Name: High Precision Zink Isotopenmessungen an Maus-Orgeln Angewandte (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-05-22T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 4 s
Description: Erfahren Sie die hochpräzise Messung von Zink-Isotopenverhältnissen in Mausorganen mittels Ionenaustauschchromatographie und Massenspektrometrie. Diese Methode ermöglicht Einblicke in Zink-Transportmechanismen und unterstützt die Diagnose von Krankheiten.

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FM erkennt Finanzierung von der ANR durch eine chaire d&#39;Excellence IDEX Sorbonne Paris Cité, die INSU durch einen PNP-Zuschuss, der Institut Universitaire de France sowie die Labex UniverEarth Programm an der Sorbonne Paris Cité (ANR-10-LABX-0023 und ANR -11-IDEX-0005-02). Wir danken auch Mittel aus dem Europäischen Forschungsrat unter der Europäischen Gemeinschaft H2020 Rahmenprogramm / ERC Finanzhilfevereinbarung # 637503 (Pristine).

HINWEIS: Verfahren, die Tiere wurden von der Institutional Animal Care und Verwenden Committee (IACUC) an der Université Paris Diderot genehmigt. 1. Vorbereitung der Materialien <ol><li> Unter Kochen destillieren 1 L der Säuren (HNO 3, HBr), um sie von Unreinheit zu reinigen. </li><li> Reinigen Sie die Becher und Spitzenadapter in einem heißen (~ 100 ° C) konzentrierte HNO 3 Säurebad für mindestens zwei Tage. </li><li> Waschen Sie die Pipettenspitzen in einer kalten 3 N HNO 3 Bad für mehrere Tage und spülen einzeln dreimal mit entionisiertem Wasser. </li></ol> 2. Probenvorbereitung <ol><li> Betäuben die Mäuse durch intraperitoneale Injektion von Ketamin und Xylazin. Beurteilen Anästhesie durch den Zehen Prise Methode. </li><li> Das Blut durch eine kardiale Punktion in Gegenwart von Heparin in 1,5-ml-Röhrchen. </li><li> Trennen des Plasmas von Blutzellen durch Zentrifugation (10 min, 1.500 x g) und übertragen das Plasma auf Polypropylen cryogenic Fläschchen mit Polypropylen-Tipps. </li><li> Entfernen Sie das restliche Blut von Organen, die durch Schneiden der Lebervene und Einspritzen von DPBS durch das Herz. Beurteilen Tod der Maus durch zervikale Dislokation. </li><li> Ernte der Organe mit sterilen Instrumenten erreicht, befreien sie von umgebenden Fett wenn überhaupt, und Schnapp frieren sie in Polypropylen Kryoröhrchen. </li></ol> 3. Chemische Reinigung <ol><li> Zunächst lösen die Proben in einer Mischung von ~ 1 ml konzentrierter (30%) H 2 O 2 und ~ 1 ml konzentrierter (etwa 15 M) HNO 3. Haben alle diese Schritte innerhalb einer Abzugshaube. <ol><li> Legen Sie das ganze Organ von Interesse in einen 15 ml Teflonbecher. Fügen Sie dann die H 2 O 2 / HNO 3 in das Becherglas 5. Halten Sie das Becherglas offen für ein paar Minuten, um Spritzer auf die Reaktion der Oxidation des organischen Materials und die Freisetzung von CO 2 zu vermeiden. </li><li> Schließlich legte das Becherglas auf einer Heizplatte bei about 100 ° C für ein paar Stunden oder bis die Lösung völlig klar. </li></ol></li><li> Öffnen der Becher und trocknen der Lösung auf einer heißen Platte bei etwa 100 ° C. </li><li> Sobald die Probe trocken ist, fügen Sie 1 ml 1,5 N HBr zu den Proben; schließen Sie das Becherglas und lassen Sie es auf einer heißen Platte lösen sich bei 100 ° C zwei Stunden. </li><li> In der Zwischenzeit die 500 ul Spalten vorzubereiten. <ol><li> Fügen Sie 500 ul der AG1X8 200-400 Mesh-Harz auf die Säule und legte es auf die Säule Rack mit einem Papierkorb-Becher darunter. Waschen des Harzes mit Wechselstrom: 5 ml von 18,2 M &amp; Omega; cm ⋅ Wasser, 5 ml 0,5 N HNO 3, 5 ml Wasser, 5 ml 0,5 N HNO 3, und dann mit 5 ml Wasser versetzt. Zustand des Harzes mit 5 ml 1,5 N HBr. </li></ol></li><li> Entfernen Sie die Bechergläser aus dem Kochplatte und setzen Sie sie in einem Ultraschallbad für etwa 30 min, und dann lassen Sie die Becher abkühlen auf RT. </li><li> Sobald der Becher wird abgekühlt und das Harz wird gewaschen, öffnen Sie das Becherglas. Setzen Sie die Spitze Adapter bis ter spritze, fügen Sie eine Pipettenspitze; Pipette die 1 ml Probe und laden Sie es auf dem Harz (sehr langsam, um nicht, um das Harz zu bewegen). </li><li> Nachdem die gesamte Flüssigkeit durch die Säule passiert, 5 ml 1,5 N HBr. </li><li> Sobald die 5 ml 1,5 N HBr durch die Säule, ersetzen Sie den Papierkorb-Becher mit einem sauberen 15 ml-Becher. </li><li> 5 ml von 0,5 N HNO 3 mit 2,5 ml auf einmal. In diesem Stadium der Zn von dem Harz eluiert. </li><li> Nachdem 5 ml HNO 3 durch die Säule passiert, nimmt das Becherglas und legen Sie sie auf einer heißen Platte bei 100 ° C bis getrocknet. </li><li> Entfernen Sie die Spalte aus der Säulenhalter; trash das Harz (verwenden Sie eine neue Harz für jede Probe). </li><li> Sobald die Probe trocken ist, wiederholen Sie das Protokoll mit dem gleichen Volumen von Säuren auf einer kleineren Kolonne (100 ul) und legen Sie sie auf einer heißen Platte bis getrocknet. Die Probe ist nun für die Massenspektrometrie. </li></ol> 4. Massenspektrometrie Measurement <ol><li> Analysieren Sie den Zn Isotopen composition auf einer Mehrkollektor-induktiv gekoppeltes Plasma-Massenspektrometer (MC-ICP-MS). <ol><li> Verwenden Sie die Maschinenparameter in Tabelle 1 zusammengefasst. </li></ol></li><li> Positionieren Sie die Faraday-Cups auf Masse (m / z) von 62 Ni, 63 Cu, Zn 64, 65 Cu, 66 Zn, 67 Zn und 68 Zn zu sammeln. </li><li> Bereiten Sie eine Lösung, die 500 ppb Zn in 0,1 M HNO 3 für die Isotopenanalyse. </li><li> Analysieren Sie die 500 ppb-Lösung von Zn mit Hilfe eines Spritzkammer in Verbindung mit einer 100 &amp; mgr; l / min Teflon Vernebler. Für jede Probe sind 30 Scans (1 Block von 30 Zyklen), in denen die Integrationszeit jeder Abtastzeile ist 8,389 sec. </li><li> Korrigieren Sie den Hintergrund durch Subtraktion der auf Spitze Null-Intensitäten aus einem Rohling-Lösung (0,1 M HNO 3 Lösung zur Wiederauflösung der Proben). </li><li> Kontrolle und korrekte möglich 64 Ni isobare Interferenzen durch Messung der Intensität der 62 Ni Höhepunkt.Angenommen, der 64 Ni / 62 Ni-Verhältnis ist natürlich (0,2548), korrigieren Sie diesen Wert aus der instrumentellen Massen bias, und entfernen Sie die 64 Ni auf die Masse 64, wie: 64 Zn Real = 64 Zn gemessen - 64 Ni = 64 Zn gemessen - (64 Ni / 62 Ni) Natur x 62 Ni gemessen. </li><li> Korrigieren Sie die instrumental Massen Bias von Belichtungsreihen jede der Proben mit 500 ppb Standardlösung des JMC Lyon Zn-Standard (oder einem anderen verfügbaren Standard wie IRMM-3702). Führen die Standardreihe durch Dividieren der 66 Zn / Zn 64 Verhältnis von der Probe durch den Mittelwert der 66 Zn / 64 Zn-Verhältnis der beiden Standards vor und nach der Probe minus 1 und multipliziert mit 1000 (siehe Gleichung 1). Typische externen Präzision auf der JMC Lyon Zn-Standard ist 0,05 permil / amu (2 Standardabweichung, 2 sd). </li></ol>

<ol><li>Marechal, C. N., Telouk, P., Albarede, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Precise+analysis+of+copper+and+zinc+isotopic+compositions+by+plasma-source+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+Geology%22%5BJournal%5D)">Precise analysis of copper and zinc isotopic compositions by plasma-source mass spectrometry.</a> Chemical Geology. 156 (1), 251-273 (1999).</li>
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<li>Urgast, D. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zinc+isotope+ratio+imaging+of+rat+brain+thin+sections+from+stable+isotope+tracer+by+LA-MC-ICP-MS%5BTitle%5D)+AND+%22Metallomics%22%5BJournal%5D)">Zinc isotope ratio imaging of rat brain thin sections from stable isotope tracer by LA-MC-ICP-MS.</a> Metallomics. 4, 1057-1063 (2012).</li>
<li>Marin-Carbonne, J., Rollion-Bard, C., Luais, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In-situ+measurements+of+iron+isotopes+by+SIMS%3A+MC-ICP-MS+intercalibration+and+application+to+a+magnetite+crystal+from+the+Gunflint+chert%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Geol%22%5BJournal%5D)">In-situ measurements of iron isotopes by SIMS: MC-ICP-MS intercalibration and application to a magnetite crystal from the Gunflint chert.</a> Chem. Geol. 285 (1-4), 50-61 (2011).</li>
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</ol>

Die Autoren haben nichts zu offenbaren.

Die Reproduzierbarkeit der Messungen wird durch repliziert Analysen der gleichen Proben während verschiedenen analytischen Sitzungen durchgeführt bewertet. Zum Beispiel 6 haben wir die gleichen terrestrischen rock 7 Mal wiederholt, und wir erhalten die Ergebnisse in der Tabelle 2 angegeben. Wie aus der Theorie der Isotopenfraktionierung 10 erwartet und nach einem Sonnensystems Material bisher gemessen (zB Meteoriten 11-13, pflanzen <...

Die Messung hoher Genauigkeit (besser als 100 ppm / atomare Masseneinheit) Zink stabilen Isotopenzusammensetzung erst seit etwa 15 Jahren durch die Entwicklung von Multi-Kollektor-Plasmaquelle Massenspektrometer möglich und wurde seitdem hauptsächlich in Erde angewendet und Planetenwissenschaften. Die Anwendungen auf dem Gebiet der Medizin, sind neu und haben ein starkes Potential als Biomarker für Krankheiten, die den Metabolismus von Zink (zB Alzheimer-Krankheit) zu ändern. Dieses Papier berichtet über eine Methode, um mit hoher Präzision in verschiedenen Organen der Maus messen die natürlichen stabilen Isotopen-Verhältnisse von Zink. Das gleiche würde für menschlichen Proben. Das Verfahren besteht in der Auflösung der Organe, die chemische Reinigung von Zink aus dem Rest der Atome, und die Analyse der Isotopenverhältnis auf einem Massenspektrometer. Die Qualität der Zn Isotopenmessungen ist abhängig von der Qualität der chemischen Reinigung (Reinheit von Zn, niedrigen leere Datei herunterladenared auf die Menge an Zn in der Probe vorhanden, hohe chemische Ausbeute des Verfahrens) und die Steuerung der Instrumental Bias. Die hohe Reinheit des Endproduktes Zn Fraktion benötigt wird, um sowohl isobare Interferenzen und nicht isobare Interferenzen, die eine Matrix Effekt entfernen. Isobar Nuklide erstellen direkten Eingriffe (zB 64 Ni). Non-isobare Interferenzen erzeugen die sogenannten &quot;Matrixeffekt&quot; und verändern die analytische Genauigkeit der Messungen durch Ändern des Zustands der Ionisation gegenüber dem reinen Zink Standards, nach dem die Proben 1 verglichen. Eine niedrige Leer (&lt;10 ng) zeigt an, daß es keine Verunreinigung der Proben durch externe Zn das würde den gemessenen Biasisotopenzusammensetzung. Zn Isotope während Ionenaustauschchromatographie 2 fraktioniert werden, die Sammlung aller Zn-Atome sichergestellt, dass keine isotopischen Fraktionierung auftritt, was bedeutet, daß der chemische Vorgang ein erfülltes Ertrag haben. Schließlich wird die Korrektur der instrument Isotopenfraktionierung während der Massenspektrometrie Messung über die &quot;Standard-Belichtungsreihe&quot; Methode. Daher sind die Hauptschwierigkeiten zu erhalten präzise Messungen sind die Steuerung der externen Kontamination (dh niedrige blank), wodurch eine vollständige Ausbeute chemische Reinigung, die sauber von anderen Atomen oder Molekülen ist, und die Korrektur der instrument Isotopenfraktionierung auf dem Massenspektrometer. In diesem Papier werden wir unsere analytischen Protokolls beschreiben Zn aus dem Maus-Organen sowie die massenspektrometrische Messung zu trennen. Die Extraktion unter Verwendung einer geringen Menge an verdünnten Säuren (HBr / HNO 3 Medien) auf Mikro-Säulen (0,5 &amp; mgr; l und 0,1 &amp; mgr; l) des Anionenaustauscherharzes durchgeführt. Es hat einen vollen Ertrag und die Messungen eine externe Reproduzierbarkeit besser als 50 ppm auf der 66 Zn / 64 Zn-Verhältnis. Ein weiterer Vorteil der Method ist, dass es sehr schnell ist. Das Verfahren ist daher sehr gut an den medizinischen Wissenschaften angepasst, wobei man braucht, um eine große Anzahl von Proben verglichen, um geowissenschaftlichen gegebenen wurden die analytischen Methoden entwickelt analysieren.

<table><tbody><tr><td>Mehrsammel-Massenspektromter für induktiv gekoppeltes Plasma</td><td>Thermo-Fisher</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anionenaustauscherharz AG1 X8 200-400</td><td>Bio-Rad</td><td>140-1443-MSDS</td><td></td></tr><tr><td>Teflonbecher</td><td>Savillex&nbsp;</td><td>200-015-12</td><td></td></tr><tr><td>Hauseigene Teflonfarben aus schrumpfbarem Teflon</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

high precision zink isotopenmessungen an maus-orgeln angewandte

High Precision Zinc Isotopic Measurements Applied to Mouse Organs

Wir präsentieren ein Verfahren mit hoher Präzision Zink Isotopenverhältnisse in der Maus Organe messen. Zink wird von 5 stabile Isotope (64 Zn, 66 Zn, 67 Zn, 68 Zn und 70 Zn), die natürlicherweise zwischen Mausorgane fraktioniert werden zusammengesetzt. Wir zeigen zunächst, wie die verschiedenen Organe, um die Zn-Atome frei zu lösen; Dieser Schritt wird durch eine Mischung von HNO 3 und H 2 O 2 umgesetzt. Reinigen wir dann die Zinkatome von allen anderen Elementen, insbesondere von isobare Interferenzen (beispielsweise Ni), durch Anionenaustausch-Chromatographie in einer verdünnten HBr / HNO 3 -Medium. Diese ersten beiden Schritte in einem Reinlabor mit hochreinen Chemikalien durchgeführt. Schließlich werden die Isotopenverhältnisse durch die Verwendung eines Multikollektor-induktiv gekoppeltes Plasma-Massenspektrometer, mit einer niedrigen Auflösung gemessen. Die Proben werden mit einer Spritzkammer und der isotopischen Fraktionierung-Massenspektrometers induzierte correc spritztted durch Vergleich des Verhältnisses der Proben an das Seitenverhältnis eines herkömmlichen (Standardbelichtungstechnik). Das vollständige typische Vorgehensweise erzeugt ein Isotopenverhältnis mit einer 50 ppm (2 sd) Reproduzierbarkeit.

In 1,5 N HBr, die Hauptzinkspezies (ZnBr3-) bildet sehr starke Komplexe mit dem Anionenaustauscherharz, während die meisten anderen Elemente nicht mit dem Harz in Wechselwirkung treten. Zink wird dann durch Ändern des Mediums verdünnt HNO 3, die Änderung der Speziation von Zn zu Zn 2+, die von dem Harz 6,7 freigesetzt wird, zurückgewonnen. Isotopenverhältnisse sind typischerweise als Teile pro 1.000 Abweichungen relativ zu einem Standard ausgedrückt: <p c...

Wir stellen die Technik vor, um Zink-Isotopenverhältnisse in Mausorganen mit hoher Präzision zu messen.

High Precision Zink Isotopenmessungen an Maus-Orgeln Angewandte

We present a procedure to measure with high precision zinc isotope ratios in mouse organs. Zinc is composed of 5 stable isotopes (64Zn, 66Zn, 67Zn, 68Zn ...

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens besteht darin, Zinkisotopenverhältnisse in Mausorganen mit hoher Präzision zu messen. Dazu werden zunächst die verschiedenen Organe in Säuren aufgelöst, um alle Atome in Lösung freizusetzen. Anschließend erfolgt die Korrektur von Aberrationen; das getrocknete Material wird dann in Wasserstoffbromid resuspendiert. Danach wird mittels Ionenaustauschchromatographie unter Verwendung einer vorbehandelten Säule im Schwerkraftbetrieb das Zink von allen anderen Elementen der Probe gereinigt. Das Zink wird mithilfe von Salpetersäure von dem Harz eluiert.Der letzte Schritt besteht darin, die Zinkisotopenverhältnisse mithilfe eines Multikollektions-Induktivgekoppelten-Plasma-Massenspektrometers zu messen. Letztendlich wird die isotopische Zusammensetzung verwendet, um Krankheiten zu diagnostizieren, die den Zinkhaushalt des Körpers verändern, indem die Gleichgewichtsverteilung von Zinkisotopen in verschiedenen Organen gemessen wird. Diese Methode wurde daher entwickelt, um Einblicke in die natürliche Verteilung und die Transportmechanismen von Zink zwischen Mausorganen zu erhalten.Es kann auf jedes Tier angewendet werden und letztendlich zur Diagnose von Krankheiten eingesetzt werden, die das Zinkgleichgewicht zwischen Organen verändern, wie beispielsweise die Alzheimer-Krankheit. Beginnen Sie dieses Verfahren mit der Vorbereitung der Materialien und der Probe, wie im Textprotokoll beschrieben, um chemische Reinigungsarbeiten in einer Abzugshaube durchzuführen, um ein Gemisch von etwa einem Milliliter 30%igem Wasserstoffperoxid und etwa einem Milliliter konzentrierter Salpetersäure herzustellen. Geben Sie das gesamte interessierende Organ in einen 15-Milliliter-Teflon-Becher.Anschließend die Mischung zum Becher geben. Den Becher einige Minuten offen stehen lassen, um Spritzer infolge der Oxidation der organischen Substanz und der Freisetzung von Kohlendioxid zu vermeiden. Zum Schluss den Becher für einige Stunden oder bis die Lösung vollständig klar ist auf eine Heizplatte bei etwa 100 Grad Celsius stellen.Als Nächstes öffnen Sie den Becher und trocknen die Lösung auf einer Heizplatte bei etwa 100 Grad Celsius. Sobald die Probe trocken ist, geben Sie ein Milliliter Wasserstoffbromid zur Probe hinzu. Schließen Sie den Becher und lassen Sie die Probe einige Stunden lang auf einer Heizplatte bei 100 Grad Celsius auflösen.Unterdessen bereiten Sie die 500-Mikroliter-Säulen vor. Geben Sie 500 Mikroliter der Ag-one-x-8-200-400-Mesh-Harzlösung in die Säule und stellen Sie sie auf den Säulenständer mit einem Abfallbecher darunter. Waschen Sie das Harz, indem Sie zweimal abwechselnd jeweils fünf Milliliter 18,2-Megohm-Zentimeter-Wasser und fünf Milliliter 0,5 Normal Salpetersäure zugeben, anschließend waschen Sie mit fünf Milliliter Wasser. Schließlich das Harz mit fünf Millilitern Bromwasserstoffsäure vorbehandeln. Danach den Becher von der Heizplatte nehmen und etwa 30 Minuten lang in ein Ultraschallbad stellen, damit der Becher auf Raumtemperatur abkühlen kann. Sobald der Becher abgekühlt ist und das Harz gewaschen wurde, den Becher öffnen.Bringen Sie den Tipp-Adapter an der Spritze an und setzen Sie eine Pipettenspitze auf. Pipettieren Sie dann ein Milliliter der Probe und geben Sie diese sehr langsam auf das Harz, um das Harz nicht aufzuwirbeln. Sobald die gesamte Flüssigkeit die Säule durchlaufen hat, geben Sie fünf Milliliter Bromwasserstoffsäure hinzu.Lassen Sie das Bromwasserstoffgas durch die Säule strömen und ersetzen Sie dann den Abfallbecher durch einen sauberen 15-Milliliter-Becher. Geben Sie anschließend fünf Milliliter Salpetersäure portionsweise je 2,5 Milliliter hinzu. In diesem Stadium wird das Zink von dem Harz eluiert.Nachdem die Salpetersäure durch die Säule gelaufen ist, entfernen Sie das Becherglas und stellen es auf eine Heizplatte bei 100 Grad Celsius, bis es vollständig eingetrocknet ist. Nehmen Sie die Säule aus dem Säulenhalter und entsorgen Sie das Harz. Sobald die Probe trocken ist, wiederholen Sie das Protokoll mit dem gleichen Säurevolumen an einer kleineren 100-Mikroliter-Säule und stellen Sie diese anschließend auf eine Heizplatte, bis sie eingetrocknet ist.Die Probe ist nun bereit für die Massenspektrometrie. Analysieren Sie die isotopische Zusammensetzung von Zink an einem Multikollektor-Induktivgekoppelten Plasma-Massenspektrometer. Richten Sie das Gerät mit den in der Textanleitung zusammengefassten Parametern ein.Positionieren Sie die Faraday-Becher so, dass sie das Verhältnis von Masse zu Ladung von Nickel 62, Kupfer 63, Zink 64, Kupfer 65, Zink 66, Zink 67 und Zink 68 sammeln. Analysieren Sie anschließend eine 500 Teile pro Milliarde Zink-Lösung in 0,1 molarer Salpetersäure unter Verwendung einer Sprühkammer in Kombination mit einem Teflon-Zerstäuber mit 100 Mikroliter pro Minute. Messen Sie für jede Probe 30 Scans, wobei die Integrationszeit jedes Scans 8,389 Sekunden beträgt.Korrigieren Sie den Hintergrund, indem Sie die On-Peak-Null-Intensitäten aus einer Leerlösungskontrolle subtrahieren, und berücksichtigen Sie mögliche isobare Störungen durch Nickel-64. Durch die Messung der Intensität des Nickel-62-Peaks wird angenommen, dass das Verhältnis von Nickel-64 zu Nickel-62 natürlich ist. Korrigieren Sie diesen Wert hinsichtlich der instrumentellen Massendiskriminierung und entfernen Sie anschließend Nickel-64 bei der Masse 64, wie im textlichen Protokoll beschrieben. Korrigieren Sie die instrumentelle Massendiskriminierung, indem Sie jede Probe mit einer Standardlösung von 500 Teilen pro Milliarde des JMC Leon Zinkstandards einklammern. Dargestellt.Hier sind typische Ergebnisse, die mit dieser Methode als Dreifachisotopen-Plot von Delta-Zink-68 gegenüber Delta-Zink-66 erhalten wurden. Für verschiedene Organe liegen alle Organe auf einer Geraden mit Steigung zwei. Dies zeigt, dass die isotopische Fraktionierung massenabhängig ist und dass die Mausorgane isotopisch voneinander verschieden sind.Interessanterweise sind rote Blutkörperchen und Knochen im Vergleich zu Serum, Gehirn und Leber angereichert an Zink-66. Diese Fraktionierung lässt sich gut durch die Gleichgewichtsverteilung von Isotopen zwischen unterschiedlichen Bindungsumgebungen von Zink in verschiedenen Organen erklären. Nach dem Anschauen des Videos sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie hochpräzise zinkisotopische Messungen von Mausorganen durchgeführt werden können.Vergessen Sie nicht, dass die Haupt Schwierigkeit darin besteht, eine Kontamination Ihrer Probe mit externem Zink zu vermeiden, und es ist daher unerlässlich, in einem sauberen Labor zu arbeiten und hochreine chemische Reagenzien zu verwenden.

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Metastasierung bei Eierstockkrebs ist durch zahlreiche diffuse intraperitoneale Läsionen gekennzeichnet, so dass eine genaue visuelle Quantifizierung der Tumorlast eine Herausforderung darstellt.  In dieser Arbeit beschreiben wir eine Methode zur in situ und ex vivo Quantifizierung der metastasierten Tumorlast unter Verwendung von rot fluoreszierenden Protein (RFP)-markierten Tumorzellen und optischer Bildgebung.

Die Quantifizierung von Intraperitonealtest Ovarian Cancer Metastasis

Hier beschreiben wir ein Protokoll für die Radiomarkierung und in vivo Testung von dreizackigen 99mTc(I)-Chelat-Tetrazin-Derivaten für Pre-Targeting und bioorthogonale Chemie.

Herstellung und Auswertung der<sup&gt; 99m</sup&gt; Tc-markierte Dreizähnige Chelate für Pre-Targeting Bioorthogonale Chemie

Dieses Protokoll beschreibt die Verwendung einer Zusammensetzung Körperanalyse und metabolische Tier Überwachungssystem Körperzusammensetzung und metabolischen Parametern bei Mäusen zu charakterisieren. Eine Adipositas-Modell induziert durch fettreiche Fütterung dient als Beispiel für die Anwendung dieser Techniken.

Körperzusammensetzung und festsetzende Stoffwechselanalyse bei hohen Fett Fed Mäusen

Kultivierte Primär-oder etablierte Zelllinien werden häufig verwendet, um grundlegende biologische und mechanistische Fragen als ersten Ansatz anzugehen, bevor tierische Modelle verwendet werden. Dieses Protokoll beschreibt, wie ganze Zellextrakte und subzelluläre Bruchteile für Studien über Zink (Zn) und andere Spurenelemente mit atomarer Absorbationsspektroskopie vorbereitet werden.

Atomische Absorbance-Spektroskopie zur Messung von intrazellulären Zink-Pools in den Mamänarchalzellen

Das Ziel des Protokolls ist es, die Techniken zu demonstrieren, die verwendet werden, um Viruserkrankungen zu untersuchen, indem das Zika-Virus von mehreren Organen in einer Maus nach einer Infektion isoliert und quantifiziert wird.

Isolierung und Quantifizierung des Zika-Virus aus mehreren Organen in einer Maus

Wir präsentieren eine robuste, kostengünstige und flexible Methode zur Messung von Veränderungen der Hepatozytenzahl und der Kernploidie in festen/kryokonservierten Gewebeproben, die keine Durchflusszytometrie erfordern. Unser Ansatz bietet eine leistungsstarke probenweite Signatur der Leberzytologie, ideal für die Verfolgung des Fortschreitens von Leberverletzungen und Krankheiten.

A High-Throughput In Situ Method for Estimation of Hepatocyte Nuclear Ploidy in Mice

Die Doppelharzguss-Mikrocomputertomographie (DUCT) ermöglicht die Visualisierung, Digitalisierung und Segmentierung von zwei röhrenförmigen Systemen gleichzeitig, um die 3D-Analyse der Organarchitektur zu erleichtern. DUCT kombiniert die Ex-vivo-Injektion von zwei röntgenopaken Harzen, gefolgt von Mikro-Computertomographie-Scanning und Segmentierung der tomographischen Daten.

DUCT: Doppelharzguss mit anschließender Mikro-Computertomographie zur 3D-Leberanalyse

Dieser Artikel zeigt, wie transferringebundenes nichtradioaktives Isotopeneisen für Studien zum Eisentransport in der Mausschwangerschaft vorbereitet und verabreicht wird. Der Ansatz zur Quantifizierung von isotopischem Eisen in fetoplazentaren Kompartimenten wird ebenfalls beschrieben.

Quantifizierung des Eisentransports über die Mausplazenta in vivo unter Verwendung nichtradioaktiver Eisenisotope

In diesem Artikel wird die Methodik zur radioaktiven Markierung eines humanspezifischen monoklonalen Anti-CD19-Antikörpers beschrieben und erläutert, wie er zur Quantifizierung von B-Zellen im zentralen Nervensystem und in peripheren Geweben eines Mausmodells für Multiple Sklerose unter Verwendung von In-vivo-PET-Bildgebung, Ex-vivo-Gamma-Zählung und Autoradiographie-Ansätzen verwendet werden kann.

Bildgebung von CD19+ B-Zellen in einem experimentellen autoimmunen Enzephalomyelitis-Mausmodell mit Positronen-Emissions-Tomographie

Dieser Artikel beschreibt die Radiosynthese, Formulierung und Qualitätskontrolle einer neuen radioaktiv markierten Sonde (d.h. 68Ga-markierter Nanobody NM-02) und ihre Verwendung für die PET/CT-Bildgebung von Kleintieren in einem Xenotransplantatmodell.

Radiosynthese, Qualitätskontrolle und Positronenemissionstomographie von Kleintieren Bildgebung von 68Ga-markierten Nanomolekülen

Erfahren Sie die hochpräzise Messung von Zink-Isotopenverhältnissen in Mausorganen mittels Ionenaustauschchromatographie und Massenspektrometrie. Diese Methode ermöglicht Einblicke in Zink-Transportmechanismen und unterstützt die Diagnose von Krankheiten.

High Precision Zink Isotopenmessungen an Maus-Orgeln Angewandte

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