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DOI: 10.3791/51909-v
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This study demonstrates the quantification of retinal degeneration and regeneration in adult zebrafish using N-methyl-N-nitrosourea (MNU). The impact on visual function was assessed, revealing a loss of visual acuity followed by cellular proliferation and complete regeneration after 30 days.
Hier zeigen wir Quantifizierung der Netzhaut De- und Regeneration und ihre Auswirkungen auf die visuelle Funktion mit N-Methyl-N -nitrosourea im erwachsenen Zebrafisch. Verlust der Sehschärfe und verminderte Photorezeptorzahlen wurden durch Proliferation in der inneren Kernschicht gefolgt. Vollständige morphologische und funktionelle Regeneration aufgetreten 30 Tage nach der ersten Behandlung.
Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, die Netzhautdegeneration und die anschließende Regeneration im erwachsenen Zebrafisch mit Hilfe von n Methyl und Nitro ueaa zu induzieren. Dies wird erreicht, indem Wildtyp-Zebrafische zunächst in Wasser inkubiert werden, das N, Methyl, N, salpetriger Harnstoff oder MNU enthält. Die nächste Sehfunktion wird quantifiziert, indem die optokinetische Reaktion oder OKR gemessen und die Sehschärfe zu verschiedenen Zeitpunkten berechnet wird.
Nach der Behandlung werden die Zebrafische eingeschläfert und die Augen für histologische Untersuchungen mittels H- und E-Färbung entkernt, um morphologische Veränderungen im Netzhautgewebe zu beobachten. Schließlich werden zelluläre Veränderungen in der Netzhaut sichtbar gemacht, mit einer spezifischen Färbung für Zelltod und -proliferation. Letztendlich werden die Messung der Sehschärfe und die Quantifizierung morphologischer und zellulärer Veränderungen verwendet, um die retinale D und die Regeneration sichtbar zu machen.
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