Name: Ein Protokoll für die Housing Mäuse in einer angereicherten Umwelt (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-06-08T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 30 s
Description: Erfahren Sie das Protokoll zur Haltung von Mäusen in einer angereicherten Umgebung zur Förderung der metabolischen Gesundheit und Reduktion von Krebsrisiko. Diese Methode zeigt verringerte Fettansammlung und erhöhten Energieverbrauch.

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Diese Arbeit wurde vom NIH gewährt CA163640, CA166590 und AG041250 zu LC.

Die nachfolgend beschriebenen Verfahren wurden von der Institutional Animal Care und Verwenden Committee (IACUC) der Ohio State University zugelassen. 1. Herstellung von Enriched Environment Vor Housing Mäuse <ol><li> Reinigung und Pflege von Instrumenten. <ol><li> Führen Sie das große Bereicherung bin (120 cm x 90 cm x 76 cm) durch einen Käfig zu waschen. Ein typisches Tierhaltung Käfigwaschprotokoll umfasst 5 bis 6 Waschzyklen, mit dem letzten Zyklus erreichte 82 ºC. Die ganze Wäsche sollte etwa 40 Minuten dauern. Der Luft trocknen den Papierkorb. <ol><li> Wenn der große Bereicherung bin und alle anderen Gehäuse Instrumente, nicht durch Käfigwasch gesendet werden, dann sprühen und wischen Sie das Innere des Behälters mit sporizide Desinfektions folgenden Anweisungen des Herstellers. Wischen Sie den Behälter mit Leitungswasser getränkten Papiertuch oder 30% Ethanol und trocken mit einem Papiertuch loswerden jedem Duft aus dem vorherigen Desinfektionsmittel zu bekommen. </li></ol></li><li> Verwenden plastic Schläuche, Iglus mit Untertasse Typenräder und andere verschiedene Kunststoff-Stall-wie Spielzeug in der EE. Durch einen Käfig Wäsche waschen diese Spielzeuge. Wenn Sie keinen Zugang zu einem Waschkorb Folgeschritt 1.1.1.1. </li><li> Verwenden Metalllaufräder in der EE. Durch einen Käfig Wäsche waschen Rädern. Wenn die Farbe auf den Rädern beginnt, so dass das Rad wird laut, wenn die Tiere die darauf ausgeführt werden verblassen, eine kleine Menge Vaseline auf, wo das Rad und axel verbinden. </li><li> Verwenden Sie Holzscheite in der EE. Reinigen Sie die Protokolle von jeder Bettzeug oder andere Fremdkörper von Hand zu entfernen. Dann sterilisieren die Protokolle durch Autoklavieren sie auf einem Trockenzyklus oder Spinnzyklus, der eine Temperatur von 121 ° C für 15 min erreicht. </li><li> Verwenden Käfige zwischen den Dimensionen von 29 cm x 18 cm x 12,5 cm und 30,5 cm x 19 cm x 14 cm zu halten, eine Zufuhr und trinken Draht rack.Cut ein Loch von mindestens 5 cm Durchmesser aus dem vorderen Boden des Käfigs für Mäuse, in die und aus der aus dem EE gehen. Reinigen Sie diese Fütterung Käfige durch Käfigwäsche. </li></ol></li><li> Einrichten der Umgebung <ol><li> ¼-Zoll-Maiskolben Labortiereinstreu Gießen Sie in das große Bereicherung bin. Decken die gesamte Bodenfläche des Behälters zu einer Tiefe von 2 bis 2,5 cm mit Bettwäsche. </li><li> Platzieren zwei oder drei Protokolle in einer Ecke des Behälters. Ort Protokolle in der Ecke einen Bereich von ungefähr 1.225 cm 2 bis zu maskieren. In dem durch die Protokolle abgesondert, legen Sie drei Iglus mit Untertasse Räder an der Spitze. Sicherzustellen, dass die Räder berühren die Wände des Behälters, die Protokolle oder einander, so dass genügend Raum für die Räder frei drehen können. </li><li> Stück zusammen die Kunststoffschlauch, so dass mehrere Arme verzweigen sich von der centeral Verbindungsstück. Dieses Schlauch in der Mitte des Behälters. </li><li> An zwei Ecken des Behälters, legen Sie jeweils mit der gleichen Bettwäsche als bin eine gefüllte Futterkorb, und das Loch in der Vorderseite des Futter Käfig sollte in Richtung der Mitte des Behälters zugewandt ist. An der Spitze dieser Fütterung Käfige ein sauberes Futter und Wasser Drahtsollten platziert werden, um Nahrung und Wasser zu halten. Jede Deckel Legen Sie nichts auf den Käfig. Setzen Sie Nahrung und Wasser in den Käfig Drähte. </li><li> Platzieren drei Metallräder in dem Behälter, wenn auch nicht alle nebeneinander. Die drei verschiedenen Arten von Rädern sind eine 11,5 cm Rad, einer 20,5 cm-Rad, und eine 28 cm-Rad. Dann legen Sie 4-5 plastischer hutch-wie Spielzeug oder Tunnel in der gesamten Anreicherung bin. </li><li> Decken Sie die bin mit Mikro-Isolator-Filterpapier. Verwenden Binder Clips, um das Filterpapier in den Papierkorb zu befestigen. </li><li> Neuheit ist wichtig, EE. Verwenden Sie diese Einstellung als Rahmen der EE und variieren die Platzierung der zuvor genannten Käfige, Objekte und Spielzeug, ein neues Umfeld für die Tiere zu schaffen. </li></ol></li></ol> 2. Die Unterbringung der Tiere <ol><li> Züchten Tiere für Experimente in regelmäßigen Laborgehäuse und nicht die EE. Gegebenenfalls legen die Tiere in EE Bereits Alter von 21 Tagen nach dem Absetzen. Genotyp und Ohrstanz / tag Tiere vor EE Gehäuse. </li><li> Beim PlatzierenTiere in die Anreicherungs bin von einem Standard-Käfig, setzen Sie den Käfig in der Bin auf die Seite, so dass die Tiere frei von der Standard-Käfig zur Bereicherung bin zu bewegen. Lassen Sie die Nistmaterial in das Anreicherungs bin übertragen werden. </li><li> Haus 10-20 Tiere im gleichen Alter, Geschlecht und genetische Belastung in der EE. </li></ol> 3. die Erhaltung der Umwelt und Beobachtung der Mäuse Während Studies <ol><li> Täglich <ol><li> Die Tiere ruhig zu beobachten auf Anzeichen von Krankheit oder Not. Wenn nötig, vorsichtig handhaben, die Tiere zu gesundheitlichen Bedingungen weiter zu untersuchen. Nehmen Sie anormalen Beobachtungen und konsultieren Sie einen Arzt oder Tierarzt Techniker Personal, wenn das Tier zeigt Zustände an, die Entfernung aus dem Experiment erforderlich. </li><li> Geben Sie die topische Behandlung mit Dreifach-antibiotische Salbe für kleine Wunden oder Krusten. Wenn ein Tier muss aufgrund einer chronischen Krankheit oder Verletzung entfernt werden, entfernen Sie das Tier aus dem Experiment um Sterbehilfe. Wenn Tieretreffen frühzeitige Entfernung Kriterien für die Aufsicht über Tierforschung Pflegeausschuss oder Tierarzt, keine Tiere zurück zu EE zurückzukehren. </li></ol></li><li> Zwei Mal pro Woche <ol><li> Überprüfen Sie die Futter- und Wasserständen. Stellen Sie sicher, dass Futter und Wasser für die nächsten 3-4 Tage dauern. Aufrichten Laufräder und Bereicherung Spielzeug, so dass sie verteilt sind und von Mäusen verwendet werden. Ersetzen Sie alle, die zu schmutzig sind. </li></ol></li><li> Wöchentlich <ol><li> Ersetzen Wasserflaschen mit sauberem Wasser-Flaschen. Neu anordnen Anreicherungsvorrichtungen in einer Weise, die das Setup in Abschnitt 1.2 folgt. doch unterscheidet sich von dem Aufbau der Vorwoche. HINWEIS: Wenn ein Versuch die Tiere aus der angereicherten Umwelt für eine Aktivität entfernt werden benötigt (Aufnahme Körpergewicht, Blutabnahme, Verhaltenstest, etc.) ist es am besten, um die Umwelt neu zu ordnen, während die Tiere sind von der Bereicherung bin. </li><li> Reinigen Sie die Zuführungs Käfige in der EE von Hand oder senden Sie es per Käfigwaschwie in Abschnitt 1.1.5 beschrieben. Ersetzen Sie die Roste, die die Nahrung und Wasser mit sauberem Roste als auch zu halten. </li><li> Folgen Sie den Anweisungen in Abschnitt 2.2. bei der Platzierung der Tiere zurück in Bereicherung. Ort-Kontrolle im übrigen große Bereicherung bin und reinigen, falls erforderlich, durch Aushöhlungen schmutzige Streu und verbreiten sich neue, saubere Bettwäsche. </li></ol></li><li> Alle zwei Wochen <ol><li> Während der Durchführung der wöchentlichen Haltung, reinigen Sie die Spielzeuge von Hand oder senden Sie durch Käfigwäsche, wie in Abschnitt 1.1.2 beschrieben. Falls nötig, stellen Sie den Mäusen in einem Standard-Mikroisolatorkäfig für die erforderliche Zeit, um zu reinigen. </li></ol></li><li> Monatlich <ol><li> Reinigen Sie den Großteil der Sänfte durch Bewegen Bereicherung Spielzeug und Fütterung Käfige und Aushöhlungen das Katzenklo. Ersetzen durch frische Einstreu. Stellen Sie sicher, dass es ein Zoll von Betten in allen Bereichen des Käfigs. Falls nötig, stellen Sie den Mäusen in einem Standard-Mikroisolatorkäfig für die erforderliche Zeit, um zu reinigen. </li></ol></li><li> Alle dreiMonate (oder am Ende des Experiment) <ol><li> Alle Bettwäsche und Spielzeug und sauber entfernen und desinfizieren die Anreicherung bin, wie in Abschnitt 1.1.1 beschrieben. Wenn das Experiment ist noch nicht abgeschlossen, ersetzen Sie mit neuen Betten, Fütterung Käfigen, Spielwarensortiment und dann die Mäuse zurück in den Papierkorb. </li></ol></li><li> Desinfizieren Sie die gesamte Anreicherung bin häufiger als alle drei Monate, ob die Forschungseinrichtung, in der die EE aufgenommen ist erforderlich. Wenn dies erforderlich ist, und eine weitere große Bereicherung Behälter verfügbar ist, die zusätzliche Anreicherung Behälter eingestellt, wie in Abschnitt 1.2 beschrieben. und übertragen Sie die Tiere auf den neuen Container, während die vorherige gereinigt wird. </li></ol> 4. Steuergehäuse Bedingungen <ol><li> Unterbringung der Tiere in der Kontrollgruppe in Mikroisolatorkäfigen mit den Abmessungen 30,5 cm x 19 cm x 14 cm. Fügen Sie eine Drahtzahnstange, in den Käfig zum Halten von Lebensmitteln und eine Flasche Wasser, wenn der Käfig nicht bis zu einem automatischen Bewässerungssystem angeschlossen. </li><li>Die gleiche Maiskolben Betten bieten in der Steuerkäfig wie in der EE. Geben Sie eine 4 cm x 4 cm nestlet für die Mäuse, ein Nest aus zu machen. </li><li> Ersetzen und / oder Reinigen der Käfige, Fütterung Drähte, Nahrung und Wasser einmal pro Woche. Saubere Käfige und Roste durch Käfigwäsche oder wie in Abschnitt 1.1.1.1. Reinigen Sie die Käfige öfter, wenn Tiere uriniert häufiger oder wenn der Trinkwasser Lecks auf den Betten. </li><li> Überwachen Sie die Gesundheit der Tiere in Steuergehäuse täglich. Versichern die Tiere haben genug Nahrung und Wasser. </li><li> Haus 3 ~ 5 Mäusen des gleichen Geschlechts in normalen Maus Käfig. Bieten keine Spielzeug, Rohr oder Stall in den Käfig. </li><li> Institutional Labortierstation Gesundheit und Laboranten können Haltung für diese Kontrollmäuse liefern. </li><li> Halten Sie Tiere auf einem 12 Stunden Licht / Dunkel-Zyklus, als die Mäuse in EE. </li></ol>

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</ol>

Die Autoren erklären, keinen Interessenkonflikt.

Die robusten Auswirkungen von EE auf die Genexpression im Gehirn verringert Adipositas und Krebswachstum bei Mäusen, hängen stark von der Forscher Fähigkeit, die neue Umgebung in einer Weise, die körperliche Aktivität, soziale Interaktion und kognitive Herausforderungen fördert pflegen und behandeln die Tiere, noch nicht Leid der Tiere. Es gibt zwei wichtigsten Verfahrensschritte zu erinnern. Zunächst erinnern, um die Platzierung der Spielzeuge, Objekte und Käfige jede Woche ändern. Auch wenn die Spielzeuge und Gegenstände könnte das gleiche von der vorherigen Woche, die Mäuse nehmen die Umwelt als Roman. Ändern Sie die Spielwaren und Objekte selbst mit verschiedene, jede zweite Woche. Zweitens, denken Sie daran, die Umwelt sauber zu halten. Wenn die verschmutzte Bettwäsche wird nicht entfernt, kann der erhöhte Stickstoffwerte ein Stressfaktor für die Tiere sein. Darüber hinaus gibt es viele Techniken zur Kenntnis in diesem EE Protokoll. Die Verwendung unterschiedlicher oder einzigartige Spielzeug und verschiedeneDesigns von Kunststoffrohr Labyrinthe wird empfohlen. Die Umwelt kann eine Herausforderung sein, sollte aber nicht eine Gefahr für die Gesundheit der Tiere darstellen. Darüber hinaus passen sie von Spielwaren, die dysfunktional sind, weil die dysfunktionalen Spielzeug erhöhen das Risiko der Maus Gliedmaßen, erwischt oder vielleicht giftig für die Tiere sein, wenn durch das Kauen auf sie verbraucht. Eine Konstante zum EE ist die Verwendung von drei Untertasse Räder auf der Oberseite der igloos, zu einer Ecke oder Seite des Behälters durch 2-3 logs sequestriert. Dieser Aufbau der laufenden Untertassen hinter den Protokollen hat in allen unseren Bereicherung Studien präsent. In Bezug auf die Verwendung und die Platzierung der anderen Objekte, über die Beschreibung des Layouts eine grundlegende Blaupause des EE-Setup. Variation des Setup mit diesem grundlegenden Rahmen der Kunststoffschlauch, Laufräder, Laufuntertassen, Käfige und Protokolle sollten eine ausreichende neue Umgebung, die berichteten Ergebnisse zu reproduzieren ist. Wenn die Arbeit mit transgenen Tieren, die Diabetes oder andere Stoffwechsel habenKrankheiten, achten Sie genau auf die Lebensmittel- und Wasserverbrauch zu gewährleisten, dass die Tiere nicht aus der Nahrung und Wasser laufen. Wenn die Tiere haben Diabetes, werden sie urinieren, so dass die Lagerung des EE Gehäuse muss möglicherweise vor Ort geprüft und häufiger gereinigt werden. Die Plätze in der EE Gehäuse, das Bettzeug entfernt am häufigsten benötigen, sind die Ecken. Denken Sie daran, die Räder und andere Spielzeuge anzupassen, so dass sie von den Tieren verwendet werden. Die Tiere sind in der Lage läuft Tasse Räder in die Betten und Klopfen Laufräder über. Wenn die Tiere jung, 3-5 Wochen alt sind, werden sie unter den Käfigen im EE graben könnten und zusammen zu verstecken unter dort, so dass die Forscher ratlos, wo die Tiere sind. Beim Entfernen verschmutzte Bettwäsche, Spielwaren ersetzt, oder Reinigungs Käfigen, wird vorgeschlagen, um die Tiere in eine saubere Standardkäfig gesetzt, so dass sie nicht zu betonen, während die Anpassung ihrer Umgebung. Es ist einfacher, alle Tiere in einem Käfig zu bekommen, wenn sie weniger Stellen in der env verbergenELT. Daher sollten Sie vor Entfernen von Spielzeug bis hin zu maskieren, die Tiere in einem Käfig erleichtert diesen Vorgang. Darüber hinaus mehr als 5-6 Tieren in einem einzigen Standard-Käfig stellen Sie keine während der Wartezeit für die Reinigung oder die Anpassung ihrer EE-Umgebung. Die männlichen Tiere in EE kann aggressiv sein vor allem, wenn EE wird im Erwachsenenalter begonnen. Daher ist es wichtig, die Umwelt für alle verwundeten oder toten Tieren zu beobachten. Darüber hinaus ist die typische Anzahl der Tiere, die wir beherbergen in EE für diese Größe der Behälter 10-20 Mäusen. Die Anzahl der Tiere andere Forscher verwenden für EE variieren, mit etwa 10 oder weniger Mäuse, und die Größe des Käfigs oder bin sollte bei der Bestimmung der Anzahl der Tiere in Haus in EE aufgenommen werden. Zu viele Tiere in einem Wohnumfeld kann die Aggression bei männlichen Mäusen führen. Die Mäuse, die wir in EE aufgenommen haben von C57BL / 6 Hintergründe gewesen. Mäuse anderer Stämme können mehr oder weniger aggressive oder anfälliger für gesundheitliche Probleme in seinDiese EE-Setup. Dies sollte bei der Festlegung der Haltung Plan für die Maus und der angereicherten Umwelt berücksichtigt werden. Vier Wochen EE Gehäuse ist ausreichend, um Verringerung der Adipositas, Tropfen Leptinspiegel und Hemmung der B16-Melanomwachstum induzieren. Mehr EE kann zu stärkeren Auswirkungen auf den Stoffwechsel und Krebshemmung führen. Wenn Mäusen unterziehen chirurgischen Verfahren während oder vor der Belichtung mit EE, können sie mit Nähten intakt untergebracht werden. Ob Tiere reagieren gut auf diese besondere EE-Setup mit chirurgischen Klammern oder Katheter intakt wurde nicht untersucht. Darüber hinaus untersuchen wir derzeit, wie diese besondere EE beeinflusst die Lebensdauer oder health von alten Tieren. Vorläufige Daten deuten darauf hin, dass weibliche C57BL / 6-Mäuse, 10 Monate alt, zu reagieren, um ähnlich wie bei jungen Mäusen EE. Eine Einschränkung des EE Gehäuse Aufnahme eine so große bin in Tierhaltung Raum, und vorzugsweise in einer geschlechtsspezifischen Raum. Damit künftige Studien über die effECTS von EE in einem kleineren Maßstab, sowie der Suche nach Spielzeuge, die leicht zu reinigen, zu ertragen Hochtemperaturreinigung sind und keine Gefahr für die Tiergesundheit, die Bewerbungen der EE in Stoffwechsel- und Krebsforschung zu verbessern.

Umweltanreicherung (EE) ist eine experimentelle Paradigma verwendet, um die Auswirkungen einer komplexen und anspruchsvollen Umfeld, das die Tiere 1 nicht betonen, hat zu erkunden. EE ist ein Tier Gehäusetechnik erhöhte Raum, Bewegung und soziale Interaktionen, was wiederum die sensorische, kognitive, motorische und soziale Stimulation 2 zusammengesetzt. Iglus, Laufräder, Untertasse Räder, Rohr Labyrinthe und andere Objekte im Wohnumfeld zu fördern diese sensorischen kognitive, soziale und motorische Stimulation durch die Förderung der Erforschung und Interaktion. Die Anordnung der Gegenstände in dem Gehäuse regelmäßig ändert, um eine neue Umgebung, denen die Mäuse werden gezwungen, angepasst werden sollen. Diese Strategie bietet milde und kurze Herausforderungen, die eine vorteilhafte, gutartige und gesunde adaptive Reaktion, als Eustress bekannt zu induzieren, im Gegensatz zu einer aversiven, feindlichen Umgebung oder maladaptive Bedrängnis 3,4. Durch die Förderung von Eustress und Begrenzung schädlicher Not, Mäusezeigen eine Vielzahl von günstigen Phänotypen. EE ist eine zuverlässige Versuchsmodell mit einer breiten Palette von Anwendungen, während sie frei von Elementen der traditionell als belastend 1 gedacht. Die Auswirkungen von EE an Nagetieren sind seit mehr als einem halben Jahrhundert untersucht. In den frühen 1960er Jahren Studien zeigten, dass kortikale Cholinesterase Ebenen verringert und subkortikalen Cholinesterase-Ebenen in Ratten, die in Umgebungen mit erhöhten Wohnraum, erhöhte Anzahl von Ratten, und eine Vielzahl von Holzspielzeug, Labyrinthe, und Plattformen untergebracht waren 5,6 erhöht. Außerdem wird bei vielen EE adaptive Veränderungen im Gehirn, das Verhalten und den Stoffwechsel in Mäusen unterschiedlichen Alters und genetischen Hintergründen verbunden. Daher ist ein nützliches EE Paradigma für einen breiten Anwendungsbereich von Experimenten der Untersuchung der Auswirkungen der Umgebung auf Mäuse. EE Wirkungen in Mäusen schnellst einwöchigen Exposition beobachtet werden kann und bei Tieren so alt wie 18 Monate 7 ersichtlich. EE ist oft uin den Neurowissenschaften und Neuropsychologische Experimente sed zu Wiederherstellung der Funktion, Lernen und Gedächtnis 2 studieren. Außerdem hat EE erheblichen Einfluss auf den Phänotyp einer Vielzahl von Toxin induziert und transgenen Tiermodellen von menschlichen neurologischen Erkrankungen einschließlich Huntington-Krankheit, Alzheimer-Krankheit, Parkinson-Krankheit, Epilepsie, Schlaganfall, und 2. Doch im Laufe der Jahre gab es mit der Anreicherung Design, Vergleiche zwischen den Studien aus verschiedenen Laboratorien schwierig Inkonsistenz. Zum Beispiel kann jede der Studien über die Wirkungen EE relativ zu neurologischer Erkrankungen genannten hatten variierende Parameter zur Anreicherung. Die Studie über die Huntington-Krankheit untergebracht 4-6 Mäusen in großen Käfigen (44 x 28 x 12,5 cm 3), Kartons, Tunnels, und Bettwäsche, sowie Holz-und Kunststoff-Objekte, die alle zwei Tage 8,9 verändert wurden. Eine der Studien zu Alzheimer und getan# 8217; s untergebracht 20 Mäusen in einem größeren Käfig (1 m 3), das 2 Laufräder, Kunststoffrohre, Kartons und Nistmaterial, die geändert oder neu angeordnet wöchentlich 10 wurden. Viele Einstellungen von EE haben ähnliche Themen wie Objekte auf denen sie laufen oder ausblenden in, aber die Zahl der Mäuse pro EE Gehäuse, Wohnbereich, und die Zeit der Änderung der Umgebung viel variieren. Die inkonsistente Designs EE haben gescheitert Replikation von EE Wirkungen geführt. Unsere Daten über Krebs und Stoffwechsel zusammen nahe, dass die Kombination von Stimulationen in der folgenden detaillierten EE Gehäuse Protokoll führen zu signifikanten anti-Krebs- und Anti-Adipositas-Effekte 14,15 vorgesehen. Jedoch wird die Differenz der von verschiedenen Labors angenommen könnten die Ergebnisse von EE zu beeinflussen, wie es in einer zu sehen ist EE Einstellungen gescheiterten Versuch, EE Wirkungen auf das Wachstum von bestimmten Krebstumoren in Mäusen 11 implantiert zu reproduzieren. Die verschiedenen Ergebnisse können aufgrund einer Vielzahl von Gründen reicht her seinm unterschiedliche Wachstumsraten der Tumorzellkulturen der Art der Reinigungsmittel für Wohnanlagen 11 verwendet. Um die Ergebnisse bei unseren Experimenten gesehen replizieren, wird eine besondere Gestaltung der Anreicherung und der Tierhaltung erforderlich. Das folgende Verfahren beschreibt die EE Gehäuse, mit denen andere Forscher, unsere wirksame Anreicherung Modell erfolgreich repliziert wird.

<table><tbody><tr><td>Großer Anreicherungsbehälter (120 cm x 90 cm x 76 cm)</td><td>Sonderanfertigung.</td><td>Sonderanfertigung.</td><td>Hergestellt aus Polypropylen. Die Ränder des Behälters sind 1,5 cm dick.</td></tr><tr><td>Alternative zu großem Anreicherungsbehälter (120 cm x 110 cm x 76 cm)</td><td>Global Industrial</td><td>155202</td><td>Bei Bedarf kann dieser Behälter als Alternative zu dem oben genannten Behälter verwendet werden.</td></tr><tr><td>Habitrail Mini-Rohre</td><td>Habitrail</td><td>62720; 62705; 62725; 62715; 62054-Kunststoff-Iglus</td><td></td></tr> <tr><td>mit Untertassenrädern</td><td>Bio Serv</td><td>K3327; K3250-Metall</td><td></td></tr> <tr><td>Laufräder</td><td>Super Pet</td><td>61392; 61394; 61396-Manzanita</td><td></td></tr> <tr><td>Holz Nagestöcke, 3"</td> <td>Bio Serv</td><td>W0016</td><td></td></tr><tr><td>Maus Tunnel</td><td>Bio Serv</td><td>K3322-Mauskäfige</td><td></td></tr><tr><td>, die in den großen EE-Behälter kommen.</td><td>Lab Products Inc</td><td>10027 Mauskäfig-Käfig</td><td></td></tr> <tr><td>Klenz 180 Alkalisches Käfigwaschmittel, Käfig Klenz 250 Saures Waschmittel</td><td>Steris Life Sciences</td><td>1K1802; 1K2502</td><td>Diese Reinigungsmittel werden in der Käfigwäsche für Spielzeug, große Anreicherungsbehälter und Käfige verwendet.</td></tr><tr><td>Sporklenz</td><td>Steris Life Sciences</td><td>6526Q8</td><td>Alternatives Sporizid-/Desinfektionsmittel zum Waschen von Spielzeug, Mülleimern und Käfigen in der Käfigwaschanlage.</td></tr><tr><td>Bed-O-Cobs 1/4" Bettwäsche</td><td>The Andersons, Inc.</td><td>4B</td><td>Maiskolben-Einstreu hat einen Durchmesser von 1/4 Zoll.</td></tr><tr><td>Nestlets für Mäuse in Kontrollhaltung</td><td>Ancare</td><td></td><td>Cotton Quadrate</td></tr></tbody></table>

ein protokoll für die housing mäuse in einer angereicherten umwelt

A Protocol for Housing Mice in an Enriched Environment

Environmental Enrichment (EE) ist eine Haltungsumgebung für Mäuse, die die geistige und körperliche Gesundheit im Vergleich zu Standard-Laborställen fördert. Unsere jüngsten Studien zeigen, dass die Anreicherung der Umgebung die Adipositas verringert, den Energieverbrauch erhöht, ernährungsbedingter Fettleibigkeit widersteht und bei Mäusen eine Krebsremission und -hemmung bewirkt. EE besteht in der Regel aus einem größeren Wohnraum, einer Vielzahl von "Spielzeugen", mit denen man interagieren kann, Laufrädern und kann eine Reihe anderer neuartiger Umweltveränderungen beinhalten. All dies fördert ein komplexeres soziales Engagement, kognitive und körperliche Stimulationen. Wichtig ist, dass der Standort und die Art des Spielzeugs regelmäßig gewechselt werden, was die Mäuse dazu anregt, sich an eine sich häufig ändernde und neuartige Umgebung anzupassen. Viele Variablen können in der Energieeffizienz manipuliert werden, um gesundheitliche Auswirkungen bei Mäusen zu fördern. Daher sind diese Ansätze schwer zu kontrollieren und müssen richtig gehandhabt werden, um die damit verbundenen Phänotypen erfolgreich zu replizieren. Daher ist es das Ziel dieses Videos, zu zeigen, wie EE richtig eingerichtet und gewartet wird, um eine komplexe, herausfordernde und kontrollierte Umgebung zu gewährleisten, damit andere Forscher die schützende Wirkung von EE gegen Fettleibigkeit und Krebs leicht reproduzieren können.

EE beeinflussen die Wachstumsfaktorexpression erhöht Neurogenese und das Überleben von Zellen in das zentrale Nervensystem (ZNS) 12,13. Neuere Studien haben gezeigt, dass diese Technik der EE führt zu einer bemerkenswerten Unterdrückung von Krebswachstum in drei Maus-Krebsmodellen einschließlich B16 Melanom, Darmkrebs und MC38 APC min / + Maus, die eine Keimbahnmutation enthält und sehr anfällig für spontane Adenom Bildung die Därme 14. Die Ergebnisse in Abbildung 2 bestätigen die Unterdrückung von B16-Melanomtumorwachstum in Mäusen nach 5 Wochen (~ 80% ige Abnahme der Tumormasse) EE ausgesetzt implantiert. Cancer Wachstumsunterdrückung wurde auch bei Mäusen beobachtet, wenn EE wurde eingeleitet, nachdem der Tumor wurde bereits festgelegt 14. EE Folge stärkere Hemmung des Melanomwachstums in den Hochfettdiät induzierte Fettleibigkeit Mäusen (~ 70% ige Verringerung der Tumormasse) als bei Mäusen mit Normalgewicht (~ 50% ige Verringerung der Tumormasse) 14. EE ind<html> uced Signatur Veränderungen in den Serum Biomarker einschließlich robust Tropfen Leptin, Abnahme der IGF-1, und die Erhöhung der Adiponectinspiegel 14. Darüber hinaus ist diese Technik von EE verringert Adipositas, erhöht den Energieverbrauch, führt zu Widerstand gegen ernährungsbedingte Fettleibigkeit, und induziert eine weiße bis braune Fett phänotypischen Switch durch die Aktivierung der Hypothalamus-sympathoneural-Adipozyten-Achse 15. Die Abnahme der Adipositas wurde bereits sechs Tage EE ausgesetzt sehen (Abbildung 3a, b) wieder in den Tieren zu vier Wochen (3C, D) ausgesetzt EE bestätigt. Es ist auch wichtig zu beachten, dass, ein, die Anti-Krebs-und Anti-Adipositas-Effekte mit EE zugeordnet sind, können nicht durch physische Aktivität, die alleine berücksichtigt werden, und, zwei, können die EE Wirkungen durch Überexpression von Wachstumsfaktor BDNF vervielfältigt (BDNF ) im Hypothalamus 14,15. <html> 2874fig1.jpg &quot;/&gt; Abbildung 1: Angereichert Umgebung bin einrichten Das angereicherte Umgebung hat eine Fläche von 120 cm x 90 cm und zwei modifizierten Käfigen, Laufräder, Iglus mit Untertasse Räder, Kunststoffschlauch, Holzbalken und andere Kunststoffanreicherung Spielzeug.. <img alt="Figur 2" src="/files/ftp_upload/52874/52874fig2.jpg" /> Abbildung 2: Angereichert Umwelt reduziert Tumorwachstum in C57BL / 6 männlichen Mäusen drei Wochen alte männliche Mäuse waren Haus in EE oder Kontrollkäfigen für 5 Wochen vor der Tumor-Inokulation.. B16-Melanom-Tumorgewichte auf 17 Tage nach der Impfung von 10 5 Zellen pro Tier subkutan über der rechten Flanke (n = 10 pro Gruppe. Student-t -Test, * p &lt;0.05). <img alt="3a" src="/files/ftp_upload/52874/52874fig3a.jpg" /> <img alt="3b" src="/files/ftp_upload/52874/52874fig3b.jpg" /> s / ftp_upload / 52.874 / 52874fig3c.jpg &quot;/&gt; <img alt="Figur 3d" src="/files/ftp_upload/52874/52874fig3d.jpg" /> Abbildung 3: Angereichert Umwelt verringert Adipositas in C57BL / 6 männlichen Mäusen drei Wochen alte Mäuse wurden einer EE;. eine Gruppe für 6 Tage, eine andere für vier Wochen. (A) Sechs Tage in EE verringerte Fettpolster Gewichte (n = 5 pro Gruppe. Student-t -Test, * p &lt;0.05). (B) Sechs Tage in EE verringerte Fettpolster Gewichte bezogen auf das Körpergewicht (n = 5 pro Gruppe. Student-t -Test, * p &lt;0.05). (C) Vier Wochen in EE verringerte Fettpolster Gewichte (n = 5 pro Gruppe. Student-t -Test, * p &lt;0.05). (D) Vier Wochen in EE verringerte Fettpolster Gewichte bezogen auf das Körpergewicht (n = 5 pro Gruppe. Student-t -Test, * p &lt;0.05). BAT: braunem Fettgewebe, IWAT: Leisten weißen Fettgewebe, EWAT: Nebenhoden weißen Fettgewebe,RWAT: retroperitoneal weißen Fettgewebe.

Die Anreicherung der Umgebung für Mäuse erfordert ein komplexes und herausforderndes Setup sowie umfassende Haltungs- und Handhabungstechniken, um robuste metabolische und krebshemmende Effekte bei den Mäusen zu gewährleisten. Dieses Protokoll enthält detaillierte Verfahren, um die oben genannten Effekte bei Mäusen zu reproduzieren.

Ein Protokoll für die Housing Mäuse in einer angereicherten Umwelt

Environmental enrichment (EE) is a housing environment for mice that boosts mental and physical health compared to standard laboratory housing. Our recent ...

Das Ziel dieses Verfahrens besteht darin, die notwendigen Einzelheiten zur Unterbringung und Pflege von Tieren in einer umweltangereicherten Umgebung bereitzustellen, die robuste metabolische und anti-karzinogene Effekte bei Mäusen hervorruft. Dies wird erreicht, indem zunächst die angereicherte Haltungsumgebung in einem großen Behälter mit Gegenständen wie Laufrädern, Laufquellen, Häuschen, Schläuchen, Holzstämmen und Käfigen eingerichtet wird. Der zweite Schritt besteht darin, die Tiere in die neue Umgebung einzuführen.Anschließend wird die angereicherte Umgebung dadurch aufrechterhalten, dass die Position und Art der Objekte in der Box verändert werden und regelmäßig frisches Futter und Wasser bereitgestellt wird. Der letzte Schritt besteht darin, die ausgetauschten Objekte zu reinigen, damit sie zukünftig erneut verwendet werden können. Letztendlich erfolgt nach der Tötung die Analyse der Tiergewebe.Diese Technik der Umweltanreicherung zeigt eine verminderte Fettmasse, einen erhöhten Energieverbrauch und eine Resistenz gegen ernährungsbedingte Adipositas sowie einen phänotypischen Wechsel von weißem zu braunem Fettgewebe, vermittelt durch die Aktivierung der hypothalamischen symnergen Fettzellachse. Diese Methode beschreibt Einzelheiten zur Einrichtung einer angereicherten Umgebung für Laborrodentien, die die Resistenz gegen Krebs und Stoffwechselerkrankungen verbessert. Zunächst den Innenraum eines großen Anreicherungsbehälters mit Sporicidin-Desinfektionsmittel besprühen und abwischen.Entfernen Sie gemäß den Herstelleranweisungen den Behälter mit einem mit 30 % Ethanol oder Leitungswasser getränkten Papier- oder Handtuch und trocknen Sie ihn mit einem Papiertuch ab, um jeglichen Geruch des vorherigen Desinfektionsmittels zu beseitigen. Verwenden Sie in der angereicherten Umgebung Plastikrohre, Iglus mit Rädern vom SOR-Typ und andere verschiedene, plasti­kerne Schlachter-artige Spielzeuge. Waschen Sie diese Spielzeuge wie zuvor beschrieben und verwenden Sie Metall-Laufräder, die wie zuvor beschrieben gewaschen wurden.Wenn die Farbe auf dem Laufrad verblasst und dadurch das Rad Geräusche von sich gibt, während die Tiere darauf laufen, tragen Sie eine kleine Menge Vaseline an der Verbindungsstelle zwischen Rad und Achse auf. Verwenden Sie Holzstämme in der angereicherten Umgebung. Reinigen Sie die Stämme, indem Sie per Hand jegliches Einstreu- oder anderes loses Material entfernen.Dann sterilisieren Sie die Holzscheiben, indem Sie sie im Trocken- oder Textilprogramm autoklavieren, wobei eine Temperatur von 121 Grad Celsius für 15 Minuten erreicht wird. Verwenden Sie saubere Fütterungskäfige mit Abmessungen zwischen 29 Zentimetern × 18 Zentimetern × 12,5 Zentimetern und 30,5 Zentimetern × 19 Zentimetern × 14 Zentimetern. Ein Gitterrost für Futter und Trinkwasser erfordert einen Ausschnitt mit einem Durchmesser von mindestens fünf Zentimetern im vorderen unteren Bereich des Käfigs, damit die Mäuse ein- und aussteigen können.Beginnen Sie damit, eine viertel Zoll große Maiskolben-Streu für Labortiere in eine saubere, große Anreicherungsschale bis zu einer Tiefe von zwei bis 2,5 Zentimetern einzufüllen. Danach platzieren Sie zwei oder drei der zuvor genannten aortischen Clave-Hölzer in einer Ecke der Schale, um einen Bereich von etwa 1.225 Quadratzentimetern abzugrenzen.Platzieren Sie dann im durch die Holzscheite abgetrennten Bereich drei Klebepunkte mit SOR-Rädern darauf. Achten Sie darauf, dass die Räder genügend Platz haben, um sich frei drehen zu können. Verbinden Sie nun die Kunststoffschläuche so, dass mehrere Arme von dem zentralen Verbindungsstück abzweigen.Platzieren Sie diesen Schlauch in der Mitte des Behälters an zwei Ecken des Behälters. Stellen Sie einen Futterkäfig, der mit dem gleichen Einstreu wie der Behälter gefüllt ist, hinein. Die Öffnung an der Vorderseite jedes Futterkäfigs sollte zum Zentrum des Behälters zeigen.Platzieren Sie einen Futter- und Wassergitter mit Mäusefutter auf jedem Aufzuchtkäfig. Fügen Sie die Wasserknippe hinzu. Geben Sie ein 11,5 cm großes Rad, ein 20,5 cm großes Rad und ein 28 cm großes Rad in die Box.Danach vier bis fünf weitere Kunststoffhütten-ähnliche Spielzeuge oder Tunnel gleichmäßig in der Anreicherungskiste verteilen. Die Kiste mit Mikroisolator-Filterpapier abdecken und das Filterpapier mit Büroklammern an der Kiste befestigen. Wenn Tiere aus einem Standardkäfig in die Anreicherungskiste umgesetzt werden, den Käfig seitlich in die Kiste stellen, sodass sich die Tiere frei vom Standardkäfig in die Anreicherungskiste bewegen können.Die Nestmaterialien dürfen nicht in den Anreicherungsbehälter gelangen. 10 bis 20 Tiere desselben Alters, Geschlechts und genetischen Stammes können gleichzeitig in der angereicherten Umgebung untergebracht werden. Stellen Sie sicher, dass die Tiere täglich auf Anzeichen von Krankheit oder Belastung überprüft werden.Falls erforderlich, sollten die Tiere zweimal wöchentlich vorsichtig angefasst werden, um ihren Zustand weiter zu überprüfen. Überprüfen Sie den Futter- und Wasservorrat und stellen Sie sicher, dass Futter und Wasser für die nächsten zwei Tage ausreichen. Richten Sie außerdem die Laufräder und Beschäftigungsspielzeuge auf, damit sie verteilt sind und leicht benutzt werden können.Ersetzen Sie w&ouml;chentlich alle verschmutzten Anreicherungsgegenst&auml;nde, idealerweise wenn die M&auml;use aus der Umgebung entfernt werden. F&uuml;r experimentelle Zwecke entfernen Sie die Futterk&auml;fige und Drahtgestelle und ersetzen Sie diese durch saubere K&auml;fige und Gestelle, die mit frischem Futter gef&uuml;llt sind. Ersetzen Sie die Wasserautomaten durch saubere Wasserautomaten.Ordnen Sie die Beschäftigungsgegenstände entscheidend um, sodass die wesentlichen Aspekte der Einrichtung erhalten bleiben, die Beschäftigungsgegenstände jedoch an unterschiedlichen Stellen platziert werden. Platzieren. Überprüfen Sie den Rest des großen Beschäftigungsbehälters und reinigen Sie ihn gegebenenfalls. Indem Sie alle zwei Wochen die verschmutzte Einstreu herausschöpfen und frische, saubere Einstreu verteilen.Bei der wöchentlichen Tierpflege die Spielsachen per Hand oder im Käfigwäscher reinigen. Monatlich den größten Teil der Einstreu entfernen, indem die Beschäftigungsspielzeuge und Futterkäfige herausgenommen und die Einstreu abgeschöpft wird. Mit frischer Einstreu ersetzen und sicherstellen, dass in allen Bereichen des Käfigs eine zweizentimeterdicke Streuschicht vorhanden ist. Alle drei Monate oder gemäß den Anforderungen Ihres Tierversuchsprotokolls die gesamte Einstreu und alle Spielsachen entfernen und die Beschäftigungsschale durch Waschen desinfizieren, wie zuvor beschrieben. Gruppentiere unter denselben 12-Stunden-Licht-Dunkel-Zyklus halten.Da die Mäuse in der angereicherten Umgebung in mikroisolierten Käfigen gehalten werden, verwenden Sie im Kontrollkäfig dieselbe Maiskolbenstreue wie in der angereicherten Umgebung und fügen Sie ein vier mal vier Zentimeter großes Nest hinzu, wobei ein Maister-Maker-Nest drei bis fünf Mäuse desselben Geschlechts in einem regulären Mäusekäfig beherbergt. Stellen Sie keine Spielzeugröhre oder Hütte im Käfig bereit. Fügen Sie einen Drahtrost in den Käfig ein, um Futter aufzunehmen, sowie eine Wasserkaraffe, falls der Käfig nicht an ein automatisches Bewässerungssystem angeschlossen ist.Überwachen Sie täglich den Gesundheitszustand der Tiere und stellen Sie sicher, dass den Tieren ausreichend Futter und Wasser zur Verfügung stehen. Ersetzen oder reinigen Sie die Käfige, Futterdrähte, Futter und Wasser. Reinigen Sie einmal pro Woche die Käfige und Drahtgestelle wie zuvor beschrieben.Drei Wochen alte männliche Mäuse wurden fünf Wochen lang in einer angereicherten Umgebung oder in Kontrollkäfigen gehalten, bevor ihnen subkutan 10 hoch fünf Zellen pro Tier injiziert wurden. Die Ergebnisse zeigen das Gewicht der B16-Melanomtumoren 17 Tage nach der Inokulation. Jede Gruppe bestand aus 10 Tieren.Das Sternchen steht hier für einen P-Wert von weniger als 0,05, berechnet mittels dem t-Test nach Student. Drei Wochen alte Mäuse wurden sechs Tage lang einer Umweltanreicherung ausgesetzt. Sechs Tage in einer angereicherten Umgebung verringerten das Gewicht des retroperitonealen weißen Fettgewebes.Dieses Diagramm zeigt, dass sechs Tage in einer angereicherten Umgebung die Gewichte der braunen Fettgewebe, des epidermalen weißen Fettgewebes und des retroperitonealen weißen Fettgewebes relativ zum Körpergewicht verringerten. Die nächsten beiden Diagramme zeigen Ergebnisse von Mäusen, die vier Wochen lang in einer angereicherten Umgebung gehalten wurden, wie hier zu sehen ist. Vier Wochen in einer angereicherten Umgebung führten zu einer Verringerung der Fettgewebe-Gewichte bei allen Fetttypen mit Ausnahme der braunen Fettgewebe. Vier Wochen in einer angereicherten Umgebung verringerten die Gewichte der Fettdepots relativ zum Körpergewicht bei allen Fetttypen mit Ausnahme der braunen Fettgewebe.Nachdem Sie sich dieses Video angesehen haben, sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie man eine angereicherte Umgebung einrichtet und aufrechterhält, die anti-karzinogene und anti-adipöse Effekte bei Mäusen hervorruft.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Behavior

Verhalten

Burrowing, Nist-und Horten sind Spezies-typischen Aktivitäten, dass Mäuse ohne weiteres im Labor durchzuführen. Dieser Artikel beschreibt, wie sie einfach und kostengünstig beurteilt werden kann. Diese Protokolle sind sehr empfindlich gegen Maus-Stamm, Hirnläsionen und Krankheiten. Darüber hinaus bilden sie "Environmental Enrichment" für die Mäuse und verkörpern die "Refinement" Aspekt der "3 R" 18.

Die Beurteilung Burrowing, Nest Bau und Horten in Mäuse

Dieses Protokoll beschreibt zwei verschiedene Umweltmanipulationen und ein gleichzeitiges Gehirninfusionsprotokoll, um umweltinduzierte Gehirnveränderungen zu untersuchen, die dem adaptiven Verhalten und der Gehirnreparatur bei erwachsenen Mäusen zugrunde liegen.

Umwelt Modulationen der Anzahl der Mittelhirn Dopamin-Neuronen in erwachsenen Mäusen

Environmental Enrichment (EE) ist eine Unterbringung von Tieren, die verwendet wird, um Mechanismen zu offenbaren, die die Zusammenhänge zwischen Lebensstil, Stress und Krankheit zugrunde liegen. Dieses Protokoll beschreibt ein Verfahren, das verwendet ein Maus-Modell der Doppelpunkt Tumorgenese und EE speziell Veränderungen in Mikrobiota Artenvielfalt definieren, die tierischen Sterblichkeit auswirken können.

Eine Methode, um die Auswirkungen der Umweltanreicherung Doppelpunkt Microbiome Biodiversitätskonvention in einem Mausmodell Doppelpunkt Tumor definieren

Dieser Artikel enthält eine detaillierte Beschreibung eines neuartigen Mausurteils-Bias-Protokolls. Beweise für die Empfindlichkeit dieser olfaktorischen Grabungsaufgabe für den affektiven Zustand werden ebenfalls demonstriert und ihr Nutzen in verschiedenen Forschungsbereichen diskutiert.

Bewertung der Mausurteilsverzerrung durch eine olfaktorische Grabaufgabe

Nagetiermodelle sind wertvolle Werkzeuge zur Untersuchung von Kernverhaltensweisen im Zusammenhang mit der Autismus-Spektrum-Störung (ASS). In diesem Artikel erläutern wir zwei Verhaltenstests zur Modellierung der Kernmerkmale von ASD bei Mäusen: Self-Grooming, der sich wiederholendes Verhalten bewertet, und der Drei-Kammer-Test für soziale Interaktion, der soziale Beeinträchtigungen dokumentiert.

Strategien zur Beurteilung autistischer Verhaltensweisen bei Mäusen

Dieses Protokoll beschreibt ein Tiermodell, um zu untersuchen, wie sich Widrigkeiten im frühen Leben, hervorgerufen durch eine verarmte Umwelt und unvorhersehbare mütterliche Fürsorge in der frühen postnatalen Phase, auf die Gehirnentwicklung und das zukünftige Risiko psychischer Störungen auswirken.

Begrenztes Einstreuen und Nisten als Modell für Widrigkeiten im frühen Leben bei Mäusen

Hier beschreiben wir die in Zwei-Photonen-Bildgebung von Maus Cortex während Verhalten in einer Umgebung der virtuellen Realität beteiligt experimentellen Verfahren.

Zwei-Photonen-Calcium Imaging in Mäuse Navigieren in einer Virtual-Reality-Umgebung

Dieses Protokoll beschreibt das modifizierte Lochbrett, bei dem es sich um einen Verhaltenstestaufbau handelt, der die Eigenschaften eines offenen Feldes und eines traditionellen Lochbretts umfasst. Dieser Aufbau ermöglicht die differentielle Analyse des unkonditionierten Verhaltens kleiner Laborsäuger sowie die Analyse kognitiver Fähigkeiten.

Der modifizierte Loch Board - Mess Verhalten, Kognition und Sozialinteraktion an Mäusen und Ratten

Dieses Manuskript beschreibt ein Morris Water Maze (MWM) Protokoll, das auf die Verwendung mit einem häufig verwendeten Mausmodell der Alzheimer-Krankheit zugeschnitten ist. Das MWM wird häufig in transgenen Mausmodellen eingesetzt. Die Implementierung eines Verfahrens, das empfindlich auf die Hintergrundbelastung des Mausmodells reagiert, ist für die Erkennung von Gruppenunterschieden unerlässlich.

Morris Wasser-Labyrinth-Test: Optimierung für Mausstamm und Testumgebung

Es wurde eine standardisierte Bewertungsmethode für tragbare Mobilitätsüberwachungssysteme (WMMS) entwickelt, die kontinuierliche Aktivitäten in einer realistischen täglichen Lebensumgebung umfasst. Das Testen mit einer Reihe von Aktivitäten des täglichen Lebens kann die Empfindlichkeit der Aktivitätserkennung verringern. Daher werden realistische Testschaltungen für eine valide Bewertung der WMMS-Leistung empfohlen.

Evaluation eines Smartphone-basierte Personal Activity Recognition System in einem täglichen Lebens Umwelt

Erfahren Sie das Protokoll zur Haltung von Mäusen in einer angereicherten Umgebung zur Förderung der metabolischen Gesundheit und Reduktion von Krebsrisiko. Diese Methode zeigt verringerte Fettansammlung und erhöhten Energieverbrauch.

Ein Protokoll für die Housing Mäuse in einer angereicherten Umwelt

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