Ein Protokoll für die Housing Mäuse in einer angereicherten Umwelt

Das Ziel dieses Verfahrens ist es, Details zu liefern, die für die Unterbringung und Haltung von Tieren in einer Umweltanreicherung erforderlich sind, die bei Mäusen robuste metabolische und krebshemmende Wirkungen hervorruft. Dies wird erreicht, indem zunächst die angereicherte Haltungsumgebung in einem großen Behälter mit Gegenständen wie Rädern, Laufquellen, Hütten, Rohren, Baumstämmen und Käfigen eingerichtet wird. Der zweite Schritt besteht darin, die Tiere an die neuartige Umgebung heranzuführen.

Als nächstes wird die angereicherte Umgebung aufrechterhalten, indem der Standort und die Art der Objekte im Behälter geändert und regelmäßig frische Lebensmittel und Wasser bereitgestellt werden. Der letzte Schritt besteht darin, die Objekte, die in der Umgebung ersetzt wurden, zu bereinigen, damit sie in Zukunft ausgetauscht werden können. Letztendlich nach Euthanasie und Analyse von tierischem Gewebe.

Diese Technik der Umweltanreicherung zeigt eine verminderte Adipositas, eine erhöhte Resistenz gegen diätbedingte Fettleibigkeit und einen phänotypischen Wechsel von weißem zu braunem Fett durch Aktivierung der hypothalamischen symneuralen Adipozytenachse. Diese Methode beschreibt Details zum Aufbau einer angereicherten Umgebung für Labornagetiere, die die Widerstandsfähigkeit gegen Krebs und Stoffwechselerkrankungen erhöht. Besprühen und wischen Sie zunächst das Innere eines großen Anreicherungsbehälters mit Sporicidin-Desinfektionsmitteln ab.

Wischen Sie den Behälter gemäß den Anweisungen des Herstellers mit 30 % Ethanol oder Leitungswasser getränktem Papier, einem Handtuch ab und trocknen Sie ihn mit einem Papiertuch ab, um den Geruch des vorherigen Desinfektionsmittels zu entfernen. Verwenden Sie Plastikschläuche, Iglus mit SOR-Rädern und andere verschiedene Plastikspielzeuge in der angereicherten Umgebung. Waschen Sie diese Spielzeuge wie zuvor, verwenden Sie Metalllaufräder, die wie zuvor gewaschen wurden.

Wenn die Farbe auf dem Rad zu verblassen beginnt, so dass das Rad laut wird, wenn die Tiere darauf laufen, tragen Sie eine kleine Menge Vaseline auf die Stelle auf, an der sich Rad und Achse verbinden. Verwenden Sie Holzstämme in der angereicherten Umgebung. Reinigen Sie die Holzscheite, indem Sie Einstreu oder andere Ablagerungen von Hand entfernen.

Sterilisieren Sie dann die Stämme, indem Sie sie in einem Trockenzyklus oder Textilzyklus autoklavieren, der 15 Minuten lang eine Temperatur von 121 Grad Celsius erreicht. Verwenden Sie saubere Futterkäfige mit den Maßen 29 Zentimeter x 18 Zentimeter x 12,5 Zentimeter und 30,5 Zentimeter x 19 Zentimeter x 14 Zentimeter zum Halten. Ein Futter- und Trinkgitter schneidet ein Loch von mindestens fünf Zentimetern Durchmesser in den vorderen Boden des Käfigs, in das die Mäuse ein- und aussteigen können.

Zu Beginn. Für einen Viertelzoll Maiskolben-Labortiereinstreu in den sauberen bis großen Anreicherungsbehälter bis zu einer Tiefe von zwei bis 2,5 Zentimetern geben. Legen Sie als Nächstes zwei oder drei der vorherigen Aortenclave-Stämme in eine Ecke des Behälters, um eine Fläche von etwa 1.225 Zentimetern im Quadrat zu sequestrieren.

Legen Sie dann in den Bereich, der von den Stämmen abgetrennt ist, drei Kleber mit SOR-Rädern darauf. Stellen Sie sicher, dass die Räder Platz haben, um sich frei zu drehen. Stecken Sie nun den Kunststoffschlauch so zusammen, dass sich mehrere Arme vom zentralen Verbindungsstück abzweigen.

Platzieren Sie diesen Schlauch in der Mitte des Behälters an zwei Ecken des Behälters. Stellen Sie einen Futterkäfig auf, der mit der gleichen Einstreu wie der Behälter gefüllt ist. Das Loch an der Vorderseite jedes Futterkäfigs sollte zur Mitte des Behälters zeigen.

Legen Sie einen Futter- und Wasserdraht mit Mäusefutter auf jeden Futterkäfig. Gib die Wasserflasche hinzu. Lege ein 11,5-Zentimeter-Rad, ein 20,5-Zentimeter-Rad und ein 28-Zentimeter-Rad in den Mülleimer.

Platzieren Sie dann vier bis fünf weitere Plastikhütten wie Spielzeug oder Tunnel in den Anreicherungsbehälter. Decken Sie den Behälter mit Mikroisolator-Filterpapier ab und befestigen Sie das Filterpapier mit Bindeklammern am Behälter. Wenn Sie Tiere aus einem Standardkäfig in den Anreicherungsbehälter setzen, legen Sie den Käfig auf die Seite, damit sich die Tiere frei vom Standardkäfig in den Anreicherungsbehälter bewegen können.

Lassen Sie nicht zu, dass das Nistmaterial in den Anreicherungsbehälter umgefüllt wird. 10 bis 20 Tiere mit dem gleichen Alter, Geschlecht und genetischen Stamm können gleichzeitig in der angereicherten Umgebung untergebracht werden. Stellen Sie sicher, dass die Tiere täglich auf Anzeichen von Krankheit oder Stress beobachtet werden.

Gehen Sie bei Bedarf vorsichtig mit den Tieren um, um ihren Zustand zweimal pro Woche weiter zu überprüfen. Überprüfen Sie den Futter- und Wasserstand und stellen Sie sicher, dass das Futter und das Wasser für die nächsten zwei Tage reichen. Richten Sie außerdem die Laufräder und Anreicherungsspielzeuge so auf, dass sie ausgebreitet sind und leicht verwendet werden können.

Ersetzen Sie alle Anreicherungsgegenstände, die verschmutzt sind, einmal pro Woche, idealerweise wenn die Mäuse aus der Umgebung entfernt werden. Entfernen Sie zu Versuchszwecken die Futterkäfige und Drahtgitter und ersetzen Sie sie durch saubere Käfige und Gestelle, die mit frischem Futter gefüllt sind. Ersetzen Sie die Wasserflaschen durch saubere Wasserflaschen.

Ordnen Sie die Anreicherungselemente entscheidend neu an, sodass die wichtigsten Aspekte des Setups beibehalten werden, die Anreicherungselemente jedoch anders platziert werden. Fleck. Überprüfen Sie den Rest des großen Anreicherungsbehälters und reinigen Sie ihn gegebenenfalls. Indem Sie schmutzigen Müll aushöhlen und alle zwei Wochen neue, saubere Einstreu verteilen.

Waschen Sie die Spielsachen bei der wöchentlichen Haltung von Hand oder indem Sie sie durch die Käfigwaschanlage schicken. Reinigen Sie jeden Monat den Großteil der Einstreu, indem Sie Anreicherungsspielzeug und Futterkäfige entfernen und die Einstreu aushöhlen. Ersetzen Sie ihn durch frische Einstreu und stellen Sie sicher, dass sich alle drei Monate oder wie in Ihrem Tierprotokoll vorgeschrieben zwei Zentimeter Einstreu in allen Bereichen des Käfigs befindet, entfernen Sie alle Einstreu und Spielzeug und desinfizieren Sie den Anreicherungsbehälter, indem Sie die Tiere wie zuvor waschen Stallkontrolle Gruppentiere im gleichen 12-stündigen Hell-Dunkel-Zyklus.

Da die Mäuse in der angereicherten Umgebung in mikroisolierten Käfigen leben, stellen Sie im Kontrollkäfig die gleiche Maiskolbeneinstreu zur Verfügung wie in der angereicherten Umgebung und fügen Sie ein vier mal vier Zentimeter großes Nest hinzu, das mit einem Maister-Maker-Nest beleuchtet ist, in dem drei bis fünf Mäuse des gleichen Geschlechts in einem normalen Mäusekäfig untergebracht sind. Stellen Sie keine Spielzeugschläuche oder -ställe im Käfig bereit. Fügen Sie dem Käfig ein Gitter zur Aufbewahrung von Futter und eine Wasserflasche hinzu, wenn der Käfig nicht an ein automatisches Bewässerungssystem angeschlossen ist.

Überwachen Sie täglich die Gesundheit der Tiere und stellen Sie sicher, dass die Tiere ausreichend Futter und Wasser haben. Ersetzen oder reinigen Sie die Käfige, die Futterdrähte, das Futter und das Wasser. Reinigen Sie einmal pro Woche die Käfige und Gitterroste wie bisher.

Drei Wochen alte männliche Mäuse wurden vor der subkutanen Tumorinokulation fünf Wochen lang in einer angereicherten Umgebung oder in Kontrollkäfigen mit 10 bis fünf Zellen pro Tier untergebracht. Die Ergebnisse zeigen, dass das Gewicht des B16-Melanomtumors 17 Tage nach der Inokulation beträgt. Jede Gruppe bestand aus 10 Tieren.

Das Sternchen steht für einen p-Wert von weniger als 0,05, der hier vom T-Test der Studierenden berechnet wird. Drei Wochen alte Mäuse wurden sechs Tage lang einer Umweltanreicherung unterzogen. Sechs Tage in einer angereicherten Umgebung, vermindertes retroperitoneales, weißes Fettgewebe, Gewicht der Fettpolster.

Diese Grafik zeigt, dass sechs Tage in einer angereicherten Umgebung, vermindertes braunes Fettgewebe, epidermales weißes Fettgewebe und retroperitoneales weißes Fettgewebe die Gewichte der Fettpolster im Verhältnis zum Körpergewicht betragen. Die nächsten beiden Diagramme zeigen die Ergebnisse von Mäusen, die vier Wochen lang in einer angereicherten Umgebung gehalten wurden, wie hier zu sehen, vier Wochen in der Umweltanreicherung, verringerte das Gewicht der Fettpolster bei allen Fetttypen mit Ausnahme des braunen Fettgewebes. Vier Wochen in der Umweltanreicherung, verringerte das Gewicht der Fettpolster im Verhältnis zum Körpergewicht für alle Fettarten außer braunem Fettgewebe.

Nachdem Sie sich dieses Video angesehen haben, sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie Sie eine angereicherte Umgebung einrichten und pflegen, die Anti-Krebs- und Anti-Adipositas-Effekte und Mäuse hervorruft.