Name: Die Quantifizierung der neurovaskulären Schutz Nach Repetitive hypoxische Präkonditionierung und Transient mittleren Hirnarterie Occlusion in Mice (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-05-04T12:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 48 s
Description: Erfahren Sie die repetitive Hypoxie-Präkonditionierung zur Quantifizierung neurovaskulären Schutzes bei Mäusen nach Schlaganfall. Diese Methode misst simultan Infarktvolumen und Blut-Hirn-Schranken-Integrität.

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Besonderer Dank geht an das Gidday-Labor für ihre Arbeit bei der Entwicklung des RHP-Protokolls, sowie an die Neuro-Models Facility (UTSW) für ihre Unterstützung bei den tMCAo-Operationen. Diese Arbeit wurde durch Zuschüsse der American Heart Association (AMS), des Haggerty Center for Brain Injury and Repair (UTSW; AMS) und der Spastischen Paralyse Research Foundation des Distrikts Illinois-Eastern Iowa von Kiwanis International (JMG).

Die Autoren haben nichts offenzulegen.

Eine einmalige Exposition, um systemische Hypoxie (dh 2 Stunden von 11% O 2) bei Mäusen &quot;transient&quot; schützt das Gehirn vor tMCAo, 29 bedeutet, die epigenetische Antwort auf die hypoxische Präkonditionierung Herausforderung ist von kurzer Dauer, und die Grundlinie Phänotyp innerhalb restauriert Tagen. Repetitive Präsentationen des hypoxischen Präkonditionierung Reiz dramatisch verlängern die Dauer der neuroprotektiven Phänotyp. 6 Viele Studien haben gezeigt, dass die Hä...

Als die führende Ursache für Invalidität bei Erwachsenen und die vierte führende Ursache des Todes ist der Schlaganfall eine der am stärksten beeinträchtigenden Krankheitszuständen vor der erwachsenen Bevölkerung der Vereinigten Staaten. 1 Tiermodellen von Schlaganfall ermöglichen experimentelle Erforschung neuer Methoden zur Reduzierung ischämischer Verletzung und Verbesserung der post-Wiederherstellung nach Schlaganfall. Ein neuartiger Weg für solche translationale Forschung ist Präkonditionierung. Vorkonditionierung ist die vorsätzliche Verwendung eines nicht-schädigenden Stimulus, um Schäden durch eine nachfolgende, und schwerer, Verletzungen zu vermeiden. 2 hypoxische Präkonditionierung hat sich gezeigt, pleiotrope Veränderungen im Gehirn, die Schutz vor Schlaganfall in vivo und in vitro Studien in produzieren . 3 jedoch eine einzige Forderung zu Hypoxie bietet nur kurzfristige Neuroprotektion, induzieren weniger als 72 Stunden von Toleranz gegenüber Ischämie in erwachsenen Mäusen. 4 Auch nach vier Wochen 14 Stunden tägliche Exposition bis hypobaren Hypoxie, Lin et al. found dass die Neuroprotektion wurde nur für eine Woche. 5 Repetitive hypoxischen Präkonditionierung (RHP) aufrechterhalten wird durch stochastische Schwankungen der Häufigkeit, Dauer und Intensität der hypoxischen Exposition aus. Im Gegensatz zu einem einzigen Präkonditionierung Herausforderung, RHP induziert eine cerebroprotektive Phänotyp, für bis zu 8 Wochen bei Mäusen. 6 RHP reduzierte Infarktvolumen, Blut-Hirn-Schranke (BHS) Störungen, Gefäßentzündung, und Leukozyten Diapedese für Wochen nach der letzten hypoxischen Exposition . RHP spezifisch verringert Entzündungen im ischämischen Gehirn durch Reduzieren T-Zelle, Monozyt und Makrophage-Populationen, und gleichzeitig B-Zellpopulationen in der ischämischen Hemisphäre. 7 Tatsächlich induzierte RHP immunsuppressiv Phänotyp bei Mäusen vor einer ZNS-Verletzung, einschließlich Schlaganfall. RHP-behandelten B-Zellen aus RHP-behandelten gesunden Mäusen isoliert zeigte eine einzigartige entzündungshemmende Phänotyp, mit einer Herabregulation der beiden Antigen-Präsentation und Antikörperproduktion. DieGesamtreduzierung der proinflammatorischen adaptiven Immunmechanismen macht RHP eine hervorragende Methode, um die endogene Immunsuppression nicht nur für ZNS-spezifische Entzündungserkrankungen zu induzieren, aber auch systemische Verletzungen oder Krankheitsmodelle, die eine pro-inflammatorischen Pathologie gehören. RHP reduziert sowohl Infarktvolumen und BBB Störung nach einer transienten mittleren Hirnarterie (tMCAo). Tiermodellen von Schlaganfall, wie die üblicherweise verwendeten tMCAo, dramatisch verbessern das Verständnis der Pathophysiologie von Schlaganfall, sowie die Gestaltung effektiver Neurotherapie. Zuerst von Koizumi et al., 1986, 8 die tMCAo Verfahren ein weit verbreitetes Verfahren zur Induzierung von Schlaganfall bei Nagern und eine der bevorzugten Methoden zur Untersuchung von Entzündungen nach Reperfusion. Da die Methoden zur tMCAo entwickeln, die neuere Verwendung von silikonbeschichteten Filamente weiter zu reduzieren das Risiko einer Subarachnoidalblutung Vergleich zu anderen Modellen 9,10 &lt;/ Sup&gt; und die Zuverlässigkeit zu erhöhen, wenn auch leider tMCAo oft produziert eine breite Variation in der Infarktvolumen 11-13. Die meisten dieser Studien Abgrenzung Infarkt Regionen in koronalen Hirnschnitten durch Färbung mit 2,3,5- Triphenyltetrazoliumchlorid (TTC), als Gold-Standard für die Quantifizierung der Infarkt, weil es ist eine einfache und kostengünstige Möglichkeit, um lebendige, reproduzierbare Ergebnisse zu erzielen. TTC dient als Substrat in Mitochondrien Dehydrogenasen. Bei Gehirnschnitten sind dem TTC-Lösung ausgesetzt wird, wird TTC selektiv in lebende Zellen aufgenommen, wo ihre nichtlöslichen Reduktionsprodukt, Formazan- fällt auf eine tiefrote Farbe in lebensfähige Mitochondrien. Wegen mitochondriale Dysfunktion in der ischämischen Gewebe bleibt diese Gewebe weiß, so dass für die Differenzierung von beschädigten und gesundem Gewebe. 14 RHP reduziert auch BBB Störung in der ischämischen Hemisphäre. 6 daher den doppelten Quantifizierung BBB Integrität innerhalb der gleichen bRegenfälle als TTC-basierte Infarktvolumen Bestimmungen 15 würde nützliche Informationen über die volle Wirksamkeit der körpereigenen Schutz und mögliche kausale Beziehungen zwischen BBB Störung und Infarkt in unbehandelten und behandelten Tieren zu schaffen. Der Zustrom von peripheren Blut durch einen gestörten BBB, sekundäre Schlaganfall, erhöht Leukozyten-Populationen, proinflammatorische Zytokine, oxidativer Stress, vasogenen Ödeme und hämorrhagischen Transformation in der ischämischen Hemisphäre, letztlich die Erhöhung der Infektionsraten und Mortalität bei Patienten mit ischämischem Schlaganfall . 16,17 Ein übliches Verfahren zur Messung der BBB Störungen in Tiermodellen ist durch Quantifizierung von Evans-Blau (EB) Farbstoff Leck in das Gehirn. 15,18-21 EB selektiv an Albumin, eine globuläre Proteinserum (MW = 65 kDa) das bedeutet nicht die BBB nicht überqueren in unverletzten Tiere 22. Nach ischämischen Schlaganfall, infiltriert EB das Gehirn, und fluoresziert bei 620 nm, so dass für die Messung der optischen Dichte within perfundierten verletzt Parenchym. 22. Die optische Dichte ist direkt proportional zu der Permeabilität der BBB bei EB aus der Post-mortem kortikalen Vaskulatur von transcardiac Perfusion gewaschen. Mit der unmittelbaren Bearbeitung der TTC-gefärbten Gehirn bei Tieren mit EB Applikation können sowohl die Infarktvolumen und BBB Störung effektiv quantifiziert werden. Es sollte jedoch angemerkt werden, dass neuronale Schädigung und BBB Störung nicht gleichzeitige Prozesse in der post stroke Gehirn, 23,24, so dass die Auswahl der Tötungszeitpunkt ist ein wichtiger Gesichtspunkt. Das folgende Protokoll beschreibt die RHP-Methode, die tMCAo Verfahren zur Induktion einer vorübergehenden Arterienverschluss, dass Modelle mittleren Hirnarterie Verschlüssen bei menschlichen Patienten, und die Dual histologischen Methoden zur Bestimmung der neuronalen und vaskulären Schlaganfall Verletzungen Endpunkte. TTC misst Zelltod und kumulative Gewebeschädigung, so dass für die Quantifizierung eines Gesamtinfarkt volume, während EB sieht die hemisphärische Quantifizierung BBB Schäden.

<table><tbody><tr><td>Durchflussmesser, Regler</td><td>VetEquip, Inc</td><td>Sonderauftrag</td><td>Vier Durchflussmesser sind an einem 6,0 mm flexiblen PVC-Schlauch befestigt, der mit einer Kunststoffbuchse mit dem Einlassanschluss jeder Induktionskammer verbunden ist. Diese Durchflussmesser sind mit einer Metallstange von 6,5" x 1" x 1" verschraubt. Dieser Metallstab ist mit einem MI-246-P-Manometer mit DISS-Ausgang verschraubt. Dieses Manometer und Durchflussmessgerät kann mit einem Schraubenschlüssel an jede neue Gasflasche angebaut werden.</td></tr><tr><td>21% O2Tank</td><td>AirGas</td><td>OX USP200</td><td></td></tr><tr><td>11% O2 Tank</td><td>AirGas</td><td>Spezialauftrag</td><td></td></tr><tr><td>8% O2 Tank&nbsp;</td><td>AirGas</td><td>Sonderbestellung</td><td></td></tr><tr><td>15 L Induktionskammern</td><td>VetEquip</td><td>941454</td><td></td></tr><tr><td>Moor Laber Dopper Flow&nbsp;</td><td>Moor Instruments&nbsp;</td>Sonde <td>für moorVMS-LDF1-HP</td><td>mit 0,8 mm Durchmesser&nbsp;</td></tr><tr><td>Hochintensive Beleuchtung&nbsp;</td><td>Nikon</td><td>NI-150</td><td></td></tr><tr><td>Zoom Stereomikroskop&nbsp;</td><td>NIkon</td><td>SMZ800</td><td>Andere Operationsmikroskope können verwendet werden.</td></tr><tr><td>Kent Scientific Right Temperature CODA</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>Nicht mehr hergestellt</td><td>Empfohlener Ersatz ist PhysioSuite mit RightTemp Temperaturüberwachung und homöothermer Steuerung (Kent Scientific, #PS-RT).</td></tr><tr><td>Hovabator Brutkasten</td><td></td><td>Stromberg's 2362-E</td><td>Unser Modell ist der 2362N. 2362E ist ein neueres Modell und verfügt über ein elektronisches Thermostat.&nbsp;</td></tr><tr><td>V010 Anästhesiesystem&nbsp;</td><td>VetEquip</td><td>901807</td><td>beinhaltet: einen zehn Fuß langen Hochdruck-Sauerstoffschlauch, einen Rahmen, einen Durchflussmesser, eine Sauerstoffspülung, einen Verdampfer, einen Beatmungskreislauf, eine Kammer, Nasenkonusen, Abgasevakuierungsschläuche und zwei VapoGuard-Filter</td></tr><tr><td>mit 250 ml Isofluran;</td><td>Butler Schein</td><td>NDC-11695</td><td></td></tr><tr><td>D-6 Vet Trim Animal Akku-Trimmer&nbsp;</td><td>Andis&nbsp;</td><td>#23905</td><td>Ersatzklingen sind bei Andis erhältlich (#23995)</td></tr><tr><td>Betadine&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>19-898-867&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Q-tips</td><td>Mehrere Verkäufer&nbsp;</td><td>Katalognummer nicht verfügbar&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Mullbinden</td><td>Fisher Scientific</td><td>67622</td><td></td></tr><tr><td>OP-Abdecktuch</td><td>Fisher Scientific</td><td>GM300&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Seiden-Nähte&nbsp;</td><td>Look/Div Surgical Specialties</td><td>SP115</td><td></td></tr><tr><td>Nylon Nähte</td><td>Look/Div Surgical Specialties</td><td>SP185</td><td></td></tr><tr><td>Durmont #5 Pinzette (2)&nbsp;</td><td>Feine wissenschaftliche Werkzeuge&nbsp;</td><td>11251-35</td><td>Abgewinkelt 45°;</td></tr><tr><td>Chirurgische Schere</td><td>Feine Wissenschaft Werkzeuge&nbsp;</td><td>14028-10</td><td></td></tr><tr><td>3 mm Vannas</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>INS600177</td> Hartman Hemostate mit <td>gerader Klinge</td></tr><tr><td>&nbsp;</td><td>Fine Scientific Tools</td><td>13002-10</td><td></td></tr><tr><td>Okkludierende Filamente</td><td>Washington University</td><td>Spezialauftrag</td><td>Filamente werden an der Washington University silikonbeschichtet und den UTSW-Einrichtungen gegen Gebühr zur Verfügung gestellt.</td></tr><tr><td>Evans</td><td>Blue Sigma Aldritch</td><td>E2129-10G</td><td></td></tr><tr><td>Filterpapier&nbsp;</td><td>Sigma Aldritch</td><td>WHA1001150</td><td>150 mm, Kreise, Güteklasse 1&nbsp;</td></tr><tr><td>Wiegen Boote</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-202-101</td><td>2,5" Durchmesser</td></tr><tr><td>0,9% Natriumchlorid-Injektion USP&nbsp;</td><td>Baxter Pharmaceutics&nbsp;</td><td>2B1321</td><td></td></tr><tr><td>0,3 cc Insulinspritze mit 29-Gauge-Nadel</td><td>Becton Dickinson Labware</td><td>309301</td><td></td></tr><tr><td>Rückhaltesystem mit flachem Boden&nbsp;</td><td>Braintree Wissenschaftlich&nbsp;</td><td>FB&nbsp; M</td><td>2,0" Durchmesser</td></tr><tr><td>TTC</td><td>Sigma</td><td>T8877</td><td></td></tr><tr><td>10x PBS, pH 7,4</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP399-20</td><td></td></tr><tr><td>Wasserbad</td><td>Mehrere Verkäufer&nbsp;</td><td>Katalognummer nicht verfügbar&nbsp;</td><td>Szintillationsröhrchen mit TTC können alternativ zum Wasserbad manuell unter fließendes warmes Wasser gehalten werden.</td></tr><tr><td>Styroporplatte</td><td>Mehrere Verkäufer&nbsp;</td><td>Katalognummer nicht verfügbar&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Großes Spritzenset</td><td>PumpSystems Inc</td><td>P-SYRKIT-LG</td><td></td></tr><tr><td>Perfusionspumpe</td><td>PumpSystems Inc</td><td>NE-300&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>60 cc Spritze</td><td>Fisher Scientific</td><td>NC9203256</td><td></td></tr><tr><td>27 Gauge geflügeltes Infusionsset</td><td>Kawasumi Laboratories, Inc</td><td>D3K1-25G 1</td><td></td></tr><tr><td>20 ml Szintillationsfläschchen</td><td>Fisher Scientific</td><td>50-367-126</td><td></td></tr><tr><td>Spatel aus Edelstahl</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-373-25A</td><td></td></tr><tr><td>Alto Acryl 1,0 mm Mausgehirn, koronal</td><td>CellPoint Wissenschaftlich&nbsp;</td><td>Katalognummer nicht verfügbar&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>0,21 mm Klingen aus rostfreiem Stahl, 25 Stück</td><td>CellPoint Scientific&nbsp;</td><td>Katalognummer nicht verfügbar&nbsp;</td><td>Wiederverwendbare Kryostat-Schaufeln sind eine kostengünstige Alternative.</td></tr><tr><td>4% Paraformaldehyd</td><td>Santa Cruz Biotechnologie&nbsp;</td><td>SC-281692</td><td></td></tr><tr><td>Superfrost Objektträger&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-550-15</td><td></td></tr><tr><td>HP Scanjet G4050</td><td>Mehrere Verkäufer&nbsp;</td><td>Katalognummer nicht verfügbar&nbsp;</td><td>Andere kommerzielle Scanner eignen sich für diesen Schritt im Protokoll.</td></tr><tr><td>BildJ&nbsp;</td><td>Katalognummer des National Institute</td><td>of Health nicht verfügbar&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Analysenwaage</td><td>Mettler Toledo&nbsp;</td><td>XSE 205U</td><td></td></tr><tr><td>Präzisions-Kompaktofen&nbsp; &nbsp;</td><td>Thermo Scientific&nbsp;</td><td></td><td></td>PR305225M</tr><tr><td>1,7 ml Mikrozentrifugenröhrchen (Eppendorfs)</td><td>Denville Scientific&nbsp;</td><td>C2170</td><td></td></tr><tr><td>Formamid</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP228-100</td><td></td></tr><tr><td>96-Well-Platten</td><td>Fisher Scientific</td><td>07-200-9</td><td></td></tr><tr><td>Epoch Mikroplatten-Spektralphotometer&nbsp;</td><td>BioTek&nbsp;</td><td>Katalognummer nicht verfügbar&nbsp;</td><td></td></tr></tbody></table>

die quantifizierung der neurovaskulären schutz nach repetitive hypoxische präkonditionierung und transient mittleren hirnarterie occlusion in mice

Quantification of Neurovascular Protection Following Repetitive Hypoxic Preconditioning and Transient Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

Experimentellen Tiermodellen von Schlaganfall sind wertvolle Werkzeuge für das Verständnis Schlaganfall Pathologie und Entwicklung wirksamerer Behandlungsstrategien. A 2 Wochen Protokoll für sich wiederholende hypoxischen Präkonditionierung (RHP) induziert langfristigen Schutz gegen das zentrale Nervensystem (ZNS) verletzt in einem Mausmodell der fokalen ischämischen Schlaganfall. RHP besteht aus 9 stochastischen Belichtungen auf Hypoxie, die sowohl in der Zeitdauer (2 bzw. 4 h) und die Intensität (8% und 11% O 2) zu variieren. RHP reduziert Infarktvolumen, Blut-Hirn-Schranke (BHS) Störung, und die nach einem Schlaganfall entzündliche Reaktion für Wochen nach dem letzten Auftreten von Hypoxie, was auf eine langfristige Induktion einer endogenen ZNS-Schutz Phänotyp. Die Methodik für die Dual-Quantifizierung der Infarktvolumen und BBB Störung wirksam ist bei der Beurteilung der neurovaskulären Schutz bei Mäusen mit RHP oder andere vermeintliche Neuroprotektoren. Erwachsene männliche Swiss Webster-Mäuse wurden durch RHP oder Dauer-äquivalenten Belichtungen auf 21% O vorkonditioniert <sub&gt; 2 (dh Raumluft). A 60 min transiente mittleren Hirnarterie (tMCAo) wurde 2 Wochen nach der letzten induzierten hypoxischen Exposition. Sowohl der Okklusion und Reperfusion wurden durch transkranielle Laser-Doppler-Flussmessung bestätigt. Zweiundzwanzig Stunden nach der Reperfusion, Evans Blue (EB) wurde intravenös durch eine Injektion in die Schwanzvene verabreicht. 2 Stunden später wurden die Tiere mit Isofluran Dosierung und Gehirnschnitte geopfert wurden mit 2,3,5-Triphenyltetrazoliumchlorid (TTC) angefärbt. Infarkte Volumina wurden dann quantifiziert. Als nächstes wurde EB aus dem Gewebe über 48 Stunden extrahiert, um BBB-Störung nach tMCAo bestimmen. Zusammenfassend ist RHP ein einfaches Protokoll, repliziert werden kann, mit minimalen Kosten, um langfristige endogenen neurovaskulären Schutz vor Schlaganfall Verletzungen bei Mäusen zu induzieren, mit der Translationspotential anderen ZNS-basierte und systemische proinflammatorische Krankheitszuständen.

An dieser Studie nahmen 25 männliche Swiss Webster-Mäuse, die 10 Wochen alt waren zu Beginn der Randomisierung in RHP (n = 10) oder 21% O 2 (n = 15) Gruppen. Zwei Wochen nach der letzten RHP Belichtung wurden chirurgische Verfahren durchgeführt, wobei Gruppen verblindet und zwischen den Tagen ausgeglichen. Nach tMCAo starb 1 Maus während der postoperativen Erholung und 1 Maus wurde von der Studie ausgeschlossen, weil sie nicht die Reperfusion CBF Kriterium erfüllen. Beide Mäuse waren ausgeschlossen von der 21...

Dieses Protokoll beschreibt die wiederholte hypoxische Präkonditionierung oder kurze Exposition gegenüber systemischer Hypoxie, die das Infarktvolumen und die Störung der Blut-Hirn-Schranke nach einem vorübergehenden Verschluss der mittleren Hirnarterie bei Mäusen reduziert. Es wird auch die duale Quantifizierung des Infarktvolumens und der Störung der Blut-Hirn-Schranke nach einem Schlaganfall beschrieben, um die Wirksamkeit des neurovaskulären Schutzes zu bewerten.

Die Quantifizierung der neurovaskulären Schutz Nach Repetitive hypoxische Präkonditionierung und Transient mittleren Hirnarterie Occlusion in Mice

Experimental animal models of stroke are invaluable tools for understanding stroke pathology and developing more effective treatment strategies. A 2 week ...

Das übergeordnete Ziel des folgenden Experiments besteht darin, die Neuroprotektion nach wiederholter Hypoxie-Präkonditionierung oder RHP zu quantifizieren, indem gleichzeitig das Infarktvolumen und die Integrität der Blut-Hirn-Schranke gemessen werden. Dies wird erreicht, indem Mäuse neun stochastischen Hypoxie-Expositionen ausgesetzt werden, die sich sowohl in Dauer als auch in Intensität unterscheiden, um einen neurovaskulären Schutz vor Schlaganfall zu vermitteln. Anschließend wird bei der Maus ein Schlaganfall induziert und eine Injektion mit Evans-Blau gefolgt. Evan's Blue bindet selektiv Albumin und ermöglicht die Quantifizierung einer Blut-Hirn-Schranke-Störung nach Injektion und anschließender Tötung des Tieres. Das Gehirn wird entnommen und mit TTC gefärbt, um das Infarktvolumen zu quantifizieren. Die Ergebnisse zeigen neuroprotektive Vorteile einer wiederholten hypoxischen Präkonditionierung bei Mäusen nach ischämischem Schlaganfall.Der Hauptvorteil dieser Technik gegenüber bestehenden Methoden wie der Hypoxie-Vorbehandlung mit einzelner Exposition besteht darin, dass RHP bei Mäusen eine Neuroprotektion für mindestens acht Wochen bewirkt. Diese duale Quantifizierungsmeth

quantification-neurovascular-protection-following-repetitive-hypoxic

Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Es wird vermehrt Hinweise darauf, dass ischämischen Präkonditionierung (PC) - verleiht einen transienten Schutz einer nachfolgenden Beschädigung ischämischen - eine schonende ischämischen Herausforderung an das Gehirn. Wir haben festgestellt, bilateralen Arteria carotis communis Okklusion (BCCAO) als Vorbehandlung Stimulus bis Anfang ischämischen Toleranz (IT), um transiente fokale zerebrale Ischämie (induziert durch Mitte Zerebralarterie, MCAO) induzieren in C57Bl6 / J Mäusen.

Bilaterale Arteria carotis communis Occlusion als adäquate Vorbehandlung Stimulus zu frühe ischämische Toleranz zu Focal zerebraler Ischämie induzieren

 Bewertung der neuroprotektiven Effekte der sauren Postkonditionierung in einem Mausmodell der zerebralen Ischämie

Quelle: Poinsatte, K., et al., Quantifizierung des neurovaskulären Schutzes nach wiederholter hypoxischer Präkonditionierung und vorübergehendem Verschluss der mittleren Hirnarterie bei Mäusen. J. Vis. Exp. (2015)Dieses Video zeigt die Methode der repetitiven hypoxischen Präkonditionierung (RHP), indem eine Maus kontrollierten Hypoxiezyklen ausgesetzt wird, bevor sie einen ischämischen Schlaganfall induziert. Das Experiment untersucht seine Auswirkungen auf die Stabilität der...

Neuronale Anpassung an repetitive hypoxische Präkonditionierung bei Mäusen

Quelle: Lee, S. E., et al. Bewertung der neuroprotektiven Wirkung von Glycyrrhizae Radix et Rhizoma-Extrakt unter Verwendung eines Mausmodells mit transientem Verschluss der mittleren Hirnarterie. J. Vis. Exp. (2018)Dieses Video zeigt das Verfahren zur Beurteilung der neuroprotektiven Wirkung einer Testsubstanz in einem Mausmodell mit Verschluss der mittleren Hirnarterie. Die Verbindung dringt in das Gehirn ein, verhindert den neuronalen Tod und reduziert das Infarktvolumen, was ihre...

Bewertung der neuroprotektiven Wirkung einer Testsubstanz in einem Mausmodell für einen Verschluss der mittleren Hirnarterie

Um die Pathophysiologie des Schlaganfalls zu verstehen, ist es wichtig, zuverlässige Modelle zu verwenden. Dieses Papier wird eine der am häufigsten verwendeten Taktmodelle bei Mäusen beschreiben, die Arteria cerebri media Okklusion (MCAo) Modell genannt (auch bezeichnet als die intraluminale Faden oder Naht Modell) mit Reperfusion.

Chirurgische Ansatz für Arteria cerebri media Occlusion und Reperfusion fokaler zerebraler Ischämie bei Mäusen

Chirurgische Verschluss eines distalen Arteria cerebri media Zweig (MCAo) ist ein häufig verwendetes Modell in experimentellen Schlaganfallforschung. Diese Handschrift beschreibt die grundlegende Technik der Dauer MCAo, mit der Einfügung eines seitlichen Schädelfenster kombiniert werden, die die Möglichkeit für eine Längsintravitalmikroskopie in Mäusen bietet.

Lateral Chronic Cranial Fenster Vorbereitung Ermöglicht In Vivo Beobachtung Nach Artery Occlusion Distal cerebri bei Mäusen

Wir beschreiben ein Mausmodell für einen Schlaganfall, der durch den Verschluss der mittleren Hirnarterie mit einer silikonbeschichteten Naht induziert wird. Das Protokoll kann angewendet werden, um einen dauerhaften Verschluss oder eine vorübergehende Ischämie mit anschließender Reperfusion zu induzieren.

Die Induktion von ischämischem Schlaganfall und Ischämie-Reperfusion bei Mäusen die Mittel Artery Occlusion Technik und Visualisierung von Infarktbereich verwenden

Die saure Nachkonditionierung schützt vor der zerebralen Ischämie. Hier stellen wir zwei Modelle vor, um APC auszuführen. Sie werden jeweils durch Übertragung von kortikostriatalen Scheiben auf sauren Puffer nach Sauerstoff-Glukose-Deprivation in vitro und durch Einatmen von 20% CO 2 nach mittlerer zerebraler Arterienverschluss in vivo erreicht .

Experimentelle Modelle zur Untersuchung der Neuroprotektion der sauren Nachkonditionierung gegen zerebrale Ischämie

Ein Maus-Modell der zerebralen Ischämie-Reperfusion wird gegründet, um die Pathophysiologie des Schlaganfalls zu untersuchen. Wir nach distal verbinden rechts mittlere zerebrale Arterie und rechts gemeinsame Halsschlagader und Blutfluss nach 10 oder 40 min der Ischämie wiederherstellen.

Zwei-Schiff Okklusion Mausmodell der zerebralen Ischämie-reperfusion

Dieses Protokoll beschreibt das Modell der transienten fokalen zerebralen Ischämie bei Mäusen durch intraluminalen Verschluss der mittleren Hirnarterie. Darüber hinaus werden Beispiele für die Ergebnisbewertung mit Hilfe von Magnetresonanztomographie und Verhaltenstests gezeigt.

Transienter mittlerer Hirnarterienverschluss Modell des Schlaganfalls

In dieser Arbeit stellen wir ein Protokoll zur Etablierung eines distalen Modells für einen Verschluss der mittleren Hirnarterie (dMCAO) durch transkranielle Elektrokoagulation bei C57BL/6J-Mäusen vor und bewerten das anschließende neurologische Verhalten und die histopathologischen Merkmale.

Induktion eines akuten ischämischen Schlaganfalls bei Mäusen mit der Technik des distalen Mittelarterienverschlusses

Erfahren Sie die repetitive Hypoxie-Präkonditionierung zur Quantifizierung neurovaskulären Schutzes bei Mäusen nach Schlaganfall. Diese Methode misst simultan Infarktvolumen und Blut-Hirn-Schranken-Integrität.

Die Quantifizierung der neurovaskulären Schutz Nach Repetitive hypoxische Präkonditionierung und Transient mittleren Hirnarterie Occlusion in Mice (Video) | JoVE Journal

Die Quantifizierung der neurovaskulären Schutz Nach Repetitive hypoxische Präkonditionierung und Transient mittleren Hirnarterie Occlusion in Mice

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