Neuronale Differenzierung von embryonalen Stammzellen der Maus in Serum-freiem Monolayer-Kultur

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, embryonale Stammzellen der Maus in einer serumfreien Monolayer-Zellkultur zu einer neuronalen Linie zu differenzieren. Dies wird erreicht, indem das Kulturgefäß zunächst mit Gelatine bestreicht wird. Im zweiten Schritt werden die embryonalen Stammzellen in Differenzierungsmedium zu einer Einzelzellsuspension assoziiert und auf die entsprechenden Plattierungsdichten verdünnt.

Im letzten Schritt werden die Zellen auf die Gel-ENC-beschichtete Platte ausgesiedelt. Letztendlich wird die Immunfluoreszenzmikroskopie eingesetzt, um den Erfolg der Differenzierung durch Visualisierung der interessierenden neuronalen Marker zu bestätigen. Im Allgemeinen werden Personen, die mit dieser Methode noch nicht vertraut sind, Schwierigkeiten haben, da die Beschichtung mit der richtigen Dichte entscheidend ist, um eine gute Differenzierung zu erreichen.