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JoVE Journal Biology
Mouse Fetal Whole Intestine Culture System for Ex Vivo Manipulation of Signaling Pathways and Three-dimensional Live Imaging of Villus Development

Maus Fetal ganze Darm-System für Kultur Ex-vivo- Manipulation von Signalwegen und dreidimensionale Live-Imaging von Zotte Entwicklung

Full Text
15,622 Views
06:46 min
September 4, 2014

DOI: 10.3791/51817-v

Katherine D. Walton1, Åsa Kolterud2

1Cell and Developmental Biology,University of Michigan, 2Department of Biosciences and Nutrition,Karolinska Instituet Novum

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Verbesserte Bildgebungstechnologie ermöglicht die dreidimensionale Bildgebung von Organen während der Entwicklung. Hier beschreiben wir ein ganzes Organkultursystem, das eine Live-Bildgebung der sich entwickelnden Zotten im fötalen Mausdarm ermöglicht.

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, ganze Organkulturen aus embryonalen Därmen von Mäusen ex vivo zu züchten, um so die Modulation der zellulären Signalwege zu ermöglichen. Dies wird erreicht, indem zunächst Mausdärme von Föten zwischen dem 12.5. und 18.5. Embryonaltag entnommen werden. Der zweite Schritt besteht darin, den Darm in eine Transwell-Kultur oder eine lebende Bildgebungskulturplatte zu legen.

Als nächstes behandeln Sie den Darm mit Medien, die mit den pharmakologischen Inhibitoren der Zellsignalwege oder -orte hergestellt wurden. Die Aro-Geschwindigkeiten sind mit rekombinanten Proteinen getränkt, um die Zellsignalisierung auf dem Darm zu verändern. Der letzte Schritt besteht darin, die kultivierten Därme entweder in dicken Viomabschnitten oder in Lochhalterungen abzubilden.

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