Bestimmen Ultraschall Vocalization Preferences in Mäuse mit einer Zwei-Choice-Test-Playback

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, die Ultraschall-Vokalisation oder die USV-Präferenzen bei Mäusen mit Hilfe eines Wiedergabetests mit zwei Auswahlmöglichkeiten zu bestimmen. Dies wird erreicht, indem zuerst U SVS von einer lebenden Person aufgenommen wird. Der zweite Schritt besteht darin, die aufgenommenen US-Dateien entsprechend zu bearbeiten und zu trimmen und stereophone Sounddateien zu generieren.

Anschließend werden die Ultraschallstrahler kalibriert und die USV-Lautstärke angepasst. Mit dem Abschwächer und den Verstärkern besteht der letzte Schritt darin, die Probandenmaus in die Testbox einzuführen und die Wiedergabe der beiden Sounddateien gleichzeitig zu starten. Letztendlich kann die Verhaltensüberwachung aufzeigen, ob die Maus eine Präferenz für ein Geräusch gegenüber dem anderen zeigt.

Die von uns entwickelten USV-Strahler können uns helfen, Schlüsselfragen zu meiner Speichenkommunikation zu beantworten, wie z. B. Partys, biologische Bedeutung verschiedener Arten von uns vs. Der Hauptvorteil unseres ätzenden Emitters gegenüber bestehenden Geräten wie den elektrischen Wandlern von Pazo besteht darin, dass der Frequenzgang keine Resonanzspitzen aufweist. Die breitbandige Flut Mississippi im Ultraschall ohne Harmonieverzerrungen ermöglicht es, den Emitter zur Wiedergabe komplizierter akustischer Kommunikationsverläufe zu verwenden.

Durch diese Methode kann ein Einblick in die weibliche Reaktion auf s bs oder Männer gegeben werden. Es kann auch auf andere Arten der sozialen Interaktion angewendet werden, z. B. zwischen Mutter und Papa, zwischen erwachsenen Männchen und zwischen erwachsenen Weibchen. Um sexuell erfahrene männliche Mäuse und jungfräuliche weibliche Mäuse zu erhalten, verfolgen Sie den ESRA-Zyklus, indem Sie täglich Vaginalabstriche machen.

Färben Sie die Abstriche mit Giza und bestimmen Sie das Gesicht des Esra-Zyklus nach Standardverfahren. So nehmen Sie Ultraschall-Vokalisationen auf oder US vs. Schließen Sie ein Ultraschall-Kondensatormikrofon über einen USB-Werbekonverter an einen PC an.

Stellen Sie den Verstärkungspegel auf dem AD-Konverter auf sieben akustische Daten in 16 Bit ein. Formatieren Sie Dateien mit einer Abtastrate von 400 Kilohertz mit einer Audio-Capture-Software für die Tonwiedergabe, schließen Sie einen DA-Wandler an den PC an und verbinden Sie dann zwei Verstärker über einen Abschwächer mit dem DA-Wandler, reparieren Sie einen kleinen Käfig mit einem Loch in der Seitenwand mit einem Durchmesser von sechs Zentimetern. Decken Sie das Loch mit 0,5 Zentimeter Drahtgeflecht ab.

Vermeiden Sie die Verwendung von Einstreu oder anderen Dingen, die raschelnde Geräusche erzeugen und die Aufnahme verunreinigen könnten. Platzieren Sie das Ultraschallmikrofon neben dem mit einem Netz bedeckten Loch. Wenn es soweit ist.

Setze eine männliche Maus und eine geschlechtsreife weibliche Maus entweder in den Käfig oder in den katastrophalen Käfig. Nehmen Sie uns auf vs. Für drei bis fünf Minuten.

Die Testbox ist in drei Kammern, eine neutrale Zone und die Gates der Räume A und B unterteilt. Trennen Sie die neutrale Zone von den anderen Räumen. Die Räume A und B haben am Ende jeweils ein vier Zentimeter großes Loch, das mit Drahtgeflecht abgedeckt ist.

Platzieren Sie den Ultraschallsender gegen das Netz und umgeben Sie ihn mit Gummiplatten, um Schallleckagen zu verhindern. Platzieren Sie Bleiplomben auf beiden Seiten der Wand zwischen den Räumen A und B zur Schalldämmung, um die Wiedergabegeräusche zu erzeugen. Erfassen Sie ein 22. USB-Segment aus der zuvor aufgezeichneten Datei.

Wählen Sie mit einer digitalen Audiobearbeitungssoftware Hintergrundgeräusche aus diesem Segment aus und erfassen Sie sie und erstellen Sie eine 22. Hintergrundgeräuschdatei, indem Sie das Geräuschsegment wiederholen, um die beiden Audiodateien wiederzugeben. Exportieren Sie sie gleichzeitig als eine einzige Stereo-Sounddatei, wobei eine Datei für das linke Ohr und die andere für das rechte Ohr verwendet wird. Filtern Sie die Sounddateien mit einem Hochpassfilter mit einem Cutoff von 40 Kilohertz.

Reduzieren Sie das Rauschen mit dem Tool zur Geräuschreduzierung. Wählen Sie in der Nachbearbeitungssoftware ein Segment der Datei aus und erfassen Sie es, das keine US-VS.As dem Rauschunterdrückungsprofil enthält, und führen Sie die Rauschunterdrückung mit Pegel 40 aus, um die Lautstärke während der Wiedergabe zu kalibrieren. Platzieren Sie das Mikrofon zunächst 10 Zentimeter von den Ultraschallsendern entfernt.

Starten Sie die Wiedergabe und messen Sie den Schalldruckpegel in Dezibel. Verwenden Sie den Abschwächer und die Verstärker, um die Lautstärke der US-V-Töne einzustellen. Wird von den Ultraschallstrahlern auf den gleichen Schalldruckpegel wie der männliche US im Vergleich zu

den zuvor aufgezeichneten Schalldruckern erzeugt. Vergewissern Sie sich, dass die beiden Ultraschallstrahler den gleichen Schalldruckpegel aufweisen, indem Sie ein Kalibrierungsgeräusch verwenden, wenn Sie eine Klangdatei reproduzieren, die aus zwei Strömen von uns besteht, vs. Passen Sie die beiden erzeugten Schalldruckpegel auf den gleichen Pegel an.

Um den Zwei-Auswahl-Test zu beginnen, schließen Sie die Tore zu den Räumen A und B und gewöhnen Sie das weibliche Subjekt an die neutrale Zone. Decken Sie die Schachtel 30 Minuten lang mit Acrylplatte ab, um ein Austreten zu verhindern. Nach 30 Minuten zeichnen Sie den gesamten Vorgang mit einer Videokamera auf, die über der Box angebracht ist.

Entfernen Sie das Tor und lassen Sie das Weibchen den Rest der Testbox, einschließlich der Schallzonen, frei erkunden. Sobald das Weibchen beide Mesh-Kreise untersucht hat und in die neutrale Zone zurückgekehrt ist, beginnt es mit dem Abspielen des 22. zuvor vorbereiteten Soundfiles. Überwachen Sie das Verhalten des Tieres fünf bis 10 Minuten lang, während Sie die Sounddatei wiederholt abspielen.

Wechseln Sie die Position der Ultraschallstrahler nach dem Zufallsprinzip, um eine seitliche Vorspannung zwischen den beiden Räumen zu vermeiden. Weibliche Mäuse zeigten keine Präferenz zwischen den Räumen A und B, wenn sie die Kammern vor der Tonwiedergabe erkunden durften. Die Anzahl der Raumeintritte war ähnlich zwischen Kammern mit Hintergrundgeräuschen oder männlichen US vs.

Die Probanden verbrachten jedoch eine signifikant längere Zeit in der Kammer, in der us vs. s regeneriert wurden. Vor allem in den ersten fünf Minuten. Die Erkundung der mittleren Zone wurde durch die Tonwiedergabe nicht verändert.

Weibchen verbrachten signifikant mehr Zeit innerhalb der Schallzone und suchten das Drahtgeflecht in der Kammer ab, um männliche US vs. Vor allem in den ersten fünf Minuten waren sowohl B sechs als auch Bub zu hören. Die Weibchen verbrachten mehr Zeit damit, die Seite zu untersuchen, die mit den Männchen gepaart war, im Vergleich zu einem anderen Stamm.

Nachdem Sie sich dieses Video angesehen haben, sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie Sie die Sprühpräferenz bei Mäusen mit einem Zwei-Auswahl-Geschmackstest nach seiner Entwicklung bestimmen können. Diese Technik ebnete den Weg für Forscher in der Feld- oder Markenforschung, um eine solide menschliche Interaktion zu erforschen. USV in muss je nach Alter, Geschlecht und genetischem Hintergrund unterschiedlich sein.

Nach diesem Verfahren können USB-Profile der transgenen Masse gemessen werden, um festzustellen, ob das Senden und das Speichern von USBs verändert sind.