Eine Vorgehensweise, um Context-induzierte Erneuerung der Pawlowschen Anlage Alkoholsucht bei Ratten Verhalten beobachten

Dieses Verfahren untersucht die Fähigkeit eines alkoholassoziierten Kontextes, die Erneuerung des Pawlowschen Alkoholsuchverhaltens auszulösen. Dies wird erreicht, indem Ethanol-erfahrene Ratten zunächst an Konditionierungskammern gewöhnt werden, die in zwei einzigartigen Kontexten konfiguriert wurden. Der zweite Schritt des Verfahrens besteht darin, Pawlowsche Diskriminierungstrainings in einem Kontext durchzuführen, in dem zwei verschiedene auditive Signale entweder die Verfügbarkeit von Alkohol oder deren Fehlen signalisieren.

Der dritte Schritt besteht darin, ein Extinktionstraining durchzuführen. Im zweiten Kontext, in dem beide auditiven Signale ohne Alkohol präsentiert werden, besteht der letzte Schritt darin, die Ratten in den ursprünglichen Trainingskontext zurückzuversetzen und beide auditiven Signale ohne Alkohol zu präsentieren. Diese Manipulation führt zu einer Erneuerung des Alkoholsuchverhaltens, das durch den auditiven Hinweis ausgelöst wird, der zuvor mit Alkohol in Verbindung gebracht wurde.

Der Hauptvorteil dieser Technik gegenüber bestehenden Verfahren wie der instrumentellen Konditionierung besteht darin, dass sie ein Tiermodell für das Verhalten bei der Suche nach Alkohol bietet, das durch Pawlowsche Signale hervorgerufen wird, die Alkohol vorhersagen. Diese Methode kann helfen, Schlüsselfragen im Suchtbereich zu beantworten, wie z.B. ob der mit Alkohol verbundene Kontext einen Rückfall provoziert? Gewöhnen Sie die Ratten vor dem Training an den Testraum und die beiden Umweltkontexte, die sie erleben werden. Transportieren Sie die Ratten immer einheitlich von der Tierpflegeeinrichtung in den Versuchsraum.

Lassen Sie die Ratten in der ersten Sitzung 20 Minuten lang im Testraum, wobei die Raumbeleuchtung beleuchtet und die Ventilatoren in den schalldämpfenden Kabinen nach 24 Stunden eingeschaltet sind. Führen Sie die zweite Gewöhnungssitzung wie die erste durch, aber wiegen und behandeln Sie jetzt jede Ratte. Führen Sie die dritte Sitzung 24 Stunden später durch.

Richten Sie dazu jede Konditionierungskammer mit einer von zwei unterschiedlichen Kombinationen aus visuellen, olfaktorischen und taktilen Reizen ein. Um einen konsistenten Kontext zu schaffen, sollte der olfaktorische Reiz der letzte kontextuelle Reiz sein, der jeder Kammer hinzugefügt wird. Um die Vermischung verschiedener Geruchsreize zu minimieren, schließen Sie die Türen der Kammern und die schalldämpfende Kabine, in der jede Kammer untergebracht ist.

Unmittelbar nach dem Auftragen des Geruchsstimulus für die dritte Sitzung wiegen Sie jede Ratte und legen Sie sie für 20 Minuten in ihre Konditionierungskammer. Die Hälfte der Ratten sollte den ersten Kontext erleben, und die andere Hälfte sollte den Kontext erleben. Zweitens, um das lebenswichtige Bedürfnis nach Konsistenz zwischen den Ratten und ihren Kammern aufrechtzuerhalten, ist es nützlich, die Ratten mit einer Nummer zu markieren, die eine bestimmte Kammer identifiziert.

Eine Minute, nachdem alle Ratten in ihren Kammern platziert wurden, beleuchten Sie das Hauslicht in den Kammern Während der 20 Minuten notieren Sie alle von den Ratten vorgenommenen Flüssigkeitseinträge. Schalten Sie dann das Licht aus, entladen Sie die Ratten und bringen Sie sie in ihre Pflegeeinrichtung zurück. Später am selben Tag führst du eine vierte Gewöhnungssitzung durch, die fast identisch mit der dritten ist, in der der Kontext der Konditionierungskammern umgekehrt wird.

Waschen Sie schließlich nach jeder Sitzung immer die Abfallschalen und Bodenplatten der Konditionierungskammern und der Petrischale, in die der olfaktorische Kontextreiz eingebracht wurde. Verwenden Sie wöchentlich nur unparfümierte Reinigungslösungen. Reinigen Sie die Kammern für dieses Training in ihrer Gesamtheit.

Teilen Sie die Ratten in zwei Gruppen mit der gleichen durchschnittlichen Ethanolaufnahme in den letzten beiden Ethanol-Sitzungen ein. Eine Gruppe wird im Kontext trainiert, die andere im Kontext. Zwei. Der Kontext, der für das Pawlowsche Diskriminierungstraining verwendet wird, wird als Kontext A bezeichnet.Während dieser Sitzungen lernen die Ratten, zwischen zwei verschiedenen auditiven Hinweisen zu unterscheiden, von denen einer mit Ethanol gepaart ist und der andere, der es nicht ist.

Der erste Schritt besteht also darin, 20-Milliliter-Spritzen mit Ethanol vorzubereiten. Verbinden Sie für die Flüssigkeitsanschlüsse den Schlauch von der Rückseite des Flüssigkeitsanschlusses mit der geladenen Spritze. Laden Sie jede Spritze mit einer stumpfen Nadel in eine eigene Pumpe außerhalb der schalldämpfenden Kabine.

Entlüften Sie dann den Schlauch, indem Sie die Pumpe manuell vorschieben, und wischen Sie überschüssiges Ethanol aus dem Flüssigkeitsanschluss ab. Bringen Sie nun die Ratten in den Labortestraum. Wie bei der Gewöhnung sollten Sie jede Ratte wiegen, bevor Sie sie in die ihm zugewiesene Konditionierungskammer setzen.

Stellen Sie sicher, dass Sie die Kontextkonfiguration in jeder Kammer überprüfen und sicherstellen, dass Sie die richtige Ratte in die richtige Kammer laden. Eine Ratte, die dem falschen Kontext oder dem falschen CS plus ausgesetzt war, muss möglicherweise aus der Studie gestrichen werden. Sobald alle Ratten gewogen und geladen sind, starten Sie das Computerprogramm, das die Ereignisse der Trainingseinheit steuert.

Fünf Minuten nach Beginn des Programms wird das Hauslicht in jeder Kammer in jeder Sitzung beleuchtet, 16 zehnsekündige Ausbrüche von weißem Rauschen und 16, zehn Sekunden lange Ausbrüche von Klickgeräuschen werden präsentiert. Bestimmen Sie für jede Ratte einen dieser auditiven Reize für das Ethanol und gleichen Sie diese Bezeichnungen über die beiden Konditionierungskontexte während der letzten sechs Sekunden des Cs aus, außerdem gibt die Pumpe 0,2 Milliliter Ethanol an den Flüssigkeitsanschluss ab. Stellen Sie die Stimuli auf einen variablen Zeitplan von 67 Sekunden ein, um eine einstündige Sitzung zu erstellen.

Zeichnen Sie alle Fluid-Port-Einträge auf, die 10 Sekunden vor Cs, während Cs und 10 Sekunden nach Cs beginnen. Notieren Sie auch die Gesamtzahl der Flüssigkeitsporteinträge, die während der gesamten Pawlowschen Diskriminationsschulung vorgenommen wurden. Wenn die Sitzung beendet ist, schalte das Licht im Haus aus und bringe die Ratten in die Tierpflegeeinrichtung in die Konditionierungskammern zurück.

Überprüfen Sie die Flüssigkeitsanschlüsse, um sicherzustellen, dass die Ratten die 3,2 Milliliter Ethanol konsumiert haben, die während der Sitzung abgegeben wurden. Denken Sie daran, die Flüssigkeitsanschlüsse zu überprüfen, nachdem die Ratten die Kammern entfernt haben, um sicherzustellen, dass sie das Ethanol konsumieren. Ratten, die das Ethanol nicht konsumieren und während der CS auch geringe Mengen an Porteinträgen aufweisen, müssen möglicherweise aus der Studie gestrichen werden. Reinigen Sie die Konditionierkammern wie gewohnt.

Reinigen Sie den Schlauch, indem Sie ihn zuerst mit Wasser spülen und dann mit einer leeren 60-Milliliter-Spritze Luft durch ihn leiten. Wiederholen Sie die Sitzungen täglich, bis die Ratten zwischen den beiden auditiven Reizen unterscheiden, was durch die Porteintrittsreaktionen angezeigt wird. Es wird ein selektiver Anstieg der Porteinträge in den CS plus erwartet, der sich innerhalb von 16 bis 20 Sitzungen stabilisiert.

Für die Extinktionssitzungen. Die Konditionierungskammer jeder Ratte sollte in einem anderen Kontext eingerichtet werden als dem, der während des Pawlowschen Diskriminierungstrainings verwendet wird. Der Kontext, in dem die Extinktion durchgeführt wird, wird als Kontext B bezeichnet.Führen Sie die Extinktionssitzungen genau wie die Distinktionssitzungen mit demselben Computerprogramm durch, geben Sie jedoch während der CS Plus kein Ethanol ab.

Aus Gründen der Konsistenz werden die Pumpen mit leeren 20-Milliliter-Spritzen befüllt, die über ethanolfreie Schläuche mit der Kammer verbunden sind. Führen Sie die Extinktionssitzungen täglich durch, bis die Ratten aufhören, zwischen CS plus und minus zu unterscheiden. Dies kann wie immer etwa acht Sitzungen dauern, reinigen Sie das Gerät nach Bedarf, bevor Sie mit dem Erneuerungstest fortfahren.

Es ist von entscheidender Bedeutung, dass es während des CS plus am Ende des Extinktionstrainings zu einer deutlichen Reduzierung der Porteingänge im Vergleich zum Anfang kommt. Der kontextinduzierte Erneuerungstest verwendet die gleiche Kammerkontextkonfiguration wie während des Pawlowschen Diskriminktionstrainings, die einen anderen Kontext als das Extinktionstraining darstellt. Dieser Einzeltest wird identisch mit einer Pawlowschen Diskriminationsschulung durchgeführt, mit der Ausnahme, dass kein Ethanol abgegeben wird und die Spritzen leer sind.

Verwenden Sie das gleiche Computerprogramm, um die auditiven Reize darzustellen. Das erwartete Ergebnis ist eine Erneuerung des Alkoholsuchverhaltens, das selektiv auf den CS abgestimmt ist, und eine Reinigung des Geräts am Ende des Tests. Wie zuvor, als Ratten periodischen intermittierenden Zugang zu Ethanol in ihren Heimkäfigen erhielten, stiegen der Ethanolverbrauch und die Ethanolpräferenz nach acht bis 12 Trainingseinheiten auf ein stabiles Niveau an.

Während des Pawlowschen Diskriminationstrainings nahmen die Porteintrittsreaktionen auf den CS plus im Laufe der Trainingssitzungen zu, es gab einen leichten Anstieg der Reaktion auf den CS minus, aber die Ratten lernten während des Extinktionstrainings, zwischen den beiden auditiven Hinweisen zu unterscheiden, die Porteintrittsreaktionen auf den CS plus nahmen allmählich ab, während die Reaktionen auf den CS minus niedrig blieben. Als die Ratten in den Kontext zurückversetzt wurden, der mit dem Pawlowschen Diskriminationstraining assoziiert war, kam es während des CS plus zu einem selektiven Anstieg der Porteintritte im Vergleich zu den Ergebnissen nach dem Extinktionstraining. Im Gegensatz dazu gab es keine Veränderung in der Reaktion auf das CS minus.

Diese Ergebnisse zeigen, dass das Alkoholsuchverhalten, das durch einen diskreten Hinweis ausgelöst wird, stark durch den Umweltkontext moduliert werden kann. Beim Versuch dieses Verfahrens ist es wichtig, dass der Forscher keine Parfüms, Kölnisch Wasser oder andere parfümierte Produkte verwendet. Ratten sind hochgradig olfaktorische Geschöpfe und olfaktorische Hinweise, die mit dem Forscher in Verbindung gebracht werden, können störend sein. Nach dieser Methode können andere Verfahren wie intrakranielle Mikroinfusionen durchgeführt werden, um zusätzliche Fragen zu beantworten, z. B. an welchen Gehirnregionen beteiligt sind.

Kontextinduzierte Erneuerung der Pawlowschen konditionierten Alkoholsuche.