Name: Moderate Pränatale Alkoholexposition und Quantifizierung von Sozialverhalten bei erwachsenen Ratten (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-12-14T14:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 1 s
Description: Lernen Sie die Quantifizierung von Sozialverhalten bei erwachsenen Ratten nach pränataler Alkoholexposition. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung neurologischer Entwicklungsauswirkungen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Unterstützung durch Zuschuss AA019462 an DAH und AA019884 an DDS.

Alle hier und im zugehörigen Video beschriebenen Verfahren wurden von den Institutional Animal Care und Verwenden Ausschüsse des Health Sciences Center und dem Hauptcampus der University of New Mexico zugelassen. 1. Die pränatale Exposition Ethanol <ol><li> Erhalten alle notwendigen Materialien und Chemikalien: Saccharin-Natriumsalz-Hydrat, Proof-Ethanol 190 (95% vol), Perlen Glas Trinkröhrchen, Naturkautschuk weiß # 4 Anschlag ein Loch, 1 &quot;gebogenen Rohren-Kugelschreiber, Papier Herrscher von www gedruckt .vendian.org / mncharity / dir3 / paper_rulers /. </li><li> Erhalten bewährten Erwachsenen Züchter Ratten von einem Händler oder alternative Quelle. Verwenden Long-Evans Züchter für die Methoden und repräsentative Daten in diesem Protokoll vorgestellt. Frauen wiegen 125-150 g und 6-7 Wochen alt bei der Ankunft, dass sie etwa 9-10 Wochen alt zum Zeitpunkt der Zucht sind (Schritt 1.5). Stellen Sie sicher, dass alle potenziellen Dämme Erstgebärenden. Stellen Sie sicher, dass Männer 12Wochen alt bei der Ankunft und 15 Wochen alt zu Beginn des Züchtungsprotokoll. </li><li> Haus die Tiere einzeln in Kunststoffkäfigen bei 22 ° C auf einer Umkehr 12 Stunden hell / dunkel Zeitplan (Licht an 21.00 bis 09.00 h). Zugang zu Lebensmitteln und Leitungswasser ad libitum während der Studie, darunter in allen Trinkgelage. Lassen Sie mindestens 1 Woche für Akklimatisierung an der Anlage, bevor zu Schritt 1.4. </li><li> Erhalten Ausgangskörpergewicht für jeden weiblichen Ratte. </li><li> Werten Sie vor der Schwangerschaft trinken Ebenen bei weiblichen Ratten für 2 Wochen. Führen Sie die Schritte 1.5.1-1.5.6 in Ordnung. <ol><li> An den Tagen 1 und 2 zu füllen ein Trinkröhrchen, das 0,066% Saccharin-Lösung (ohne Ethanol) in Leitungswasser. Zur Quantifizierung Verbrauch befestigen ein Papier Lineal mit mm Genauigkeit auf den Trinkschlauch vor dem Füllen sie. Verwenden Sie diese Methode, wie sie bei der Messung mit einem Gewicht von Röhrchen Ethanolkonsum zu quantifizieren assoziiert reduziert Fehler. Das Rohr wird auf die 20 mm-Marke auf dem Lineal. Beginnen vierstündigen drinking Sitzungen (Schritte 1.5.1-1.5.6 und 1,7) 1 Stunde nach dem Beginn der Dunkelphase (10.00 h), wenn die Aktivität und Trink Ebenen am höchsten sind. </li><li> Am Ende jedes Trinkgelage Quantifizierung des Volumens des Saccharin-Lösung, die verbraucht wurde. Um die Messung zu erleichtern, bestimmen das Volumen der Lösung pro mm auf dem Lineal im Voraus und konvertieren mm bis Bände. Bei den hier empfohlenen Rohren jeweils mm entspricht 0,366 ml. </li><li> An den Tagen 3 und 4 zu füllen ein Rohr mit 2,5% Ethanol (v / v) und 0,066% Saccharin-Lösung in Leitungswasser. Am Ende jeder Sitzung Quantifizierung der Menge an Ethanol-Lösung (Gewicht pro kg Körpergewicht), die verbraucht wurde. </li><li> Am Tag 5 und danach Füllen eines Rohres mit 5% Ethanol (v / v) und 0,066% Saccharin-Lösung in Leitungswasser. Am Ende jeder Sitzung Quantifizierung der Menge an Ethanol-Lösung (Gewicht pro kg Körpergewicht), die verbraucht wurde. </li><li> Nach Abschluss der vor der Schwangerschaft trinken Phase wiegen die Ratten und berechnet den Mittelwert Ethanol consumption und Standardabweichung für die gesamte Gruppe. Ratten, für die bedeuten Verbrauch größer als 1 Standardabweichung über oder unter dem Gruppendurchschnitt aus der Studie, um die Variabilität der freiwilligen Trinken während der Schwangerschaft zu verringern. </li><li> Ordnen die verbleibenden Ratten entweder mit dem Saccharin Steuerung oder PAE solchen Bedingungen, dass die vor der Schwangerschaft Trinkpegel so dicht wie möglich für die zwei Gruppen angepasst ist. </li></ol></li><li> Innerhalb 1-14 Tage Paar jeweils weiblichen Ratten mit einem bewährten männlichen Züchter. Weibliche Ratten haben während der Brutphase nicht Ethanol konsumieren. Schwangerschaft zu bestätigen durch die Anwesenheit von einer vaginalen Stecker, wiegen die weiblichen Ratte und beherbergen sie einzeln. Dies wird als Schwangerschafts Tag 1. Optional definiert, lassen Sie die weiblichen Ratten mit einem männlichen Züchter für bis zu 5 Tage, nach dem Entfernen der Frauen aus der Studie. Hinweis: Da Ethanolkonsum während der Schwangerschaft beginnt um 10:00 h am Tag der Gestation 1 Prüfung auf das Vorhandensein von einer vaginalen Stecker durchgeführt werden sollbis zu diesem Zeitpunkt. </li><li> Bereitzustellen Ethanol oder Saccharin Lösungen während 4 Stunden pro Tag (1.000 bis 1.400 hr) für die Dauer der Schwangerschaft. <ol><li> Ab dem Tag der Gestation 1 stellen die weiblichen Ratten mit 0% oder 5% Ethanol und 0,066% Saccharin-Lösung in Leitungswasser auf der Grundlage der Gruppenzuordnung. Sicherzustellen, dass das Volumen der 0% igen Ethanollösung, um Saccharin Kontrollratten vorgesehen ist, um das mittlere Volumen von 5% Ethanol-Lösung von Ethanol Ratten konsumierten abgestimmt. Am Ende jeder Sitzung Quantifizierung der Menge an Ethanol-Lösung (Gewicht pro kg Körpergewicht) oder Saccharin, die verbraucht wurde. </li><li> Wiegen Ratten-Muttertiere wöchentlich zu einer Gewichtszunahme von Müttern zu bewerten. </li><li> Sorgen für Speis und Leitungswasser jederzeit einschließlich der Trinkgelage. </li><li> Hört die Ethanolexposition Verfahren, wenn der Nachwuchs geboren werden. Notieren Sie die Zahl der lebenden Welpen und Welpen Gewichte bei der Geburt. Bestimmen Sie den Tag der Geburt als postnatalen Tag 0. </li><li> Cull das Katzenklo zu 10 Welpen um postnatalen Tag 2-3. Versuchen to pflegen eine gleiche Verhältnis von männlichen zu weiblichen Tieren in jedem Wurf. Wenn dies nicht möglich ist, filtern bis 10 Welpen mit einer ungleichen Anzahl von Männchen und Weibchen. </li><li> Nehmen pup Gewichte 2-3 Tage nach der Geburt. </li><li> Wean die Tiere auf etwa postnatalen Tag 21 bis 24 und Haus in gleichgeschlechtlichen Paaren mit einem Tier aus dem gleichen pränatalen Behandlung Zustand. Verwenden Sie nicht mehr als 1-2 Ratten aus jedem Wurf pro Versuch, potenzielle Wurf Auswirkungen zu begrenzen. </li></ol></li></ol> 2. Sozialverhalten <ol><li> Erhalten und bereiten alle notwendigen Materialien und Geräte. <ol><li> Besorgen Sie ein Gerät für die soziale Interaktion. Verwenden Sie eine Kammer mit einem offenen Oberteil Material aufgebaut ist, die leicht zu reinigen und zu desinfizieren ist. Die Vorderseite des Gerätes sollte mit starren transparenten Kunststoff (~ 2 mm Dicke) für die Dreharbeiten abgedeckt werden. Linie die Innenwände und Boden mit transparentem Kunststoff (~ 2 mm Dicke), um bei der Reinigung und Geruchskontrolle zu unterstützen. Platz Spiegeln entlang der Rückseite Innen wall Analyse helfen. HINWEIS: Für die repräsentative Daten hier ein benutzerdefiniertes Kammer (95 cm lang x 47 cm breit x 43 cm hoch) mit einer offenen Oberseite und starren transparenten Kunststoff (2 mm Dicke), die die Innenseiten und Boden des Gerätes gemeldet verwendet wurde. Spiegel wurden an der Rückwand angebracht. Die spezifischen Abmessungen und Materialien sind nicht kritisch für die Messung des Sozialverhaltens, aber es wird empfohlen, dass die Abmessungen ausreichend groß, dass eine echte soziale Interaktion gewährleisten können von anderen Verhaltensweisen unterschieden werden können. Das heißt, die Vorrichtung sollte groß genug sein, so dass Tiere nicht immer in unmittelbarer Nähe zueinander. </li><li> Erhalten Videokameras in der Lage, Aufnahmen bei geringer oder keiner Lichtverhältnissen wie alle Dreharbeiten mit wenig oder gar kein Umgebungslicht im sichtbaren Spektrum durchgeführt. Stellen Sie sicher, dass die Kamera hat eine hohe Auflösung im Infrarotspektrum jedoch jede Kamera, die Aufnahme bei schlechten Lichtverhältnissen in seiner nativenNacht-Modus oder mit zusätzlicher Infrarot-Strahler sollte ausreichend sein. </li><li> Position Infrarotstrahler in der Umgebung der Vorrichtung zur Beleuchtung der Vorrichtung in der Videoaufzeichnung zu verbessern. </li><li> Erhalten Laborqualität Hackschnitzel (Espe Chip). </li><li> Besorgen Sie sich einen Pinsel, Kehrschaufel, Chlordioxid und Isopropylalkohol (70%) für die Reinigung des Gerätes zwischen den Sitzungen und Geruchskontrolle. </li></ol></li><li> Apparat Akklimatisierung und Sozialverhalten <ol><li> Für diese Phase des Experiments, machen Messungen bei erwachsenen Ratten, die mindestens 90 Tage alt sind. </li><li> Vor jeder Sitzung entfernen Sie alle Wald-Chips, wischen Sie das Gerät sauber mit Isopropylalkohol, um Gerüche zwischen den Sitzungen zu steuern und für frische Holzspäne. Sicherzustellen, dass die Holzspäne vollständig bedeckt die Unterseite der Vorrichtung. Reinigen von der Vorrichtung mit einem geeigneten Mittel, wie beispielsweise Chlordioxid, wie nötig. </li><li> Für drei aufeinander folgenden Tagen stellen ein Tier und seinem Käfig Kollegen in derKammer für 30 Minuten, um die Tiere an die Vorrichtung zu akklimatisieren. Während der Akklimatisierung Sitzungen alle Raumbeleuchtung ausgeschaltet sind. </li><li> Am Ende des dritten Akklimatisierung Sitzung Haus die Tiere einzeln in neue Käfige mit frischer Bettwäsche, Lebensmittel und Wasser für 24 Stunden, um die soziale Interaktion zu motivieren. </li><li> Record soziale Interaktion am folgenden Tag 24 Stunden nach Einsetzen der Tiere wurden getrennt. <ol><li> Entfernen Hackschnitzel aus dem Gerät, Reinigen von mit Chlordioxid, wischen Sie mit Isopropyl-Alkohol, um Gerüche zu kontrollieren, und ersetzen Sie die Holzspäne vor der Sitzung. </li><li> Positionieren Sie eine oder mehrere Kameras, um die Interaktion zu erfassen. Position mindestens einer Kamera vor der Vorrichtung, so daß die Spiegel auf der Rückwand der Vorrichtung eine zusätzliche Perspektive für die Analyse bereitzustellen. </li><li> Abrufen Tieren ein zu einer Zeit und halten das Tier vor der Kamera, so dass die einzigartigen Eigenschaften des Pelzmuster zu verzeichnen. Diese Identifikationsmerkmale vondas Fell kann verwendet werden, um Ratten während der Analyse und nicht künstlich Kennzeichnung der Tiere zu unterscheiden. Hinweis: Da viele Aspekte der Nager soziale Interaktion beinhalten olfaktorischen Signale und riechen Sie den Partner, wo immer möglich, die Einführung fremder Gerüche zu vermeiden. Long-Evans-Ratten haben in der Regel eine Funktion der Fellmuster, die genutzt werden, um eine bestimmte Paar von Tieren zu unterscheiden. Bei anderen Stämmen (zB Sprague-Dawley-Ratten) Alternative Ansätze, wie Markieren der Schwanz mit einem fusselfreien Farbstoff verwendet werden. Es ist wichtig zu erkennen, dass viele Verhaltensweisen von Interesse sind, auf bestimmte Ziele ausgerichtet (z. B. anogenitale Sniffing in der Nähe der Basis des Schwanzes gerichtet, verspielt Angriffe am Nacken oder aggressive Angriffe gegen die Flanken oder Bauch gerichtet). Kennzeichnung der Tiere näher zu der Spitze des Endstücks weit von diesen interessierende Ziele empfohlen. </li><li> Nehmen Sie Video von der sozialen Interaktion für mindestens 12 min.</li><li> Überwachen Tiere für den Kampf in der gesamten Sitzung. Wenn möglich, beobachten Sie die Tiere über einen Monitor oder ein Fenster, so dass der Versuchsleiter ist nicht im Zimmerpreis während der Sitzung. HINWEIS: Bekämpfung wurde nur selten in Studien mit erwachsenen Ratten beobachtet jedoch, sollten die Tiere während der gesamten Sitzung überwacht werden. Die Sitzung sollte beendet werden, wenn es übermäßige Bekämpfung oder Anzeichen von Schäden oder Verletzungen an ein Tier. </li></ol></li></ol></li><li> Verhaltens Codierung und Analyse. <ol><li> Identifizieren Sie die folgenden Verhaltensweisen von Interesse nach früheren Arbeiten mit PAE 1,18. Quantifizierung der Dauer, Häufigkeit und Latenzzeit bis zum ersten Auftreten der folgenden Verhaltensweisen; Wrestling (einschließlich Pinning), Boxen, Krabbeln (Kreuzung) über / unter dem Partner, anogenitale Schnupfen, andere Schnüffeln der Körper des Partners (Körper Sniffing) allogrooming (Pflege des Partners), Aufzucht und schnüffeln / Graben in den Holzspänen . Beispiele für jedes Verhalten zu veranschaulichend in der Video-Komponente in diesem Artikel. </li><li> Quantifizierung der Sozialverhalten von Interesse aus dem Video. Besorgen Sie sich die Frequenz, Gesamtdauer und Latenz an die erste Instanz für jedes Verhalten von Interesse. HINWEIS: Die Beschaffung dieser Maßnahmen kann manuell erreicht werden, aber die Quantifizierung dieser Maßnahmen mit Hilfe computergestützter Analysen der digitalisierten Video empfohlen. Ein Matlab (www.mathworks.com) Skript für die Wiedergabe des Videos und Quantifizierung von Verhalten ist als Ergänzung zu diesem Artikel. </li><li> Nach der Codierung wird für alle Ratten beendet die erhaltenen Dauer, Häufigkeit und Latenz-Daten werden mit einem Statistikpaket analysiert. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Hamilton, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prenatal+exposure+to+moderate+levels+of+ethanol+alters+social+behavior+in+adult+rats%3A+Relationship+to+structural+plasticity+and+immediate+early+gene+expression+in+frontal+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Prenatal exposure to moderate levels of ethanol alters social behavior in adult rats: Relationship to structural plasticity and immediate early gene expression in frontal cortex.</a> Behav. Brain Res. 207 (2), 290-304 (2010).</li>
<li>May, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Approaching+the+prevalence+of+the+full+spectrum+of+Fetal+Alcohol+Spectrum+Disorders+in+a+South+African+population-based+study%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol.+Clin.+Exp.+Res%22%5BJournal%5D)">Approaching the prevalence of the full spectrum of Fetal Alcohol Spectrum Disorders in a South African population-based study.</a> Alcohol. Clin. Exp. Res. 37 (5), 818-830 (2013).</li>
<li>Chasnoff, I. J., Wells, A. M., Telford, E., Schmidt, C., Messer, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurodevelopmental+functioning+in+children+with+FAS%2C+pFAS%2C+and+ARND%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Developmental+and+Behavioral+Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Neurodevelopmental functioning in children with FAS, pFAS, and ARND.</a> Journal of Developmental and Behavioral Pediatrics. 31 (3), 192-201 (2010).</li>
<li>Disney, E. R., Iacono, W., McGue, M., Tully, E., Legrand, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strengthening+the+case%3A+Prenatal+alcohol+exposure+is+associated+with+increased+risk+for+conduct+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Strengthening the case: Prenatal alcohol exposure is associated with increased risk for conduct disorder.</a> Pediatrics. 122 (6), E1225-E1230 (2008).</li>
<li>Kelly, S. J., Goodlett, C. R., Hannigan, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+fetal+alcohol+spectrum+disorders%3A+Impact+of+the+social+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Disabil+Res+Rev%22%5BJournal%5D)">Animal models of fetal alcohol spectrum disorders: Impact of the social environment.</a> Dev Disabil Res Rev. 15 (3), 200-208 (2009).</li>
<li>Kelly, S. J., Day, N., Streissguth, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+prenatal+alcohol+exposure+on+social+behavior+in+humans+and+other+species%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotoxicol.+Teratol%22%5BJournal%5D)">Effects of prenatal alcohol exposure on social behavior in humans and other species.</a> Neurotoxicol. Teratol. 22 (2), 143-149 (2000).</li>
<li>Thomas, S. E., Kelly, S. J., Mattson, S. N., Riley, E. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+social+abilities+of+children+with+fetal+alcohol+syndrome+to+those+of+children+with+similar+IQ+scores+and+normal+controls%5BTitle%5D)+AND+%22Alcoholism%3A+Clinical+and+Experimental+Research%22%5BJournal%5D)">Comparison of social abilities of children with fetal alcohol syndrome to those of children with similar IQ scores and normal controls.</a> Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 22 (2), 528-533 (1998).</li>
<li>Conry, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuropsychological+deficits+in+Fetal+Alcohol+Syndrome+and+fetal+alcohol+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol.+Clin.+Exp.+Res%22%5BJournal%5D)">Neuropsychological deficits in Fetal Alcohol Syndrome and fetal alcohol effects.</a> Alcohol. Clin. Exp. Res. 14 (5), 650-655 (1990).</li>
<li>Streissguth, A. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fetal+Alcohol+Syndrome+in+adolescents+and+adults%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA-Journal+of+the+American+Medical+Association%22%5BJournal%5D)">Fetal Alcohol Syndrome in adolescents and adults.</a> JAMA-Journal of the American Medical Association. 265 (15), 1961-1967 (1991).</li>
<li>Streissguth, A. P., Barr, H. M., Sampson, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Moderate+prenatal+alcohol+exposure%3A+effects+on+child+IQ+and+learning+problems+at+age+7+1%2F2+years%5BTitle%5D)+AND+%22Alcoholism%3A+Clinical+and+Experimental+Research%22%5BJournal%5D)">Moderate prenatal alcohol exposure: effects on child IQ and learning problems at age 7 1/2 years.</a> Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 14 (5), 662-669 (1990).</li>
<li>Valenzuela, C. F., Morton, R. A., Diaz, M. R., Topper, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Does+moderate+drinking+harm+the+fetal+brain%3F+Insights+from+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Does moderate drinking harm the fetal brain? Insights from animal models.</a> Trends Neurosci. 35 (5), 284-292 (2012).</li>
<li>May, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+children+with+severe+Fetal+Alcohol+Spectrum+Disorders+in+communities+near+Rome%2C+Italy%3A+New+estimated+rates+are+higher+than+previous+estimates%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Env.+Res.+Public+Health%22%5BJournal%5D)">Prevalence of children with severe Fetal Alcohol Spectrum Disorders in communities near Rome, Italy: New estimated rates are higher than previous estimates.</a> Int. J. Env. Res. Public Health. 8 (6), 2331-2351 (2011).</li>
<li>Tunc-Ozcan, E., Ullmann, T. M., Shukla, P. K., Redei, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-dose+thyroxine+attenuates+autism-associated+adverse+affects+of+fetal+alcohol+in+male+offspring%27s+social+behavior+and+hippocampal+gene+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol.+Clin.+Exp.+Res%22%5BJournal%5D)">Low-dose thyroxine attenuates autism-associated adverse affects of fetal alcohol in male offspring's social behavior and hippocampal gene expression.</a> Alcohol. Clin. Exp. Res. 37 (11), 1986-1995 (2013).</li>
<li>Middleton, F. A., Varlinskaya, E. I., Mooney, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+substrates+of+social+avoidance+seen+following+prenatal+ethanol+exposure+and+its+reversal+by+social+enrichment%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Molecular substrates of social avoidance seen following prenatal ethanol exposure and its reversal by social enrichment.</a> Dev. Neurosci. 34 (2-3), 115-128 (2012).</li>
<li>Varlinskaya, E. I., Mooney, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+exposure+to+ethanol+on+gestational+day+15+affects+social+motivation+of+female+offspring%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Acute exposure to ethanol on gestational day 15 affects social motivation of female offspring.</a> Behav. Brain Res. 261, 106-109 (2014).</li>
<li>Meyer, L. S., Riley, E. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+play+in+juvenile+rats+prenatally+exposed+to+alcohol%5BTitle%5D)+AND+%22Teratology%22%5BJournal%5D)">Social play in juvenile rats prenatally exposed to alcohol.</a> Teratology. 34 (1), 1-7 (1986).</li>
<li>Royalty, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+prenatal+ethanol+exposure+on+juvenile+play-fighting+and+postpubertal+aggression+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Psychol+Rep%22%5BJournal%5D)">Effects of prenatal ethanol exposure on juvenile play-fighting and postpubertal aggression in rats.</a> Psychol Rep. 66 (2), 551-560 (1990).</li>
<li>Hamilton, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+moderate+prenatal+ethanol+exposure+and+age+on+social+behavior%2C+spatial+response+perseveration+errors+and+motor+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of moderate prenatal ethanol exposure and age on social behavior, spatial response perseveration errors and motor behavior.</a> Behav. Brain Res. 269, 44-54 (2014).</li>
<li>Kelly, S. J., Dillingham, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sexually+dimorphic+effects+of+perinatal+alcohol+exposure+on+social+interactions+and+amygdala+DNA+and+DOPAC+concentrations%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotoxicol.+Teratol%22%5BJournal%5D)">Sexually dimorphic effects of perinatal alcohol exposure on social interactions and amygdala DNA and DOPAC concentrations.</a> Neurotoxicol. Teratol. 16 (4), 377-384 (1994).</li>
<li>Lugo, J. N., Marino, M. D., Cronise, K., Kelly, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+alcohol+exposure+during+development+on+social+behavior+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Effects of alcohol exposure during development on social behavior in rats.</a> Physiology and Behavior. 78 (2), 185-194 (2003).</li>
<li>Lugo, J. N., Marino, M. D., Gass, J. T., Wilson, M. A., Kelly, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ethanol+exposure+during+development+reduces+resident+aggression+and+testosterone+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Ethanol exposure during development reduces resident aggression and testosterone in rats.</a> Physiology and Behavior. 87 (2), 330-337 (2006).</li>
<li>Kelly, S. J., Tran, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alcohol+exposure+during+development+alters+social+recognition+and+social+communication+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotoxicol.+Teratol%22%5BJournal%5D)">Alcohol exposure during development alters social recognition and social communication in rats.</a> Neurotoxicol. Teratol. 19 (5), 383-389 (1997).</li>
<li>Mooney, S. M., Varlinskaya, E. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+prenatal+exposure+to+ethanol+and+social+behavior%3A+Effects+of+age%2C+sex%2C+and+timing+of+exposure%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Acute prenatal exposure to ethanol and social behavior: Effects of age, sex, and timing of exposure.</a> Behav. Brain Res. 216 (1), 358-364 (2011).</li>
<li>Savage, D. D., Becher, M., de la Torre, A. J., Sutherland, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dose-dependent+effects+of+prenatal+ethanol+exposure+on+synaptic+plasticity+and+learning+in+mature+offspring%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol.+Clin.+Exp.+Res%22%5BJournal%5D)">Dose-dependent effects of prenatal ethanol exposure on synaptic plasticity and learning in mature offspring.</a> Alcohol. Clin. Exp. Res. 26 (11), 1752-1758 (2002).</li>
<li>Rasmussen, D. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+daily+ethanol+and+withdrawal%3A+1.+Long-term+changes+in+the+hypothalamo-pituitary-adrenal+axis%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol.+Clin.+Exp.+Res%22%5BJournal%5D)">Chronic daily ethanol and withdrawal: 1. Long-term changes in the hypothalamo-pituitary-adrenal axis.</a> Alcohol. Clin. Exp. Res. 24 (12), 1836-1849 (2000).</li>
<li>Savage, D. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+a+Novel+Cognition-Enhancing+Agent+on+Fetal+Ethanol-Induced+Learning+Deficits%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol.+Clin.+Exp.+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of a Novel Cognition-Enhancing Agent on Fetal Ethanol-Induced Learning Deficits.</a> Alcohol. Clin. Exp. Res. 34 (10), 1793-1802 (2010).</li>
<li>Goodlett, C. R., Johnson, T. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neonatal+binge+ethanol+exposure+using+intubation%3A+Timing+and+dose+effects+on+place+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotoxicol.+Teratol%22%5BJournal%5D)">Neonatal binge ethanol exposure using intubation: Timing and dose effects on place learning.</a> Neurotoxicol. Teratol. 19 (6), 435-446 (1997).</li>
<li>Staples, M. C., Rosenberg, M. J., Allen, N. A., Porch, M. W., Savage, D. D. Impact of Combined Prenatal Ethanol and Prenatal Stress Exposure on Anxiety and Hippocampal-Sensitive Learning in Adult. 37 (12), 2039-2047 (2013).</li>
<li>Champagne, F. A., Francis, D. D., Mar, A., Meaney, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variations+in+maternal+care+in+the+rat+as+a+mediating+influence+for+the+effects+of+environment+on+development%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Behav%22%5BJournal%5D)">Variations in maternal care in the rat as a mediating influence for the effects of environment on development.</a> Physiol. Behav. 79 (3), 359-371 (2003).</li>
<li>Hamilton, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patterns+of+social-experience-related+c-fos+and+Arc+expression+in+the+frontal+cortices+of+rats+exposed+to+saccharin+or+moderate+levels+of+ethanol+during+prenatal+brain+development%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Patterns of social-experience-related c-fos and Arc expression in the frontal cortices of rats exposed to saccharin or moderate levels of ethanol during prenatal brain development.</a> Behav. Brain Res. 214 (1), 66-74 (2010).</li>
<li>Barnett, S. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBarnett%2C+SA+%22A+study+in+behaviour%3A+Principles+of+ethology+and+behavioural+physiology+displayed+mainly+in+the+rat%22">A study in behaviour: Principles of ethology and behavioural physiology displayed mainly in the rat</a>. , (1963).</li>
<li>Pellis, S. M., Pellis, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Play-fighting+differs+from+serious+fighting+in+both+target+of+attack+and+tactics+of+fighting+in+the+laboratory+rat+Rattus-Norvegicus%5BTitle%5D)+AND+%22Aggressive+Behav%22%5BJournal%5D)">Play-fighting differs from serious fighting in both target of attack and tactics of fighting in the laboratory rat Rattus-Norvegicus.</a> Aggressive Behav. 13 (4), 227-242 (1987).</li>
<li>Meaney, M. J., Stewart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+descriptive+study+of+social-development+in+the+rat+%28Rattus-Norvegicus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Anim.+Behav%22%5BJournal%5D)">A descriptive study of social-development in the rat (Rattus-Norvegicus).</a> Anim. Behav. 29 (1), 34-45 (1981).</li>
<li>Pellis, S. M., Pellis, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+prejuvenile+onset+of+play+fighting+in+laboratory+rats+%28Rattus+norvegicus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">The prejuvenile onset of play fighting in laboratory rats (Rattus norvegicus).</a> Dev. Psychobiol. 31 (3), 193-205 (1997).</li>
<li>Himmler, B. T., Pellis, V. C., Pellis, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peering+into+the+dynamics+of+social+interactions%3A+measuring+play+fighting+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Peering into the dynamics of social interactions: measuring play fighting in rats.</a> J. Vis. Exp. (71), e4288-e4288 (2013).</li>
<li>Panksepp, J., Siviy, S., Normansell, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+psychobiology+of+play+%3A+Theoretical+and+methodological+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Biobehav.+Rev%22%5BJournal%5D)">The psychobiology of play : Theoretical and methodological perspectives.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 8 (4), 465-492 (1984).</li>
<li>Siviy, S. M., Panksepp, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensory+modulation+of+juvenile+play+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">Sensory modulation of juvenile play in rats.</a> Dev. Psychobiol. 20 (1), 39-55 (1987).</li>
<li>Pellis, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+orbital+frontal+cortex+damage+on+the+modulation+of+defensive+responses+by+rats+in+playful+and+nonplayful+social+contexts%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The effects of orbital frontal cortex damage on the modulation of defensive responses by rats in playful and nonplayful social contexts.</a> Behav. Neurosci. 120 (1), 72-84 (2006).</li>
<li>Blanchard, R. J., Blanchard, D. C., Takahashi, T., Kelley, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Attack+and+defensive+behavior+in+albino-rat%5BTitle%5D)+AND+%22Anim.+Behav%22%5BJournal%5D)">Attack and defensive behavior in albino-rat.</a> Anim. Behav. 25 (3), 622-634 (1977).</li>
</ol>

Die Autoren haben keine Interessenkonflikte offenzulegen.

Die hier beschriebene pränatalen Exposition Alkohol Paradigma beinhaltet freiwilligen Verbrauch von Ethanol (5% v / v) von Ratten-Muttertiere während der Schwangerschaft. Es gibt eine Reihe von Protokollen für die während der Entwicklung des Gehirns in der Literatur, die in Bezug auf die Zeitwahl, Dosis, Dauer und Art der Verabreichung Ethanol sowie untersuchten Art unterscheiden dargestellt Belichten nicht-menschlichen Tieren zu Ethanol. Obwohl eine sorgfältige Behandlung der Vorteile der verschiedenen Belichtungs Prot...

Schätzungsweise 1-5% der Kinder mit Fetal Alcohol Spectrum Disorders (FASDs) 2, das Fetale Alkoholsyndrom (FAS), Teil FAS (PFA) und alkoholbedingte neurologische Entwicklungsstörungen (Arnds) 3 sind diagnostiziert. Defizite im sozialen Verhalten und Kognition gehören zu den häufigsten unerwünschten Ergebnissen bei Kindern mit FASDs 4-7 beobachtet. Negative Folgen sind nicht zu schwer pränatalen Exposition Alkohol (PAE), als moderat PAE, die nicht der auffällige morphologische, Verhaltens- und kognitive Defizite Merkmal FAS führt, bei Menschen mit FASDs 8-10 begrenzt vergleichsweise subtile, aber dennoch anhalt verursachen, Defizite und nicht-menschlichen Tieren zu Ethanol während der Gehirnentwicklung 11 ausgesetzt. Die Bedeutung von Verständnis der Verhaltens-und neurobiologische entsprechenden Folgen moderate PAE wird von aktuellen Schätzungen darauf hinweist, dass die große Mehrheit der FASD Fällen innerhalb weniger s fallen unterstrichenevere Bereich des Spektrums 12. Mehrere unabhängige Laboratorien haben Veränderungen in Nagetier Sozialverhalten im Zusammenhang mit Exposition während der Entwicklung des Gehirns Ethanol berichtet, einschließlich verringerte Untersuchung und Zusammenspiel 1,13-15, veränderte Spiel 14,16,17, erhöhte aggressive Interaktionen 17,18, Veränderungen in Reaktion auf soziale Stimuli 19-21, und Defizite in sozial erworbenen Nahrungspräferenzen und soziale Anerkennung Speicher 22. Soziales Verhalten Defizite wurden nach Exposition gegenüber Schwer (Blutethanolkonzentrationen (BECs) ~ 300 mg / dl) 22,23 oder eher moderaten Ethanol (BECs ~ 80 mg / dl) 1 und in einem breiten Spektrum von Parametern für andere bedeutende beobachtet Faktoren wie Belichtungszeit, Dauer der Exposition, und Alter zum Zeitpunkt der Verhaltensmessung. Zurück Forschung hat in bestimmten Aspekten der sozialen int gezeigt, dass Änderungeneraction im Erwachsenenalter zu unterscheiden Ratten auf moderatem Niveau von Alkohol aus den Kontrolltieren zu Saccharin 1,18 ausgesetzt. Insbesondere hat moderate PAE konsequent mit robusten erhöht im Ringen, die Erhöhungen der aggressives Verhalten und geringere soziale Untersuchung (zB Schnupfen des Partners) im Erwachsenenalter legt nahe, in Verbindung gebracht. Da Veränderungen im Sozialverhalten sind zuverlässig Folgen PAE kann die Quantifizierung von Sozialverhalten folgenden PAE Bedeutung für Fortschritte in Richtung auf ein besseres Verständnis der neuronalen Grundlagen der PAE bedingten Veränderungen im Sozialverhalten und der Entwicklung von Interventionsansätze zu halten. Das Ziel dieser Arbeit und der damit verbundenen Video ist zu Anweisungen auf dem moderaten PAE-Protokoll und Methoden zur Quantifizierung von Sozialverhalten bei erwachsenen Nachkommen, aufweisen zuverlässig unterschieden pränatale Alkohol-exponierten von nicht-exponierten Ratten-Nachwuchs.

<table><tbody><tr><td>Saccharin Natriumsalzhydrat</td><td>Sigma</td><td>S1002</td><td></td></tr><tr><td>190 Proof</td><td>Ethanol Sigma</td><td>493538</td><td></td></tr><tr><td>Perlenglas Trinkschläuche</td><td>Fisher</td><td>14-955K</td><td></td></tr><tr><td>Naturkautschuk weiß #4 Stopfen ein Loch</td><td>Plasticoid</td><td>LSG4M181</td><td></td></tr><tr><td>1" gebogene Rohre-Kugelschreiber</td><td>Ancare</td><td>TD-199-3"</td><td></td></tr> <tr><td>Papier Lineale</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td><a href="http://www.vendian.org/mncharity/dir3/paper_rulers">www.vendian.org/mncharity/dir3/paper_rulers</a></td></tr><tr><td>Geräte für soziale Interaktion</td><td>Sonderanfertigungen</td><td>N/A</td><td>95 cm x 47 cm x 43 cm</td></tr><tr><td>Videokameras</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Geeignet für die Aufzeichnung von schwachen/keinen Lichtverhältnissen</td></tr><tr><td>Infrarot-Strahler</td><td>Vitek</td><td>VT-IR1-12</td><td></td></tr><tr><td>Teklad Sani-Chips Harlan</td><td></td><td>7090A</td><td></td></tr><tr><td>Bürste und Kehrschaufel</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Isopropylalkohol</td><td>Sigma</td><td>W292907</td><td></td></tr><tr><td>Chlordioxid (1,5 mg Tabletten)</td><td>Quiplabs</td><td>N/A</td><td>Vorbereiten gemäß Herstellerempfehlung</td></tr></tbody></table>

moderate pränatale alkoholexposition und quantifizierung von sozialverhalten bei erwachsenen ratten

Moderate Prenatal Alcohol Exposure and Quantification of Social Behavior in Adult Rats

Veränderungen im Sozialverhalten gehören zu den wichtigsten negativen Folgen, die bei Kindern mit fetalen Alkoholspektrumstörungen (FASDs) beobachtet werden. Mehrere unabhängige Laboratorien haben robuste Veränderungen im Sozialverhalten von Nagetieren gezeigt, die während der Gehirnentwicklung Alkohol ausgesetzt waren, und zwar über einen weiten Bereich von Expositionsdauer, Zeitpunkt, Dosis und Alter zum Zeitpunkt der Verhaltensquantifizierung. Frühere Arbeiten dieses Labors haben zuverlässige Veränderungen in bestimmten Formen der sozialen Interaktion nach moderater pränataler Alkoholexposition (PAE) bei der Ratte identifiziert, die bis ins Erwachsenenalter anhalten, einschließlich vermehrtem Ringen und verminderter Untersuchung. Diese Verhaltensänderungen waren nützlich bei der Identifizierung neuronaler Schaltkreise, die durch moderate PAE1 verändert wurden, und können wichtig für ein vollständigeres Verständnis der neuronalen Grundlagen von PAE-bedingten Veränderungen im Sozialverhalten sein. In dieser Arbeit werden Verfahren zur Durchführung einer moderaten PAE beschrieben, bei der Rattenmütter während der gesamten Trächtigkeit freiwillig Ethanol oder Saccharin (Kontrolle) zu sich nehmen, sowie die Messung des Sozialverhaltens bei erwachsenen Nachkommen.

Im Laufe vieler Zucht Runden weiblichen Ratten in der Ethanol Zustand konsistent trinken durchschnittlich etwa 2,1 g / kg Ethanol pro 4 Stunden Trinkgelage. Ratte Dämme verbrauchen etwa eine Hälfte des vier hr Gesamt während der ersten 15 bis 30 Minuten nach der Einführung der Trinkröhrchen, was zu einem Spitzen mütterlichen Serum Ethanolkonzentration von etwa 60 mg / dl, gemessen in 45 Minuten-Zeitpunkt. Über den verbleibenden 3,5 Stunden des Trink Zeitraums erhalten sie auf 5% Ethanol, bei einer niedrigeren, aber rela...

Das Ziel des hier vorgestellten Protokolls ist es, Verfahren zu beschreiben, um Ratten während der pränatalen Gehirnentwicklung moderaten Alkoholmengen auszusetzen und die daraus resultierenden Veränderungen im Sozialverhalten im Erwachsenenalter zu quantifizieren.

Moderate Pränatale Alkoholexposition und Quantifizierung von Sozialverhalten bei erwachsenen Ratten

Alterations in social behavior are among the major negative consequences observed in children with Fetal Alcohol Spectrum Disorders (FASDs). Several ...

Mäßige pränatale Alkoholexposition und Quantifizierung des sozialen Verhaltens bei erwachsenen Ratten. In diesem Video wird ein Paradigma zur pränatalen Alkoholexposition beschrieben, gefolgt von der Quantifizierung des sozialen Verhaltens im Erwachsenenalter. Alle in diesem Video beschriebenen Verfahren wurden von dem Institutional Animal Care and use Committee des Health Sciences Center und des Hauptcampus der University of New Mexico genehmigt. Beginnen Sie mit der Beschaffung erwachsener weiblicher Ratten im Alter von sechs bis sieben Wochen, die im Durchschnitt ein Gewicht von 125 bis 150 Gramm aufweisen, sowie bewährter männlicher Rattenzuchttiere.In der Regel ermöglicht ein Alter von 12 Wochen, dass die Tiere mindestens eine Woche lang an ihre neue Haltungsumgebung akklimatisiert werden können. Insgesamt umfasst der Zeitplan für die pränatale Alkoholexposition eine zweiwöchige Vorbehandlungsphase, eine Zuchtphase, in der die Tiere keinen Zugang zu Alkohol haben, sowie die pränatale Expositionsphase, die während der gesamten Tragzeit stattfindet. Die Einzelheiten jeder Phase sind wie folgt.Um die Trinkmengen vor der Schwangerschaft zu bewerten, nehmen weibliche Ratten über einen Zeitraum von zwei Wochen hinweg freiwillig Saccharinwasser mit schrittweise erhöhten Alkoholkonzentrationen auf. Die Funktion dieser Bewertung besteht darin, Ratten zu identifizieren, die in den gewünschten Mengen trinken, um sie in nachfolgende Phasen des Trinkprotokolls einzubeziehen. Dieser Aspekt des Alkoholexpositionsparadigmas stellt außerdem sicher, dass alle weiblichen Ratten vor der Schwangerschaft bereits Trinkverhalten erfahren haben.Bereiten Sie Trinkröhrchen vor, indem Sie folgende Materialien sammeln: Saccharin-Natriumsalz, Hydrat, Ethanol 190 proof, gläserne Trinkröhrchen mit Kugeln, weißer Naturgummi, einlochige Stopfen Nummer vier, ein Zoll lange gebogene Röhrchen mit Kugelspitze und Papierlineale. Bereiten Sie eine Stammösung von 0,066 % Saccharinwasser in Leitungswasser zu. Verwenden Sie einen Teil der 0,066 %igen Saccharinlösung, um eine konzentrierte Saccharinlösung mit 2,5 % Ethanol herzustellen, und einen weiteren Teil, um eine konzentrierte Lösung mit 5 % Ethanol herzustellen.Bereiten Sie Trinkröhrchen vor, indem Sie ein Lineal aus Papier an einem Röhrchen befestigen. Füllen Sie das Röhrchen bis zur 20-Millimeter-Marke mit der richtigen Lösung für den Tag. Stellen Sie sicher, dass Sie die Ausgangskörpergewichte jeder weiblichen Ratte ermitteln, da die Trinkphasen täglich vier Stunden dauern und eine Stunde nach Beginn des Dunkelzyklus starten.An den Tagen eins und zwei erhalten die Weibchen Zugang zu 0,066 % Saccharin-Wasser. An den Tagen drei und vier erhalten die Weibchen Zugang zur SAC-Lösung, die 2,5 % Ethanol enthält. Ab Tag fünf erhalten die Weibchen Zugang zur SAC-Lösung, die 5 % Ethanol enthält, für Trinksitzungen mit der 5 % Ethanol-Lösung.Fortsetzen, bis die Trinkphase vor der Schwangerschaft abgeschlossen ist. Futter und Leitungswasser sind während aller Trinkphasen verfügbar. Am Ende der vierstündigen Trinkphase die Menge der konsumierten Ethanol-Lösung pro Kilogramm Körpergewicht bestimmen.Nach Abschluss der Trinkphase vor der Schwangerschaft berechnen Sie den mittleren Ethanolverbrauch und die Standardabweichung für die gesamte Gruppe und schließen Ratten aus, deren mittlerer Verbrauch um eine Standardabweichung oder mehr über oder unter dem Gruppenmittelwert liegt.Ordnen Sie die verbleibenden Ratten entweder der Saccharin-Kontrollgruppe oder der Gruppe mit pränataler Ethanolexposition zu. Gleichen Sie die Trinkmengen vor der Schwangerschaft so genau wie möglich an. Paaren Sie für die beiden Gruppen jeweils eine weibliche Ratte mit einem bewährten männlichen Zuchttier.Weibliche Ratten konsumieren während der Zuchtphase keinen Alkohol. Sobald eine Schwangerschaft durch das Vorhandensein eines Vaginalpfropfens bestätigt ist, wiegen Sie die weibliche Ratte und den Hauser ab dem ersten Tag der Trächtigkeit einzeln. Verabreichen Sie Alkohol- oder Saccharinlösungen entsprechend der Gruppenzuordnung.Genehmigen Sie vier Stunden pro Tag Zugang zu Futter und Leitungswasser während Trinkphasen. Setzen Sie die täglichen Trinkphasen über die gesamte Dauer der Schwangerschaft fort. Quantifizieren Sie den täglichen Trinkverbrauch und wiegen Sie die Rattenmütter wöchentlich.Beenden Sie die Alkoholexpositionsverfahren, wenn die Nachkommen geboren sind. Legen Sie den Tag der Geburt als den postnatalen Tag null fest.Rufen Sie den Wurf auf etwa 10 Welpen um den zweiten oder dritten Tag nach der Geburt zusammen und notieren Sie das Gewicht der Welpen. Entwöhnen Sie die Tiere etwa am 21. bis 24. Tag nach der Geburt und unterbringen Sie sie paarweise nach Geschlecht getrennt mit einem Tier desselben pränatalen Behandlungsstatus. Verwenden Sie pro Experiment nicht mehr als ein bis zwei Ratten aus jedem Wurf, um mögliche Wurf-Effekte zu begrenzen.Quantifizierung des sozialen Verhaltens im Erwachsenenalter. Beschaffen Sie alle erforderlichen Materialien und Geräte. Wir verwenden eine speziell angefertigte Kammer, die 95 Zentimeter lang, 47 Zentimeter breit und 43 Zentimeter hoch ist.Die Kammer besteht aus einem Verbundkunststoff, der leicht gereinigt und desinfiziert werden kann, und verfügt über eine transparente Kunststoffvorderseite sowie eine offene Oberseite. Boden und Seitenwände sind mit Kunststoff ausgekleidet, um die Reinigung zu erleichtern. Die hintere Innenwand ist mit Spiegelplatten verkleidet, um die Analyse zu unterstützen.Zusätzliche benötigte Materialien sind folgende Videokameras, die in der Lage sind, unter schwachen Licht- oder Lichtausfallbedingungen aufzuzeichnen. Ideal sollte die Kamera eine hohe Auflösung im Infrarotbereich aufweisen, sowie Infrarot-Beleuchtungseinheiten, die um die Versuchsanordnung herum positioniert werden, um die Ausleuchtung der Anordnung zu verbessern. Im Videobereich werden laborübliche Sandspäne benötigt, eine Bürste und ein Kehrschaufel zum Reinigen der Apparatur zwischen den Sitzungen sowie 70% Isopropylalkohol zur Beseitigung von Rattengerüchen zwischen den Sitzungen.Für die Messung im Erwachsenenalter werden die Ratten, die mindestens 90 Tage alt sind, wenn diese Phase des Experiments beginnt, an drei aufeinanderfolgenden Tagen jeweils mit ihrem Käfigpartner 30 Minuten lang in die Versuchsanordnung gestellt, um sich an diese zu gewöhnen. Vor jeder Sitzung werden sämtliche Sägespäne entfernt. Die Versuchsanordnung wird mit Isopropylalkohol abgewischt, frische Sägespäne werden bereitgestellt, um die Anordnung mit einem geeigneten Reinigungsmittel zu reinigen und zu desinfizieren.Falls erforderlich, sollten die Holzspäne den Boden der Apparatur vollständig bedecken. Während der Gewöhnungssitzung werden am Ende der dritten Gewöhnungssitzung alle Raumlichter ausgeschaltet. Unterbringen Sie die Tiere einzeln in neuen Käfigen mit frischen Holzspänen, Futter und Wasser.Die soziale Interaktion wird am folgenden Tag, 24 Stunden nach der Trennung der Tiere, aufgezeichnet, um das soziale Verhalten zu bewerten. Beginnen Sie damit, die Versuchsanordnung zu reinigen und die Holzspäne auszutauschen. Positionieren Sie eine oder mehrere Kameras, um die Interaktion aufzuzeichnen. In unserem Labor nutzen wir die einzigartigen Muster der Fellzeichnungen zur Identifizierung der einzelnen Tiere; Alternativen zur Markierung der Tiere sind im Text beschrieben. Nach Abschluss der Aufnahme der sozialen Interaktion identifizieren Sie die von Interesse stehenden Verhaltensweisen in unserem Labor.Wir haben partnergerichtete Verhaltensweisen und andere Verhaltensweisen gegenüber der Umwelt quantifiziert. In unseren früheren Studien konnten sich zu Ethanol exponierte Tiere zuverlässig von solchen, die Saccharose ausgesetzt waren, anhand von Verhaltensweisen wie Ringen sowie anderen Maßen sozialer Untersuchung wie dem Beschnüffeln von Anus und Genitalien oder gegenseitiger Fellpflege unterschieden werden. In den folgenden Videoclips sind Beispiele für jedes interessierende Verhalten dargestellt.Beim Ringen versucht ein oder beide Tiere, auf den Partner zu springen, und führt oft dazu, dass ein Tier das andere auf die Seite oder den Rücken drückt. Dem Ringen geht häufig eine Verfolgungsjagd voraus und es kann auch von anderen Verhaltensweisen wie Boxen, Unter-durch-Gehen sowie Anogenitalschnüffeln begleitet sein. Die Beobachtung der Verhaltensweisen endet, wenn sich die Tiere voneinander trennen.Gelegentlich beginnen Tiere schnell eine weitere Runde Ringen, wenn sie sich deutlich voneinander getrennt haben. Die zweite Runde würde als separater Vorfall erfasst. Da das Ringen die Beteiligung beider Tiere aus dem Paar erfordert, sollten die Messwerte für das Paar beim Erfassen äquivalent sein.Sie möchten möglicherweise ebenfalls vermerken, welche Tiere am Ende festhielten beziehungsweise festgehalten wurden, sowie welches Tier Verfolgung und Anspringen zeigte. Es kann außerdem sinnvoll sein, die Verhaltensweisen, aus denen sich Ringkämpfe zusammensetzen, separat zu kodieren. Wenn eine detailliertere Analyse beim Boxen erforderlich ist, stellen beide Tiere sich auf ihre Hintergliedmaßen und drücken sich gegenseitig mit allen vier Pfoten. Bei Episoden des Übereinanderkletterns oder -untertauchens klettert ein Tier absichtlich über oder taucht unter seinen Partner. Bei diesem Verhalten beschnüffelt ein Tier die anogenitale Region des Partners. Eine Funktion des anogenitalen Beschnüffelns ist die Identifikation.Körperschnüffeln bezeichnet das Schnüffeln am Körper des Partners und richtet sich oft auf die Seite oder Flanke des Partners. Tierallogrooming ist das Grooming des Partneralls. Grooming richtet sich typischerweise auf den Nacken- und Kopfbereich.Beim Aufrechten Stehen hebt das Tier sich auf die Hintergliedmaßen, ähnlich wie beim Graben und Schnüffeln im Einstreu, was ein häufiges umweltorientiertes Verhalten darstellt. Dieses Verhalten ermöglicht eine Bewertung der Aktivität, die auf das im Versuchsaufbau verwendete Substrat gerichtet ist. Zur Kodierung und Quantifizierung der Verhaltensweisen nutzen wir ein benutzerdefiniertes MATLAB-Programm, das in unserem Labor entwickelt wurde. Zu den Hauptfunktionen dieses Programms gehören die Wiedergabe des Videos mit variabler Geschwindigkeit, Umschaltknöpfe für jedes interessierende Verhalten, deren Zustand „an“ oder „aus“ das Vorhandensein oder Fehlen des jeweiligen Verhaltens anzeigt, die automatische Zeitkodierung von Beginn und Ende jedes Verhaltens sowie die Datenausgabe, einschließlich Gesamtdauer, Häufigkeit und Latenz bis zum ersten Auftreten jedes Verhaltens. Nach Abschluss der Kodierung aller Tiere werden die resultierenden Daten zu Dauer, Häufigkeit und Latenz mit einem statistischen Softwarepaket analysiert. Wie im hier gezeigten Beispiel zu sehen ist, unterschieden sich die Häufigkeit, Dauer und Latenz bis zum ersten Auftreten von Ringkämpfen sowie die Dauer des analgenitalen Schnüffelns signifikant zwischen den Tieren, die Saccharin bzw. Ethanol ausgesetzt waren.Andere Verhaltensmaße unterschieden nicht zwischen den Gruppen. Die in diesem Video vorgestellten Methoden vereinfachten den Prozess der Analyse sozialen Verhaltens nach pränatalem Alkoholkonsum zu einem einfachen und effizienten Protokoll. Neben der Nützlichkeit dieses Ansatzes zur Unterscheidung von Ratten, die während der pränatalen Entwicklung mäßigen Alkoholkonzentrationen ausgesetzt waren, von nicht-exponierten Tieren, könnten diese Methoden leicht angepasst werden, um andere Alkoholexpositionsprotokolle zu evaluieren, einschließlich Variationen in Zeitpunkt, Dosis, Dauer und Alter zum Zeitpunkt der Verhaltensanalyse.Außerdem können die spezifischen Verhaltensweisen, die während der Analyse quantifiziert werden, darauf zugeschnitten werden, die Haupteffekte der Ethanol-Exposition in verschiedenen Entwicklungsstadien zu erfassen.

moderate-prenatal-alcohol-exposure-quantification-social-behavior

Research

Forschung

JoVE Journal

Behavior

Verhalten

Um die molekularen Mechanismen des Ethanol-induzierte Entwicklungsstörungen verstehen, haben wir einen Zebrafisch-Modell von Ethanol Exposition entwickelt und erforschen die physikalischen, zellulären und genetischen Veränderungen, die nach der Exposition auftreten...

Die Beurteilung Teratogene Änderungen in einem Zebrafisch-Modell der Fetal Alcohol Exposure

Die experimentellen Entwürfe hier vorgeschlagenen konzentrieren sich auf die Untersuchung der Auswirkungen von Alkohol-Exposition in der Apoptose und der Anwendung von neurotrophen Peptid während der Schwangerschaft in der fetalen Gehirns. Eine detaillierte Beschreibung aus der Zucht der Sammlung des fetalen Gehirns beschrieben. Techniken zur Bestimmung der Apoptose auch im Detail beschrieben.

Experimentelle Methoden zur Prüfung der Auswirkungen von Neurotrophic Peptide, ADNF-9, gegen den Alkohol-induzierte Apoptose während der Schwangerschaft in C57BL / 6 Mäuse

Wir zeigen den Aufbau der Alkoholdampf Kammern mit leicht verfügbaren Materialien, die gleichzeitig beherbergen 6 Mäusekäfige. Wir beschreiben weiter ihre Verwendung in einem Mausmodell der fetalen Alkohol-Exposition entspricht allen 3 Trimester der Schwangerschaft beim Menschen. Dieses Paradigma macht Tieren während der Trächtigkeit und postnatalen Tag 1-12.

Bau von Dampfkammern verwendet, um Mäuse zu Alkohol Expose Während der Equivalent aller drei Trimester der Human Development

Herz-Kreislauf Training und anregend Erfahrungen in einem komplexen Umfeld haben positive Auswirkungen auf mehrere Maßnahmen der Neuroplastizität im Gehirn von Nagetieren. Dieser Artikel wird die Umsetzung dieser Maßnahmen als "superintervention" diskutieren, die Radfahr und Umwelt Komplexität kombiniert und die Grenzen dieser Interventionen begegnen.

Rad-Laufen und Umwelt Komplexität als therapeutische Intervention in einem Tiermodell der FASD

Spur Eyeblink klassische Konditionierung (ECC) wurde verwendet, um zu beurteilen hippocampal-abhängige assoziativen Lernens bei erwachsenen Ratten, die eine hohe Konzentration (11,9 % V/V) von Alkohol während der frühen Entwicklung des Neugeborenen Gehirns verabreicht. ECC-Verfahren sind in der Regel fundierte Diagnose-Tools zur Erkennung von Funktionsstörungen des Gehirns über viele psychologische und biomedizinische Einstellungen.

Die Verwendung von Trace Eyeblink klassische Konditionierung hippocampale Funktionsstörung in einem Rattenmodell der Fetal Alcohol Spectrum Disorders bewerten

Diese Arbeit beschreibt ein Protokoll zur Quantifizierung des Ethanolgehalts in einem Zebrafisch-Embryo mithilfe der Kopfraumgaschromatographie von geeigneten Expositionsmethoden für die Embryoverarbeitung und Ethanolanalyse.

Quantifizierung des Ethanolgehalts in Zebrafisch-Embryonen mittels Head Space Gas Chromatographie

Hier ist ein Protokoll für das 2BC/CIE-Modell der Alkoholabhängigkeit bei Mäusen zur Untersuchung der Alkoholkonsumstörung.

Chronische intermittierende Exposition gegenüber Ethanoldampf gepaart mit der Wahl von zwei Flaschen zur Modellierung der Alkoholkonsumstörung

Das Ziel des aktuellen Protokolls ist es, die notwendigen Schritte zur Etablierung und Verwendung eines Assays für soziale Präferenzen für adulte Zebrafische zu skizzieren und zu zeigen, dass er zur Charakterisierung von Ethanol-induzierten sozialen Defekten verwendet werden kann.

Modellierung fetaler Alkoholspektrumstörungen beim Zebrafisch, um den Einfluss einer ungünstigen embryonalen Umgebung auf das Sozialverhalten von Erwachsenen zu charakterisieren

Dieses Protokoll beschreibt ein standardmäßiges Paradigma für das Trinken von Käfigen mit intermittierendem Zugang zu zwei Flaschen, um den Alkoholkonsum bei Ratten zu modellieren. Darüber hinaus bietet es eine Schritt-für-Schritt-Anleitung, um das Standardprotokoll um ein DIY-Leckerkennungssystem zu erweitern, das eine mikrostrukturelle Analyse des Trinkverhaltens ermöglicht.

Modellierung des Alkoholkonsums bei Nagetieren unter Verwendung von Zwei-Flaschen-Choice-Käfigtrinken zu Hause und Mikrostrukturanalyse

Da sich die gesetzlichen Beschränkungen ändern, was zu einer besseren Zugänglichkeit von Cannabinoidprodukten führt, ist es von entscheidender Bedeutung, Modelle zu entwickeln, um die Auswirkungen dieser Expositionen, insbesondere während der Schwangerschaft, zu untersuchen. Es wurde ein präklinisches Modell der moderaten pränatalen Cannabinoid-Exposition durch freiwillige Einnahme entwickelt, das tiefergehende Untersuchungen ermöglicht.

Präklinisches Modell der pränatalen Delta-9-Tetrahydrocannabinol-Exposition zur Bewertung ihrer Auswirkungen auf die neurologischen Entwicklungsergebnisse

Lernen Sie die Quantifizierung von Sozialverhalten bei erwachsenen Ratten nach pränataler Alkoholexposition. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung neurologischer Entwicklungsauswirkungen.

Moderate Pränatale Alkoholexposition und Quantifizierung von Sozialverhalten bei erwachsenen Ratten

Weitere Videos entdecken