><td>Lidocain (1% HCl, ohne Epi)</td><td>Dealmed</td><td>427902</td><td>30 cc Fläschchen</td></tr><tr><td>Ethylchlorid-Spray</td><td>Dealmed</td><td>386020</td><td>3,5 fl. Oz. Flasche</td></tr><tr><td>5 ml Spritze mit 21 G Nadel</td><td>Fisher</td><td>14-827-48</td><td>Etui mit 100</td></tr><tr><td>25 G 5/8" Nadel</td><td>Fisher</td><td>14-826AA</td><td>Etui mit 100</td></tr><tr><td>25 G 1 1/2" Nadel</td><td>Fisher</td><td>14-826-49</td><td>Hülle mit 100</td></tr><tr><td>Einweg-Skalpelle mit #11 Klinge</td><td>Fisher</td><td>0-8927-5B</td><td>Schachtel mit 20</td></tr><tr><td>60 ml</td><td>Spritze Fisher</td><td>13-689-8</td><td>Schachtel mit 40</td></tr><tr><td>~30 Zoll Verlängerungsschlauch</td><td>Fisher</td><td>14-169-7A</td><td>Rolle mit 50 Fuß</td></tr><tr><td>Metallhahn</td><td>Fisher</td><td>01-290-38</td><td>Stück</td></tr><tr><td>Schlauchverbinder aus Polypropylen mit konischen Enden, 3,2 bis 5,5 mm</td><td>Fisher</td><td>15-315-28A</td><td>Etui mit 100</td></tr><tr><td>gelben Pipettenspitzen (1-200 &micro; l)</td><td>Fisher</td><td>02-681-2</td><td>~15-18 mm der Spitze abschneiden</td></tr><tr><td>Topischer chirurgischer Klebstoff</td><td>Medline</td><td>MSC091076</td><td>Etui mit 36 Tuben</td></tr><tr><td>Topischer chirurgischer Kleber</td><td>Medline</td><td>MSC091076Z</td><td>Schachtel mit 6 Tuben</td></tr><tr><td>Schmetterlingsstiche (Klebestreifen) 1/2" x 4" (6 pro Packung)</td><td>Moore Medical</td><td>93050</td><td>Schachtel/300</td></tr><tr><td>Bandadge, Streifen, 3/4 x 3 in.</td><td>Fisher</td><td>19-027-202</td><td>Packung mit 100</td></tr><tr><td>Klebebinden (5 m Rollen)</td><td>Fisher</td><td>19-027-768</td><td>Packung mit 36</td></tr><tr><td>1" chirurgischem Papierband</td><td>Fisher</td><td>19-027-761</td><td>Packung mit 12</td></tr><tr><td>Nähten (4-0 Rückwärtsschneiden, FS2)</td><td>Moore Medical</td><td>82926</td><td>Packung mit 36</td></tr> 4 <tr><td>x 4 sterilen Mullbinden</td><td>Moore Medical</td><td>66949</td><td>Packung/50</td></tr><tr><td>2 x 2 Unsterile Mullbinden</td><td>Moore Medical</td><td>37336</td><td>Packung/200</td></tr><tr><td>3 x 4 nicht klebende Polster</td><td>Moore Medical</td><td>74389</td><td>bx/100</td></tr><tr><td>Autoklavenbeutel 3,5 x 9</td><td>Moore Medical</td><td>40390</td><td>Karton mit 200</td></tr><tr><td>Autoklavenbeuteln 5,25 x 10</td><td>Moore Medical</td><td>40391</td><td>Karton mit 200</td></tr><tr><td>Autoklaven-Indikatorband</td><td>Moore Medical</td><td>31608</td><td>Karton mit 250</td></tr><tr><td>Laboratoren Mäntel&mdash; kleiner</td><td>Fisher</td><td>23-900-520A&nbsp;</td><td>10/pk</td></tr><tr><td>Laborkittel&ndash; mittel</td><td>Fisher</td><td>23-900-520B&nbsp;</td><td>10/pk</td></tr><tr><td>Laborkittel&ndash; groß</td><td>Fisher</td><td>23-900-520C&nbsp;</td><td>10/pk</td></tr><tr><td>Keimtötende Einweg-Stofftücher</td><td>Moore Medical</td><td>62879</td><td>Dose/160</td></tr></tbody></table>

menschlichen skelettmuskelbiopsie verfahren unter verwendung der modifizierten technik bergström

Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified Bergstr&#246;m Technique

Die perkutane Biopsie-Technik ermöglicht es Forschern und Klinikern der Skelettmuskulatur Gewebeproben zu sammeln. Das Verfahren ist sicher und sehr effektiv. Dieses Video beschreibt die perkutane Biopsie-Technik unter Verwendung eines modifizierten Bergström Nadel Skelettmuskelproben aus den vastus lateralis Personen erhalten. Die Bergström Nadel besteht aus einer äußeren Kanüle mit einer kleinen Öffnung (&quot;Fenster&quot;) auf der Seite der Spitze und einer inneren Trokar mit einer Schneidklinge an seinem distalen Ende. Unter lokaler Anästhesie und aseptischen Bedingungen wird die Nadel in den Skelettmuskel durch einen Einschnitt in der Haut, Unterhaut und Faszie schoben. Als nächstes wird Saugkraft auf die innere Trokar eingesetzt, wird die äußere Trokar zurückgezogen, Skelettmuskelgewebe in das Fenster des äußeren Kanüle durch die Saugwirkung gezogen wird, und der innere Trokar schnell geschlossen wird, wodurch das Schneiden oder Abschneiden des Skelettmuskelgewebes Proben . Die Nadel wird um 90 ° gedreht60, und ein weiterer Schnitt durchgeführt wird. Dieser Vorgang kann noch dreimal wiederholt. Diese Mehrfachschnitttechnik erzeugt typischerweise eine Probe von 100-200 mg oder mehr bei gesunden Probanden und kann unmittelbar vor, während getan werden, und nach einer Trainingseinheit oder sonstigen Eingriffen. Nach Post-Biopsie Verband der Einschnittstelle, Themen in der Regel wieder ihre Aktivitäten des täglichen Lebens sofort und vollständig in starke körperliche Aktivität innerhalb von 48-72 Stunden zu beteiligen. Themen sollten Schwerkrafttraining für 48 Stunden zu vermeiden, um das Risiko von Bandscheibenvorfall des Muskels durch den Einschnitt in der Faszie zu reduzieren.

Die wie oben beschrieben Muskelbiopsie Verfahren ermöglicht die Forscher Skelettmuskelgewebe Proben schnell und konsequent zu sammeln. Die typische Ausbeute bei gesunden, sportlich Themen ist 200 mg oder mehr in einem einzigen Durchgang mit 3-4 Clips. Das Verfahren dauert 15-20 Minuten, von denen die meisten in der Vorbereitung für den Einschnitt ausgegeben wird. In Übung basierte Studien sind oft Muskelproben vor und nach dem Training eingenommen, mit einem oder zwei Proben während der Wiederherstellung gesammelt. Mit ...

Der Zweck dieses Videos ist es, die modifizierte Bergström-Skelettmuskelbiopsietechnik an menschlichen Probanden zu präsentieren.

Menschlichen Skelettmuskelbiopsie Verfahren unter Verwendung der modifizierten Technik Bergström

The percutaneous biopsy technique enables researchers and clinicians to collect skeletal muscle tissue samples. The technique is safe and highly ...

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, mit der modifizierten Bergstrom-Technik eine Skelettmuskelbiopsieprobe aus dem Vastus laterals eines menschlichen Freiwilligen zu erstellen. Dies wird erreicht, indem zunächst die Haut und das Unterhautgewebe an der Biopsiestelle anästhesiert werden. Im zweiten Schritt wird ein Schnitt durch die Haut gemacht, das Unterhautgewebe und die Faszien, die den Skelettmuskel überlagern.Anschließend wird die Biopsienadel durch die Schnitte in den Skelettmuskel vorgeschoben und im letzten Schritt die Biopsieprobe entnommen. Die Biopsienadel wird vorsichtig entfernt und der Schnitt mit chirurgischem Klebstoff verschlossen. Letztendlich können die Skelettmuskelbiopsieproben für histologische Analysen aufbereitet und auf biochemische Veränderungen und die Expression spezifischer Proteine und Gene unter verschiedenen Trainingsbedingungen analysiert werden.Diese Methode kann helfen, wichtige Fragen auf dem Gebiet der Skelettmuskulatur zu beantworten, z. B. welche biochemischen, molekularen und zellulären Reaktionen auf anstrengendes Training bestehen. Das Verfahren wird von Dr. Gerald Ferris, dem Arzt unseres örtlichen Krankenhauses, und Maschi Tanaka, einem Techniker aus unserem Labor, demonstriert. Nach Einholung der Einverständniserklärung weisen Sie den Probanden an, sich mit freiem Oberschenkel in Rückenlage auf einen gepolsterten Tisch zu legen und das Bein entspannt mit einer kleinen Handtuchrolle unter der Ferse so zu positionieren, dass das Knie vollständig gestreckt und etwa einen Zentimeter angehoben ist.Weisen Sie als Nächstes den Probanden an, den freiliegenden Oberschenkelmuskel kurzzeitig anzuspannen, so dass die riesige Lateralis-Biopsiestelle direkt vor der Faszie sichtbar gemacht werden kann. Lata etwa ein Drittel des Abstands zwischen der Oberseite der Kniescheibe und dem Trokanter major. Verwenden Sie dann eine Haarschneidemaschine, um die Haare aus einer etwa 15 x 15 Zentimeter großen Region um die Biopsiestelle herum zu entfernen, und sterilisieren Sie den Bereich mit Tupfern, die in einem topischen Antiseptikum getränkt sind, um die Biopsie mit geeigneter PSA und einer septischen Technik zu entnehmen.Sprühen Sie zuerst Ethylchlorid auf die Inzisionsstelle, bis die Haut zu blanchieren scheint. Führen Sie als Nächstes eine 25-Gauge-Nadel horizontal in die Dermis ein, saugen Sie die Nadel an und geben Sie etwa 100 Mikroliter Lidocain ab, um eine Blase mit einem Durchmesser von zwei bis vier Millimetern unter der Hautoberfläche zu erzeugen. Dann schieben Sie die Nadel in das Unterhautgewebe vor, aspirieren erneut und geben etwa einen Milliliter Lidocain ab, um eine weitere Blase zu bilden.Sobald die zweite Blase abgeklungen ist, führen Sie die Nadel in die Inzessionsstelle ein, halten Sie oberflächlich an der Faszie an, saugen Sie die Nadel ein letztes Mal ab und injizieren Sie dann langsam die restlichen vier Milliliter Lidocain, während Sie die Nadel aus dem Oberschenkel ziehen. Sondieren Sie nach zwei bis drei Minuten die Biopsiestelle leicht mit der Spitze eines sterilen Skalpells, um die Anästhesie zu bestätigen. Wenn die Stelle fertig ist, machen Sie einen geraden Schnitt von einem Zentimeter durch die Haut und das Unterhautgewebe in einem 45-Grad-Winkel in Bezug auf den Oberschenkelknochen.Führen Sie dann das Skalpell einmal in jede Richtung tief genug ein, um einen Schnitt durch die Faszie in den Muskel zu machen. In der Regel müssen Personen, die neu in dieser Methode sind, geduldig sein, da sie lernen, die Veränderung des Widerstands zwischen dem Unterhautgewebe und den Faszien bei der Verabreichung des Lokalanästhetikums und beim Durchtrennen der Haut, des Unterhautgewebes und der Faszien zu spüren. Führen Sie nun die Biopsienadel im gleichen Winkel in das Gewebe ein, in dem der Schnitt gemacht wurde, bis die Spitze in die Faszie eintritt.Schieben Sie die Nadel in einem Abwärtswinkel knapp an der Faszie vorbei, während sie in den Muskel vorgeschoben wird. Weisen Sie den Probanden an, entspannt zu bleiben und den Oberschenkelmuskel nicht anzuspannen, während die Nadel vorgeschoben wird. Sobald die Biopsienadel in Position ist, öffnen Sie eine 60-Milliliter-Einwegspritze bis zur 40- bis 50-Milliliter-Markierung, um einen Sog in der Biopsienadel zu erzeugen.Ziehen Sie den inneren Trokar etwa einen Zentimeter heraus, um das Fenster der äußeren Kanüle zu öffnen, während Sie die Position der äußeren Kanüle innerhalb des Muskels beibehalten. Schließen Sie dann schnell den inneren Trokar, um die Muskelprobe zu schneiden und zu entnehmen. Öffnen Sie anschließend den Absperrhahn, um die Absaugung zu lösen, und drehen Sie die Biopsienadel um 90 Grad, wobei Sie den Vorgang bis zu dreimal wiederholen, um insgesamt vier Clips zu erhalten.Entfernen Sie dann die Biopsienadel aus dem Oberschenkel, wenn Sie die Nadel entfernen. Ziehen Sie den inneren Trokar einen Zentimeter zurück und inspizieren Sie das Lumen der äußeren Kanüle, um abzuschätzen, ob eine ausreichende Menge an Gewebe entnommen wurde. Üben Sie 10 bis 15 Minuten lang direkten Druck mit steriler Gaze und einem Eisbeutel auf die Biopsiestelle aus.Entfernen Sie während dieser Zeit das Gewebe von der Biopsienadel Ziehen Sie nach dem Vereisen den Schnitt mit einer Hand zu, während Sie mit der anderen Hand eine einzelne Schicht chirurgischen Klebstoff über den trockenen Schnitt auftragen. Nachdem der Klebstoff etwa 90 Sekunden lang ausgehärtet ist, bringen Sie Klebebandverschlüsse senkrecht zum Einschnitt an, platzieren Sie dann drei bis vier zwei mal zwei Zoll große unsterile Mullpads über der Inzisionsstelle und befestigen Sie sie mit selbstklebender Klebefolie, um direkten Druck auf das Gewebe auszuüben. Geben Sie dem Probanden schließlich mündliche und schriftliche Anweisungen zur richtigen Wundversorgung, zu normalen und abnormalen Reaktionen und Aktivitätsrichtlinien für die folgenden ein bis vier Tage.In einer randomisierten, placebokontrollierten Crossover-Studie liefen männliche Ausdauersportler drei Stunden lang auf Laufbändern mit 70 % VO O2 max und konsumierten ein 6 % Kohlenhydrat- oder Placebo-Getränk mit einer Rate von einem Liter pro Stunde. Biopsien des Skelettmuskelgewebes wurden vor und nach dem Training entnommen, und es wurde beobachtet, dass die Genexpression verschiedener Zytokine im Skelettmuskelgewebe, das von erfahrenen Ausdauersportlern gewonnen wurde, nach drei Stunden Laufen erhöht war. Interessanterweise wurde beobachtet, dass die Kohlenhydrataufnahme trotz fehlender Auswirkungen auf die Skelettmuskulatur den Glykogenmangel nach seiner Entwicklung abschwächte. Diese Technik ebnete Forschern auf dem Gebiet der Muskelphysiologie den Weg, um unter anderem Prinzipien wie die Nutzung des Kraftstoffsubstrats bei unterschiedlichen Trainingsintensitäten, trainingsinduzierte Muskelschäden und interzelluläre Signalübertragung zu erforschen.

human-skeletal-muscle-biopsy-procedures-using-modified-bergstrm

Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Myo-mechanischen Analyse von isolierten Skelettmuskel

Die wichtigsten adhärenten Zelltypen, die aus dem menschlichen Muskel stammen, sind myogene Zellen und Fibroblasten. Hierbei werden Zellpopulationen mittels magnetisch aktivierter Zellsortierung auf Basis des CD56-Antigens angereichert. Die anschließende Immunmarkierung mit spezifischen Antikörpern und der Einsatz von Bildanalysetechniken ermöglicht die Quantifizierung der zytoplasmatischen und nukleären Eigenschaften in einzelnen Zellen.

Isolierung und Charakterisierung von Quantitative Immunzytochemische Primäre myogenen Zellen und Fibroblasten aus menschlichen Skelettmuskel

Verfahren zur Biopsie des Vastus lateralis, Herstellung von gereinigtem Mitochondrien und respirometrischen Profiling beschrieben. Die Verwendung von kleinen Muskelvolumen macht diese Technik für klinische Forschung.

Vorbereitung und Respirometrische Bewertung der Mitochondrien isoliert aus dem Skelettmuskelgewebe durch perkutane Nadelbiopsie Erhalten

Dieses Video demonstriert die Technik der perkutanen Muskelbiopsie des menschlichen Vastus lateralis unter Verwendung des Weil-Blakesley-Konchotoms.

Mensch<em&gt; Vastus lateralis</em&gt; Skeletal Muscle Biopsy die Weil-Blakesley Conchotom Verwendung

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Isolation, Kultur, Charakterisierung und Differenzierung menschlicher Muskelprogenitorzellen aus dem Skelettmuskelbiopsieverfahren

Beschrieben hier ist ein Protokoll zur direkten Immunkennzeichnung von nekrotischen Myofikern in Muskelkryosektionen. Nekrotische Zellen sind durchlässig für Serumproteine, einschließlich Immunglobulin G (IgG). Die Enthüllung der Aufnahme von IgG durch Myofiber ermöglicht die Identifizierung und Quantifizierung von Myofiberen, die einer Nekrose unabhängig von Muskelproblemen unterzogen werden.

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Menschlichen Skelettmuskelbiopsie Verfahren unter Verwendung der modifizierten Technik Bergström

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