Name: Einseitige Pyramidotomy der Pyramidenbahn in Ratten für Bewertung der Neuroplastizität treibenden Therapien (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-12-15T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 41 s
Description: Lernen Sie die einseitige Pyramidotomie bei Ratten zur Bewertung neuroplastizitätsfördernder Therapien. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung motorischer Defizite und Erholungsmuster nach Rückenmarksverletzungen.

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Diese Arbeit wurde von der International Spinal Research Trust und die Treuhand Rosetrees unterstützt.

Ethics Statement: Alle Verfahren wurden in Übereinstimmung mit den Richtlinien des britischen Innenministeriums und Tiere (Scientific Procedures) Act von 1986. 1. Chirurgie und Verletzung HINWEIS: Die Verwendung Ratten schwerer als 220 g mit postoperative Genesung zu helfen, wenn der Chirurg findet Tiere verlieren oft mehr als 10% ihres präoperativen Körpergewicht. <ol><li> Vor der Operation testen, die Tiere für ihre Vorderpfote bevorzugt mit dem Zylinder Aufzuchttest 15 oder der Montoya staicase Test 24. Vorzugsweise schneiden die Pyramide / der CST, der dem dominierenden Vorderpfote. HINWEIS: Zwei Tage vor der Operation, legen Sie die folgenden Punkte in die Käfige, so dass die Ratten, die mit Lebensmitteln, die während der Erholung von der Operation von Vorteil sein wird, vertraut machen: Hydrogel-Packs, nassen Brei und hochkalorische Nahrungsergänzungsmittel. Sterile Versionen dieser Nahrungsergänzungsmittel werden von verschiedenen Anbietern. </li><li> Anesthetize weiblichen Lister Kapuze Ratten (Gewicht zwischen 200 und 250 g) mit Isofluran (5% für die Induktion und 1 bis 2% für die Wartung) in Sauerstoff (Leistung: 1,5 l / min). HINWEIS: Die Wahl des Anästhetikums ist wichtig. Inhalationsanästhetikum ermöglicht eine schnellere Regelung der Tiefe der Anästhesie als Ketamin, die auch häufig verwendet wird. Isofluran ermöglicht eine bessere Kontrolle der Atmungsfrequenz und der Tiefe. Die Wahl der Betäubung ist Isofluran. HINWEIS: Die Verwendung Ratten schwerer als 220 g mit postoperative Genesung zu helfen, wenn der Chirurg findet Tiere verlieren oft mehr als 10% ihres präoperativen Körpergewicht. </li><li> Verwalten Carprofen subkutan als Analgetikum, wenn die Tiere betäubt, um Entzündungen zu behandeln und zu Analgesie. Hinweis: Carprofen während pyramidotomy Chirurgie in unserem Labor nach unserem Tierarzt beraten. Opioide können weitere Atemdepression während der Operation führen. </li><li> Während der Operation die Tiere bei 37 ° C zu halten mit einem Heim-exotherme Decke-System und eine rektale Temperatursonde. </li><li> Bestätigen Sie Vollnarkose, indem Sie für die Pfote Prise Rückzug Reflex und der Blinkreflex. Hinweis: Optional: Atemprobleme während der Operation, Intubation und Beatmung begegnen könnte machbar sein. Aber bedenken Sie, dass die Luftröhre muss während der Operation verschoben werden. </li><li> Einmal betäubt, legen Sie die Ratte in Rückenlage, rasieren die ventrale Hals und sterilisieren Sie es mit 1% Chlorhexidin Tücher und / oder Alkoholtupfer. Tragen Sie eine sterile OP-Decke über das Tier und steril zu allen Zeiten das Gebiet. </li><li> Einmal betäubt, legen Sie die Ratte in Rückenlage, rasieren die ventrale Hals und sterilisieren Sie es mit 1% Chlorhexidin und Alkoholtupfer. Tragen Sie eine sterile OP-Decke über das Tier und steril zu allen Zeiten das Gebiet. HINWEIS: Optional kann Kopf der Ratte in einem stereotaktischen Rahmen in der Rückenlage während der Operation festgelegt werden, um die Mobilität des Kopfes, dh deaktivierender Hinterhauptbein. </li><li> Machen Sie eine 2 bis 3 cm langen Mittellinienschnitt vom Kinn bis fast rostralen Ende des Brustbeins mit einem sterilen Skalpell (# 10). Optional gelten kleine Bulldogge Schellen, um die Haut zu widerrufen. </li><li> Blunt die oberen Schichten der Gewebe wie Drüsen (zB Unterkieferdrüse und Ohrspeicheldrüse) und die Muskeln für den Luftröhre mit umgekehrter Wirkung mit stumpfen Schere und Zahnzange sezieren. Bleiben Sie immer auf der Mittellinie. Die Gewebe sollten leicht zu trennen. </li><li> Nachdem die Luftröhre freigelegt ist, verdrängen sie zur Seite. Die Mittellinie ist darunter mit zwei weißen Fettpölsterchen sichtbar, Kennzeichnung der Mittellinie an der rostralen Ende. </li><li> Rostra zu den weißen Fettpolster, stumpf sezieren Gewebe, bis der ventralen Oberfläche des Schädels (die Basioccipitale Knochen) erreicht ist. </li><li> Legen Langzahn Retraktoren (Zahnlänge 5,5 mm oder 16 mm), um die Luftröhre zu einer Seite (maximal 1 cm) verdrängt zu halten und die Basis des Schädels aus. Verschiebung der Luftröhre OBstruct Atmung. HINWEIS: Bei einigen Tieren, lösen Sie die Retraktoren auf mehrere Male während der Operation, um die Belastung für die Luftröhre alle 10 min für 2 min zu entfernen, zum Beispiel. Wundhaken kann anstelle von Langzahnwundhaken verwendet werden, um die Belastung der Verschiebung zu reduzieren. </li><li> Sorgfältig kauterisieren kleine sichtbare Blutgefäße an der rostralen Ende in Richtung des Kehlkopfes, um Blutungen zu vermeiden. HINWEIS: Um kauterisiert die Recurrens Blutgefäße werden sorgfältig zog sich von der Gewebewand, bevor sie geätzt werden, um zu verhindern. </li><li> Stellen Sie das Mikroskop für den Rest der Operation. </li><li> Entfernen Sie die Beinhaut für die Basis des Schädels mit feinen Pinzette. Passen Sie die Wundhaken, um die beste Sicht für das Bohren zu erreichen. </li><li> Spüren Sie die unebene Oberfläche des Basioccipitale Knochen mit feinen Pinzetten und stellt fest, eine Erhöhung an der Mittellinie, die die A. basilaris abdeckt. Rostral, wird der Schädel als eine leichte Wölbung erhöht. </li><li> Je nachdem, welche Seite die Läsion gewünscht ist, bohren Sie ein Loch in etwa 1 mm lateral der Mittellinie in mediolateral Bewegungen. HINWEIS: Denken Sie daran, dass die Ratte ist in Rückenlage, und die linke Seite auf der Ermittler rechten Seite! </li><li> Sobald ein Loch gemacht wird, vergrößern zur Mittellinie mit kleinen vertikalen Aufwärts- und Abwärtsbewegungen mit dem Bohrer, bis die Basilararterie deutlich sichtbar ist und sich seitlich erweitern mindestens 2 mm. </li><li> Sicherstellen, dass die A. basilaris deutlich sichtbar ist. Die Pyramide kann durch seine leicht gewölbten Form (Abbildung 2) und von angrenzenden Blutgefäßen identifiziert werden. </li><li> Nehmen Sie die restlichen Knochenfragmente mit feinen Pinzette. </li><li> Einen Tropfen Doxapram Hydrochlorid, einem Atmungsreizmittel, auf der Zunge. </li><li> Öffnen Sie die Dura in Längsrichtung mit einer 26-Gauge-Nadel und feinen Pinzette lateral der A. basilaris. Genießen Sie die Rückenmarksflüssigkeit (CSF) und jede Blutung mit Wattestäbchen. </li><li> Vermeiden Injury in die A. basilaris, einen Schnitt etwa 1,5 mm breit über die gesamte Breite der Pyramide und 0,5 mm tief mit Vannas Frühling Schere senkrecht zur A. basilaris (Abbildung 2), die CST-Fasern zu unterbrechen. HINWEIS: Markieren Sie die Mikroschere zuvor bei 0,5 mm von den Spitzen. Nachdem die Dura geöffnet die A. basilaris kann leicht zu einer Seite erlaubt einen besseren Zugang zu der Pyramide bewegt werden. </li><li> Wiederholen Sie den Vorgang mit der Spitze eines 26-Gauge-Nadel, um sicherzustellen, die Läsion sind die Fasern in der Nähe der Arteria basilaris. </li><li> Die Blutung zu stoppen mit leichtem Druck von Wattestäbchen aufgetragen. Wahlweise kann der Schnitt mit Gelfoam abgedeckt werden. </li><li> Entfernen Sie die Wundhaken, ersetzen Sie die Gewebe und Naht nur die Haut mit 3-0 Vicryl Nahtmaterial. </li><li> Nach der Operation erhalten die Tiere in einem Brutschrank bei 32 ° C bis zum vollständigen Aufwachen und zu verwalten, 5 ml Kochsalzlösung subkutan, falls erforderlich. Stellen Sie das Tier nicht unbeaufsichtigt lassen. </li><li> Geben Carporfen subkutanals entzündungshemmendes und als Analgetikum für die postoperativen Schmerzen 1 Tag nach dem Eingriff. </li><li> Überwachen Tiere genau eine Woche nach der Operation und mindestens einmal in der Woche danach. </li><li> Als nach der Operation, Ort Trink Gel-Packs, pürierte Babynahrung, nassen Brei und trocken Chow auf Käfigboden erforderlich. Geben Sie Wasserflaschen mit langen Tüllen (ohne Kugellager Ventile). </li></ol>

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Die Autoren haben nichts zu offenbaren.

Wir haben die pyramidotomy Verletzungsmodell beschrieben. Die Pyramidenbahn auf der Höhe des Hirnstamms geschnitten. Aus technischer Sicht ist diese Operation erfordert viel Umsicht und Präzision. Der Hirnstamm nimmt die Atemzentren und die Herz-Kreislauf-Zentren in mehrere Kerne wie den Kern mehrdeutig und solitarii in der Formatio reticularis unter den Pyramiden eingebettet. Wenn der Schnitt gemacht zu tief kann es zu plötzlichen Atembeschwerden, die Lebensgefahr führen. Wir geben Dopram kurz vor dem Schnitt, um die Atmungsaktivität zu erhöhen, um eine plötzliche Atem Einstellung zu verhindern. Wenn der Atemstillstand ist es wert, die Belüftung des Tieres für die folgenden fünf Minuten lang mit Sauerstoff wie es wiederherzustellen. Darüber hinaus sollte eine Beschädigung des Basilararterie unbedingt zu vermeiden. Komplikationen während der ersten Tage nach der Verletzung sind: eine weitere Blutung im Hirnstamm beeinflussen Vitalfunktionen, erheblichen Gewichtsverlust, schwere Atem schwierulties durch umfangreiche Verletzungen, einschließlich der Oliven unmittelbar lateral Pyramiden aufgrund Trachea Verschiebung und starke Ausrichtung und Gleichgewichtsprobleme des Tieres. Diese Komplikationen können so behandelt, als Endpunkte und Tiere auf humane Weise getötet werden. Eine engmaschige Überwachung während der ersten Woche nach der Operation ist von wesentlicher Bedeutung. Ergänzungsfuttermittel können, um Gewichtsverlust auszugleichen erhalten. Entzündung der Atemwege (raue Atmung) in der Regel verschwindet innerhalb von ein bis zwei Tagen. Im Allgemeinen sind jüngeren Tieren einfacher zu bedienen als auf ihren Hals ist weniger tief. Darüber hinaus sind sie widerstandsfähiger und haben weniger Atemkomplikationen. Es erfordert etwas Übung, um eine komplette Läsion des CST mit einem pyramidotomy erzielen. Auch in zwei Studien, die von Steward et al. 16, die sich daran, ein ehemaliger Experiment Benowitz et al. 28 zu replizieren, berichtete anfänglich hohen Sterblichkeit und dass einige ihrer Läsionen waren unvollständig. VerhaltensDefizite werden auch variabel sein. Es wird empfohlen, eine neue Chirurg führt viele der Praxis pyramidotomy Operationen, bevor eine vollständige Experiment, einen Kandidaten-Therapie zu testen durchgeführt wird. Wegen unvollständiger Läsionen zu verhindern sind Rückverfolgung der Schnitt mit einer Injektionsnadel sicherstellen, dass die Pyramidenfasern in der Nähe der Arteria basilaris durchtrennt werden, wie in diesem Protokoll beschrieben. Andere Möglichkeiten sind, um die Läsion mit einem Glas gekippt Saugpipette saugen wie in Zhou et al. 2003 29 beschrieben. Eine feine Wolframdraht kann auch verwendet werden, um den Trakt 22 geschnitten. Eine Alternative zu pyramidotomy ist es, die Gebärmutterhalskrebs C3 dorsale CST einseitig geschnitten und dann mit einem Bauchansatz die ipsilesional C2 ventralen Teil der CST 18 geschnitten. Doch wohl, ist eine komplette Läsion nicht erforderlich, wenn das Ziel ist, Sprießen des kontraläsionalen CST zu studieren; wenn die Mehrzahl der Pyramide läsionierten und einem Austrieb Antwort vom unverletzten Seite geschieht dies ausreichend sein. Ein Ziel der pyramidotomy Läsionsmodell ist an einer Seite der Pyramidenbahn abzutragen und benutzen neuroplasticity induzierenden Therapien, die Plastizität und Sprossung der intakten nicht verletzten Fasern zu stimulieren. Neuroschütz Therapien getestet dieses Modell ungeeignet und anderen Verletzungen Modelle wie Quetschung Verletzungen verwendet werden soll. Ergebnisse der pyramidotomies werden am häufigsten mit Verhaltenstests und Anatomie bewertet. Die horizontalen Leiter Test, der Zylinder Aufzuchttest und Montoya Treppentest sind die am häufigsten verwendeten Verhaltensprüfungen. Andere in der Literatur beschriebenen Tests sind das Pellet Erreichen Test, Seilprüfung, Ganganalyse und das Klebeband Test 3,17-19. Jedoch sind die Ergebnisse der meisten Verhaltenstest häufig nur bis zu einem Maximum von 42 Tagen nach Läsion 3,4,11,17,18,20-22 überwacht. Aus früheren Erfahrungen, Nagetiere erholen sich die meisten Funktion zu späteren Zeitpunkten ohne Behandlung Intervention. Wir haben gezeigt, that die horizontale Leiter Test und der Montoya Treppe Pellet Erreichen Test erkennt Behinderungen bis zu einem späteren Zeitpunkt. Sie können verwendet werden durch eine Behandlung, um die funktionelle Erholung zu messen. Die Läsion Vollständigkeit wird durch die PKC gamma Anfärbung des Rückenmarks auf rostral zervikalen Pegel oder Eriochrome Cyanin Färbung der Querschnitte der Läsionsstelle (was CST-Fasern in den dorsalen Säulen Etiketten) beurteilt. Biotinylierten Dextran Amin kann in die kontraläsionalen Kortex eingespritzt werden, um die Keimung der intakten Fasern über die Mittellinie in den denervierten Rückenmarksbereich zu bewerten. Zusammenfassend ist die pyramidotomy Modell gut zur Beurteilung Neuroplastizität auslösenden Fähigkeiten einer Behandlung Droge für das zentrale Nervensystem Verletzungen, wenn die Operation erfolgreich gemeistert wird. Er beurteilt die Plastizität von intakten Fasern. Der nächste Schritt wäre, eine weitere klinisch relevanten Modell, wie Quetschungen Verletzungen zu verwenden, um das Medikament die Fähigkeit, größere SCHADEN überwinden bewertenes, die mehrere Verträge.

Die Pyramidenbahn (CST) ist einer der Hauptmotor Wege im menschlichen Rückenmark. Schäden an diesem Trakt nach Verletzungen des Rückenmarks führt zu erheblichen Verlust der Fingerfertigkeit. Die CST ist besonders wichtig für feinmotorische Bewegungen beim Menschen, wie stelligen Bewegung und distalen Muskelkontrolle. Es wird auch in Nagetieren obwohl seine anatomische Lage innerhalb des Rückenmarks ist anders als die des Menschen und CST Schäden geringer Deaktivierung 1-4. Ein in vivo Modell CST Verletzung schließt eine einseitige pyramidotomy, wobei eine Pyramide im ventralen Hirnstamm rostral des Kreuzung (Figur 1) zu schneiden. Die Pyramiden sind ein deutliches anatomisches Merkmal auf der Bauchseite der Medulla oblongata, durch die das CST läuft, bevor es decussates. Bei Ratten ist die Mehrzahl der Fasern (etwa 95%) decussate am kaudalen Ende der Medulla und danach im dorsalen medialen Teil des Rückenmarks zu finden. Allerdings approximately 10% der decussated Fasern verlaufen in den dorsolateralen Spalten. Die verbleibende ~ 5% Fasern bleiben uncrossed auf der ipsilateralen Seite und Reisen im ventralen medialen Teil 5,6. Nach pyramidotomy das Rückenmark verliert seine direkte Eingabe von dem kontralateralen CST (Abbildung 1). Die pyramidotomy Modell ist besonders gut für die Prüfung der Antworten der intakten Fasern des unverletzten CST einer Behandlung. Es ermöglicht Beurteilung Plastizität und Sprossung der intakten Fasern über die Mittellinie des Rückenmarks, die die denervierten Bereichen innervieren. Die Pyramidenbahn wurde beobachtet, dass sich in den Rückenmarksverletzung Modelle sprießen und vermittelt insbesondere forelimb Recovery 7-10. Eine Behandlung könnte darauf abzielen, diese forelimb Wiederherstellung zu verbessern. Die Wirksamkeit einer Therapie mit Verhaltensprüfungen, anatomischen Verfolgungstechniken der unverletzten Trakt und Klemmenelektrophysiologischen Experimenten 3,11,12 getestet werden. &lt;/ P&gt; Der Vorteil im Vergleich zu den meisten anderen präklinischen Modellen von Rückenmarksverletzungen ist, dass es speziell betrifft eine Wege im Vergleich zu anderen Wirbelsäulenverletzungen oft, die mehrere Verträge. Nur ein Trakt in einer klaren, oberflächliche anatomische Lage ist verletzten. Ein weiterer Vorteil ist, dass die pyramidotomy ist eine reproduzierbare Verletzungsmodell. Es ist eine geeignete In-vivo-Ressource für Forscher, um die Auswirkung von potenziellen Neuroplastizität treibenden Therapien, die auf Wiederherstellung der motorischen Funktion nach Verletzungen oder Erkrankungen der motorischen Systems 13,14 Ziel zu testen.

<table><tbody><tr><td>Carprofen</td><td>Norbrook</td><td>Vm No; 02000/4229</td><td>zweimal täglich 5 mg/kg geben</td></tr><tr><td>Homothermes Deckensystem</td><td>Harvard Instruments</td><td>507222F</td><td></td></tr><tr><td>Isofluran</td><td>Abbott</td><td>B506</td><td></td></tr><tr><td>Feine Schere - Tough Cut</td><td>Fine Science Tools</td><td>14058-09</td><td></td></tr><tr><td>Pinzette</td><td>Fine Science Tools</td><td>11019-12</td><td></td></tr><tr><td>Langzahnige Alm-Retraktoren</td><td>Fine Science Tools</td><td>17009-07</td><td></td></tr><tr><td>Kautersystem-Kit</td><td>Harvard Instruments</td><td>726067</td><td></td></tr><tr><td>feine Dumont-Zange</td><td>Fine Science Tools</td><td>11251-10</td><td></td></tr><tr><td>Grate aus Kohlenstoffstahl</td><td>Fine Science Tools</td><td>19007-07</td><td></td></tr><tr><td>Dopram V-Tropfen</td><td>Pfizer</td><td></td><td>1 Tropfen auf die Zunge</td></tr><tr><td>auftragen Vannas Spring Schere</td><td>Fine Science Tools</td><td>15000-03</td><td></td></tr><tr><td>Gelfoam</td><td>Equimedical</td><td>EQU705001</td><td></td></tr><tr><td>3-0 Vicryl-Nähte</td><td>Ethicon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Operationsmikroskop</td><td>Zeiss</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Compact Anästhesiesystem Isofluran K/F Single</td><td>Gas VetTech Solutions</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Waagen</td><td>Ohaus</td><td>NVT3201</td><td></td></tr><tr><td>Kohlenstoffstahl Skalpellklingen Nr. 10</td><td>Swann-Morton</td><td>201</td><td></td></tr><tr><td>25g Nadeln</td><td>Terumo</td><td>NN-2525R</td><td></td></tr><tr><td>Spritzen (1 ml und 5 ml)</td><td>Terumo</td><td>SS+01T1 / SS*05SE1</td><td></td></tr><tr><td>Kochsalzlösung (Natriumchlorid 0,9%)</td><td>Fresenius Kabi</td><td>Pl 08828/0178</td><td></td></tr><tr><td>Wattestäbchen</td><td>Johnson and Johnson</td><td>5000207582502</td><td>vor Gebrauch sterilisieren</td></tr></tbody></table>

einseitige pyramidotomy der pyramidenbahn in ratten für bewertung der neuroplastizität treibenden therapien

Unilateral Pyramidotomy of the Corticospinal Tract in Rats for Assessment of Neuroplasticity-inducing Therapies

Die Pyramidenbahn (CST) kann komplett einseitig in den Markpyramiden der Nagetier-Hirnstamm durchtrennt werden. Das CST ist ein Motor-Darm-Trakt, die große Bedeutung für distale Muskelkontrolle bei Menschen hat und, in geringerem Maße, in Nagetieren. Eine einseitige Schnitt einer Pyramide führt zu einem Verlust der CST Innervation des Rückenmarks vor allem auf der kontralateralen Seite der Wirbelsäule, die zu vorübergehenden Motorunfähigkeit in den Vorderbeinen und anhaltende Verlust der Beweglichkeit. Ipsilateralen Projektionen der Pyramidenbahn sind gering. Wir haben unsere chirurgische Methode, um die Chancen zu erhöhen Läsion Vollständigkeit verfeinert. Wir beschreiben postoperativen Pflege. Defizite auf dem Montoya Treppe Pellet Erreichen Test und dem hier gezeigten horizontalen Leiter Test werden bis zu 8 Wochen nach der Verletzung festgestellt. Defizite auf dem Zylinder Aufzucht Test werden nur vorübergehend erkannt. Daher kann die Zylinder Test nur zur Detektion von kurzfristigen Erholung. Wir zeigen, wie, elektrophysiologischund anatomisch, kann man Läsionen und plastischen Veränderungen zu beurteilen. Wir beschreiben auch, wie Fasern aus dem unverletzt CST sprießen über die Mittellinie in den benachteiligten Gebieten analysieren. Es ist schwierig zu&gt; 90% komplette Läsionen durchgängig zu erhalten wegen der Nähe zu der Arteria basilaris im verlängerten Mark und Überlebensraten niedrig sein kann. Alternative Operationstechniken und Verhaltenstests werden in diesem Protokoll beschrieben. Die pyramidotomy Modell ist ein gutes Werkzeug für die Bewertung der Neuroplastizität treibenden Behandlungen, die Keimung von intakten Fasern nach einer Verletzung zu erhöhen.

Die Überlebensraten. In einer repräsentativen Studie von uns durchgeführten hatten wir eine Überlebensrate von 16 von 20 weiblichen Lister Kapuze Ratten (200-250 g). Die häufigste Komplikation ist Atembeschwerden, weil der Luftröhre Verschiebung oder Beschädigung der Atemzentren im Hirnstamm genau zu den Pyramiden (Nucleus solitarii, mehrdeutig und parabrachilis) dorsal. Ähnliche Ergebnisse wurden in der Literatur 16 gemeldet. Verhaltens Ergebnisse. Eine Reihe von Verhaltenstests wurden zur sensomotorischen Ergebnis nach pyramidotomy bei Nagetieren zu bewerten: die horizontale Leitertest, dem einzigen Pellet Erreichen Test, der Zylinder Aufzucht Test und Montoya Treppentest sind die am häufigsten verwendeten Verhaltensbewertungen. Andere in der Literatur beschriebenen Tests sind das Pellet Erreichen Test, Seilprüfung, Ganganalyse und die Klebeband-Test3,17-19. Die meisten von ihnen zeigen eine funktionelle motorische Defizite 1 Woche nach der Verletzung. Gegenwärtig sind die meisten in der Literatur beschriebenen Untersuchungen nur Verhaltenstests durchführen bis zu 42 Tage 4,11,13,20,21, oder für eine kürzere Zeit 3,18,22. Wir haben Verhaltenstests über einen längeren Zeitraum durchgeführt und haben im wesentlichen vollständige Wiederherstellung der motorischen Funktion 8 Wochen nach pyramidotomy für einige der Verhaltenstests gesehen, außer dem Montoya Treppenhaus-Test und der horizontalen Leiter Test. Dies ist vermutlich aus mehreren Gründen. Erstens kann der verletzte CST rostral zur Läsion Synapsen auf Neuronen in Hirnstamm, der als indirekter Relais motorischen Neuronen wirken im Rückenmark zu bilden. Zweitens kann die unverletzten (kontralateral) CST keimen und Formen Synapsen auf Neuronen in Hirnstamm oder das Rückenmark, die als Relais-Motoneuronen handeln. Drittens kann andere verschont motorischen Bahnen wie die retikulospinale, vestibulospinalen oder rubrospinalen Verträge übernehmen irgendeine Funktion. Somit ist eine dauerhafte tEHANDLUNG Effekt ist bei vielen Verhaltenstests im pyramidotomy Modell zu erfassen. Einige Verhaltenstests in diesem Modell jedoch könnte beschleunigte Erholung früh nach der Verletzung, die zu einer Behandlung zusammenhängt anzuzeigen. Flaschenaufzucht Test 3,4,23 Basierend auf dem Zylinder Aufzucht Test der CST, der dem dominierenden Vorderpfote wurde verletzt. Ratten werden in einer Plexiglas-Zylinder hineingelegt und Aufzucht Verhalten wird für einen Zeitraum von 3 min beobachtet. Preinjury gab es eine leichte Präferenz für die Verwendung von einer Vorderpfote, die dominante forepaw, während vertikale Explorations (3A). Die Verletzung wirkt sich auf die dominante Seite und die Verwendung der kontraläsionalen Vorderpfote verringerte sich auf 28% nach 1 Woche nach der Verletzung (ANOVA mit wiederholten Messungen p &lt;0,05; Post-hoc-Analyse zeigte, Tiere haben erhebliche Defizite in Woche 1, 2 und 3, p &lt;0,05, Fisher-LSD). 4 Wochen nach der Verletzung die Tiere wieder eind verwendet den betroffenen Vordergliedmaße 45% der Hinterreifen, und nach 6 Wochen war 57% (n = 16, Mittelwert ± Standardfehler dargestellt). Ähnlich Starkey et al. (4) haben beurteilt Mäusen unter Verwendung des Zylindertest für bis zu 42 Tage nach pyramidotomy und berichtete über eine signifikante Verminderung in der Verwendung des betroffenen forepaw während des gesamten Testzeitraum. Montoya Treppentest 24 Rats erfordern Vortraining für diese Prüfung zu akklimatisieren vor Verletzungen. Um die Motivation während der Testsitzung Tieren erhöht werden Lebensmittel bis 15 g Futter pro Ratte in der Nacht vor beschränkt. Die Nahrung entzogen Ratten werden in der Montoya Treppe für 15 Minuten platziert. Auf jeder Seite gibt es eine Treppe mit 7 Stufen mit Brunnen zu je 3 Pellets. Die Gesamtzahl der abgerufenen Pellets auf jeder Seite aufgezeichnet. Die Anzahl der abgerufenen Pellets mit dem kontraläsionalen / betroffenen Vorderpfote deutlich von 61% auf preinjury3% 3 Tage nach der Verletzung (3B). Die Fähigkeit, Pellets abgerufen wurde noch signifikant nach 4 Wochen nach der Verletzung mit 20% der Pellets abgerufen beeinträchtigt. Ratten zeigen einen signifikanten Defizit bis Woche 8 mit nur 29% der Pellets zu diesem Zeitpunkt gegessen (ANOVA mit wiederholten Messungen p &lt;0.05, Post-hoc-Analyse zeigte, Tiere haben erhebliche Defizite auf der kontraläsionalen Seite jeder Wochen, p &lt;0,05, Fishers LSD). Die ipsilesional Vorderpfote ist bis 1 Woche nach der Verletzung betroffen; aber dies wieder durch die zweite Woche (ANOVA mit wiederholten Messungen p &lt;0.05, Post-hoc-Analyse zeigte, Tiere haben erhebliche Defizite an Tag 3 und Woche 1 am ipsilesional Vorderpfote, p &lt;0,05, Fisher-LSD). Die anfänglichen Defizite der ipsilesional Vorderpfote könnte durch die Läsion des ipsilateralen Teil der Pyramidenbahn durch den Schnitt Pyramide ausgeführt wird, mit anschließender Sprießen und Wiederherstellung erklären. HorizontalLadder-Test 25 Rats erfordern Vortraining für diesen Test. Ratten laufen dreimal über eine 1 m lange Leiter mit unregelmäßigen Sprossenabstand. Videos werden später in Zeitlupe und die Gesamtzahl der Fuß rutscht und Fehlschüsse für jede Pfote analysiert wird quantifiziert. Die Grafik in 3C stellt die Gesamtzahl der Fehlschüsse und rutscht der betroffenen und weniger betroffenen Seite (Vorderpfote + Hinterpfote) als Prozentsatz der Gesamtzahl der zurückgelegten Schritte. Ratten eine signifikant erhöhte Anzahl von Fehler 1 Woche nach der Verletzung mit 10% bzw. 11% auf der betroffenen Seite und weniger betroffenen Seite auf. Dieses Defizit ist persistent auf der kontraläsionalen / betroffenen Seite bis zu 8 Wochen mit 10% Fehler gemacht, jedoch entscheidet über die ipsilesional / weniger betroffenen Seite von 2 Wochen (ANOVA mit wiederholten Messungen, Post-hoc-Analyse zeigte, Tiere haben erhebliche Defizite auf allen Wochen die kontraläsionalen Seite und erhebliche Defizite in Woche 1 und 3 auf der ipsilesionalSeiten, p &lt;0,05, Fisher-LSD). Elektrophysiologische Tests In einem Terminal elektro Aufbau des Tieres wurde intraperitoneal mit Urethan anästhesiert. Während des gesamten Verfahrens wurde es bei 37 ° C ± 1 ° C gehalten. Seine ventralen Halsbereich, seine Vorderbeine und Brustbereich wurden rasiert und mit Jod-Peeling desinfiziert. Die Pyramiden wurden wie zuvor durch einen Bauchansatz Einschneiden der Haut und den großen Brust beschrieben und in den Oberarm der N. radialis ausgesetzt wurde ausgesetzt. Das distale Ende des Radialnerv wurde geschnitten und der Nerv wurde über zwei Silberdrahthaken-Elektroden in einem Mineralölbad gelegt. Entweder Pyramide mit konzentrischen bipolaren Elektroden in verschiedenen Tiefen mit 5 Impulsen bei 300 Hz und zunehmender Stimulationsamplitude stimuliert wird. Die Aufzeichnungen wurden immer von der N. radialis des behinderten Arm (Bild 4) vorgenommen. Unverletzt animals eine starke Reaktion bei Latenzzeiten von 12 bis 20 ms in der N. radialis, wenn die Gegenseite Pyramide wurde angeregt (4B). Ipsilateraler Stimulation führt nur zu gelegentlichen Aktivierung (4C). Tiere, die vorher auf dem Aufzeichnungs Arm empfangen pyramidotomies, auf der kontralateralen Seite zeigen keine Reaktion in Radialnerv bei lädierten Trakt über der Läsion (4B ') stimuliert. Stimulation der CST-Fasern in den Pyramiden ipsilateralen jedoch an die Aufzeichnungselektroden in Folge einer stärkeren Aktivierung in Radialnerv im Vergleich zu unverletzten Tieren nach 12 Wochen nach der Verletzung (4C). Anatomische Ergebnisse. Die Tiere wurden 10 Wochen postoperativ euthanasiert nach Anhang 1 der Tiere (Scientific Procedures) Act 1986 Zwei Wochen zuvor war die unverletzt CST mit biotinyliertem verfolgenDextran Amin (BDA) Injektionen in den motorischen Kortex 26 ipsilateral zur behinderten Arm (Abbildung 1). Dies ermöglicht die Quantifizierung von unverletzten Fasern, die über die Mittellinie zu überschreiten und liefern kontraläsionalen Rückenmark (5C, D). Unverletzt Tiere haben nur ein paar Fasern Überqueren der Mittellinie, während dies erhöht in Reaktion auf eine Verletzung. Quer zervikalen Rückenmarkschnitte wurden mit Proteinkinase C (PKC) gamma gefärbt, um den Anteil der Denervierung im läsionierten CST (5E) 16 zu beurteilen. Alternativ kann die Vollständigkeit der Läsion durch Injizieren BDA Tracer in den motorischen Cortex am ipsilesional Seite des pyramidotomy Schädigung bewertet. Das Fehlen der Kennzeichnung in der kontralateralen dorsomedialen CST und die ipsilateralen ventromedialen CST nachweist vollständige einseitige Durchtrennung. <img alt="Figur 1" fo:conte> nt-width = "4in" src = "/ files / ftp_upload / 51.843 / 51843fig1highres.jpg" width = "400" /&gt; Abbildung 1: Schematische Darstellung der Pyramidenbahn bei der Ratte und einseitige Axotomie der CST in den Pyramiden Bild oben:. Pyramidenneuronen in der Rindenschicht 5 Pyramidenzellen stammen. Biotinylierte Dextran Amin (in grün dargestellt) wird in die kontraläsionelle cortex zwei Wochen vor dem Ende des Experiments injiziert. Mittelbild: Die Verträge bilden die Pyramiden auf der ventralen Oberfläche der Medulla und im spinomedullary Kreuzung die Mehrheit der Axone kreuzen sich. Einseitige pyramidotomy ist im kaudalen Medulla (rot) durchgeführt. Nieder Bild: Der Großteil der Pyramidenbahn, die in den dorsomedialen und dorsolateralen Teile des Rückenmarks führen. Eine Minderheit bleibt ipsilateral und läuft ventromedial. 1843fig2highres.jpg "Breite =" 500 "/&gt; Abbildung 2: Ventralansicht des Rattenhirns. Die Pyramiden sind unverwechselbar, weil sie erhoben werden, parallel Ausbuchtungen (gelber Kasten). Die Grenzen der Pyramiden sind medial von der Arteria basilaris (bas) über die Mittellinie und seitlich an der Basis der Konvexität auf halbem Weg zwischen der Arteria basilaris und paraolivary Arterie (pol), wie in (C) gesehen, definiert. Kraniotomie wird über die Arteria basilaris geführt und seitliche Ausdehnung auf den paraolivary Arterie (rotes Feld in C). Eine Pyramide senkrecht zur Basilararterie geschnitten (rote Linie in C wird geschnitten auf Probe in A und B gezeigt). Läsionen zu kaudal in der Nähe der Wirbelarterien (vert) platziert wird unvollständig sein, da die CST beginnt, kreuzen sich, und weil die A. vertebralis wird von der Mittellinie eingestellt. (C) Bild von George Paxinos 27 von "The Rat Nervensystem" angepasst. HINWEIS: Diese Abbildung zeigt eine Läsion auf der linken Seite des Bildes: Das ist das Tier right Pyramidenbahn, weil er auf dem Rücken liegt. Bitte beachten Sie jedoch, dass das Video zeigt eine Läsion links Pyramidenbahn des Tieres. <img alt="Figur 3" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51843/51843fig3highres.jpg" width="500"> Abb. 3: Repräsentative Ergebnisse für den Zylinder Aufzucht Test, Montoya Treppe Pellet Erreichen Test und horizontale Leiter Test gibt es eine von allen Tests nach der Verletzung erfassten Motor Defizit. Es kann jedoch keine Defizit mit dem Zylinder Aufzuchttest nach 4 Wochen nach der Verletzung festgestellt werden, während anhaltende Defizite mit dem Montoya Treppenhaus-Test und der horizontalen Leiter Test bis zu 8 Wochen nach der Verletzung (n = 16 pro Gruppe, Mittelwerte und Standardfehler sind erkannt gezeigt). Stern zeigt p &lt;0,05 gegenüber preinjury Basislinie (Fishers LSD-Test). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51843/51843fig3highres.jpg" target="_blank">Bitte klicken</a>Sie hier, um eine größere Version dieser Figur zu sehen. <img alt="4" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51843/51843fig4highres.jpg" width="500"> Fig. 4: Elektrophysiologie der Beurteilung der Pyramidenbahn vor und nach pyramidotomy (A) zeigt den Aufbau für das Endgerät Experiments. Wir regen die Pyramiden mit einem Zug von 5 Impulse in verschiedenen Tiefen rostral zum Ort der Läsion und Kreuzung. Die rot-Darm-Trakt ist die lädierten Trakt. Wir nehmen aus dem N. radialis auf der kontraläsionalen Seite. (B) und (C) zeigen beispielsweise Aufnahmen mit ipsilesional Stimulation oder kontraläsionalen Stimulation vor und 12 Wochen nach pyramidotomy. Ipsilesional Reize evozieren mehrere Summenaktionspotenziale (Spitzen in der Kurve) in der N. radialis vor Verletzungen (B). Diese werden durch die Verletzung abgeschafft und Tätigkeit nicht return innerhalb von 12 Wochen (B '). Kontraläsionalen Stimulation evoziert seltenen Einzelsummenaktionspotenziale preinjury (C). 12 Wochen nach der Verletzung Aktivität deutlich erhöht (C '), die möglicherweise durch intakte Axone sprießen über die Mittellinie und plastischen Veränderungen im Rückenmark. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51843/51843fig4highres.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieses Bild anzuzeigen.</a> <img alt="Abbildung 5" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51843/51843fig5highres.jpg" width="500"> Fig. 5: Anatomische Beurteilung nach pyramidotomy (A, B, C, D) Biotinylierte Dextran Amin wurde verwendet, um die Pyramidenbahn durch Injektion in den motorischen Cortex entsprechend dem unverletzten CST verfolgen (siehe in Figur 1 grün). Die dorsalen medialen, die ventralen medialen Komponenten des CST deutlich sichtbar sind (A, dorsalen medialen Teil in B vergrößert). (C) und (D) sind Vergrößerungen von (A) aus Fasern Sprießen über die Mittellinie in der grauen Substanz des denervierten Seite in Reaktion auf eine Behandlung. Um die Vollständigkeit der Läsion Querschnitte der zervikalen Stufe 4 (12 Wochen nach der Verletzung Gewebe) beurteilt wurden geschnitten und mit Antikörpern gegen PKC gamma (E) gefärbt. Das CST auf der linken Seite des Bildes ist intakt und kann gesehen werden prall über die Mittellinie in den denervierten Seite, vermutlich aufgrund der strukturellen Zerfall des verletzten Rücken CST.

Die Pyramidenbahn, einer der wichtigsten sensomotorischen Striche können einseitig in das Nagetier brainstem um neuroplasticity induzierenden Therapien für das zentrale Nervensystem zu testen läsionierten werden. Dieses chirurgische Verfahren (&quot;pyramidotomy&quot;) und postoperative Beurteilungen werden in diesem Protokoll beschrieben.

Einseitige Pyramidotomy der Pyramidenbahn in Ratten für Bewertung der Neuroplastizität treibenden Therapien

The corticospinal tract (CST) can be completely severed unilaterally in the medullary pyramids of the rodent brainstem. The CST is a motor tract that has ...

Ziel dieses Verfahrens ist es, eine einseitige Taxonomie des Cortico-Spinaltrakts in den Markpyramiden bei Ratten durchzuführen, um die Neuroplastizität nach einer spontanen oder durch Therapien induzierten Verletzung zu beurteilen. Dies wird erreicht, indem zunächst der Hals von einem ventralen Zugang an der Luftröhre vorbei präpariert wird. Als nächstes werden die Pyramiden durch Kraniotomie freigelegt, und es wird eine Läsion an der Pyramide auf einer Seite der Basalarterie gemacht.Nach der Operation können die Auswirkungen der Pyramidenotomie mit Hilfe von Verhaltenstests, elektrophysiologischen Tests und Histologie beurteilt werden. Die einseitige Taxotomie der kortikospinalen Bahnen in den Markpyramiden erwachsener Ratten führt zu einem lang anhaltenden Defizit in der Geschicklichkeit. Dieses Modell kann zur Bewertung von Therapiekandidaten für ZNS-Verletzungen verwendet werden.Zuerst wird die dominante Vorkraft des Tieres anhand des Zylinderaufzuchtversuchsplans bestimmt, um die entsprechende Pyramide zu verletzen. Trennen Sie zum Beispiel die rechte Pyramide rostral zur Kreuzung, um die linke Seite der Ratte zu deaktivieren. Nach der Einleitung der Anästhesie eines weiblichen Listers, einer Kapuzenratte mit 5% Fluor, rasieren Sie die ventrale Seite ihres Halses, regulieren Sie die Anästhesie und halten Sie sie aufrecht.Die Verwendung von etwa 1,5% ist Fluor. Verabreichen Sie dann Carprofen subkutan, um Entzündungen zu reduzieren und eine Analgesie mit einem homöo-themischen System bereitzustellen. Halten Sie das Tier während der Operation bei 37 Grad Celsius.Überprüfen Sie vor dem Start den Einklemmreflex und den Blinzelreflex. Salbe auf die Augen auftragen. Desinfizieren Sie die exponierte Haut mit 1% Chlorhexidin in Alkohol.Um die Operation zu beginnen, machen Sie einen zwei bis drei Zentimeter langen Schnitt in der Mittellinie, der nur cordal zum Kinn beginnt und nur roral zum Brustbein endet. Verwenden Sie dann kleine Bulldoggenklemmen, um die Haut stumpf zurückzuziehen. Präpariere die oberen Gewebeschichten, um die Luftröhre freizulegen.Bleiben Sie auf der Mittellinie und verwenden Sie die Rückwärtsbewegung mit abgestumpften Scheren und Zahnzangen. Sobald sie freigelegt ist, verschiebe die Luftröhre zur Seite. Darunter befinden sich zwei weiße Fettpolster.Markieren Sie das Nabelschnurende des Bai-Hinterhauptbeins. Nun roral zu den Ballen stumpf zur ventralen Oberfläche des Schädels präparieren. Um den Schädel freizulegen, verschieben Sie die Luftröhre um höchstens einen Zentimeter.Bei einem Paar Langzahn-Retraktoren oder bei Haken-Retraktoren behindert zu viel Verschiebung die Atmung. Es kann hilfreich sein, die Retraktoren für einige Minuten zu schließen, wenn es Anzeichen dafür gibt, dass die Ratte eine bessere Belüftung benötigt. Verätzen Sie nun vorsichtig die kleinen Gefäße am rostralen Ende der Luftröhre in Richtung Kehlkopf.Stellen Sie das Mikroskop ein und fokussieren Sie auf den Schädel. Bereiten Sie sich auf die Bohrung vor, indem Sie das Periost mit einer feinen Pinzette entfernen und die Retraktoren anpassen. Um den Schädel besser freizulegen, untersuchen Sie die unebene Oberfläche des basalen Hinterhauptbeins radial. An der Mittellinie befindet sich eine Erhöhung, die die Arteria basilaris bedeckt.Bohren Sie ein Loch einen Millimeter lateral zur Mittellinie auf der gewählten Seite. Vergrößern Sie das Loch allmählich zur Mittellinie hin mit kleinen vertikalen Auf- und Abbewegungen. Dann können die Arteria basilaris und die Pyramide mit ihrer leicht gewölbten Form identifiziert werden.Verbleibende Knochenfragmente sollten mit einer Pinzette entfernt werden. Die Pyramide ist dann an ihrer leicht gewölbten Form zu erkennen und die angrenzenden Blutgefäße tragen einen Tropfen des Atemstimulans Dora Hydrochlorid auf die Zunge auf, um die Pyramide freizulegen. Öffnen Sie zuerst die Dura mit einer 26-Gauge-Nadel und einer feinen Pinzette.Saugen Sie zerebrale Rückenmarksflüssigkeit und Blut mit Wattestäbchen auf. Halte eine Venus-Federschere mit einem Abstand von 0,5 Millimetern von den Spitzen markiert. Machen Sie mit dieser Schere einen etwa 1,5 Millimeter breiten Schnitt in die Pyramide, der die Pyramide überspannt und 0,5 Millimeter tief senkrecht zur Arteria basilaris verläuft.Dadurch werden die CST-Fasern unterbrochen. Nach der Zomy kann es sein, dass das Tier vorübergehend aufhört zu atmen. Ein kurzer Zyklus der künstlichen Beatmung mit einer 10-mil-Spritze, die über Nase und Mund der Ratte platziert wird, kann die Genesung erleichtern Um sicherzustellen, dass die Läsion Fasern in der Nähe der Arteria basilaris umfasst.Verfolgen Sie den Schnitt mit der Spitze einer 26-Gauge-Nadel nach. Stoppen Sie das Ausbluten mit leichtem Druck von Wattestäbchen. Der Schnitt kann auch mit Gelschaum überzogen werden.Entfernen Sie nun die Retraktoren und Bulldoggenklemmen und tauschen Sie die Taschentücher aus. Nähen Sie nur die Haut mit drei Null-Vicryl-Nähten. Dann subkutan.Verabreichen Sie fünf Milliliter Kochsalzlösung zur Rehydrierung. Nach der Operation wird das Tier in einen 32 Grad Celsius heißen Inkubator gebracht, bis es vollständig wach ist. Überwachen Sie das Tier und geben Sie in den nächsten zwei Tagen täglich subkutane Carprofen-Injektionen, um Entzündungen zu kontrollieren und Schmerzen zu lindern.Beobachten Sie das Tier auch in der darauffolgenden Woche genau. Tägliches Wiegen und bei Bedarf zusätzliche Flüssigkeit geben. Wasserflaschen sollten lange Ausläufe ohne kugelgelagerte Ventile haben, es kann zu einem Gewichtsverlust von bis zu 20% kommen.Legen Sie also Hydrogel-Packungen zusammen mit nassem Brei, Beerenfrüchten und pürierter Babynahrung in den Käfig und füttern Sie sie von Hand mit einer Spritze. Falls erforderlich, kann eine Schädigung anderer Hirnstammbereiche zu einem Fassrollen führen oder dazu führen, dass ein Augenlid offen oder geschlossen bleibt. In einigen Fällen müssen Tiere auf humane Weise geopfert werden.In mehreren Versuchen wurden Defizite aufgrund der Pyramidenotomie in der Zylinderaufzucht gemessen. Testverletzungen, die das dominante Fopo betrafen, reduzierten die Präferenz signifikant mit allmählicher Genesung nach der Läsion. Der Montoya-Treppentest zeigt, dass die Anzahl der geborgenen Pellets auf der betroffenen Seite während des Testzeitraums deutlich abnimmt.Während sich das Verhalten der ipsilateralen, weniger betroffenen Frontporen nach einer Woche im horizontalen Leitertest nach der Verletzung erholte, stieg die Häufigkeit von Fehltritten auf der betroffenen Seite der Contralläsionalität signifikant an, verglichen mit einem unmittelbaren Defizit mit Genesung auf der ipsilateralen, weniger betroffenen Seite. 10 Wochen nach der Operation wurde eine histologische Analyse durchgeführt. Der unverletzte kortikospinale Trakt der Tiere wurde mit biotinyliertem Dextranamin verfolgt.Durch die Injektion in den kontralen läsionalen Kortex waren die dorson-medialen Ventra-, medialen und dos-lateralen Komponenten des CST deutlich sichtbar. Bei näherer Vergrößerung waren Fasern zu erkennen, die sich über die Mittellinie bis in die graue Substanz der dierten Seite erstrecken. Zum Beispiel wurde 10 Wochen nach der Operation die Vollständigkeit der Läsion mit einem Querschnitt auf zervikaler Ebene und einer Immunhistochemie gegen PKC gamma bestätigt, da erwartungsgemäß ein Cortico-Spinaltrakt fehlte.Einmal gemeistert, kann die Operation in 30 Minuten mit einer niedrigen Sterblichkeitsrate durchgeführt werden.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowissenschaften

Quelle: Beom, J., et al. Repetitive transkranielle Magnetstimulation der einseitigen Hemisphäre des Rattengehirns. J. Vis. Exp. (2016)Dieses Video zeigt die Anwendung der repetitiven transkraniellen Magnetstimulation (rTMS) bei anästhesierten Ratten zur Modulation der kortikalen Erregbarkeit. Das Verfahren beinhaltet die Bestimmung der motorischen Schwelle (MT), um eine Basisstimulation zu etablieren, gefolgt von der Anwendung von rTMS mit einer Intensität oberhalb der MT, um eine neuronale...

Modulation der kortikalen Erregbarkeit bei einer Ratte durch repetitive transkranielle Magnetstimulation

Hier präsentieren wir ein Protokoll permanent distalen mittleren Hirnarterie bei älteren weiblichen Ratten bei gleichzeitiger Verschluss der Halsschlagadern zu produzieren große kortikale Infarkte und anhaltende Defizite zu erzeugen. Wir zeigen die Bestätigung der Größe der Läsion mit strukturellen MRT bei 24 Stunden und 8 Wochen nach dem Schlaganfall.

Darstellende Permanent Distal cerebri mit Arteria carotis communis Occlusion bei alten Ratten zu studieren kortikale Ischämie mit anhaltenden Behinderungs

Tiefe Hirnstimulation (THS) ist eine wirksame Behandlungsoption für die Parkinson-Krankheit. Wir haben ein Studiendesign entwickelt, um neuartige Stimulationsparadigmen bei Ratten zu screenen. Das Protokoll beschreibt die Verwendung des Treppentests und des Zylindertests zur Beurteilung des motorischen Ergebnisses bei mit THS behandelten Hemiparkinson-Ratten.

Ein neuer Ansatz Motor Ergebnis der tiefen Hirnstimulation Effekte in der Hemiparkinsonian Rat zur Bewertung: Treppe und Zylinder-Test

Wir haben die repetitive transkranielle Magnetstimulation (rTMS) auf die einseitige Hemisphäre des Rattengehirns angewendet, indem wir eine 25-mm-Spirale 8 1 cm lateral zum Scheitel auf der biaurikulären Linie platziert und die Spule um 45° gewinkelt haben. Für rTMS wurde für mehr als 20 min eine hauseigene Wasserkühlung eingesetzt.

Repetitive transkranielle Magnetstimulation auf die Einseitige Hemisphäre von Rattenhirn

Dieses Manuskript beschreibt eine halbautomatische Aufgabe, die Supination in Ratten quantifiziert. Ratten erreichen, erfassen und eine sphärische Manipulandum supinieren. Die Ratte ist mit einem Pellet belohnt, übersteigt die Umdrehung Winkel ein Kriterium, die vom Benutzer festgelegt. Diese Aufgabe erhöht den Durchsatz, Empfindlichkeit gegenüber Verletzungen und Objektivität im Vergleich zu traditionellen Aufgaben.

Drehknopf Supination Aufgabe: Eine halbautomatische Methode für die Beurteilung der Funktion der Vordergliedmaße bei Ratten

Dieses ausführliche Protokoll beschreibt Transkranielle Stimulation Elektrode Platzierung auf dem Felsenbein um die kurz- und langfristigen Auswirkungen der transkraniellen Elektrostimulation im frei beweglichen Ratten zu untersuchen.

Chronische Transkraniellen Elektrostimulation und Intracortical Aufnahme bei Ratten

Hier beschreiben wir chirurgische Verfahren zur Herstellung einer zuverlässigen Rückenmarks-Lateral-Hemisektion (HX) auf der9. Brustebene bei erwachsenen Ratten und neuroverhaltensbezogene Beurteilungen, die zum Nachweis asymmetrischer Defizite nach einer solchen einseitigen Verletzung entwickelt wurden.

Spinal Cord Lateral Hemisection und Asymmetrische Verhaltensbeurteilungen bei erwachsenen Ratten

Wir haben gezeigt, dass eine Mikroelektrode Implantation im motorischen Kortex von Ratten sofortige und dauerhafte motorische Defizite verursacht. Die Methoden vorgeschlagen hierin Umriss einer Mikroelektrode Implantation Operation und drei Nagetier Verhaltens Aufgaben, mögliche Änderungen in die feine oder grobe Motorik durch Implantation verursacht Schäden an den motorischen Kortex aufzuklären.

Nagetier Verhaltens Tests, um funktionelle Defizite verursacht durch Mikroelektrode Implantation im motorischen Kortex Ratte bewerten

Dieses Protokoll zeigt Methoden für ein Mausmodell der traumatischen Hirnverletzung mit offenem Schädel und die Transplantation kultivierter, humaninduzierter pluripotenter Stammzellen-abgeleiteter Zellen in die Verletzungsstelle. Verhaltens- und histologische Tests der Ergebnisse dieser Verfahren werden ebenfalls kurz beschrieben.

Kontrolliertes kortikales Wirkungsmodell der Maushirnverletzung mit therapeutischer Transplantation von humaninduzierten Pluripotenten Stammzell-abgeleiteten Neuralzellen

Wir stellen ein Protokoll zur Beurteilung des motorischen Verhaltens über eine Verhaltenstestbatterie bei Ratten nach Ischiasnervenquetschverletzung zur Verfügung.

Multifaktorielle Beurteilung des motorischen Verhaltens bei Ratten nach einseitiger Ischiasnervenquetschverletzung

Dieses Protokoll demonstriert eine neuartige Methode zur Anwendung von Gentherapien auf Subpopulationen von Zellen bei neonatalen Ratten im postnatalen Alter von 5-10 Tagen durch Injektion eines anterograden chemogenetischen Modifikators in den somatomotorischen Kortex und einer retrograden transportablen Cre-Rekombinase in das zervikale Rückenmark.

Targeting des kortikospinalen Trakts bei neonatalen Ratten mit einem doppelviralen Vektor mittels kombinierter Gehirn- und Wirbelsäulenchirurgie

Lernen Sie die einseitige Pyramidotomie bei Ratten zur Bewertung neuroplastizitätsfördernder Therapien. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung motorischer Defizite und Erholungsmuster nach Rückenmarksverletzungen.

Einseitige Pyramidotomy der Pyramidenbahn in Ratten für Bewertung der Neuroplastizität treibenden Therapien

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