Name: Beurteilung der Murine sportliche Ausdauer, ohne die Verwendung eines Shock Grid: Eine Alternative zur Zwangsübung (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-08-14T16:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 52 s
Description: Erfahren Sie eine stressfreie Methode zur Beurteilung der sportlichen Ausdauer bei Labormäusen ohne Elektrogitter. Diese humane Technik minimiert Stressfaktoren und liefert valide Ergebnisse für Verhaltens- und Physiologiestudien.

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Unterstützt von Merit Bewertung # BX001026 aus dem Department of Veterans Affairs (LSQ), und die Nutzung von Ressourcen und Einrichtungen bei VA Puget Sound Health Care System, die transgene Ressourcenkern an der Universität von Washington Nathan Shock Center of Excellence in der biologischen Grundlagen des Alterns (NIA # 5P30AG-013280) und der University of Washington Diabetes Endokrinologie Research Center (NIH # P30 DK-17047). Wir danken Cynthia Pekow DVM und Kari L. Koszdin DVM, VA Puget Sound, vorausgesetzt, hilfreiche Kommentare zum Manuskript.

Das hier beschriebene Verfahren wurde von der VA Puget Sound Institutional Animal Care und Use Committee genehmigt und erfüllt die ILAR Leitfaden für die Pflege und Verwendung von Labortieren. 1. Versuchsvorbereitung <ol><li> Entscheiden, ob vorher Blut oder Gewebesammel bald nach dem Training erforderlich ist, und wenn ja, bestimmen die Post-Belastungs-Intervall zum Leiten solcher Verfahren. Beispiele sind die Bestimmung der Übung induzierte Hormon oder Zytokin-Freisetzung in die Zirkulation (erforderlich Blutentnahme), Bestimmung der Übung induzierte Expression von mRNA-Spezies von Interesse (erforderlich Euthanasie gefolgt von Gewebe-Sammlung). Wenn unmittelbar nach Ausübung Blut oder Gewebe Sammlung angezeigt wird, müssen Materialien für diese Verfahren auf der Hand in den Behandlungsraum. Erhalten Institutional Review Board Genehmigung und durchzuführen, gemäß der Richtlinien. Nicht alle Experimente erfordern Nachtrainingszeit Blut oder Gewebe collectiauf; Ein einfacher Vergleich der laufenden Ausdauer kann alles, was erforderlich ist. </li><li> Im Voraus entscheiden, auf experimentellen Gruppen und Nachtrainingszeit Verfahren für Mäuse (Beschreibung siehe oben). </li><li> Legen Sie das Laufband auf einen stabilen Tisch in einem ruhigen Raum während der laufenden Studien zu diesem Verfahren gewidmet. </li><li> Stellen Sie das Laufband für Maus-Größe Gassen und mit einer Neigung entsprechend dem Protokoll. Die Neigung der +5 o wird hier verwendet, um Muskelschäden durch exzentrische Übung (Verlängerung der Muskeln zur gleichen Zeit wie Kontraktion), die während der Bergabfahrt erfolgt zu vermeiden. </li><li> Ein saugfähigen Kissen unter dem Laufband, um Kot zu fangen. </li></ol> 2. Akklimatisierung von Mäusen auf das Laufband Entscheiden, ob eine &quot;sitzende&quot; (keine Übung) Gruppe von Mäusen notwendig ist, und setzen sitzende Mäuse auf dem Laufband laufen, ohne wie in den Schritten 2.1 skizziert - 2.5. Festzustellen, ob 2 oder 4 Versuchsgruppen benötigt werden,. zB Sitzende / Übung (2 Gruppen); Ausgeübt Kontrollen / Ausgeübt Behandlung (2 Gruppen, keine sitzende Tiere); oder Sitzende / Ausgeübt x Steuer / Behandlung (4 Gruppen). Die &quot;Behandlung&quot; kann ein oder transgenen Knockout-Genotyp, eine pharmakologische Therapie, spezielle Diät oder anderen experimentellen Intervention. <ol><li> Lassen Sie die Maus, um das Verfahren in seinem Zimmer transportiert Käfig zu gewöhnen, mit Käfig Kollegen, mit 1 - 2 Stunden. </li><li> Wählen Sie eine einzelne Maus und Rekord-Tag-Nummer; wiegen Maus und Rekordgewicht. </li><li> Bewegen Sie die Maus in dem Laufband ohne Motor eingeschaltet, Akklimatisierung, ca. 5 min. Schalten Sie das Gerät auf, ohne Laufband läuft, und lassen Sie die Maus an die Maschine zu gewöhnen Lärm für weitere 5 min. </li><li> Mäuse entfernen in der &quot;sitzende&quot; Gruppen (falls verwendet, siehe Anmerkung 1) aus dem Laufband an dieser Stelle und bringt sie zu ihrem Käfig oder führen nach dem Training Verfahren gemäß dem Versuchsplan (siehe Anmerkung 2). </li></ol><ol><li> Nach Akklimatisierung, drehen Sie den Gurt auf eine niedrige Geschwindigkeit (10 m / min), wenn das Tier die Erkundung der Band und nicht auf der Plattform. </li><li> Klopfen Sie leicht oder heben Sie die Hinterhand von der Maus mit einem Spatel, ein bis drei Mal, um nur ungern Tiere zu ermutigen, auf dem Laufband laufen und zu bleiben. HINWEIS: Die meisten Mäuse leicht laufen, aber sie manchmal für kurze Zeit zu stoppen. Wenn dies der Fall, verwenden Sie den Spatel vorsichtig tippen oder heben Sie den hinteren Teil des Tier um die Wiederaufnahme der laufenden Förderung. Oft haben die Mäuse nicht zu dem Zungenspatel berührt werden; bemerken die Hand mit dem Spatel auf sie zukommen bewirkt, dass die Mäuse, etwas mehr laufen. </li><li> Starten Sie ein Labor-Timer, sobald die Maus in der Anfangsgeschwindigkeit von 10 m / min läuft. </li><li> Drehen Sie die Geschwindigkeit langsam, wenn die Maus an der Spitze (bergauf) Ende der Gürtel, in Schritten von 1 m / min, ca. alle 2 min. </li><li> Drehen Sie den Drehzahl auf dievorherige Einstellung, wenn die Maus immer wieder in kurzen Schüben verläuft und nicht in einem gleichmäßigen Tempo. </li><li> Bestimmen Sie die maximale Laufgeschwindigkeit aufrechterhalten jeder Maus (in der Regel 14 bis 17 m / min für C57BL / 6 Mäuse) durch Einstellen der Geschwindigkeit und beobachten Sie die Maus. Notieren Sie sich diese Geschwindigkeit. HINWEIS: Die Position des Tieres auf dem Laufband Queues die Ermittler über die Bereitschaft des Tieres, bei einer höheren Geschwindigkeit. Wenn die Maus am anderen (bergauf) Ende und etwa in die Wand laufen, ist es bereit, bei einer höheren Geschwindigkeit. Wenn die Maus in konstanter Geschwindigkeit ausgeführt wird, in der Mitte des Laufbandes kann auf seine maximale Geschwindigkeit sein oder kann weiter angepasst werden müssen, abhängig von der Qualität des Laufs. </li></ol> 4. Endpunkte und Mäuse, die Stop- <ol><li> Verwenden Sie den Spatel vorsichtig tippen oder heben Sie die Hinterhand der Tiere, die zu stoppen, um die Wiederaufnahme der laufenden Förderung (siehe Anmerkung 3.2). Sie den Timer für vorübergehende Unterbrechungen läuft nicht ab. </li><li> Identifizieren und remove Maus, die zu laufen verweigern. Hinweis: Dies auf dem Datenblatt. Je nach Ihrer experimentellen Design, können Mäuse, die sich weigern an einem anderen Tag erneut getestet werden HINWEIS: Einige Mäuse vollständig ablehnen zu laufen. Solche Mäuse wird in kurzen Stößen laufen, dann stoppen zu pflegen oder &quot;Pedal&quot;, das heißt, sitzen auf der Plattform und nutzen ihre Vorderbeine auf dem Band. Die Haltung dieser Mäuse ist gebeugt, mit allen vier Füßen unter das Tier eingepflanzt, um nicht wieder auf dem Laufband durch den Spatel gedrückt halten. Gelegentlich eine Maus wird aggressiv gegenüber der Spatel, wenn nicht bereit zu laufen, beißen die Spatel oder Klettern bis es als eine Möglichkeit der Flucht. Es ist klar, innerhalb der ersten 5 Minuten der Studie, ob die Maus, oder wird sie nicht, laufen. Mäuse, die aus der Analyse laufen ablehnen, aber nicht zählen sie als &quot;sitzende&quot; Mäuse zu entfernen. </li><li> Identifizieren erschöpft Mäusen und stoppen Sie den Timer. HINWEIS: Erschöpfung wird von drei aufeinanderfolgenden Haltestellen und Ablehnung der Wieder definiertSume trotz sanfte Ermutigung, sowie körperliche Anzeichen von Erschöpfung wie erschwerte Atmung und Körperhaltung gespreizt läuft. Mäuse erholen sich von Erschöpfung innerhalb von 30 bis 60 min. </li><li> Notieren Sie den Gesamtbetrag der Zeit läuft bei allen Geschwindigkeiten. </li><li> Abhängig von der Versuchsplanung, entweder die Maus zurück in seinen Käfig, oder Verhaltensweisen sofort Nachtrainingszeit Verfahren wie Blut oder Gewebe Sammlung nach den Richtlinien des Instituts. </li><li> Wischen Sie den Gurt sauber und mit einer keimtötenden Tuch nach der Prüfung jeder einzelnen Maus, so dass der Duft des vorherigen Maus nicht beeinflussen Verhalten der nachfolgenden Mäusen getestet. </li><li> Testen Sie die nächste Maus. Verwenden Sie eine frische Spatel für jede Maus. Mäuse, die im selben Käfig aufhalten können nacheinander am selben Tag getestet werden, ohne zusätzliche Akklimatisierung an dem Eingriffsraum. </li></ol>

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</ol>

Die Autoren haben keine Interessenkonflikte offen zu legen.

Beschrieben wird hier ein Verfahren zur freiwilligen Lauf Ausdauer in Mäusen zu bewerten unter Verwendung eines motorisierten Laufband ohne Verwendung eines Schockgitter. Diese Methode kann die Unterschiede zwischen Unterlinien von C57BL / 6 Mäusen, die in der Expression des Zytokins IL-15, was wiederum bewirkt, dass Unterschiede in der Expression von Faktoren, die Übungsausdauer 16,17 zugrunde unterscheiden offenbaren. Im Einklang mit den Grundsätzen der &quot;drei R&quot; in der Versuchstierkunde, kann dies...

Übergewicht, Insulinresistenz und Typ-2-Diabetes sind miteinander verknüpft Stoffwechselstörungen, die tiefgreifende Auswirkungen auf die Gesundheit der sowohl in den USA und weltweit Populationen 1-4 auszuüben. Ausdauertraining kann zu verhindern, sowie Genuss, diese Bedingungen 5,6. Darüber hinaus Beurteilung der Gehgeschwindigkeit und Ausdauer werden verwendet, klinisch als Diagnosetests für Gebrechlichkeit, Sarkopenie und die Folgen anderer Erkrankungen wie chronisch-obstruktive Lungenerkrankung, bei Menschen 7. Die zugrunde liegenden biochemischen Wege die wohltuende Wirkung des Ausdauertrainings auf die Körperzusammensetzung und der Insulinempfindlichkeit beginnen, erläutert, mit Hilfe gentechnisch veränderter Mäuse oder pharmakologisch, die erweitert oder reduziert die körperliche Belastbarkeit 8-11 Display. Allerdings haben viele solcher Studien motorisierten Laufbänder mit Schock Gitter ausgestattet, um Mäuse zu zwingen, 8-11 laufen verwendet. Tiere, die Lauf beenden werden durch geschobendie Bewegungslaufband auf einem Raster, die einen elektrischen Fuß-Schock liefert; um den negativen Reiz nicht entziehen, die Mäuse auf dem Band laufen zurück. Solche Verfahren können psychischer Stress und Vermeidungsverhalten als Störfaktoren beeinflussen experimentellen Parameter 12 einzuführen. Andere Methoden zur Messung von Ausdauer, wie die Quantifizierung der ambulanten Tätigkeit mit einem Strahlgerät Pause oder Quantifizierung von In-Käfig Rad läuft, kann durch Modulation des Tagesrhythmus, Angst, unbeabsichtigte Training oder Essen sucht Verhalten 12-16 verwechselt werden. Darüber hinaus sind diese Verfahren erfordern einzigen Gehäuse, eine andere Quelle der psychologischen Stress für Mäuse. Daher ist eine direkte Messung der sportliche Ausdauer nicht durch Stress verwechselt benötigt. Um diese Bedenken zu beseitigen, hat sich unser Labor entwickelt und validiert eine Methode, um eine maximale Laufleistung zu bewerten und anhaltender Laufgeschwindigkeit bei untrainierten, naiven Mäusen mit Hilfe eines motorisierten Laufband nicht equipped mit einem Schock Netz. Der Raum am Ende des Laufbandes, wo der Schock Grid meistens wohnt, wird dann zu einer Plattform für die Mäuse, um Ruhe, und bietet einen Platz für Maus, die zu laufen, bis aus der Vorrichtung entfernt sitzen zu verweigern. Mäuse sind aufgefordert, von einem menschlichen Beobachter laufen mit Antippen oder Berühren mit einem Spatel auf den freiwilligen Bereitschaft auf Seiten der Maus laufen gepaart mit Sensibilität. Diese Methode wurde verwendet, um Unterschiede in der Trainingsausdauer zwischen C57BL / 6 Mäusen gentechnisch veränderten und zu kontrollieren, die in der Expression des Zytokins Interleukin abgeleitet Muskel-15 (IL-15) 16,17 unterscheiden zu quantifizieren. Diese Methode ist eine Verfeinerung, die die humane verwirrende Effekte der negativen Verstärkung durch die Verwendung eines Raster Schock verursacht abnimmt.

<table><tbody><tr><td>Offenes Nagetier-Laufband Exer-3/6</td><td>Columbus Instruments, Columbus OH</td><td>1050RM</td><td>Diese Katalognummer gilt für Modelle ohne Stoßgitter. Stoßgitter können bei älteren Modellen manuell entfernt werden (Eco 3/6)</td></tr><tr><td>Sani Cloth Keimtötende Towlettes</td><td>PDI- Professional Disposables, Inc., Orangeburg, NY</td><td>werden normalerweise über eine örtliche Einrichtung bestellt</td><td>Enthält 10% Isopropylalkohol; jedes gleichwertige Produkt kann verwendet werden.</td></tr><tr><td>Zungenspatel</td><td>Jeder lokale Lieferant</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Labortimer</td><td>Jeder Lieferant</td><td></td><td></td></tr><tr><td>IL-15 TG Mäuse*</td><td>JAX, Bar Harbor, ME</td><td>011002</td><td>Maus IL-15-Transgen, exprimiert von modifiziertem humanem alpha-skelettalem Aktin-Promotor mit veränderter Signalsequenz zur Erleichterung der Sekretion.</td></tr><tr><td>C57BL/6J-Mäuse (Wildtyp)*</td><td>JAX, Bar Harbor, ME</td><td>000664</td><td>Kontrollmäuse für IL-15 TG</td></tr><tr><td>IL-15 KO-Mäuse*</td><td>Taconic Farms, Germantown, NY</td><td>4269-M</td><td>Homozygote IL-15 "Knockout"-Mäuse auf C57BL/6 Hintergrund</td></tr><tr><td>C57BL/6NTac (Wildtyp)*</td><td>Taconic Farms, Germantown, NY</td><td>B6-M</td><td>Kontrollmäuse für IL-15 KO</td></tr><tr><td>*Optional; Mauslinien und Behandlungen können spezifisch für die experimentelle Protokoll.</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

beurteilung der murine sportliche ausdauer, ohne die verwendung eines shock grid: eine alternative zur zwangsübung

Assessment of Murine Exercise Endurance Without the Use of a Shock Grid: An Alternative to Forced Exercise

Mit Labormausmodellen werden die molekularen Signalwege für die Stoffwechselleistungen der Ausdauerbelastung verantwortlich beginnt, definiert werden. Die gebräuchlichste Methode zur Beurteilung der Ausdauerübung in Mäusen nutzt gezwungen auf einem motorisierten Laufband mit einem Schock Gitter ausgestattet läuft. Tiere, die Lauf beenden werden durch die Bewegungslaufband auf einem Raster, die einen elektrischen Fuß-Schock liefert geschoben; um den negativen Reiz nicht entziehen, die Mäuse auf dem Band laufen zurück. Allerdings können Vermeidungsverhalten und psychische Belastung durch den Einsatz einer Schockgerät mit Quantifizierung der laufenden Ausdauer, sowie verwechseln Messungen der Nachtrainingszeit Serum Hormon und Zytokin-Ebenen stören. Hier demonstrieren und validieren eine raffinierte Methode, um Ausdauer laufen in naiven C57BL / 6 Mäusen auf einem motorisierten Laufband ohne Verwendung eines Schockgitter messen wir. Wenn Mäuse auf dem Laufband preacclimated, mit Gang freiwillig laufen sie beschleunigt spezifisch für jede mouse. Die Nutzung der Schock Gitter durch sanfte Ermutigung durch einen menschlichen Bediener mit einem Spatel auf den freiwilligen Bereitschaft auf Seiten der Maus laufen gepaart mit Sensibilität ersetzt. Klar Endpunkte zur Quantifizierung Laufzeit zu Erschöpfung für jede Maus definiert und in der Verhaltens Anzeichen von Erschöpfung wie gespreizt Körperhaltung und Atemschwierigkeiten wider. Diese Methode ist eine Verfeinerung, die humane sinkt auch die verwirrende Auswirkungen von Stress auf experimentellen Parameter.

Dieses Verfahren zum Messen von Übungsausdauer spiegeln genau die molekularen und Stoffwechselprofil von verschiedenen Stämmen von C57BL / 6 Mäusen, die in der Expression des Zytokins IL-15 16,17 abweichen. Transgene Mäuse, die eine Überexpression von IL-15 (IL-15 TG-Mäuse) eine deutlich Run-to-Erschöpfung Zeiten im Vergleich zu Kontrollen erhöht Wurf, während Mäuse, die IL-15 (IL-15-KO-Mäuse) aufweisen fehlt Laufzeiten deutlich vor Erreichen reduziert Erschöpfung (Abbildung 1A). Veröffentlic...

Eine Methode zur Beurteilung der Belastungsausdauer bei Labormäusen ohne die Verwendung eines Schockgitters wird demonstriert. Diese Methode ist eine humane Verfeinerung, die die verwirrenden Effekte von Stress auf experimentelle Parameter verringern kann.

Beurteilung der Murine sportliche Ausdauer, ohne die Verwendung eines Shock Grid: Eine Alternative zur Zwangsübung

Using laboratory mouse models, the molecular pathways responsible for the metabolic benefits of endurance exercise are beginning to be defined. The most ...

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, die freiwillige Trainingsausdauer zu bestimmen. Bei Labormäusen gelingt dies, indem man die Maus zunächst ein bis zwei Stunden lang in ihrem Heimkäfig an den Behandlungsraum gewöhnen lässt. Die Maus darf sich dann an das Laufband und das Geräusch des Motors gewöhnen.Anschließend wird die Geschwindigkeit des Laufbandes schrittweise erhöht, bis die Maus bequem mit ihrer maximalen Dauergeschwindigkeit läuft. Der letzte Schritt besteht darin, festzustellen, wann die Maus erschöpft ist. Letztendlich zeigt die Zeit, die die Maus bis zur Erschöpfung gelaufen ist, ein Maß für die Ausdauer des Trainings ohne die verwirrenden Auswirkungen von Stress durch die Verwendung eines Schockgitters.Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass sie eine Verfeinerung bestehender Methoden zur Bestimmung der Trainingsausdauer und der Mäuse darstellt, vor allem, weil sie kein Schussgitter verwendet, um die Mäuse zum Laufen zu animieren, wodurch die verwirrenden Auswirkungen von Stress sowohl für das Tier als auch für den Versuch reduziert werden. Entscheiden Sie sich im Voraus für Versuchsgruppen und Nachbereitungsverfahren für Mäuse. Stellen Sie das Laufband auf einen stabilen Wagen oder Tisch in einem ruhigen Raum, der diesem Verfahren gewidmet ist.Stellen Sie das Laufband während der laufenden Versuche auf mausgroße Bahnen und in einer dem Protokoll entsprechenden Neigung ein. Die Neigung von positiven fünf Grad wird hier genutzt, um Muskelschäden durch exzentrische Übungen, die beim Bergablauf auftreten, zu vermeiden. Legen Sie ein saugfähiges Pad unter die Laufbandglocke, um den Kot aufzufangen.Lassen Sie die Maus sich ein bis zwei Stunden lang in ihrem transportierten Heimkäfig mit Käfiggenossen an den Eingriffsraum gewöhnen. Wählen Sie eine einzelne Maus aus und notieren Sie sich die Tag-Nummer. Wiegen Sie auch die Maus und notieren Sie ihr Gewicht.Legen Sie die Maus etwa fünf Minuten lang ohne eingeschalteten Motor in das Laufband, um sich zu akklimatisieren. Schalten Sie das Gerät ein, ohne dass das Laufbandband läuft, und lassen Sie die Maus weitere fünf Minuten lang an das Geräusch des Geräts gewöhnen. Nehmen Sie die Mäuse in den sitzenden Gruppen zu diesem Zeitpunkt aus dem Laufband und bringen Sie sie in ihren Käfig zurück oder führen Sie nach dem Training Verfahren gemäß dem Versuchsdesign durch.Drehen Sie den Riemen nach der Eingewöhnung auf eine niedrige Geschwindigkeit. Wenn das Tier das Band erkundet und nicht auf der Plattform, klopfen oder heben Sie die Hinterhand der Maus mit einem Zungenspatel sanft ein- bis dreimal an, um widerstrebende Tiere zu ermutigen, auf dem Laufband zu bleiben und zu rennen. Starten Sie einen Labor-Timer Sobald die Maus mit der Anfangsgeschwindigkeit von 10 Metern pro Minute läuft, drehen Sie die Geschwindigkeit langsam hoch.Wenn sich die Maus etwa alle zwei Minuten in Schritten von einem Meter pro Minute am oberen Rand des Bandes befindet, drehen Sie die Geschwindigkeit auf die vorherige Einstellung herunter. Wenn die Maus wiederholt in kurzen Stößen und nicht in gleichmäßigem Tempo läuft, laufen die meisten Mäuse bereitwillig, aber sie stoppen manchmal für kurze Zeiträume. Verwenden Sie den Zungenspatel, um sanft auf den Rücken des Tieres zu klopfen oder ihn anzuheben, um die Wiederaufnahme des Laufs zu fördern.Oft führt schon das Bemerken der Hand mit dem Zungenspatel dazu, dass die Mäuse noch mehr rennen. Stoppen Sie den Timer nicht für vorübergehende Unterbrechungen der Ausführung. Bestimmen Sie die maximale anhaltende Laufgeschwindigkeit jeder Maus, indem Sie die Geschwindigkeit anpassen und beobachten, wie die Maus diese Geschwindigkeit aufzeichnet.Einige Mäuse weigern sich komplett zu rennen. Solche Mäuse laufen in kurzen Schüben. Halten Sie dann an, um das auf der Plattform sitzende Pferd zu putzen oder in die Pedale zu treten, und verwenden Sie die Vorderbeine am Gurt.Die klassische Haltung einer ablehnenden Maus besteht darin, alle vier Füße unter das Tier zu stellen, um nicht durch den Zungenspatel auf das Laufband zurückgestoßen zu werden. Gelegentlich wird eine Maus aggressiv gegenüber dem Zungenspatel, wenn sie nicht rennen will, beißt auf die Zunge, den Zaumhebel oder klettert sie hinauf, um zu entkommen. Innerhalb der ersten fünf Minuten des Versuchs ist klar, ob die Maus läuft oder nicht.Entfernen und identifizieren Sie Mäuse, die sich weigern, vor der Analyse zu fliehen, aber sie nicht als sitzende Mäuse zählen. Abhängig von Ihrem Versuchsdesign können Mäuse, die sich weigern, an einem anderen Tag erneut getestet werden. Erschöpfung wird durch drei aufeinanderfolgende Stopps und die Weigerung, trotz sanfter Ermutigung wieder zu laufen, definiert.Plus körperliche Anzeichen von Erschöpfung wie mühsames Atmen und gespreizte Haltung. Identifizieren Sie erschöpfte Mäuse und stoppen Sie den Timer. Notieren Sie die Gesamtzeit, die Sie mit allen Geschwindigkeiten verbracht haben.Je nach Versuchsdesign bringen Sie die Maus entweder in ihren Käfig zurück oder führen Sie unmittelbar nach dem Training Verfahren wie Blut- oder Gewebeentnahme durch. Gemäß den institutionellen Richtlinien wischen Sie das Band nach dem Testen jeder einzelnen Maus mit einem keimtötenden Handtuch sauber, damit der Geruch der vorherigen Maus das Verhalten der nachfolgenden getesteten Mäuse der nächsten Maus nicht beeinflusst. Verwenden Sie für jede Maus einen frischen Zungenspatel.Mäuse, die sich im selben Käfig befinden, können nacheinander am selben Tag getestet werden, ohne dass sich zusätzlich an den Operationsraum gewöhnt werden muss. Die Trainingsausdauer spiegelt genau das molekulare und metabolische Profil verschiedener Stämme von C 57 wider: sechs Mäuse, die sich in der Expression von Muskel-abgeleiteten Zytokinen IL 15 unterscheiden; transgene Mäuse, die IL 15 überexprimieren, zeigen signifikant erhöhte Durchlaufzeiten bis zur Erschöpfung im Vergleich zu ate-Kontrollen, während Mäuse, denen IL 15 fehlt, signifikant verkürzte Laufzeiten vor Erreichen der Erschöpfungs-Wildtyp-Kontrollen aufweisen. Siehe 57 schwarze sechs Mäuse aus zwei verschiedenen Quellen weisen keine signifikant unterschiedlichen Laufzeiten auf.Die maximale anhaltende Laufgeschwindigkeit unterschied sich nur bei IL 15 Knockout-Mäusen. Eine unvermeidliche Einschränkung dieser Technik besteht darin, dass einige Mäuse sich weigern, freiwillig zu laufen. Der Prozentsatz der jungen Wildtyp-Kontrollmäuse, die sich weigern zu laufen, liegt bei etwa 10 %Im Alter von vier Monaten steigt der Prozentsatz der Verweigerungen im Alter von acht Monaten auf 20 % und im Alter von 16 Monaten auf mehr als 60 %.Der Prozentsatz der Verweigerungen in der älteren Altersgruppe ist jedoch bei IL 15-transgenen Mäusen signifikant niedriger. Wenn Sie dieses Verfahren versuchen, ist es wichtig, daran zu denken, ruhig und entspannt zu bleiben und auf das Verhalten der Maus zu achten. Nachdem Sie sich dieses Video angesehen haben, sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie Sie ein Laufband verwenden, um die Trainingsausdauer und Mäuse zu bestimmen, ohne das E-Chakra zu verwenden.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Behavior

Verhalten

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