Chronische Verengung Verletzung des Ratten N. infraorbitalis (Ionen CCI) zu Trigeminal Neuropathischer Schmerz Studieren

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, trigeminale neuropathische Schmerzen bei Ratten über eine chronische Verengungsverletzung des Nervus infraorbitalis zu untersuchen. Dies wird erreicht, indem zunächst ein Schnitt in der Mittellinie der Kopfhaut vorgenommen und der Nervus infraorbitalis freigelegt wird. Der zweite Schritt besteht darin, den Nervus infraorbitalis zu verengen, indem zwei lose gebundene Ligaturen um den Nerv gelegt werden.

Als nächstes wird das Tier für 10 Minuten in einen Beobachtungskäfig gelegt, und spontane neuropathische Schmerzen werden beurteilt, indem die Menge der isolierten Gesichtspflege gemessen wird. Zusätzlich wird die mechanische Allodynie gemessen, indem das infraorbitale Nervengebiet der Ratte mit einer abgestuften Reihe von Von-Frey-Haarfilamenten stimuliert wird, was letztendlich das Pflegeverhalten und die Reaktion verändert. Im EPS werden infraorbitale Nerventerritorien verwendet, um die Behandlung von trigeminalen neuropathischen Schmerzen zu untersuchen.

Der Hauptvorteil des Modells des roten Infraorbitalnervs gegenüber anderen Modellen wie dem Ischiasnerv oder dem Ligator des Spinalnervs besteht darin, dass der Nervus infraorbitalis ein rein sensorischer Nerv ohne motorische oder autonome Komponenten ist. Dieses Modell beinhaltet auch die Messung von spontanen Schmerzen, die die wichtigsten Beschwerden bei neuropathischen Schmerzen sind. Patienten. Die Tiere werden nach den Richtlinien des Ausschusses behandelt und gepflegt.

Für Forschungs- und Ethikfragen des IASP wird das Protokoll vom Institutionellen Ethikkomitee genehmigt. Schneiden Sie zur Vorbereitung zwei sechs Zentimeter große Stücke von fünf null chromischen Darmligaturen ab und bewahren Sie sie in einer Schale mit steriler Kochsalzlösung auf, damit sie nicht steif werden. Nachdem Sie bestätigt haben, dass die Ratte durch das Fehlen einer Reflexreaktion betäubt ist, bereiten Sie sie auf die Operation vor, indem Sie ihren Kopf rasieren.

Für einen mittleren Schnitt der Kopfhaut rasieren Sie einen Radius von 25 Millimetern vom Mittelpunkt der Augen entfernt. Befestigen Sie als Nächstes den Kopf der Ratte in einem stereotaktischen Rahmen und legen Sie ein Heizkissen unter den Körper der Ratte. Tragen Sie dann etwas Augensalbe auf und reinigen Sie die rasierte Stelle mit abwechselnd Alkohol- und Betadine-Peelings.

Beginnen Sie die Operation mit einem Schnitt in der Mittellinie, um den Schädel und das Nasenbein freizulegen. Fahren Sie mit der Operation mit einem Dissektionsmikroskop fort. Als nächstes wird mit einer Pinzette der Rand der Augenhöhle befreit, der aus den Oberkiefer-Stirn-, Tränen- und Jochbeinknochen gebildet wird, und bei Bedarf auch Blut abgetupft.

Um nun an das ION zu gelangen, lenken Sie den orbitalen Inhalt vorsichtig mit einem Präzisionswattestäbchen ab. Überdehnen Sie dabei nicht den vorderen Siebbeinnerv, der sich superior zum ION kreuzt. Anschließend wird das ION mit Hilfe einer Pinzette in einer Spreizbewegung vom umgebenden Bindegewebe befreit und bei Bedarf immer eine Blutung abgetupft.

Platzieren Sie nun ein Stück Ligatur zwischen dem ION und dem Stirnbein, indem Sie ein n entlang des Stirnknochens nach unten schieben, medial zum ION, und es dann einige Millimeter parallel zum ION schieben, wobei es dem ION unterlegen bleibt. Schieben Sie dann die Spitze einer 45 Grad abgewinkelten Pinzette unter die ION in der Nähe der Ligatur und ziehen Sie die ION vorsichtig seitlich zurück, so dass die Ligatur und die Spitzen der Pinzette zum Vorschein kommen. Fassen Sie die Ligatur und führen Sie sie unter den ION hindurch und ziehen Sie ihn heraus, bis die freiliegenden Längen gleichmäßig sind.

Binden Sie dann die Enden mit einem Kettknoten zusammen und schieben Sie den Knoten sichtbar auf den ION. Schnüren Sie den Nerv nur leicht ein und vervollständigen Sie den Knoten, damit er nicht weiter verrutschen kann. Schneiden Sie nun die freien Enden der Ligatur ab und platzieren Sie eine weitere Ligatur mit der gleichen Technik, zwei Millimeter von der ersten Ligatur entfernt.

Bestätigen Sie visuell die korrekte Platzierung der Ligaturen. Schließen Sie die Operation ab, indem Sie die Kopfhaut mit vier Null-Polyester-Nähten verschließen. Beobachte dann die Ratte, während sie sich auf einem beheizten Pad erholt.

Wenn es wieder die sternale Stellung erlangt hat, setze es in einen richtigen Käfig zurück. Die Ratte sollte alleine untergebracht werden, bis sie sich vollständig erholt hat. Dieser Test sollte in einem dunklen Raum durchgeführt werden, der von einer einzigen roten 60-Watt-Glühbirne beleuchtet wird.

Einen Meter vom Testgelände entfernt. Stellen Sie sicher, dass bei Bedarf ausreichend Hintergrundgeräusche vorhanden sind. Stellen Sie weißes Rauschen am Testgelände bereit.

Positionieren Sie einen Spiegel auf einer Seite des Beobachtungskäfigs und positionieren Sie eine Videokamera, um die Ratte und den Spiegel auf der gegenüberliegenden Seite zu betrachten. Für jeden Versuch sollte immer ein sauberer Prüfkäfig verwendet werden. Bringen Sie eine einzelne Ratte aus der Kolonie in einem ansonsten leeren Käfig zum Testgelände.

Setzen Sie das Tier in den Testkäfig und zeichnen Sie 10 Minuten lang sein Verhalten auf. Nachdem Sie die Aufnahme gemacht haben, bringen Sie die Ratte zurück in die Kolonie und reinigen Sie den Testkäfig. Nachdem Sie die Ratten einige Tage lang an das Testgelände gewöhnt haben, analysieren Sie die nachfolgenden Daten, sehen Sie sich die Aufzeichnungen an und bewerten Sie die Pflegeepisoden.

Unter Gesichtspflege versteht man Bewegungsmuster, bei denen die vier Pfoten den Gesichtsbereich berühren. Unterscheidung der isolierten Gesichtspflege von der Gesichtspflege, der die Körperpflege vorausging oder folgte. Körper. Grooming ist jede Bewegung, bei der die Pfoten, die Zunge oder die Schneidezähne mit einer anderen Körperstelle als dem Gesicht oder den vier Pfoten in Berührung gebracht werden.

Nächste Platte. Die Zeit, die für die Gesichtspflege aufgewendet wurde, und die Anzahl der Pflegeepisoden. Zwischen den Grooming-Episoden liegen mindestens vier Sekunden nicht-tödliches Grooming-Verhalten.

Bodygrooming zählt nicht als Gesichtspflege, und zwei Episoden der Gesichtspflege können durch vier oder mehr Sekunden Körperpflege unterbrochen werden. Transportieren Sie die Ratten in Sechsergruppen in abgedeckten Käfigen zum Testgelände für den Test. Setzen Sie eine einzelne Ratte in einen Kunststoffkäfig mit Einstreu und Klappdeckel für einen einfachen Zugang.

Für den Test haben Sie fünf verschiedene Von Frey Haare. Tragen Sie die Von Frey Haare 10 Minuten lang schrittweise von am flexibelsten bis am steifsten auf. Lassen Sie die Ratte in dieser Zeit im Käfig sitzen.

Öffnen Sie alle 30 Sekunden den Deckel und berühren Sie vorsichtig einen Messstab an der Wand. Nach der Besiedlungszeit, wenn sich die Ratte niedergelassen hat und nur herumschnüffelt, stochern Sie sie mit dem ersten Von-Frey-Haar innerhalb des ION-Territoriums in der Mitte des SLE-Polsters auf der Haarhaut, die die mesiale Vibra-Brust umgibt. Das Filament ist hart genug, dass es sich etwa eine halbe Sekunde lang biegt.

Bewerten Sie die Reaktion des Tieres mit keiner Antwort. Notieren Sie eine Null Punktzahl eins. Wenn die Ratte den Reiz bemerkt, aber sonst nichts tut, wird die Reaktion mit zwei bewertet.

Wenn sich die Ratte langsam von dem Reiz zurückzieht, zählt ein Gesichtswischer als zwei. Punktzahl, die Antwort als drei. Wenn die Ratte versucht, den Reiz anzugreifen oder den Reiz schnell zurückzieht, wenn die Ratte darauf reagiert, indem sie asymmetrisch mit mindestens drei Gesichtswaschbewegungen auf die stimulierte Region reagiert, dann bewerten Sie die Reaktion mit einer Vier.

In der Regel werden sechs Ratten gleichzeitig mit jeweils einem Haar getestet, bevor das nächste Haar verwendet wird. Sobald ein Haar auf eine Seite aufgetragen wurde, tragen Sie dasselbe Haar auf die kontralaterale Seite auf. Wenn beide Seiten stimuliert wurden, gehen Sie zum nächsten Haar über.

Wählen Sie für jede Ratte zufällig aus, welche Seite zuerst stimuliert werden soll. Nach der ION-Einschnürungsoperation zeigte sich bei der Beobachtung der Ratten, dass sie signifikant mehr Zeit mit der isolierten Gesichtspflege verbrachten. Die ipsilaterale mechanische Stimulation des ION-Territoriums führte in der ersten Operationswoche zu nahezu keinem Ansprechen.

In der zweiten postoperativen Woche wurden die Ratten überempfindlich. Dies hielt bis zu 120 Tage an. Es wurde auch eine sehr geringe Zunahme der Empfindlichkeit auf der kontralateralen Seite festgestellt.

Nachdem Sie sich dieses Video angesehen haben, sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie der Nervus infraorbitalis bei der Ratte freigelegt und ligiert wird und wie Sie Verhaltenstests durchführen, mit denen Sie spontane neuropathische Schmerzen und mechanische Allodynie messen können.