Long-Term Katheterisierung der Darmlymphe Trunk und Sammlung von Lymphe in Neonatal Pigs

Die Lymphkatheterisierung ist eine wichtige Technik, um Mechanismen zu untersuchen, die am Fett- und Arzneimittelstoffwechsel, der Krebsmetastasierung und der Immunfunktion beteiligt sind, und die Entnahme großer Mengen an Lymphe aus verschiedenen Tiermodellen ermöglicht es den Forschern, diese Prozesse zu untersuchen. Das Video zeigt detailliert das chirurgische Verfahren zur Katheterisierung des intestinalen Lymphstamms bei neugeborenen Schweinen mit einem ventralen Mittellinienzugang. Alle Verfahren wurden vom Institutional Animal Care and Use Committee der University of Alberta genehmigt.

Um Zugang zum Lymphgefäß zu erhalten, wurde die Bauchhöhle geöffnet. Zur Öffnung der Muskelschicht wurde Elektrokauter in der Schnittstellung verwendet. Ein Retraktor wurde platziert, um die Bauchdecke für die Dauer des Eingriffs offen zu halten.

Es werden wichtige Bauchorgane identifiziert, die bei der Lokalisierung des Lymphgefäßes helfen. Für einen besseren Zugang zu den Lymphgefäßen sind Segmente des Dünndarms und des Dickdarms auf der linken Körperseite nach außen verlagert. Das Lymphgefäß wird durch die Identifizierung der Leber und des rechten ventralen Segments der Pfortader markiert.

Bei neugeborenen Schweinen sind die Lymphgefäße empfindlich und leicht zu zerreißen, so dass eine sorgfältige Dissektion mit Tupfern und stumpfen Instrumenten erforderlich ist. Hier befindet sich das intestinale Lymphgefäß. Nun wird die Naht mit einer stumpfen Pinzette unter dem Lymphgefäß hindurch geführt.

Nun werden drei 2:0-Seidennähte unter dem Lymphgefäß geführt. Die kaudalste Naht wird verwendet, um das Gefäß zu erweitern und den Katheter am Gefäß zu befestigen. Die Schädelnähte dienen dazu, den Katheter im Gefäß zu fixieren.

Ein kleiner Schnitt im Lymphgefäß ermöglicht es, das Gefäß mit einer stumpfen Pinzette zu erweitern. Der Katheter wird in das Gefäß eingeführt. Dies muss schonend erfolgen, damit das Lymphgefäß nicht reißt.

Der Katheter muss über die schädelreichste Naht hinaus vorgeschoben werden, um sicherzustellen, dass er gut sitzt. Die drei 2-0 Seidennähte fixieren den Katheter im Lymphgefäß. Wichtig ist, dass die beiden Schädelnähte zuerst verwendet werden, um den Katheter im Gefäß zu sichern, und dann die kaudalste Naht verwendet wird, um den Katheter zu binden und die Stabilität zu erhöhen.

Es ist wichtig, vor dem Verschluss der Bauchhöhle auf einen guten Lymphfluss zu achten. Der Katheter befindet sich an der linken Mittelflanke des Schweins. Mit einer großen Pinzette wird der Katheter von der Bauchhöhle zur Außenfläche der Schweineflanke gezogen.

Die Muskelschichten werden mit einer 2-0 Vicryl-Naht auf einer konischen Nadel in einem einfachen unterbrochenen Nahtmuster verschlossen. Die Haut wird mit einer 2-0 Vicrylnaht auf einer Schneidenadel in einem verlaufenden subkutikulären Nahtmuster verschlossen. Mit dem Austrittsschnitt wird der Katheter durch die Haut geführt und mit einer 2-0 Nylonnaht auf einer Schneidenadel in einem Nahtmuster verschlossen.

Dieser Verschluss verhindert, dass aufsteigende Infektionen entlang des Katheters nach innen wandern. Die Jacke, in der sich die Lymphsammelflaschen befinden, wird dem Schwein aufgesetzt, während das Schwein noch unter Narkose steht. Der Katheter wird in die Auffangflasche eingeführt und ein guter Lymphfluss wird vor dem Aufwecken des Schweins gewährleistet.

Die Schweine erholen sich gut von dem Eingriff und der ausgezeichnete Lymphfluss bleibt während des gesamten Versuchs erhalten. Die Tabelle zeigt die Bestandteile der Lymphe, die aus dem Lymphgefäß entnommen werden. Zu diesen Komponenten gehören Apolipoprotein B48, Triglyceride und Cholesterin.

Die Abbildung des Western Blots zeigt das Vorhandensein von Apolipoprotein B48 und geringen Mengen des aus Plasma gewonnenen Apolipoproteins B100 in der entnommenen Lymphprobe. Obwohl die Lymphkatheterisierung bei jungen Schweinen eine technische Herausforderung darstellen kann, da die Lymphgefäße sowohl empfindlich als auch brüchig sind, zeigt dieses Video, dass die richtige und sorgfältige chirurgische Technik bei jungen Schweinen den Forschern ein hervorragendes Modell für die Entnahme von Darmlymphe bieten kann.