Isolation, Kultur und langfristige Wartung von Primär mesencephalen dopaminergen Neuronen aus embryonalen Nagetier Brains

Ziel dieses Verfahrens ist es, primäre Neuronen aus dem ventralen Mittelhirn von Nagetieren effizient zu isolieren und zu kultivieren. Dazu wird zunächst das Mittelhirn von Nagetierembryonen präpariert. Der zweite Schritt besteht darin, das ventrale Mittelhirn sorgfältig zu isolieren.

Als nächstes muss das neuronale Gewebe dissoziiert werden, um eine Einzelzellsuspension zu erhalten. Der letzte Schritt besteht darin, die primären Neuronen in einem kleinen Volumen auf Deckgläsern zu plattieren, bevor die angehängten Zellen spät in eine 24-Well-Platte überführt werden. Letztendlich wird die Antikörper- und Immunfluoreszenzmikroskopie verwendet, um die dopaminergen Neuronen innerhalb der Kultur zu identifizieren.