Name: Einen methodischen Ansatz, um Nicht-invasive Assessments der Gefäßfunktion und Morphologie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-02-07T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 33 s
Description: Erfahren Sie nicht-invasive Methoden zur Bewertung der Gefäßfunktion und Morphologie bei Atherosklerose-Forschung. Laser-Doppler-Imaging, Fluss-vermittelte Dilatation und Carotis-Intima-Media-Dicke ermöglichen präzise Analysen.

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Die Autoren danken Dr. George Balanos für seine Unterstützung bei der flussvermittelten Dilatationstechnik.

HINWEIS: Das Protokoll folgt Richtlinien von Human Research Ethics Committee Dudley Gruppe NHS Foundation Trust. Führen alle beschriebenen Techniken in einem temperaturgeregelten Labor (21-22 ° C), mit einer stabilen Beleuchtung und Abwesenheit von Rauschen. Fragen Sie Personen, die sich um Einschätzungen von Essen, Trinken, Rauchen und Bewegung 12 Stunden vor dem Test zu unterlassen. Zurückhalten, vasoaktive Medikamente für mindestens 12 Stunden, wenn angemessen. 1. Laser-Doppler-Imaging mit Iontophorese <ol><li> Schalten Sie Laser Doppler Imager (LDI) und lassen Sie den Scanner automatisch nach ca. 30 min zu stabilisieren. Starten Sie den LDI-Software und klicken Sie auf &quot;Measurement&quot; (Startbildschirm der Software wird dann ausgewiesen werden). Auf dem Startbildschirm, wählen Sie &#39;Ionto Protocol &quot;in der Taskleiste am oberen Rand des Fensters. </li><li> Geben Sie manuell das Protokoll (der in unserem Labor verwendete Protokoll beinhaltet insgesamt 13 sDosen, mit elektrischem Strom zur iontophoretischen Verabreichung von Medikamenten vom Scan 2, um bei einer Spannung von 30 uA scannen 11). Set Scan 1 als Baseline werden ohne elektrischen Strom, und scannen 12 und 13 als Verwertung Scans auch ohne elektrischen Strom. Klicken Sie auf OK, um die Einstellungen zu bestätigen und zum Home-Bildschirm. </li><li> Fragen Sie Teilnehmer in einer halbliegenden Stuhl mit ihren Unterarm ruhen 90 Grad auf einem bequemen, festen Kissen entspannen, und legen Sie eine schwarze Unterlage unter den Unterarm. HINWEIS: Die Matte hilft, Artefakt Messungen Hintergrundflächen des umgebenden Gewebes erzeugt begrenzen. Es ist wichtig, dass die Teilnehmer der Arm fest an dem Kissen angeschnallt, so daß es keine Bewegung gibt und zugehörige Artefakte. </li><li> Schließen Sie die Kabel-Stecker am anderen Ende jedes Plexiglaskammer mit der Iontophorese-Controller. Schließen Sie die Kammer, die eine 2,5-ml-Dosis von 1% Acetylcholin (ACh) zu dem Anodenanschluss der Iontophorese-Controller, und schließen Sie die zweite Kammereine 2,5 ml-Dosis von 1% Natrium-Nitroprussid (SNP) an die kathodenseitige Anschluss. Das Vermischen der beiden Wirkstoffe in der Kammer mit 0,5% Kochsalzlösung. Verbinden Sie die beiden Kammern auf der volaren Aspekt des Teilnehmers rechten Unterarm mit doppelseitigen Klebepads. </li><li> Umfassen die Kammern um 32 mm Deckgläsern um eine Leckage von Fluid zu verhindern. </li><li> Vor dem Starten des Scan, öffnen Sie das Fenster &quot;Scanner-Setup&quot; auf der oberen linken Ecke des Home-Bildschirm entfernt. Wählen Sie die &quot;Video und Entfernung&quot; und wählen Sie die Registerkarte &quot;Auto Abstand&quot; Funktion, um den Abstand des Scannerkopfes vom Teilnehmer Unterarm messen. <ol><li> Nach Abschluss der automatischen Abstandsmessung, wählen Sie die Registerkarte &quot;Image Scan&quot; und bestimmen Sie den Bereich, der durch Klicken auf die Taste &#39;Mark&#39; in der rechten unteren Ecke des Fensters eingescannt werden soll. Falls erforderlich, ändern Sie die Größe der Region von Interesse durch die manuelle Eingabe der Größe des Scanbereichs in die &quot;Scanbereich &amp;# 8217; Abschnitt in der Nähe des oberen Rand des Fensters. Sicherzustellen, dass die Region von Interesse enthält, den Durchmesser von jedem der Iontophorese Kammern und ist groß genug, um die Variabilität der Hautdurchblutung zu begrenzen. </li></ol></li><li> Nach Abschluss der Beurteilung, speichern Sie die Datei. Öffnen Sie die Datei mit LDI Bildanalyse-Software zur Messung der Durchblutung führen. <ol><li> Klicken Sie auf &quot;Bilddurchsicht&quot; auf der Haupt-Software-Fenster, und öffnen Sie die Bilddatei, die analysiert werden soll. </li><li> Verwenden Sie die Software, um eine Region von Interesse rund um den Außendurchmessern jeder Kammer markieren. Stellen Sie die Region von Interesse, so dass es auf dem Gebiet, in dem die Kammern anwesend waren richtig passt. Klicken Sie dann auf das Symbol &quot;Statistik&quot; und eine Spalte mit den mittleren Perfusion Einheiten für jede Kammer wird angezeigt. Beachten Sie die Grundlinie Perfusionseinheit sowie die höchste Perfusionseinheit von jedem der letzten 12 Scans für jede Kammer. HINWEIS: Diese Analysemethode istspezifisch für unser Labor; jedoch können auch andere Methoden verwendet werden, um Daten von dem Scan erhaltenen LDI exprimieren. Eine umfassende Übersicht finden Sie in Richtlinien von Roustit und Cracowski 12 beziehen. </li></ol></li><li> Um prozentuale Veränderung der Durchblutung in Reaktion auf ACh und SNP berechnen, subtrahieren Grundliniendurchblutung von der Spitze Perfusion, geteilt durch Basisdurchblutung und dann mit 100 multiplizieren. HINWEIS: In unserem Labor haben Veränderungen der Durchblutung im Vergleich zum Ausgangs gute intra-observer Variationskoeffizient für ACh (7%) und SNP (6%) gezeigt. </li></ol> 2. Durchfluss vermittelten Dilatation und Glyceroltrinitrat-vermittelten Dilatation <ol><li> Schalten Sie den Doppler-Ultraschallgerät und PC im Netzwerk, die Gefäßbildanalyse-Software (VIA). HINWEIS: Der VIA-Software erfasst ein Live-Bild (mit 25 Bildern pro Sekunde) und gibt Auskunft über den Gefäßdurchmesser als auch die Qualität der Gefäßgrenzen durch die Ultraschallgerät erkannt. Otihre Software-Pakete zur Verfügung, die zusätzliche Funktionen und Einstellungen enthalten können. Es ist ratsam, Bedienungsanleitungen für spezifische Software konsultieren. </li><li> Fragen Sie Teilnehmer in einer halbliegenden Sessel entspannen und setzen ihr Arm auf einem bequemen Kissen, um ihre Seite, sondern in Höhe des Herzens. Legen Sie eine Blutdruckmanschette um den Teilnehmer Handgelenk. HINWEIS: Der Patient sollte aufgefordert, den Arm so ruhig wie möglich zu halten, um Bewegungsartefakte während der Messung zu vermeiden. </li><li> Sichern Sie die Linearschallkopf von der Ultraschall-Maschine in einen stereotaktischen Klemme, und ziehen Sie die Klammer mit den Flügelmuttern, so dass der Ultraschallwandler in einer festen Position bleibt. HINWEIS: Die Klemme wird sichergestellt, dass der Ultraschallwandler stabil bleiben, wenn das Blutgefäß befindet. </li><li> Auf dem Ultraschallgerät, blättern Sie in das &quot;Menü&quot; und stellen Sie die Scanfrequenz bei 5 MHz und optimieren die Tiefe (die empfohlene Tiefeneinstellung ist3,5 cm) und die Verstärkungseinstellungen an der Ultraschallgerät. Anpassen der Verstärkungseinstellungen, um sicherzustellen, dass es symmetrisch Helligkeit für die nahen und fernen Wand des Gefäßes. </li><li> Mit dem Linearschallkopf, suchen Sie die Arteria brachialis in der Regel 2 bis 10 cm über der Ellenbeuge in Längsscanebene zu finden ist. Nehmen Sie die Einstellungen, um die Bildqualität in dieser Phase zu klären. Um zur Ermittlung der Arterie, schalten Sie den Farb-Doppler zu helfen zeigen pulsierenden arteriellen Durchblutung und sie von kontinuierlichen venösen Blutfluss. Sehen Sie sich die Arteria brachialis horizontal über den Bildschirm; es sollte als zwei feste parallele Leitungen, durch einen klaren Bereich in getrennt zwischen den Linien, die das Lumen des Gefäßes darstellt erscheinen. </li><li> Damit der VIA-Software automatisch zu protokollieren Gefäßdurchmesser, mit dem Cursor, um einen vorbestimmten Bereich von Interesse erkennen und verfolgen Sie die Vorder- und Hinterwand der Arterie zu markieren. HINWEIS: Die Größe der Region von Interesse sein kannerhöht oder verringert wird mit Hilfe der &#39;x&#39; und &#39;y&#39; Tasten am Haupt Software Bildschirms. </li><li> Klicken Sie auf &quot;Start&quot; auf der VIA-Software und Bild die Arterie für 2 min. Danach klicken Sie auf &#39;Pumpen&#39; auf der VIA-Software und pumpen Sie die Blutdruckmanschette um das Handgelenk gelegt, um Druck suprasystolischem (in der Regel über 220 mmHg) für 5 min gleichzeitig. HINWEIS: Der Zweck der Manschette ist, um den Blutfluss in der Hand zu verschließen. </li><li> Nach 5 Minuten wurde die Luft aus dem Blutdruckmanschette an reaktiven Hyperämie, die in einer gesunden Gefäß, sind vermittelte Vasodilatation stimulieren induzieren. HINWEIS: Peak-Erweiterung bis zu 180 sec folgenden Manschettenentleerung auftreten, so empfiehlt sich die Aufnahme fortzusetzen Gefäßquerschnitte für 3 Minuten nach der Manschette Release ist. </li><li> Nach 10 Minuten Ruhezeit erneut suchen Sie die Oberarmarterie unter Verwendung des linearen Array-Schallkopf und nehmen einen Durchmesser Lesung 2 min Grundlinie auf die gleiche Weisewie in Schritt 2.7. </li><li> Dann fragen Sie die Teilnehmer, um eine 500 ug sublingual Glyceryl-(GTN) Tablette unter die Zunge legen und weiterhin die Oberarmarterie Durchmesser für weitere 5 min messen. Nach Ablauf dieser Frist, fragen Sie die Teilnehmer, die GTN Tablette zu entfernen und Überwachung der Teilnehmer sicherstellen, dass sie keine nachteiligen Auswirkungen auf das Medikament zu erleben. </li><li> Führen Sie alle Analyse von Daten offline. Fünfundzwanzig Datenpunkte für jede Sekunde der Beurteilung vorhanden; kollabieren diese Daten in einer Sekunde Epochen in Microsoft Excel. Exportieren der Daten in eine digitale Signalanalyse-Paket und das Filter mit einem 3 sec Gleitmittelungsfilters. </li><li> Stellen Sie die Basisdurchmesser von 120 Sekunden der Daten vor der Manschette-Inflation. Sichtprüfung der Basislinienbereich und verstehen sich inklusive Artefakte. Der Mittelwert der verbleibenden Basislinienbereiche, um die Basisliniendurchmesser herzustellen. </li><li> Für die flussvermittelte Dilatation (FMD) Analyse, die Software automatisch scannen die Post cuff-Deflation Region für Spitzen Dilatation und verwenden Sie den Cursor auf diese Spitze zur Sichtkontrolle zu markieren. Wenn der Spitzen wurde falsch identifiziert, verwenden Sie den Cursor auf eine begrenzten Bereich, in dem die Spitze könnte dann identifiziert werden, auszuwählen. Notieren Sie sich den Spitzenwert als Spitzendurchmesser. </li><li> Für die GTN-Daten, einen Akt gleichen Verfahren wie bei der MKS verwendet, mit Ausnahme der Suche nach Spitzen Erweiterung in der Region nach dem 5 Minuten der Verabreichung des Arzneimittels. </li><li> Zur Berechnung FMD% und GTN%, subtrahieren Basisdurchmesser von der Spitzendurchmesser, geteilt durch Basisdurchmesser und dann mit 100 multipliziert. HINWEIS: In unserem Labor ist die intra-observer Variationskoeffizienten von 11% für die Maul- und Klauenseuche, und 12% für GTN. </li></ol> 3. Intima-Media-Dicke <ol><li> Fragen Sie Teilnehmer, um bequem auf einem Bett liegen, und ein Kissen unter den Kopf, um Unterstützung für den Hals zu bieten. </li><li> Schließen Sie das Elektrokardiogramm (EKG) führt zu der Doppler-Ultraschall und befestigen Sie sie auf die patient Gliedmaßen. Nur eine grundlegende EKG-Kurve erforderlich ist, so stellen Sie die entsprechenden Kabel an den linken und rechten Arme, und auf der linken Knöchel. </li><li> Bereiten Sie das Ultraschallgerät indem Sie durch die &quot;Menü&quot; und die Einstellung der Scanfrequenz bei 10 MHz und Optimierung Tiefe (die empfohlene Tiefeneinstellung ist 3-4 cm) und Verstärkungseinstellungen. Anpassen der Verstärkungseinstellungen, um sicherzustellen, dass es symmetrisch Helligkeit für die nahen und fernen Wand des Gefäßes. </li><li> Fragen Sie Teilnehmer, den Kopf leicht nach links kippen, und mit Hilfe des Linearschallkopf, scannen Sie die rechte Halsschlagader entlang aller seiner Teile (gemeinsame, innere und äußere Halsschlagader) mit dem Längsscanebene, um das Vorhandensein von Plaques zu identifizieren. Bilder, die keine Anzeichen von Plaque Anzeige zu speichern. Um zur Ermittlung der Arterie, suchen Sie nach einem Verzweigungspunkt in dem Gefäß, da dies zeigt die A. carotis communis gabelnden in der internen und externen Halsschlagadern. </li><li> Zur Messung of Intima-Media-Dicke (cIMT), zu erreichen mindestens 3 Bilder auf einen Abschnitt der A. carotis communis, die frei von Plaque ist, und ist 1 cm proximal des Bulbus. Erreichen alle Bilder mit der Spitze der R-Welle des EKG als dies entspricht der ventrikulären Diastole und der Punkt, an dem das Schiff unter der geringsten Menge an Scherspannung. </li><li> Wiederholen Sie die Schritte 3.4 und 3.5 in der linken Halsschlagader. Bitten Sie den Teilnehmer, den Kopf leicht nach rechts für diese Messung zu kippen. </li><li> Um zur Verwirklichung klare Bilder der nahen und fernen Wand zu unterstützen, sorgfältig während der Beurteilung manipulieren die Ultraschallsonde, um sicherzustellen, das Gefäß senkrecht zum Ultraschallstrahl. Erreichen dies durch subtile Änderung der Neigung und Drehung des Wandlers zusammen mit kleineren Anpassungen an den Druck, der von proximal nach distal Winkel (heel-toe-Bewegung) der Sonde aufgetragen. </li><li> Führen Sie die Analyse von Bildern offline mit Artery-Mess-Software (AMS), um die Gefäß boun erkennendäre nach den Linien Pignoli. Laden Sie das Bild zu analysieren, und dann mit dem Cursor, erstellen Sie eine Region von Interesse in einem Abschnitt des Schiffes, die frei von Plaque ist. Klicken Sie auf &quot;erkennen&quot; auf der Software und notieren Sie die auf dem Bildschirm für cIMT und Lumendurchmesser angezeigten Werte. HINWEIS: genaue Messwerte kann nur von der gegenüberliegenden Wand erhalten werden, so ignorieren Lesungen aus der nahe Wand. </li><li> Nehmen drei Messungen für jede Seite, und dann den Mittelwert bilden, um den mittleren cIMT für den rechten und linken Halsschlagadern getrennt zu geben. Weitere Durchschnitt der CIMT von beiden Seiten, um die Gesamt cIMT geben. HINWEIS: Die intra-observer Variationskoeffizient für diese Technik in unserem Labor beträgt 9%. </li><li> Messung durchführen jeder Plaque mit der gleichen Software durch manuelle Markieren Sie die Plakette mit dem Cursor. Klicken Sie auf &quot;klassifizieren&quot; auf AMS, um die Echogenität des Plaque und Besoldungsgruppe berechnet automatisch entsprechend seiner Anfälligkeit für Bruch. Klickenim Fenster &quot;Plaque Eigenschaften&quot;, um diese Informationen zu sehen. </li></ol>

Die Autoren erklären, dass sie keine konkurrierenden finanziellen Interessen haben.

Die vorliegende Manuskript Details der Methodologie aus mehreren getrennten Beurteilung der Gefäßfunktion und die Morphologie der in der peripheren Gefäßen durchgeführt werden kann. Jede Beurteilung informiert über die verschiedenen Stadien der Atherosklerose, und helfen, den Kreisprofil verschiedener Gefäßterritorien zu charakterisieren. Wir haben bereits berichtet, dass mikrovaskuläre endotheliale Funktion ist von großer Gefäße Endothelfunktion unabhängig in einer Population von Patienten mit rheumatoider Arthritis ein erhöhtes Risiko für CVD-39. Darüber hinaus waren die Beurteilungen der Gefäßfunktion und Morphologie auch unabhängig voneinander in der gleichen Gruppe von Patienten und bei Patienten mit CVD 40,41. Diese Ergebnisse können durch die Heterogenität der Struktur und Funktion von Endothelzellen in verschiedenen Gefäßgebieten 38, wie auch eine mögliche Zeitverzögerung für die Progression von funktionellen Veränderungen morphologischen erklärtAnomalien in dem Behälter. Eine Studie von Hashimoto und Kollegen 42 ergab, dass mehrere Teilnehmer mit Arteriosklerose hatte MKS Werte als normal cIMT Werte verringert. Diese Ergebnisse legen nahe, dass die Prüfung der subklinischen Atherosklerose mit einer Vielzahl von Methoden ist wichtig, um die globalen Auswirkungen der CVD entziffern. Die Bedeutung der Mikrogefäßsystems in Gesundheit und Krankheit gewinnt immer mehr Aufmerksamkeit in der medizinischen Literatur. Die Mikrogefäße bilden eine viel größere Oberfläche als große Schiffe so dass sie bedeutende Ziele für Schäden, die durch schädliche Reize 43. Es wurde vermutet, dass die Mikrogefäße könnte die primäre Quelle von Entzündungsmediatoren, die das Endothel der größeren Gefäßen, die zu Bildung von Läsionen 43 einzudringen. Bei Typ-II-Diabetikern, die mikrovaskuläre Krankheit geht häufig große Gefäßkrankheit 44 und in anderen Populationen mit erhöhtem Risiko für CVD wie rheumatoide Arthritis, Interventionen, die das CVD-Risiko zu verringern verbessern mikrovaskuläre, aber nicht großen Behälter, Endothelfunktion 45,46. Zusammengenommen deuten diese Ergebnisse, dass die Prüfung der mikrovaskulären Funktion kann in das Verständnis der komplexen Mechanismen, die Arteriosklerose initiieren helfen. In der vorliegenden Arbeit wurde Beurteilung der mikrovaskulären endothelialen Funktion erfolgt mit LDI mit Iontophorese von vasoaktiven Substanzen. Mehrere andere Einschätzungen können verwendet werden, um mikrovaskuläre Funktion einschließlich nailfold Kapillaroskopie und Venenverschlussplethysmographie bewerten. Jedoch stellt die früheren Bewertungsinformation nur mikrovaskulärer Morphologie, während die letztere zeitintensiv und in einigen Protokollen invasive durch Verabreichung intra brachialis vasoaktive Mittel 1. Im Gegensatz dazu bietet LDI eine einfache, zeitsparende Ansatz zur mikrovaskulären Durchblutung der Hautblutgefäße als Reaktion auf vasoaktive Mittel zu messen, die verabreicht werden nicht INVAShungsweise. Die Messung der Durchblutung der Haut hat eine breite Akzeptanz in der Literatur durch seine einfache Zugänglichkeit und starke Korrelation mit etablierten CVD 12 gewonnen. Ferner liegt der Vorteil der LDI über andere Dopplertechniken wie Laser-Doppler-Flussmessung ist, dass sie gleichzeitig scannen mehreren Punkten in einem bestimmten Bereich und kann daher entfallen zellulären Bewegungsartefakte und räumliche Unterschiede der Hautdurchblutung, von denen beide die Wirkung Perfusion des Schiffes 47,48. Trotz der offensichtlichen Vorteile der Iontophorese ist es wichtig anzumerken, dass der Strom induzierte Vasodilatation (CIV) von Iontophorese kann die Wirkung der vasoaktiven Mittel insbesondere an der Kathode zu verwechseln. Die Auswahl des Trägers für den Wirkstofftransport könnte dabei helfen, diesen Effekt zu reduzieren, das mit 0,5% Natriumchlorid bei der Beschränkung CIV 18 (wie in dem aktuellen Protokoll verwendet). Darüber hinaus verwenden einen größeren Durchmesser Kammern und eine geringe elektrische AktuellMieten (wie im aktuellen Protokoll verwendet) alle dazu beitragen, CIV 18 zu reduzieren. Die Verwendung eines Steuer Website wurde auch empfohlen 12. Biologische und Verhaltensfaktoren kann auch Auswirkungen auf die Zuverlässigkeit und Reproduzierbarkeit des Verfahrens. Beispielsweise zirkadiane Variation und Rauchen wurde gezeigt, daß mikrovaskuläre endotheliale Funktion 49,50 beeinflussen. Strenge Aufnahmebedingungen müssen, um genaue Ergebnisse zu erhalten halten werden und hat Richtlinien sollten bei der Gestaltung Protokolle 12 folgen. Die Messung der MKS und GTN-vermittelten Dilatation informiert über endotheliale Dysfunktion in der großen Blutgefäße, und ist weit verbreitet in nicht-invasiven Gefäßforschung. Die MKS-Technik liefert Ersatzinformation auf die NO Bioverfügbarkeit und ist ein nützlicher prognostischer Marker kardialer Ereignisse bei verschiedenen klinischen Populationen 7-9. In der vorliegenden Arbeit legte die Protokoll-Konten für viele der Faktoren,Für ausreichende Stimulation von NO-vermittelte Vasodilatation 25 notwendig. Zum Beispiel wurde die Okklusionsmanschette distal zum Ultraschallsonde gelegt und um das Handgelenk 27, die Dauer der Ischämie wurde 5 min 26 sowie ausreichend Zeit durfte die &quot;wahren&quot; Spitzendurchmesser aufnehmen folgenden reaktiven Hyperämie 28. Leider hat das Protokoll nicht enthalten Charakterisierung des Scherspannungsprofil wie die automatische Kantenerkennung Software nicht gleichzeitige Aufnahme von Gefäßdurchmesser und Pulswellengeschwindigkeit Signals ermöglichen. Die Berechnung der Scherbeanspruchung ist wesentlich für eine genaue Messung der FMD 26 und empfahlen, daß, soweit möglich, Gefäßforschungsgruppen benutzen Software, die solche Messungen durchgeführt werden können. Beurteilungen der FMD und GTN-vermittelte Dilatation sind auch anfällig für Umwelt und biologische Veränderungen 24, wie kleine Änderungen in der Gefäßdurchmesserentlocken großen MKS / GTN Antworten. Beispielsweise umfassen typische FMD Werte für gesunde Teilnehmer reichen von 5-10% 51, die zu einer 0,25 entspricht - 0.5mm Änderung arteriellen Durchmesser einer Arterie mit einem Durchmesser von 5 mm. Angesichts dieser kleine Änderungen an der Arteriendurchmesser muss sorgfältig auf technische und biologische Faktoren, die die Messung beeinflussen kann bezahlt werden. In der Tat kann die MKS durch eine Vielzahl von biologischen und Verhaltensfaktoren wie sympathische Aktivierung 52, Schlafentzug 53, 54 Koffeinkonsum, Rauchen 55 beeinflusst werden, antioxidative Therapie 56 und die Tageszeit 57. Dementsprechend ist es wichtig, diese Faktoren, die durch Verwendung von Information aus etablierten Richtlinien 24,25 steuern. Bewertung fortgeschrittener aber subklinischen Atherosklerose wurde mit cIMT getan. Die Technik wurde in mehreren klinischen Populationen genutzt worden und bietet allen Einzelheiten auf die arterielle structure gegenüber anspruchsvolleren Verfahren wie Kernspintomographie 34. Wie bei den anderen Kreislauf-Techniken, die Messung der cIMT erfordert eine sorgfältige Prüfung der technischen Faktoren, welche die Messung beeinträchtigen können. Im Allgemeinen sollten cIMT an Orten aufbewahren, Plaque durchgeführt werden, in der hinteren Wand des Halsschlagader. Ähnlich wie bei der MKS, Messung cIMT erfolgt mit hochauflösenden Sonographie und so ist sehr benutzerabhängig. Berichtet, Variationskoeffizient (CofV) Bereich von 2,4 bis 18,3% 58, während für die Maul- und Klauenseuche ist 1-84% 59. Selbst wenn jedoch beide Techniken durch kompetente Ultraschallspezialisten mit externen Faktoren gut kontrollierten durchgeführt werden, besteht ein hoher CofV 58,60,61. Ein Grund dafür könnte sein, dass die Analyse der Gefäßgrenzen werden mit manuellen Methoden 60,61 durchgeführt. Eine solche Analyse kann die Zuverlässigkeit als Bildartefakten wie falsche Grenzen, Lärm von der ultraso reduzierenund Signal und Verzerrung der Gefäße Interpretation des Bildes 22 zu beeinflussen. Jüngste Entwicklungen in der kontinuierlichen automatischen Kantenerkennungssoftware haben die Erkennung von Gefäßwand Grenzen 21,22 stark verbessert. In der vorliegenden Studie wurde die VIA-Software verwendet, um die Oberarmarterie Durchmesser messen, während AMS wurde verwendet, um cIMT erkennen. Die Verwendung dieser Software reduziert Operator abhängig, jedoch in dem Fall von AMS, ein gewisses Maß an Bedien noch in Situationen zur Verfügung, wo die Bildqualität schlechter 62 sein. Laboratorien, die automatische Kantenerkennung Software verwenden in der Regel dazu neigen, niedrige CofV 58,63,64 haben, so sollte es das Ziel aller Gefäßforschungslabors, um automatisierte Messung der Gefäßgrenzen, um die Genauigkeit der Ergebnisse sicherzustellen, übernehmen können. Es ist auch ratsam, Ergebnisse der Reproduzierbarkeit Studien für spezifische Protokolle Bericht bei der Veröffentlichung von Studienergebnissen. <p class = &quot;jove_content&quot;&gt; Obwohl Beurteilungen der Gefäßfunktion werden routinemäßig in der klinischen Forschung, ist eine Einschränkung der Techniken, die Normwerte für LDI mit Iontophorese und FMD nicht existieren. Es ist daher wichtig, dass gesunde Alter und Geschlecht passenden Kontrollgruppen untersucht, um Ergebnisse mit der Testgruppe zu vergleichen. Obwohl diese Techniken in Verbindung mit einer schlechten Prognose in einer Vielzahl von Populationen mit Nachweis der CVD 6-9, gibt es immer noch ein Mangel an Studien, die den Zusammenhang zwischen schlechter Endothelfunktion und negativen kardiovaskulären Auswirkungen wie Herzinfarkt und Schlaganfall untersucht haben. Weitere prospektive Studien sind erforderlich, um diese Bedenken auszuräumen. Eine weitere Einschränkung ist die Verwendung von menschlichen Operatoren, um die Beurteilungen durchführen und die Analyse durchzuführen. Dies stellt eine potentielle Quelle der Befangenheit; dies kann jedoch durch Blendung der Fahrer den Ergebnissen oder zu gewährleisten, daß der Leser sich von dem Betreiber begrenzt werden. Esist auch wichtig, um sicherzustellen, dass der Leser nach einem standardisierten Protokoll für die Datenanalyse, so dass alle Daten konsistent analysiert. Zusammenfassend stellt die vorliegende Manuskript detaillierte Informationen zu den methodischen Schritte notwendig, um Bewertungen von Mikrogefäß und großes Gefäß Endothelfunktion sowie vaskuläre Morphologie des peripheren Blutkreislauf erfolgreich durchzuführen. Wenn sie zusammen verwendet, die Einschätzungen stellen globale Informationen über die verschiedenen Stadien der Atherosklerose. Weitere prospektive Studien, die das Potenzial diagnostische Rolle dieser Techniken sind gerechtfertigt.

Das Endothel ist die innerste Auskleidung des Gefäßsystems und bei der Aufrechterhaltung der vaskulären Homöostase über die Regulierung einer Vielzahl von vasoaktiven Prozessen beteiligt. Störung auf diese Verfahren kann das Schiff zu Arteriosklerose begünstigen und das Risiko für Herz-Kreislauf-Erkrankungen (CVD) 1 zu erhöhen. Periphere Endothelfunktion ist ein guter Indikator der frühen Abnormalitäten in der Gefäßwand 2. Darüber hinaus Maßnahmen der peripheren Endothelfunktion wurde gezeigt, dass koronaren Endothelfunktion 3-5 reflektieren, und als solche sind als gute Prädiktoren für kardiovaskuläre Erkrankungen 6-9 betrachtet. Dies ist vielleicht nicht verwunderlich, da die Atherosklerose ist nun allgemein sehr beliebt, um eine systemische Erkrankung 10 sein. Die Bewertung der peripheren Endothelfunktion der Regel quantifizieren die gefäßerweiternde Reaktion des Schiffes auf einen spezifischen Stimulus, mit einer Dämpfung des säumigen Antwort Hinweis auf EndothelzellenDysfunktion 11 und kann in verschiedenen Gefäßbetten gemessen werden. Die Bewertung der fortschrittlichen Strukturveränderungen im Behälter kann durch Ultraschalluntersuchung der Intima-Media-Dicke charakterisiert werden. In der Mikrozirkulation, können Laser-Doppler-Flussmessung (LDF) und Laser-Doppler-Bildgebung (LDI) mit Iontophorese von gefäßerweiternden Agonisten nützliche Informationen über die mikrovaskuläre Perfusion 12 liefern. Beide Techniken messen die Doppler-Verschiebung von sich bewegenden roten Blutkörperchen die durch Streulicht. Perfusion wird als Blutfluss statt Blutfluss (ml / min) dargestellt ist, mit Blutflusses reflektiert durchschnittlichen roten Blutzellgeschwindigkeit und Konzentration. Die Messung der Blutfluss linear mit der tatsächlichen Blutfluss 13 verbunden. Die Beurteilung der LDI bietet erhebliche Vorteile gegenüber LDF, denn im Gegensatz zu LDF, LDI kann über ein riesiges Gebiet zu scannen was einem Anteil von Heterogenität in der Durchblutung der Haut und die Erhöhung der Reproduzierbarkeit der Technik12. Der Reiz für die Erhöhung des Blutflusses während der LDI durch Iontophorese Vasodilator Agonisten Acetylcholin (ACh) und Natriumnitroprussid (SNP), die Endothel-abhängige und Endothel-unabhängige Funktion zu beurteilen bzw. in die Haut mit Hilfe eines schwachen elektrischen Strom 14 vorgesehen. Sobald durch die Haut bindet ACh Zell Muscarinrezeptoren Lösen der Vasodilatator Stickstoffmonoxid (NO) Endothelzellen. Die Verwendung von SNP aktiviert direkt glatten Muskelzellrezeptoren für maximale Vasodilatation des Gefäßes und Prüfung von glatten Muskelzellen Integrität 15 ermöglichen. Es besteht eine gewisse Unsicherheit darüber, ob ACh-vermittelten Dilatation beinhaltet NO überhaupt, wie ACh können nicht NO Wege wie Cyclooxygenase-vermittelte Signalwege 12 zu stimulieren. Dennoch haben wir bereits berichtet, dass SNP ACh und Antworten sind in Patientengruppen mit erhöhtem Risiko für CVD 16 beeinträchtigt und dass Übung Interventionen bekannt, KEINE b verbessernioactivity auch verbessern ACh-vermittelte Blutfluss mit LDI 17. Das Fahrzeug für den Transport der Wirkstoffe in die Haut Mikrogefäße enthalten oft Natriumchlorid oder VE-Wasser 18,19. Mikrovaskuläre endotheliale Funktion kann über verschiedene Ansätze, mit kutanen Gefäß Leitfähigkeit quantifiziert werden - ein Produkt des Flusses geteilt durch arteriellen Druck, in Studien eingesetzt, wenn der Blutdruck kann sich über ändern Sie die Studiendauer (dh während des Trainings oder antihypertensive Behandlung) 12. Eine andere häufig verwendete Quantifizierung ist es, die Fläche unter der Kurve für den Blutfluss berechnen oder drücken die prozentuale Erhöhung der Fluss von der Grundlinie. Es ist wichtig zu beachten, dass es keine festgelegten Richtlinien für die Präsentation von Daten, aber Ermittler sollten einen Ansatz, der eine gute Reproduzierbarkeit zeigt zu nutzen. In der großen Gefäße, sind flussvermittelte Dilatation (FMD) und Glyceryl-Trinitrat vermittelten Dilatation (ATA) zu beurteilen, durchgeführts Endothel-abhängige und Endothel-unabhängige Funktion bzw. 20. FMD wird typischerweise in der Oberarmarterie, wo eine Manschette verwendet wird, um den arteriellen Blutstrom für 5 min durchgeführt zu verschließen; Freigabe der Manschette bewirkt eine plötzliche Erhöhung der Durchblutung (reaktive Hyperämie) durch die Brachialarterie was schubspannungsabhängige Dilatation des Gefäßes. Die Baseline-und Post-Manschette Release Durchmesser werden durch Ultraschall-Bildgebung des Schiffes mit anschließender Beurteilung der Gefäßdurchmesser quantifiziert geführt manuell 20 oder mit automatisierten Kantenerkennungssoftware 21,22. Der Einsatz von GTN hilft zu bestimmen, ob Abnormalitäten in Vasodilatation auf einen Verlust an Muskelzellintegrität glatte oder beeinträchtigter Freisetzung von NO aus Endothelzellen 23 sind. Maul- und Klauenseuche und GTN werden als die prozentuale Erhöhung der Post-Stimulus-Gefäßdurchmesser relativ zur Grundlinie Durchmesser ausgedrückt. Die richtige Einschätzung der MKS erfordert eine Reihe vonwichtige Überlegungen im Studienprotokoll 24,25. Die Dauer der Okklusion Manschette sorgfältig zeitlich abgestimmt werden; 5 min von Manschettenverschluss reicht für NO-vermittelten Dilatation Weile Manschette Okklusion führt zu nicht-NO-vermittelten Dilatation 26. Ähnlich Platzierung der Okklusionsmanschette um das Handgelenk und distal von der Ultraschallsonde überwiegend ruft NO-vermittelte Dilatation, während Manschette bei am Oberarm und proximal zur Sonde nur teilweise stimuliert NO 27. Es ist auch wichtig, um Spitzen Dilatation folgenden Manschettenentleerung über einen längeren Zeitraum, da die Messung der Spitzendurchmesser innerhalb der ersten 60 Sekunden nach Manschettenentleerung um 25 MKS unterschätzen messen - 40% 28. Tatsächlich ist ein Zeitraum von 180 sec Wahrscheinlichkeit der Erfassung wahren Spitzendurchmesser ausreichend zu sein, wobei die meisten Spitzenwerte innerhalb der ersten 120 s 28 auftritt. Die Anregung für MKS beinhaltens die Produktion von Scherspannung, die spezifischen endothelialen Rezeptoren aktiviert, um die NO 29 freizugeben. Jedoch kann Schubspannung auch aktivieren, mehrere andere vasoaktiven Faktoren (von denen einige Vasokonstriktion verursachen) 30, so dass es unerlässlich, dass die hervorgerufenen Scherbeanspruchung Reiz spiegelt Vasodilatation von NO Pfade 26. Es ist auch wichtig, um die Scherbeanspruchung Stimulus während FMD ausmachen, mit der Berechnung der Schergeschwindigkeit (Geschwindigkeit / Durchmesser) als geeignetes Maß für die Scherbeanspruchung dienen, aber nicht notwendigerweise Reflexionsspitzenstrom 31. Neueste physiologischen Empfehlungen legen nahe, dass die Schubspannung Profil sollte immer gekennzeichnet werden, wenn Ultraschallsysteme ermöglichen die gleichzeitige Messung der Pulswellengeschwindigkeit und aktive B-Bild im Duplex-Modus 25. Beurteilung der Halsschlagadern mit B-Mode-Ultraschall kann Informationen über die Intima-Media-Dicke (cIMT) und wurde zum ersten Mal described 1986 von Pignoli und Kollegen 32. Beurteilung cIMT reflektiert Proliferation von glatten Muskelzellen in die Intima des Gefßes und ist ein nützlicher Indikator für klinische Ereignisse in eine Arteriosklerose 33. Carotis Ultraschall oft vorher arteriellen Struktur besser als ähnliche Verfahren (wie der Magnetresonanztomographie oder radiographischen Beurteilung) 34. Außerdem cIMT Mitarbeiter mit einer Reihe von klassischen CVD-Risikofaktoren wie Alter, Bluthochdruck, Fettstoffwechselstörungen und 35. Änderungen an den Wänden der Arteria carotis werden üblicherweise durch eine Reduktion in NO Bioverfügbarkeit, die Entzündung in dem Behälter 36 fördert initiiert. Die A. carotis communis, Arteria carotis interna und Karotisbifurkation Punkte können verwendet werden, um festzustellen, cIMT, da jede Website kann in ähnlicher Weise vorherzusagen, kardiovaskuläre Ereignisse 37. In dem vorliegenden Manuskript, bieten wir detaillierte Methodik zur Bewertung der microvascular Endothelfunktion (LDI mit Iontophorese), großes Gefäß Endothelfunktion (MKS und GTN) und vaskuläre Morphologie (cIMT). Atherosklerose ist ein mehrstufiges Verfahren, das mit einer endothelialen Dysfunktion beginnt und endet mit der Brenn atherosklerotischen Läsionen in den großen Arterien. Die Begründung für die Wahl der oben genannten Einschätzungen ist, dass sie die verschiedenen Stadien der Atherosklerose zu reflektieren und dabei helfen, die Heterogenität des Gefäßsystems 38 zu berücksichtigen. Weiterhin haben wir früher gezeigt haben, daß in einer Population von Patienten mit einem erhöhten Risiko für CVD war mikrovaskulären endothelialen Funktion von großen Gefäß Endothelfunktion 39 unabhängig und funktionellen Bewertungen waren strukturelle Beurteilung der Vaskulatur 40 unabhängig. Daher kann die Gesamtbeurteilung des Gefäßsystems zu helfen, die verschiedenen Stadien der Atherosklerose zu entziffern.

<table><tbody><tr><td>Laser Doppler Imager</td><td>Moor Instruments, Devon, UK</td><td>moorLDI2</td><td></td></tr><tr><td>Iontophorese Controller</td><td>Moor Instruments, Devon, UK</td><td>MIC2</td><td></td></tr><tr><td>Miochol-E 20 mg</td><td>Novartis UK</td><td>Vom Arzt verschrieben</td><td>Acetylcholin für endothelabhängige Funktion</td></tr><tr><td>Nitroprussiat Fides 50 mg</td><td>Rottapharm Spanien</td><td>Vom Arzt</td> <td>verschriebenNatriumnitroprussid für endothelunabhängige Funktion</td></tr><tr><td>Doppler Ultraschall</td><td>Siemens PLC, Camberley UK</td><td>Accuson Antares</td><td></td></tr><tr><td>Glyceryltrinitrat 500 mcg</td><td>Alpharma, Barnstaple, UK</td><td>Vom Arzt</td><td></td> verschrieben</tr></tbody></table>

einen methodischen ansatz, um nicht-invasive assessments der gefäßfunktion und morphologie

A Methodological Approach to Non-invasive Assessments of Vascular Function and Morphology

Das Endothel ist die innerste Auskleidung des Gefäßsystems und ist an der Aufrechterhaltung der Gefäßhomöostase beteiligt. Eine Schädigung des Endothels kann das Gefäß für Arteriosklerose prädisponieren und das Risiko für Herz-Kreislauf-Erkrankungen erhöhen. Die Beurteilung der peripheren Endothelfunktion ist ein guter Indikator für frühe Anomalien in der Gefäßwand und korreliert gut mit der Beurteilung der koronaren Endothelfunktion. Das vorliegende Manuskript beschreibt die wichtigen methodischen Schritte, die für die Beurteilung der mikrovaskulären Endothelfunktion mittels Laser-Doppler-Bildgebung mit Iontophorese, der Endothelfunktion großer Gefäße mittels flussvermittelter Dilatation und der Karotis-Atherosklerose mittels Ultraschall der Halsschlagader erforderlich sind. Es wird auch eine Diskussion über die methodischen Überlegungen für jede der Techniken vorgestellt und Empfehlungen für zukünftige Forschung gegeben.

Laser-Doppler-Imaging mit Iontophorese Die mittleren Blutflusseinheiten nach den Laser-Doppler-Imaging-Scans von einem gesunden mittleren Alters weiblichen frei von CVD sind in Abbildung 1 dargestellt. Es gab eine deutliche Zunahme der mittleren Blutfluss sowohl für ACh und SNP. Ausgangsblutfluss betrug 48 Perfusion Einheiten für ACh und 67 Perfusion Einheiten für SNP. Spitzenblutfluss in Reaktion auf ACh war 455 Perfusion Einheiten und für SNP 446 Perfusion Einheiten. Dies ergab eine Zunahme 831% und 566% in Perfusion (Vergleich zum Ausgangswert) für Acetylcholin und SNP auf. Die Werte, die vorgesehen sind, sind hoch abhängig von der zur Behandlung von Hautblutflusses zusammen mit Umweltfaktoren zu untersuchen Ausrüstung. Flussvermittelte Dilatation und Glyceroltrinitrat-vermittelten Dilatation Abbildung 2 zeigt die Grundlinie und der Spitzendurchmesser für Maul- und Klauenseuche und GTN Einschätzungen von einem gesunden jungen männlichen frei von CVD. DieBasisdurchmesser der Oberarmarterie war 3,0 mm für die Maul- und Klauenseuche und GTN Einschätzungen. Der Spitzendurchmesser in der FMD Test betrug 3,3 mm, während für die GTN Beurteilung war 3,9 mm, was einer Steigerung von 10 bis 30% des Blutflusses entspricht jeweils, bezogen auf die Grundlinie. Intima-Media-Dicke Abbildung 3 zeigt die linke Halsschlagader eines gesunden Menschen. Berechnung der cIMT Werte erfolgt mit automatisierten Kantenerkennungssoftware. Der CIMT in der gegenüberliegenden Wand war 0.83mm und der Lumendurchmesser des Schiffes war 7.71mm. Die Ergebnisse für die rechte Halsschlagader in der gleichen Person waren 0,87 mm für cIMT und 7.80mm der Lumendurchmesser. Beim Mitteln das Lesen beider Seiten cIMT war 0,85 mm, und Lumendurchmesser 7.76mm. <img alt="Figur 1" src="/files/ftp_upload/52339/52339fig1highres.jpg" /> Fig. 1 Changes Blutfluss in Reaktion auf Laser-Doppler-Bildgebung mit Iontophorese. Nach Abschluss der Grundlinie zu scannen, um Ausgangsblutfluss zu messen, 10 Scans (Scan 1 bis 10) mit Iontophorese von Acetylcholin und SNP mit einer 30 &amp; mgr; a elektrischen Strom durchgeführt. Nach Iontophorese wurden 2 Recovery-Scans durchgeführt. ACh = Acetylcholin; SNP = Natriumnitroprussid. <img alt="Abbildung 2" src="/files/ftp_upload/52339/52339fig2highres.jpg" /> Abbildung 2. Durchfluss-vermittelte und Glyceroltrinitrat-vermittelten Dilatation. Die Grafik zeigt die Basisdurchmesser und einen deutlichen Anstieg der Spitzendurchmesser nach der Anwendung der flussvermittelte und Glyceroltrinitrat-vermittelten Dilatation Reize. FMD = flussvermittelte Dilatation; GTN = Glyceroltrinitrat-vermittelten Dilatation. <img alt="Figur 3" src="/files/ftp_upload/52339/52339fig3highres.jpg" /><br/&gt; Abbildung 3. Ultraschalluntersuchung der Halsschlagader. Eine Ultraschalluntersuchung der linken Halsschlagader mit einem Bereich von Interesse gezeigt platziert 1cm aus der Halsschlagkolben (Verzweigungspunkt). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52339/52339fig3large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieses Bild anzuzeigen .</a>

Der vorliegende Artikel beschreibt die methodischen Überlegungen für mehrere nicht-invasive Beurteilungen der Gefäßfunktion und -morphologie, die in der medizinischen Forschung häufig zur Beurteilung verschiedener Stadien der Atherosklerose verwendet werden.

Einen methodischen Ansatz, um Nicht-invasive Assessments der Gefäßfunktion und Morphologie

The endothelium is the innermost lining of the vasculature and is involved in the maintenance of vascular homeostasis.  Damage to the endothelium may ...

Das übergeordnete Ziel des folgenden Experiments besteht darin, subklinische Arteriosklerose in verschiedenen Gefäßgebieten zu untersuchen. Zunächst wird die Laser-Doppler-Bildgebung in Kombination mit der Iontophorese vasodilatierender Arzneimittel verwendet, um die endotheliale Funktion der Mikrogefäße zu prüfen. Anschließend kommen die flussvermittelte Dilatation und die Glycerintrinitrat-vermittelte Dilatation zum Einsatz, um die endotheliale Funktion großer Gefäße zu untersuchen.Zuletzt wird die Dicke der intimen Media der Arteria carotis auf fortgeschrittene morphologische Veränderungen analysiert. Die Ergebnisse zeigen Veränderungen der endothelialen Funktion von Mikrogefäßen und großen Gefäßen als Reaktion auf eine Stimulierung. Zusätzlich wird auch die Gefäßwand der Arteria carotis charakterisiert.Mithilfe dieser Methoden lassen sich zentrale Fragen auf dem Gebiet der kardiovaskulären Physiologie beantworten, beispielsweise die Auswirkung von Interventionen auf die Gefäßgesundheit bei verschiedenen klinischen Populationen. Bereiten Sie zunächst den Laser-Doppler-Imager vor. Lassen Sie ihn eine halbe Stunde oder länger aufwärmen.Kalibrieren Sie das Gerät und bereiten Sie die Software für die Nutzung vor. Bereiten Sie außerdem die Lösungen in der Plexiglas-Kammer vor. Bringen Sie dann den Studienteilnehmer zum Sitz des Abbildungsgeräts, wobei der Teilnehmer leicht zurückgelehnt auf einem festen Kissen sitzt, einen Ellbogen im 90-Grad-Winkel gebeugt hat und der entsprechende Unterarm bequem auf einer schwarzen Matte aufliegt.Stellen Sie sicher, dass der Unterarm auf dem Kissen fixiert wird, damit er auf der Matte an Ort und Stelle bleibt. Bereiten Sie als Nächstes die Plexiglas-Kammern vor. Befestigen Sie zunächst die Stecker an der Iontophorese-Steuerungseinheit.Dann befestigen Sie die Kammer mit Acetylcholin an der anodalen Anschlussstelle und die Kammer mit Natriumnitroprussid an der kathodalen Anschlussstelle. Anschließend verbinden Sie die beiden Kammern mit der Volarfläche des fixierten Unterarms mithilfe von doppelseitigen Klebepads. Zudem decken Sie die Kammern mit 32 mm großen Deckgläsern ab.Öffnen Sie nun in der Scanner-Software das Scanner-Einstellungsfenster in der oberen linken Ecke des Startbildschirms. Wählen Sie den Reiter „Bildscan“ und bestimmen Sie den zu scannenden Bereich, indem Sie die Markierungstaste in der unteren rechten Ecke des Fensters anklicken. Positionieren Sie den Scannerkopf gegebenenfalls sorgfältig, damit der gewünschte Bereich genau erfasst wird.Ändern Sie den interessierenden Bereich manuell, indem Sie die Größe des Abtastbereichs im Abschnitt „Scan-Bereich“ nahe der oberen Fensterkante eingeben. Stellen Sie sicher, dass der interessierende Bereich den Durchmesser jeder Iontophoresekammer umfasst und groß genug ist, um die Variabilität der Hautdurchblutung zu begrenzen. Der Scan kann nun nach Abschluss der Vorbereitung gestartet werden.Verwenden Sie die LDI-Bildanalyse-Software, um die Datendatei zu öffnen. Wählen Sie im Hauptfenster die Option Bildüberprüfung aus.Markieren Sie nun einen interessierenden Bereich um die Außenabmessungen jeder Kammer. Klicken Sie dann auf das Statistik-Symbol, und eine Spalte mit den medianen Perfusionseinheiten für jede Kammer wird aus den 12 Scans jeder Kammer angezeigt. Notieren Sie sich die Ausgangs-Perfusionseinheit und die höchste Perfusionseinheit.Beginnen Sie mit dem Einrichten des Doppler-Ultraschallgeräts und der Software für die Live-Bildanalyse von Gefäßen. Stellen Sie anschließend dem Teilnehmer die Einrichtung vor und lassen Sie den Teilnehmer bequem auf dem Stuhl entspannen. Bitten Sie den Probanden, jeglichen Schmuck vom Handgelenk zu entfernen, und reichen Sie ein Kissen, auf dem der Arm bequem ruhen kann.Dann legen Sie eine Blutdruckmanschette um das Handgelenk des Teilnehmers. Diese muss so still wie möglich gehalten werden. Befestigen Sie anschließend den linearen Wandlerkopf des Geräts an einer stereotaktischen Klammer.Dann ziehen Sie die Klemme am Wandler fest. Danach rufen Sie das Menü am Ultraschallgerät auf. Stellen Sie die Abtastfrequenz auf fünf Megahertz ein und die Tiefe auf etwa 3,5 Zentimeter.Verwenden Sie nun den Wandler, um mit einer Längsabtastung die Arteria brachialis zu lokalisieren. Diese befindet sich gewöhnlich zwei bis zehn Zentimeter oberhalb der Ellenbeuge. Stellen Sie anschließend die Verstärkung so ein, dass die Nahe- und Fernwand des Gefäßes symmetrisch hell erscheinen.Die Farbdopplersonographie zeigt das arterielle Blut, das pulsierend durch die Arterie fließt, wodurch diese von eventuellen Venen unterschieden werden kann. Stellen Sie die Ansicht der Arteria brachialis so ein, dass sie klar und horizontal auf dem Bildschirm zu sehen ist. Sie sollte in der Software als zwei solide parallele Linien erscheinen, die durch einen klaren Bereich zwischen den Linien getrennt sind.Markieren Sie mithilfe des Cursors den interessierenden Bereich, und die Aufnahme erfolgt automatisch über die Software. Die Anpassung des Gefäßdurchmessers des Bereichs kann über die X- und Y-Tasten auf dem Hauptbildschirm vorgenommen werden. Klicken Sie nun auf die Schaltfläche „Start“ und nehmen Sie die Arterie zwei Minuten lang auf.Drücken Sie dann „Aufpumpen“, um fünf Minuten lang aufzuzeichnen, während die Blutdruckmanschette auf systolische Drücke aufgepumpt wird. Nach dem Entleeren der Manschette sollte der Blutfluss zur Hand durch die Manschette unterbunden sein. Setzen Sie die Aufzeichnung drei Minuten lang fort.An diesem Punkt wird Hyperämie induziert, was eine durch Stickstoffmonoxid vermittelte Vasodilatation stimuliert. Danach eine 10-minütige Ruhephase einlegen. Als Nächstes die A. brachialis erneut lokalisieren und zwei Minuten lang eine neue Basislinienaufzeichnung des Arteriendurchmessers anfertigen.Bitten Sie nun den Teilnehmer, eine 500-Milligramm-Glyceroltrinitrat-Tablette sublingual einzunehmen, und setzen Sie die Aufzeichnung fünf Minuten lang fort. Nach fünf Minuten sollte die Tablette entfernt werden, und der Teilnehmer ist auf unerwünschte Wirkungen zu überwachen. Bei der Datenanalyse überprüfen Sie unbedingt den Basislinienbereich auf Artefakte und schließen Sie alle Artefakte aus, bevor Sie die verbleibenden Werte mitteln, um den Basisliniendurchmesser zu erhalten.Außerdem sollte während der Analyse der flussvermittelten Dilatation die automatisch erkannte Region der maximalen Dilatation überprüft werden. Falls diese fehlerhaft identifiziert wurde, manuell einen begrenzteren Bereich auswählen, der das Maximum enthält. Für diese Messung sollte die Versuchsperson bequem auf einem Bett mit einem Kissen liegen.Danach die EKG-Ableitungen für eine Grundmessung vorbereiten. Diese an beiden Armen und am linken Knöchel anbringen. Anschließend im Menü die Abtastrate auf 10 Megahertz und die Aufzeichnungstiefe auf drei bis vier Zentimeter einstellen.Danach die Verstärkung wie zuvor einstellen. Bitten Sie nun den Probanden, den Kopf leicht nach links zu drehen, und scannen Sie mit dem linearen Array-Wandler die rechte A. carotis. Suchen Sie nach einem Teilungspunkt im Gefäß, da dieser die Aufspaltung der Arteria carotis communis in die Arteria carotis interna und die Arteria carotis externa zeigt.Scannen Sie die Arteria carotis entlang aller Abschnitte in einer Längsebene. Identifizieren Sie die Arteria carotis communis, interna und externa, falls Plaques sichtbar sind. Speichern Sie die Bilder jetzt.Nehmen Sie mindestens drei Bilder eines Bereichs auf, der frei von Plaques ist und etwa einen Zentimeter vom Karotisbulbus entfernt liegt. Lassen Sie die Versuchsperson ihren Kopf zur anderen Seite drehen und wiederholen Sie den Vorgang, um die linke A. carotis zu dokumentieren. Analysieren Sie die Bilder anschließend offline mithilfe des Arterienmesssoftwarepakets, während Sie die Werte für CIMT und Lumendurchmesser erfassen.Beachten Sie, dass genaue Messungen nahe der Wand nicht möglich sind; analysieren Sie daher nur die Messwerte von der gegenüberliegenden Wand. Die Laser-Doppler-Bildgebung in Kombination mit Iontophorese wurde bei einer gesunden Frau mittleren Alters ohne kardiovaskuläre Erkrankung angewendet. Es zeigte sich ein deutlicher Anstieg des medianen Blutflusses unter beiden Reizen. Der maximale Blutfluss erreichte 455 Perfusions­einheiten für Acetylcholin und 446 Perfusions­einheiten für Natriumnitroprussid. Die durch Fluss vermittelte Dilatation und die durch Glyceroltrinitrat vermittelte Dilatation wurden beide bei einer gesunden jungen Frau ohne kardiovaskuläre Erkrankungen untersucht. Der Test zur flussvermittelten Dilatation erhöhte den Arterien­durchmesser um etwa 10 %, und die durch Glyceroltrinitrat vermittelte Dilatation erhöhte den Arterien­durchmesser um etwa 30 %. Die Dicke der intimomedialen Schicht der Arteria carotis wurde in der linken Arteria carotis eines gesunden Individuums untersucht.Der CIMT-Wert für die Fernwand betrug 0,83 Millimeter und der Lumendurchmesser 7,71 Millimeter. Die gleichen Messungen an der rechten A. carotis betrugen nach deren Entwicklung 0,87 Millimeter und 7,8 Millimeter. Diese Techniken ebneten Forschern der kardiovaskulären Physiologie den Weg, um die Mechanismen kardiovaskulärer Erkrankungen in verschiedenen klinischen Populationen zu verstehen.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Kapillaroskopie ist eine nicht-invasive, relativ kostengünstige Methode zur direkten Visualisierung der Mikrozirkulation. Der Unterarm Blutfluss Technik bietet akzeptiert nicht-invasive Maßnahmen der endothelialen Funktion.

Non-invasive Beurteilung der mikrovaskulären und Endothelfunktion

Die Pulswellengeschwindigkeit (PWV) Messung beurteilt arteriellen Steifigkeit durch eine Tonometrie-basierte System, das die Geschwindigkeit, mit der arteriellen Druckwelle entlang der arteriellen Baum, in der Regel in etwa der Zeit, die es dauert, diese Welle von der absteigenden Aorta (mit der Halsschlag reisen misst Arterie als Surrogat) an der Oberschenkelarterie. Karotis-Oberschenkel PWV erhöht zwei-bis über die dreifache Lebensdauer Erwachsenen.

Pulswellengeschwindigkeit Testing in der Baltimore Longitudinal Study of Aging

Der Grad der vaskulären Dysfunktion beitragen und physiologischen Mechanismen können bei Patienten mit chronischer Nierenerkrankung durch Messen brachialis flussabhängigen Dilatation Aortapulswellengeschwindigkeit und vaskuläre Endothelzellen-Protein-Expression zu beurteilen.

Beurteilung der Gefäßfunktion bei Patienten mit chronischer Nierenerkrankung

Endotheliale Dysfunktion ist mit zahlreichen Krankheitszuständen verbunden und prädiktiv für unerwünschte kardiovaskuläre Ereignisse bei Menschen. Flussvermittelte Vasodilatation (FMD) ein nicht-invasiven Ultraschall Verfahren zur Bewertung der endothelialen Funktion. Methodische Entscheidungen und Erfahrung des Bedieners können die Ergebnisse beeinflussen. Ein systematischer Ansatz zur Bekämpfung der MKS in Studien am Menschen wird hier diskutiert.

Ultraschall Beurteilung der Endothelial Abhängige Fluss Vasodilatation der Arteria brachialis in der klinischen Forschung

Videomicroscopy Systeme werden verwendet, um die funktionelle Eigenschaften der isolierten Fettgewebe Arteriolen in Reaktion auf physiologische und pharmakologische Stimuli zu untersuchen. Diese Technik kann verwendet werden, zu prüfen, mikrovaskuläre Phänotypen in verschiedenen Fettgewebe Domänen bei übergewichtigen Menschen.

Bewertung der menschlichen Fettgewebe mikrovaskuläre Funktion mit Videomicroscopy

Dieser Artikel beschreibt einen gut etablierten und reproduzierbaren Lektin-Färbungsassay für die gesamten Netzhautpräparate und die Protokolle, die für die quantitative Messung von Gefäßparametern erforderlich sind, die bei proliferativen und nicht-proliferativen Retinopathien häufig verändert sind.

Quantifizierung vaskulärer Parameter in der gesamten Netzhaut von Mäusen mit nicht-proliferativen und proliferativen Retinopathien

Das vorliegende Protokoll beschreibt die Konzepte und die technische Anwendung der tensometrischen Myographentechnik unter Verwendung eines Mehrkammer-Myographensystems bei der experimentellen ex vivo Bewertung der Aortenendothelfunktion der Maus.

Messung der endothelabhängigen Vasorelaxation in der thorakalen Aorta der Maus mittels tensometrischer Kleinvolumenkammermyographie

In diesem Artikel wird ein Schritt-für-Schritt-Protokoll für die Isolierung und funktionelle Bewertung von arteriellen Ästen der menschlichen Nieren vorgestellt, das präklinische Studien für die pharmazeutische Entwicklung erleichtert.

Mehrstufige Mikrodissektion und funktionell-strukturelle Profilierung humaner Nierenarterienäste

Der vorliegende Artikel stellt die Einzelheiten über die Anwendung von Krafttraining verbunden zu Gefäßverschlüssen in IBM-Patienten.

Gefäßverschluss Training für Inclusion Body Myositis: einen neuen therapeutischen Ansatz

Ein Dual-Mode-Imaging-System wurde für die berührungslose Prüfung von Hautgewebe Oxygenierung und vaskuläre Funktion entwickelt.

Dual-Mode-Imaging von Hautgewebe Oxygenation und Gefäßfunktion

Erfahren Sie nicht-invasive Methoden zur Bewertung der Gefäßfunktion und Morphologie bei Atherosklerose-Forschung. Laser-Doppler-Imaging, Fluss-vermittelte Dilatation und Carotis-Intima-Media-Dicke ermöglichen präzise Analysen.

Einen methodischen Ansatz, um Nicht-invasive Assessments der Gefäßfunktion und Morphologie

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