Murine Nierentransplantations Technik

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, eine modifizierte arterielle Anastomosentechnik für Nierentransplantationen bei der Maus zu demonstrieren. Dazu werden zunächst die relevanten Gefäße des Spenders sorgfältig präpariert. Der zweite Schritt besteht darin, eine Fersen- und Zehenmanschette der Bauchaorta des Spenders neben der Nierenarterie anzulegen.

Als nächstes wird diese Fersen- und Zehenmanschette verwendet, um die arterielle Anastomose beim Empfänger zu bilden. Letztendlich sollte diese Technik zu sehr geringen Fällen von arteriellen Thrombosen führen. Dieses Video zeigt Ihnen, wie Sie eine arterielle Fersen- und Zehenmanschette erstellen, um Nierentransplantationen im Mund zu erleichtern.

Der Hauptvorteil dieser Technik der Widerstandsmethoden besteht darin, dass der Blutflussweg von der Empfängeraorta in die Nierenarterie des Spenders begradigt wird, was zu einer Verringerung der Thrombozytenaktivierung und der Thrombosebildung führt. Mit der sterilen Technik unter dem Operationsmikroskop wird die Nieren des Spenders entnommen und ordnungsgemäß durchgeführt. Die Erntezeit beträgt 15 bis 20 Minuten. Entfernen Sie das Fell und halten Sie das Tier fest.

Bereiten Sie die Operationsstelle vor, indem Sie die Haut mit Povidon-Jod waschen, die Maus drapieren und die Operation mit einem zwei Zentimeter langen Bauchschnitt in der Mittellinie beginnen. Ziehen Sie den Darm auf die Brust zurück und wickeln Sie ihn in feuchte Gaze. Halten Sie die Gaze während des gesamten Eingriffs feucht.

Finde nun die großen Bauchgefäße und mobilisiere sie. Alle Lendenläste sollten entweder kauterisiert oder mit 10 Nylon-Naht ohne Nylon ligiert werden. Präparieren Sie anschließend eine zwei Millimeter lange Teilung der unteren Hohlvene und der Aorta distal zu den linken Nierengefäßen.

Dann ligieren und teilen Sie alle kleinen arteriellen und venösen Äste, die am Nierengefäß ansetzen. Setzen Sie die stumpfe Dissektion fort, um die Nierenvene von der Nierenarterie zu trennen und so die spätere Bildung eines Carroll-Pflasters am proximalen Ende der Nierenvene zu ermöglichen, dieses Pflaster wird für die Bildung der venösen Anastomose verwendet. Als nächstes mögen Sie es und teilen Sie die linken Nebennierengefäße, um Zugang zur suprarenalen Aorta zu erhalten.

Sobald Sie darauf zugegriffen haben, schlingen Sie sechs Nullseide. Naht um die supranierenale Aorta für den späteren Gebrauch. Mobilisieren Sie nun die Nierengefäße und den Harnleiter aus der umgebenden Faszie.

Drehen Sie die Niere auf der hinteren Seite nach rechts, ligieren und teilen Sie die Gefäßäste, wobei Sie sich auf den Harnleiter konzentrieren. Befreien Sie den Harnleiter vorsichtig von der umgebenden Faszie. Stören Sie nicht den Nierenhilum und bewahren Sie die Eretikgefäße.

Als nächstes teilen Sie den Harnleiter auf Höhe des Ductus deens. Die Niere kann nun geborgen werden. Injizieren Sie zunächst langsam 300 Einheiten Heparin in die distale IVC, um den Spender zu heparinisieren.

Zweitens, binden Sie die Sechs-Null-Naht um die Nebenniere aa. Dann perfundieren Sie die linke Niere aus der Bauchaorta und injizieren Sie 0,8 Milliliter Heparin-Kochsalzlösung in einer Menge von 100 Einheiten pro Milliliter. Legen Sie nach der Perfusion sofort das venöse Karylpflaster an, um einen Rückfluss in die Niere zu vermeiden.

Ziehen Sie die Nierenvene in Richtung Niere zurück, um die AA und die Nierenarterie freizulegen. Teilen Sie nun die an die Nierenarterie angrenzende Aorta. Machen Sie einen Absatz und eine Manschette.

Wenn dann null Minuten kalte Ischämie erforderlich sind, übertragen Sie die wiedergewonnene Niere in einen vorbereiteten Empfänger. Alternativ können Sie die Organe in eine vier Grad Celsius warme Lagerkammer überführen und die Spender dann einschläfern, wie im Textprotokoll angegeben. Dieses Verfahren dauert 35 bis 45 Minuten, wie es bei der Anästhesie des Spenders der Fall ist.

Der Empfänger ergänzt auch den anfänglichen Bolus nach Bedarf. Geben Sie dem Empfänger eine Augencreme. Geben Sie dann dem Tier eine Injektion von Buprenorphin und setzen Sie die Verabreichung nach dem Eingriff fort, nachdem Sie den ersten Schnitt gemacht und den Darm wie beim Spender verdrängt haben, fahren Sie mit einer rechten Nephrektomie fort, ligieren Sie die Nierenarterie und -vene mit sechs Nullnähten und teilen Sie den Harnleiter proximal zur Niere mit sechs Nullnähten.

Schneiden Sie dann die Niere distal der Gefäßnaht heraus. Isolieren Sie nun unterhalb der Nierengefäße die AA und IVC, die dann oberhalb der Anastomosenstelle liegen. Legen Sie eine Vier-Null-Baumwollkrawatte um die Aorta und IVC tun das Gleiche unterlegen mit der Stelle.

Alle Lendenwirbelgefäße, die in der Region gefunden werden, sollten entweder kauterisiert oder mit 10 Null-Nylon-Naht befestigt werden, nicht die Naht, die unterlegen ist, und dann fest nicht die Naht, die überlegen ist. Dadurch bleibt etwas Blut in der Aorta zurück, was die AOR-Autotomie erleichtert. Führen Sie die Atomy mit einer 30-Gauge-Nadel durch und verlängern Sie dann den Schnitt mit einer feinen Mikroschere auf etwa zwei Millimeter Länge.

Der nächste Schritt besteht darin, eine Endo-Anastomose von der Ferse und der Zehenmanschette des Spenders bis zur Aorta des Empfängers durchzuführen. Setzen Sie zuerst einen Bleistich in die Ferse der Spenderaorta mit 10 Nullnähten. Fahren Sie dies durch das untere Ende des Schnitts in der Aorta des Empfängers fort und binden Sie ihn ab.

Zweitens: Legen Sie eine Naht 10 Null in das obere Ende des Aortenschnitts und setzen Sie diese durch die Spitze der Spendermanschette fort und binden Sie sie ab. Drittens, beginnend am oberen Ende, machen Sie eine flüssige Naht in der Seitenwand der Aorta und binden Sie sie gegen den zuvor platzierten unteren Haltestich ab. Drehen Sie dann die Niere um und setzen Sie eine Laufnaht entlang der medialen Wand fort und binden Sie sie gegen den oberen Stay-Stich ab.

Vervollständigen Sie die venöse Anastomose, indem Sie die IVC mit der Nadel punktieren und dann den Schnitt mit einer feinen Mikroschere verlängern. Binden Sie die Spendernierenvene mit 10 Nylon an die untere Ecke der IVC. Platzieren Sie eine weitere 10-Null-Naht am oberen Ende der IVC und der Spendervene und machen Sie eine Laufnaht entlang beider Seiten.

Wie bei der arteriellen Anastomose hilft die Ablenkung der Geweberänder bei der Abdichtung und Heilung. Überprüfen Sie nun Ihre Arbeit. Gegenüberliegende Wände sollten nicht von den Nähten erfasst werden, da sonst der Blutfluss zu stark eingeengt wird.

Ein weiterer lebenswichtiger Faktor, der sicherstellt, dass die Spannung der Anastomosennahtlinie optimal ist, ist, dass es zu locker und zu irreversiblen Leckagen kommt, die zu eng werden und es zu einer Striktur des Flusses kommt. Wenn es sich auf der arteriellen Seite befindet, führt dies zu einer schlechten Fülle des Transplantats. Wenn auf der venösen Seite, kommt es zu einer verstopften Niere.

Sobald die Anastomose abgeschlossen ist, lösen Sie das distale Wattebinder, um den venösen Fluss herzustellen. Lösen Sie dann allmählich die proximale Bindung und waschen Sie sie zur Blutstillung an der arteriellen Anastomose. Wenn beide Anastomosen als sicher bestätigt wurden, sehen Sie hier die Blase des Empfängers mit einer 20-Gauge-Nadel, die zwei Löcher macht, die Pinzette durch die Löcher führt und den Donatorharnleiter durch die Blase zieht.

Verankern Sie dann das proximale Ende des Harnleiters mit 2 10 0 Nähten an der Blasenwand. Kürzen Sie die überschüssige Länge des hervorstehenden Harnleiters, sodass er sich in der Blase zurückzieht. Dann verschließen Sie das andere Loch in der Blase mit 10 Nullnähten.

Schließen Sie die Operation ab, indem Sie den Darm ersetzen, den Bauch in zwei Schichten schließen, indem Sie fünf Nullseidennähte führen und einen Mikroliter Kochsalzlösung in den Bauch injizieren, bevor Sie ihn schließen. Nach dem Schließen des Bauches injizieren Sie weitere 0,8 Milliliter Kochsalzlösung subkutan und bergen das Tier auf einer warmen Decke. In einem Jahr der Datenerhebung reduzierte diese Technik die Inzidenz arterieller Thrombosen signifikant von 35 % auf 0 %, und diese Rate von 0 % Thrombose wurde beibehalten, da die Immunhistochemie an einer nicht transplantierten Niere und einer transplantierten Niere durchgeführt wurde. Unter Verwendung der beschriebenen Technik zeigte eine periodische Säureverschiebungsfärbung normale proximale tubuläre Zellen bei der Kontrolle und dem Spender.

Die Zellen sind quaderförmig mit einem klaren Zytoplasma und einem runden hellen Kern in der Mitte der Zelle für beide Pfeile. Weisen Sie auf Hinweise auf eine leichte Verletzung der Bürstenränder hin, aber die meisten Bürstenrandbegrenzer sind regelmäßig und gut erhalten. Nachdem Sie sich dieses Video angesehen haben, sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie Sie eine arterielle Fersen- und Zehenschalenanastomose durchführen, die zu einer Verringerung der Thrombosefälle und erfolgreicheren Nierentransplantationen führt.