Name: Induktion und Beurteilung der Ischämie-Reperfusion Injury in Langendorff-perfundierten Rattenherzen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-07-27T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 58 s
Description: Lernen Sie die Modellierung von Ischämie-Reperfusionsverletzungen ex vivo am isolierten Rattenherzen. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung molekularer Ereignisse und myokardialer Funktion.

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Diese Veröffentlichung wurde von der South Carolina Clinical &amp; Translational Research (SCTR) Institute unterstützt, mit einem akademischen Heimat an der Medizinischen Universität von South Carolina, NIH / NCATS Statt Anzahl UL1 TR000062. Weitere Unterstützung wurde von VA Merit Award BX002327-01 DRM zur Verfügung gestellt. DJH wurde von NIH / NCATS Statt Anzahl TL1 TR000061 von NIH Zuschusses Anzahl T32 GM008716 unterstützt. SEA wurde vom NIH Zuschusses Anzahl T32 HL07260 unterstützt.

Alle hier aufgeführten Verfahren wurden von der Institutional Animal Care und Verwenden Committee an der Medizinischen Universität von South Carolina genehmigt. Die hier beschriebenen Experimente sind akute, nicht-Überlebensexperimente. Als solche gibt es keine Verwendung von Augensalbe und eine sterile OP-Bereich nicht erforderlich ist. Sterbehilfe wird durch Ausbluten bei der Ernte des Herzens erreicht. 1. Versuchsvorbereitung <ol><li> Bis entweder einen konstanten Druck oder konstanten Fluss Langendorff Perfusion 4 Stellen. </li><li> Herstellung von 4 L modifizierte Krebs-Henseleit-Puffer (in mM: 112 NaCl, 5 KCl, 1,2 MgSO 4, 1 K 2 HPO 4, 1,25 CaCl 2, 25 NaHCO 3, 11 D-Glucose, 0,2 Octansäure, pH = 7,4). <ol><li> Machen 10x stock Puffer. <ol><li> Aufzulösen NaCl, KCl, MgSO 4 und K 2 HPO 4 in 3 L Reinstwasser. </li><li> Löse CaCl 2 in 500 ml Reinstwasser with 40 ml 1 N HCl. </li><li> Langsam CaCl2-Lösung in den Puffer in 1.2.1.1 vorgenommen. Fügen Sie genug hochreinem Wasser auf insgesamt 4 L. Lassen Sie für 1 Stunde vor dem Filtrieren durch ein 0,8 um Filter zu rühren. Lagerung bei 4 ° C. </li><li> Löse NaHCO 3 in 4 L Reinstwasser. Man lässt 1 h, bevor es durch einen Filter an 0,8 um-Filter rühren. Lagerung bei 4 ° C </li></ol></li><li> Kombinieren Sie 400 ml 10x Krebs Henseleit-Puffer mit 400 ml 10x NaHCO3-Puffer. Fügen Sie genug hochreinem Wasser auf insgesamt 4 L. auflösen Glukose und Oktansäure unter Rühren. Man filtriert durch 0,8-um-Filter. </li></ol></li><li> Bereiten System für Herz. <ol><li> In 2 l gefiltert Puffer zu einem 4-l-Flasche 38 in platziert über dem Hahn an die Aortenkanüle angebracht. Dadurch wird ein Perfusionsdruck von 70-80 mmHg in das Herz, die die empfohlene Perfusionsdruck 4 zu liefern. </li><li> Legen Gasdispersions bubbler in den Puffer in der Flasche. </li><li> Führen Sie den Puffer durch das System, dass auf jeden Fall alle Blasen aus dem Inneren der Rohrleitung zu beseitigen. </li><li> Einzuschalten Gas (95% O 2/5% CO 2) mindestens 30 min vor Herz ist auf dem System platziert werden. Verwenden Sie ein Gasstrom-Sonde und Blutgasanalysegerät, um die Sauerstoffsättigung zu überprüfen. </li></ol></li><li> Bereiten chirurgisches Material und Ballon. <ol><li> Für die Ernte von Herz, bereiten ein Paar von 6,75 &quot;chirurgische Schere, ein Paar von 4.5&quot; Schere, zwei Paare von Hämostatika, zwei Sätze von Karamellenmalz Zange zwei Spritzen mit 27 G Nadeln, 2 Stück von 0-Gauge-Seidenfaden (ca. 15 cm in der Länge), einer 1/16 inch Stacheldraht Kanüle und eine Trachealkanüle. </li><li> Um Trachealkanüle montieren, kleben Sie ein kurzes Stück von 1/16 Zoll Durchmesser Kunststoffschlauch mit einem Y-Verbinder. </li><li> Um Ballongerät montieren: fügen Sie eine Sondennadel an ein Stück 1/16 Zoll Schlauch, dann bringen Sie Schlauch an Druckwandlergehäuse. Eine kleine Spritze zu der anderen Seite des Druck tr befestigtansducer Gehäuse wird Aufblasen und Entleeren des Ballons zu ermöglichen. <ol><li> Schneiden Sie ein Quadrat der Plastikverpackung und Platz Spitze einer Magensonde Nadel in der Mitte. Wickeln Sie die Plastikfolie um die Sondennadel. </li><li> Füllen Ballon mit Kochsalzlösung und binden mit zwei Nähten. Blasen Sie Ballon, um sicherzustellen, keine Lecks vorhanden sind. Das Volumen der Salzlösung innerhalb des aufgeblasenen Ballons sollte ungefähr 200 &amp; mgr; l, kann aber abhängig von der Größe der Ratte variieren. </li><li> Alternativ können Sie einen Latex Fingerling anstelle der Plastikfolie. Platzieren Sie eine Magensonde Nadel innerhalb Fingerling, füllen mit Kochsalzlösung und Krawatte ab. </li></ol></li></ol></li></ol> 2. Ernte das Herz <ol><li> Restrain eine Sprague Dawley-Ratte mit einem decapicone oder andere manuelle Rückhaltevorrichtung. Wiegen Ratte. </li><li> Verabreichen Ketamin / Xylazin-Mischung (0,85 mg / kg Ketamin und 0,15 mg / kg Xylazin) durch intraperitoneale Injektion an Ratten anästhesiert. Diese Dosis des Anästhetikums ausreichend für Anästhesie liefern20-40 min, aber das Verfahren sollte möglichst schnell nach der Narkose wird bestätigt, durchgeführt werden. </li><li> Bestätigen richtigen Grad der Anästhesie durch Tests toe Prise Reflex. </li><li> Tracheotomie <ol><li> Entfernen pelt von Mitte Vorderpfote auf Basis des Kiefers, mit Gefäßklemmen, um Fell und Schere zu erheben, um Einschnitt zu machen. Halten Sie das Fell angehoben, um es von der darunter liegenden Muskeln zu trennen, so dass man auf dem Fell schneiden und entfernen. </li><li> Verwendung hemostats, heben Drüsengewebe und machen einen horizontalen Schnitt in Faszie schlechter als das Drüsengewebe. Verwenden hemostats zu Einschnitt spreizt, kümmert sich nicht um nick die Halsvenen. </li><li> Verwendung Hämostaten pinch Muskeldarüberliegenden Luftröhre, und mit einer Schere einen Quereinschnitt im Muskel genau unter der Spitze der Hämostatika. Verwendung hemostats, verbreiten Gewebe auseinander, um die Luftröhre zu offenbaren. </li><li> Gefäßklemmen vorsichtig unter Luftröhre, Clearing Faszie, während voran durch leichtes Vor- und Zurück hemostats. </li><li>Sobald hemostats erfolgreich hinter der Luftröhre gelegt, kneifen 0-0 Seidennaht mit Gefäßklemmen und hemisect die Luftröhre mit einem kleinen, scharfen Schere. </li><li> Legen Trachealkanüle in die Trachea hemiseziert, ziehen Naht hinter der Luftröhre, und binden Sie den Faden um die Kanüle eingeführt Luftröhre, die Verankerung des Nahtmaterials zu der Y-Leiste der Kanüle mit einem Chirurgen Knoten. </li><li> Unter Verwendung einer 27 G Nadel injizieren 1.000 U / kg Heparin in die Halsschlagader und lassen Sie sie für 30 Sekunden zu zirkulieren. </li></ol></li><li> Thorakotomie <ol><li> Entfernen pelt von Mitte Bauch bis Mitte Vorderpfote Region durch Kneifen mit Gefäßklemmen und Schneiden mit einer Schere. </li><li> Machen Sie eine ¾-Zoll-Quereinschnitt in die Bauchmuskelwand, direkt unterhalb des Zwerchfells. </li><li> Machen Sie eine vertikale Inzision bis die Bauchdecke und Brustwand, Schneiden entlang dem Brustbein. </li><li> Schneiden Sie die Blende wieder auf bilateraler Ebene, dann verbreiten Brustkorb zu Herzen, Klemmbrustkorb mit Gefäßklemmen, um sicherzustellen, bleibt es verbreitet zu offenbaren. </li&gt; <li> Verwendung hemostats, entfernen Sie vorsichtig Thymus, Aussetzen der aufsteigenden Aorta. </li><li> Necken hemostats durch Aorten-Schleife, Vorschieben und Zurückziehen hemostats und sanft Verbreitung Faszie zu Spitze Gefäßklemmen ermöglichen durch. </li><li> Verwenden hemostats zu 0-0 Seidennaht hinten aufsteigenden Aorta zu ziehen, binden Naht zu einem lockeren Halb quadratischen Knoten. </li><li> Schalten Hahn, um den Fluss von Perfusionspuffer, hemisect Aorta beginnen und sofort legen Kanüle in Aortenlumen. Schnell cinch eine Halbkreuzknoten und füllen Sie die Knoten, Anziehen gründlich. </li><li> Mit einer Schere Herzen weg von den großen Gefäßen zu sezieren, Herz aus der Brust zu entfernen und um die Perfusion Spalte. </li><li> Abschneiden von überschüssigem Lungengewebe und lassen Herz auf der Säule für etwa 15 min vor dem Einsetzen des Ballons äquilibrieren. Verwenden Sie einen normalen Durchflussrate von Puffer durch das Herz von 10-20 ml / min. </li></ol></li></ol> 3. Langendorff-Perfusion und Ischämie-Reperfusionsverletzung <ol><li> Platzierung der LV vorssure Ballon <ol><li> Lassen Sie die Luft Ballon beim Rollen in eine Kegelform und schalten Hahn, um sicherzustellen, Ballon bleibt entleerten. </li><li> Excise linken Vorhof mit einer kleinen Schere, um den Zugang zu Mitralklappe aussetzen. </li><li> Legen Ballon durch linken Vorhof und Mitralklappe in den linken Ventrikel. </li><li> Startdruck-Monitoring-Software (LabChart Pro). </li><li> Blasen Sie Ballon durch Öffnen Absperrhahn und sanft zunehmende Menge an Kochsalzlösung in Ballon, bis der diastolische Druck Lesung aus Mikromanometer Null übersteigt. </li><li> Auf Länge-Spannung Antwort überprüfen, aufblasen Ballon langsam zu einer diastolischen Druck von 75 mmHg, entleeren langsam, einmal zu wiederholen. </li><li> Eingestellt diastolische Druck 10 mmHg durch Modulieren der Menge von Salzlösung in den Ballon. Schalten Hahn zu Ballon auf diesem Niveau der Inflation zu versiegeln und zu pflegen geschlossenen Drucksystem zwischen LV Ballon und Druckwandler. </li><li> Unteren Herzkammer in die erhitzt und Abdeckung mit Kunststoffkammer. </li></ol></li><li> AnzeigeDienst der Ischämie-Reperfusionsverletzung <ol><li> Stecker die Unterseite der erwärmten Kammer und erlauben Kammer mit ergossenen Puffer zu füllen. </li><li> Als Puffer Herzen unter Wasser, drehen Hahn, den Fluss von Puffer in das Herz zu stoppen, zu induzieren globale Ischämie. Ischämie Zeit kann je nach den Zielen des Experiments variieren. </li><li> Nach 30 Minuten der Ischämie, schalten Hahn, um die Strömung des Puffers in das Herz wiederherzustellen, Initiierung der Reperfusion. </li><li> Lassen Sie Reperfusion des Herzens für 1 h vor Beendigung des Experiments. Verwenden variable Reperfusion Zeiten, abhängig von den Zielen des Experiments. </li></ol></li><li> Kündigung Experiment und Ernten von Tissue <ol><li> Verwendung Seitenöffnung des Absperrhahns verabreichen 10 ml phosphatgepufferter Salzlösung bei 4 ° C in das Herz mit einer Rate von 10 ml / min, um das Herz anzuhalten. </li><li> Herz entfernen Perfusion Spalte wegschneiden restlichen Vorhofgewebe. </li><li> Zeigen Herz in einen Edelstahlgewebe Schneidematrix, Deckel mit Parafilm und Stelle bei -80 ° C für 8 Minuten, oder bis das Herz hat einen Marshmallow artige Konsistenz. </li><li> Entfernen Block vom Gefrierschrank und legen Sie in Rasierklingen schneiden Matrix zu Herzen in 2 mm dicke Scheiben schneiden. Gewebeblöcke können auch mit anderen als 2 mm Scheibe Größen erworben werden. </li><li> Scheiben entfernen ein zu einer Zeit und fallen in flüssigem Stickstoff auf Blitzeis für biochemische Untersuchungen. Bewahren Sie den dritten Ventrikel Scheibe von der Spitze zur Infarkt Färbung. </li><li> Entfernen Gewebe aus flüssigem Stickstoff und bei -80 ° C bis zur Verwendung in biochemischen Experimenten. </li></ol></li><li> Infarkt-Färbung <ol><li> Inkubieren des dritten ventrikulären Scheibe in 10 ml 1% w / v Triphenyltetrazoliumchlorid (TTC) bei 37 ° C für 15 min. Anmerkung: Die Inkubation in TTC kann für 15 oder 30 Minuten bei unveränderter Wirksamkeit 15 durchgeführt werden. </li><li> Übertragen Gewebeschnitt von TTC zu 10% Formalin und lassen Sie sie bei Raumtemperatur über Nacht inkubiert. Für optimale Ergebnisse zu hörents sollte von Formalin aufgenommen und innerhalb von 24 Stunden 4 abgebildet werden. </li><li> Fotografie Buntscheibe und Verwendung Software wie ImageJ zu Infarktgröße schätzen, nach dem Protokoll des Herstellers. Fotografieren so bald wie möglich nach der Fixierung, da der Farbstoff im Laufe der Zeit verblassen. </li></ol></li></ol>

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Die Autoren erklären, dass sie keine konkurrierenden finanziellen Interessen haben.

Isoliert perfundierten Rattenherzen erfolgreich eingesetzt werden kann, um die Wirkung von pharmakologischen Intervention Herz Präkonditionierung Reperfusionsverletzung 9 untersuchen. Es gibt jedoch einige wesentliche Schritte der Prozedur, die um reproduzierbare Ergebnisse zu gewährleisten standardisiert werden müssen. Aufrechterhalten einer Temperatur von 37,4 ° C innerhalb des Systems ist entscheidend, denn auch milder Hypothermie und Hyperthermie kann Herz Präkonditionierung 10,11 führen. Die G...

Aufklärung der Ereignisse des Herz Reaktion auf sowohl Ischämie und Reperfusion zugrunde liegen weiter zu verbessern die Behandlung von Herzinfarkt und Herz 1 operative Eingriffe, die Aorten-Querspann 2 erfordern. Während in vivo Modellen von Ischämie-Reperfusionsverletzung ermöglichen sehr nützlich Endpunktanalyse, sind sie nicht so wirksam für die Untersuchung der funktionellen Auswirkungen von Ischämie-Reperfusionsverletzung akut in Echtzeit. Zusätzlich kann in vivo Ischämie-Reperfusion-Modelle erzeugen im Allgemeinen zu signifikanten Schwankungen in der Infarktgröße und die direkte Abgabe von Arzneimittel an das Herz zum Zeitpunkt der Reperfusion ist eine Herausforderung. Die Verwendung einer Langendorff-Herzen isoliert System für die Untersuchung ischämischen Reperfusionsschäden ermöglicht Echtzeit-funktionelle Bewertung der pharmakologischen Behandlungen, gleichmäßige Flächen infarzierten Gewebe und momentane Abgabe von Arzneimittel direkt in den Herzmuskel. Zuerst beschrieben by Oscar Langendorff 1895 3 ist der Langendorff-Herz isoliert ein robustes Modell für die Untersuchung ischämischen Reperfusionsschäden, nachdem er in Ischämie-Reperfusion Forschung für den letzten 40 Jahren 4,5 verwendet. Hier werden einige Modifikationen vorgenommen, um das isolierte Herz zur Funktionsanalyse zu optimieren. In situ Kanülierung der Aorta, während das Herz schlägt, wird sichergestellt, dass das Herz nicht ischämischen Präkonditionierung, die die Ergebnisse der Ischämie-Reperfusion den Versuchen 6 verändern würden auftreten. Um dies zu erleichtern, wird ein Luftröhrenschnitt durchgeführt, so dass Belüftung und gewährleisten physiologische Stabilität der Ratte während der Operation. Das Herz wird dann auf eine Glaswassermantel spiral Säule, durch die Krebs-Henseleit-Puffer wird durch retrograde Perfusion direkt in die Aorta geliefert befestigt. Eine Kochsalzlösung gefüllten Ballon wird in den linken Ventrikel eingeführt und mit einem Druckwandler, der für die Echtzeit-Messung von Drücken von innerhalb der Herzkammer ein ermöglicht befestigtd Berechnung mehrerer funktioneller Parameter. Am Ende des Experiments wird das Herz mit kalter Kochsalzlösung gespült, um die Kontraktion und in flüssigem Stickstoff eingefroren, um Downstream-Analyse von DNA, RNA und Protein-Ebene ermöglichen verhaften. So modifizierte, dient der Langendorff-perfundierten Herzen als ein wirksames System für die direkte Überwachung der physiologischen Wirkung von pharmakologische Interventionen zu jeder Zeit während des akut ischämischen Reperfusionsschäden.

<table><tbody><tr><td>Natriumchlorid</td><td>Sigma Aldrich</td><td>S3014</td><td></td></tr><tr><td>Kaliumchlorid</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P9541</td><td></td></tr><tr><td>Magnesiumsulfat</td><td>Sigma Aldrich</td><td>203726</td><td></td></tr><tr><td>Kaliumphosphat zweibasisch</td><td>Sigma Aldrich</td><td>RES20765-A7</td><td></td></tr><tr><td>Calciumchlorid Dihydrat</td><td>Sigma Aldrich</td><td>C8106</td><td></td></tr><tr><td>Natrium Bicarbonat</td><td>Sigma Aldrich</td><td>S5761</td><td></td></tr><tr><td>D-Glukose</td><td>Sigma Aldrich</td><td>G8270</td><td></td></tr><tr><td>Oktansäure</td><td>Sigma Aldrich</td><td>C2875</td><td></td></tr><tr><td>2,3,5-Triphenyltetrazoliumchlorid</td><td>Sigma Aldrich</td><td>T8877</td><td></td></tr><tr><td>Medizinischer Druckmessumformer</td><td>MEMSCAP</td><td>SP844</td><td></td></tr><tr><td>Masterflex Schlauchpumpe</td><td>Cole Parmer</td><td>EW-07521-40</td><td></td></tr><tr><td>Masterflex Easy Load Pumpenkopf</td><td>Cole Parmer</td><td>EW-07518-10</td><td></td></tr><tr><td>Beheiztes Umlaufwasserbad</td><td>Lauda</td><td>M3</td><td></td></tr><tr><td>Schlauch Durchflussmodul</td><td>Transsonic</td><td>TS410</td><td></td></tr><tr><td>Modulare Forschungskonsole</td><td>Transsonic</td><td>T402</td><td></td></tr><tr><td>Inline-Durchflusssensor</td><td>Transsonic</td><td>ME2PXN</td><td></td></tr><tr><td>PowerLab Datenerfassungsgerät</td><td>AD Instruments</td><td>PL3508</td><td></td></tr><tr><td>LabChart Datenerfassungssoftware</td><td>AD Instruments</td><td>MLU60/8</td><td></td></tr></tbody></table>

induktion und beurteilung der ischämie-reperfusion injury in langendorff-perfundierten rattenherzen

Induction and Assessment of Ischemia-reperfusion Injury in Langendorff-perfused Rat Hearts

Die biochemischen Ereignisse im Zusammenhang mit Ischämie-Reperfusionsschäden im akuten Bereich sind von großer Bedeutung für die Förderung neuer Behandlungsoptionen für Myokardinfarkt und kardiale Komplikationen der Thoraxchirurgie. Die Fähigkeit bestimmter Medikamente, das Myokard gegen Ischämie-Reperfusionsschäden zu präkonditionieren, hat zu mehreren klinischen Studien mit wenig Erfolg geführt. Das isolierte Herzmodell ermöglicht die akute Beobachtung der funktionellen Auswirkungen einer Ischämie-Reperfusionsverletzung in Echtzeit, einschließlich der Auswirkungen verschiedener pharmakologischer Interventionen, die zu einem beliebigen Zeitpunkt vor oder innerhalb des Zeitfensters der Ischämie-Reperfusionsverletzung verabreicht werden. Da kurze Perioden der Ischämie das Herz gegen ischämische Verletzungen präkonditionieren können, wird eine In-situ-Aortenkanüle durchgeführt, um eine funktionelle Beurteilung des nicht präkonditionierten Myokards zu ermöglichen. Ein mit Kochsalzlösung gefüllter Ballon wird in den linken Ventrikel eingeführt, um eine Echtzeitmessung der Druckerzeugung zu ermöglichen. Eine ischämische Schädigung wird durch die Beendigung des Perfusionspufferflusses simuliert, gefolgt von einer Reperfusion. Die Dauer sowohl der Ischämie als auch der Reperfusion kann moduliert werden, um biochemische Ereignisse zu einem bestimmten Zeitpunkt zu untersuchen. Obwohl das Langendorff-isolierte Herzmodell keine Berücksichtigung systemischer Ereignisse ermöglicht, die Ischämie und Reperfusion beeinflussen, ist es ein hervorragendes Modell für die Untersuchung akuter funktioneller und biochemischer Ereignisse im Zeitfenster der Ischämie-Reperfusionsverletzung sowie der Wirkung pharmakologischer Interventionen auf die kardiale Prä- und Postkonditionierung. Das Ziel dieses Protokolls ist es, zu demonstrieren, wie eine in situ Aortenkanüle und Herzexzision mit anschließender Ischämie/Reperfusionsverletzung im Langendorff-Modell durchgeführt werden kann.

Die linke Kammerballon Vorrichtung ermöglicht eine Echtzeitüberwachung des Drucks durch den Auftraggeber linken Ventrikel (Abbildung 1) entwickelt. Wie zuvor 7 beschrieben, kann diese Druckspur verwendet, um viele der Parameter der Herzfunktion zu berechnen. Diese Berechnungen können in der Basisphase als auch der Reperfusionsphase gemacht werden, gemittelt über mehrere Spuren in jeder Gruppe, und verglichen, um zu bestimmen, ob die pharmakologische Intervention ergab Herz Vorbehandlung, wie ...

Das isolierte Rattenherz ist ein dauerhaftes Modell für Ischämie-Reperfusionsschäden. Hier beschreiben wir den Prozess der Entnahme des schlagenden Herzens von einer Ratte mittels in situ Aortenkanüle, der Langendorff-Perfusion des Herzens, der simulierten Ischämie-Reperfusionsverletzung und der Infarktfärbung, um das Ausmaß des ischämischen Insults zu bestätigen.

Induktion und Beurteilung der Ischämie-Reperfusion Injury in Langendorff-perfundierten Rattenherzen

The biochemical events surrounding ischemia reperfusion injury in the acute setting are of great importance to furthering novel treatment options for ...

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens besteht darin, eine Ischämie und Reperfusionsverletzung ex vivo zu modellieren. Dazu wird zunächst eine Ratte anästhesiert und der Brustkorb geöffnet, um die Aorta in C zwei zu kanülieren und so eine ischämische Präkonditionierung des Myokards zu verhindern. Anschließend wird das Herz entfernt und an eine Langendorff-Perfusionsapparatur angeschlossen.Der letzte Schritt besteht darin, eine Ischämie-Reperfusionsschädigung durch Anhalten des Pufferflusses für einen bestimmten Zeitraum und anschließende Wiederherstellung des Flusses auszulösen. Letztendlich wird die ventrikuläre Druckerzeugung verwendet, um die Wirkung der Ischämie-Reperfusionsschädigung auf die myokardiale Funktion darzustellen. Diese Methode kann dazu beitragen, zentrale Fragen im Bereich der kardialen Ischämie-Reperfusion zu beantworten, beispielsweise welche molekularen Vorgänge während der dynamischen ersten Stunden der Ischämie-Reperfusionsschädigung ablaufen.Berechnen Sie zunächst die erforderliche Anästhetika-Menge, nachdem bestätigt wurde, dass die Ratte narkotisiert ist. Beginnen Sie die Tracheotomie, indem Sie zuerst die Haut von den mittleren Vorderpfoten bis zur Unt

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Research

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JoVE Journal

Medicine

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Dieser Artikel beschreibt ein hoher zeitlicher und räumlicher Auflösung Technik optisch Bild Aktionspotential Bewegung auf der Oberfläche von Langendorff-perfundierten Rattenherzen mit einem potentiometrischen Farbstoff (di-8-ANEPPS).

Optische Abbildung von Langendorff-perfundierten Rattenherzen

Das Rattenmodell der akuten Myokardinfarkt (AMI) ist nützlich, um die Folge eines MI auf die kardiale pathophysiologischen und physiologischen Funktion zu untersuchen.

Akuter Myokardinfarkt bei Ratten

Wir stellen ein chirurgisches Verfahren, experimentelle Ischämie / Reperfusions (I / R) Schädigung induzieren Myokardinfarkt (MI) in Mausmodellen, die für mehr Klarheit in der Positionierung der Ligation an der linken vorderen absteigenden Arterie (LAD) simulieren können, um die Reproduzierbarkeit zu erhöhen MI Experimente in Mäusen.

Einem Mausmodell der myokardialen Ischämie-Reperfusion Injury durch Ligation des linken vorderen absteigenden Arterie

Koronare Strömungsreserve (CFR), ist definiert als das Verhältnis des maximalen koronaren Blutflusses zum ruhenden koronaren Blutfluss. Wir präsentieren ein Protokoll zur Bewertung von CFR bei Ratten mittels Ultraschall, das die Möglichkeit bietet, kardiovaskuläre Risikofaktoren in Ermangelung einer obstruktiven koronaren Erkrankung vorherzusagen.

Bewertung des koronaren Flussreservats nach Myokard-Ischämie-Reperfusion bei Ratten

Dieser Artikel stellt eine effiziente Methode zur Durchführung von Myokard-Ischämie und anschließender chronischer Reperfusion bei Ratten mit einem minimal-invasiven Ansatz dar. Darüber hinaus wird die linksventrikuläre hämodynamische Funktion von Ratten durch Echokardiographie und isolierte Arbeitsherzmethoden beurteilt.

Semi-Minimal Invasive Methode zur Induzieren von Myokardinfarkt bei Ratten und der Beurteilung der Herzfunktion durch ein isoliertes funktionierendes Herzsystem

Das Myokardischämie-Reperfusionsmodell des Rattenherzens wird durch die Verwendung eines selbst hergestellten Retraktors, einer Polyvinylchloridröhre und einer einzigartigen Knotenmethode verbessert. Die Ergebnisse der Elektrokardiogramm-, Triphenyltetrazoliumchlorid- und histologischen Färbung sowie die Ergebnisse der prozentualen Überlebensanalyse zeigten, dass die verbesserte Modellgruppe höhere Erfolgs- und Überlebensraten aufweist als die bereits bestehende Modellgruppe.

Verbessertes Nagetiermodell der Myokardischämie und Reperfusionsverletzung

Die vorliegende Studie zeigt ein hochgradig reproduzierbares Tiermodell der akuten regionalen myokardialen Ischämie und Reperfusionsschädigung bei Kaninchen unter Verwendung einer linken Mini-Thorakotomie für Überlebensfälle oder einer Mittellinien-Sternotomie für Nicht-Überlebensfälle.

Modell der Ischämie und Reperfusionsschädigung bei Kaninchen

Dieser Artikel zeigt die Machbarkeit, längere Perfusionszeiten (4 h) von murinen Herztransplantaten ohne Funktionsverlust zu erreichen, indem während des Langendorff-Prozesses niedrigere (30-35 mmHg) als physiologische (60-80 mmHg) Perfusionsdrücke verwendet werden.

Modifizierte Langendorff-Perfusion zur Verlängerung der Perfusionszeiten von Nagetier-Herztransplantaten

Dieses Protokoll beschreibt den Prozess der Vorbereitung auf die Reperfusion des Verschlusses der mittleren Hirnarterie über die Arteria carotis communis.

Eine modifizierte Modellpräparation für die Reperfusion des Verschlusses der mittleren Hirnarterie

Ein leistungsfähiges Modell für perioperative und Intensivmedizin akute Nierenversagen wird vorgestellt. Mit ganzen Körper Hypoperfusion durch Herzstillstand ist es möglich, fast replizieren die histologische und funktionelle Veränderungen der klinischen AKI induziert.

Normothermen Herzstillstand und Herz-Lungen: Ein Maus-Modell der Ischämie-Reperfusionsschaden

Lernen Sie die Modellierung von Ischämie-Reperfusionsverletzungen ex vivo am isolierten Rattenherzen. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung molekularer Ereignisse und myokardialer Funktion.

Induktion und Beurteilung der Ischämie-Reperfusion Injury in Langendorff-perfundierten Rattenherzen

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