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Spannung und Calcium Dual Channel Optical Mapping von Cultured HL-1 Vorhofmuskelzellen Monolayer
Spannung und Calcium Dual Channel Optical Mapping von Cultured HL-1 Vorhofmuskelzellen Monolayer
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JoVE Journal Biology
Voltage and Calcium Dual Channel Optical Mapping of Cultured HL-1 Atrial Myocyte Monolayer

Spannung und Calcium Dual Channel Optical Mapping von Cultured HL-1 Vorhofmuskelzellen Monolayer

Full Text
10,877 Views
08:25 min
March 23, 2015

DOI: 10.3791/52542-v

Jiajie Yan*1, Justin K. Thomson*1, Weiwei Zhao1, Vladimir G. Fast2, Tong Ye3, Xun Ai1

1Department of Cell and Molecular Physiology,Loyola University Chicago, 2Department of Biomedical Engineering,University of Alabama at Birmingham, 3Department of Bioengineering,Clemson University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article describes a technique for dual channel optical mapping in cultured HL-1 atrial cell monolayers. The protocol enables simultaneous visualization of calcium and voltage activity, facilitating detailed analysis of electrophysiological properties.

Key Study Components

Area of Science

  • Electrophysiology
  • Cell Culture
  • Fluorescence Microscopy

Background

  • HL-1 atrial cells are a model for studying cardiac electrophysiology.
  • Understanding calcium and voltage dynamics is crucial for cardiac research.
  • Simultaneous mapping provides insights into cellular behavior.
  • This technique enhances the analysis of action potentials and calcium transients.

Purpose of Study

  • To map transmembrane potentials and calcium transients in HL-1 monolayers.
  • To visualize the propagation of electrical signals across cell layers.
  • To improve understanding of cardiac cell interactions.

Methods Used

  • Culturing HL-1 cells on a cover slip to achieve proper density.
  • Loading cells with calcium and voltage-sensitive dyes.
  • Stimulating the monolayer with a bipolar electrode.
  • Recording action potentials and calcium transients using fluorescence microscopy.

Main Results

  • Successful simultaneous mapping of calcium and voltage activity.
  • Clear visualization of signal propagation across the monolayer.
  • Detailed traces of action potentials and calcium transients obtained.
  • Insights into the electrophysiological properties of HL-1 cells.

Conclusions

  • The dual channel optical mapping technique is effective for cardiac research.
  • This method enhances the understanding of cellular electrophysiology.
  • Future studies can build on these findings to explore cardiac function.

Frequently Asked Questions

What are HL-1 cells?
HL-1 cells are a continuous cell line derived from atrial myocytes, used for cardiac research.
Why is dual channel mapping important?
It allows simultaneous observation of calcium and voltage changes, providing a comprehensive view of cardiac cell activity.
What dyes are used in this technique?
Calcium-sensitive and voltage-sensitive fluorescent dyes are used to visualize cellular activity.
How are the cells stimulated?
The cells are stimulated using a bipolar electrode to induce action potentials.
What is the significance of this research?
This research enhances the understanding of cardiac electrophysiology and may inform future therapeutic strategies.

Dieser Artikel beschreibt die Technik, die zur Durchführung von optischem Zweikanal-Mapping in kultivierten HL-1-Vorhofzell-Monoschichten verwendet wird. Dieses einzigartige Protokoll ermöglicht die gleichzeitige Visualisierung der Calcium- (Ca) und Spannungsaktivität (Vm) im selben Bereich für die detaillierte Detektion und Analyse der elektrophysiologischen Eigenschaften von Kulturmonoschichten.

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, gleichzeitig Transmembranpotentiale und Kalziumtransienten in HL one atrialen Monoschichten zu kartieren, die sowohl mit Kalzium- als auch mit Spannungsfarbstoffen beladen sind. Dies wird erreicht, indem zunächst die HL 1-Zellen auf einem Deckglas auf eine geeignete konfluente Dichte kultiviert werden. Der zweite Schritt besteht darin, das Kalzium und die spannungsempfindlichen Farbstoffe in die Zellen zu laden.

Als nächstes wird die HL-Monoschicht mit einer bipolaren Elektrode stimuliert. Der letzte Schritt ist die Aufzeichnung des Aktionspotentials und der transienten Calciumsignale durch Fluoreszenzmikroskopie. Letztendlich können das Aktionspotential und die transienten Kalziumspuren zusammengestellt werden, um die Ausbreitung der Signale über die konfluente Monoschicht im Laufe der Zeit zu zeigen.

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