Name: Wurzelspitzenresektion Mausmodell zur frühen Säugetierherzregeneration Studieren (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-01-23T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 8 s
Description: Lernen Sie die Wurzelspitzenresektion bei neugeborenen Mäusen zur Untersuchung früher Herzregeneration. Diese Methode ermöglicht die Analyse zellulärer und molekularer Reparaturmechanismen.

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Die Autoren danken Drs. James Hawkins, Zu-Xi Yu Xuan und Qu aus dem National Heart, Lung, and Blood Institute (NHLBI) für ihre Unterstützung bei der Maus-Operation und Vorbereitung und Färbung von Paraffinschnitten. Die Autoren sind dankbar, dass die NIH Fellows Editorial Board für die redaktionelle Unterstützung.

Alle Maus-Experimente wurden von der Animal Care und Verwenden Programm an der National Institutes of Health (NIH) mit Protokollnummer H0083R3 genehmigt. Das NHLBI IACUC genehmigt das Protokoll ohne Analgetika. 1. Hypothermie Anästhesie in neugeborenen Mäusen <ol><li> Sterilisieren, Schwämme und chirurgische Geräte in einem Autoklaven vor der Operation. Bereiten Sie alle chirurgischen Materialien und schalten auf eine heiße Perle Sterilisator 15-20 Minuten vorher auf 240 ° C bis 270 ° C zu erreichen. </li><li> Übertragen Sie alle C57BL / 6 Welpen (Alters P1) von ihren stillenden Mutter in eine saubere Maus Käfig mit frischer Bettwäsche und Nistmaterial. Sobald die Welpen werden in einen Operationssaal genommen, führen Sie die Apikalchirurgie unverzüglich zu minimieren ihre Zeit damit verbracht von der Mutter getrennt und das Risiko der Mütter Kannibalisierung zu reduzieren. </li><li> Setzen Schwämme auf einem Eis-Bett und legen Sie dann einen Welpen auf dem Schwamm für ~ 3 min zu Unterkühlung Anästhesie zu erreichen. Anästhesie Bestätigen Sie durch Beobachtung apnea und Akinese und Kneifen einen hinteren Fuß. Überprüfen Sie den Status des Neugeborenen häufig, weil zu wenig Zeit nicht den Welpen akinetischen und Apnoen, und eine übermäßige Dauer der Anästhesie kann die Überlebensrate 12 niedriger zu machen. </li></ol> 2. Thorakotomie <ol><li> Bringen Sie den Welpen aus dem Eis Bett auf eine chirurgische Tischbereich und verwenden Sie Klebeband um seine Arme, Beine und Schwanz in Rückenlage zu immobilisieren. </li><li> Desinfizieren Sie die Brust mit Betadin und reinigen Sie sie mit einem 70% igem Alkohol prep Pad sanft. </li><li> Einen Querhautschnitt entlang des hervorZwischenRippenBereich des Brusthöhle mit einem Vannas Frühling Scissor und dann stumpf sezieren die hervorZwischenRippenMuskeln, um Zugang zum Herzen zu erleichtern. HINWEIS: Die Überlebensraten zu verbessern, wenn der Blutverlust wird während des chirurgischen Prozesses minimiert. </li></ol> 3. Chirurgische Amputation des Herzens ventrikuläre Apex <ol><li> Von Hand, vorsichtig anwenden Druck auf den Bauch, um die exteriorisierenApex des Herzens. Blut aufnehmen um den OP-Bereich mit einem sterilen Wattestäbchen für klare Visualisierung. Für scheinoperierten Kontroll Neugeborenen, gehen Sie direkt zu Schritt 4 (Naht und Wiederherstellung von Mäusen). </li><li> Unter einem Vergrößerungslampe und mit Iridektomie Schere vorsichtig auszuführen stück Resektion des linken Ventrikels (LV), bis der LV Kammer ausgesetzt ist. Seien Sie vorsichtig, um die reseziert Teile des LV minimieren. Etwa 15% Resektion ist notwendig, um eine optimale Belichtung der LV Kammer zu erreichen. </li><li> Sicherzustellen, dass das Herz wieder in den Brustraum, sobald der LV Kammer ausgesetzt ist. </li></ol> 4. Naht und Wiederherstellung von Mäusen <ol><li> Naht der Rippen und Muskeln zusammen, um die Brusthöhle zu versiegeln mit sterilen Proline 6-0 Nahtmaterial, und dann sorgfältig schließen Sie die Hautschnitt Site mit Hautkleber. </li><li> Erwärmen Sie die Neugeborenen unter einer Wärmelampe für ca. 3 min für die Wiederherstellung, und klicken Sie dann reinigen das Blut und Leimspuren mit einem 70% igem Alkohol prep Pad before Wiedereinführung seine Wurfgeschwister. Versuchen Sie, den gesamten chirurgischen Eingriffs innerhalb von 10 Minuten abgeschlossen werden, da die Minimierung der Zeitaufwand von der Mutter getrennt verbessert pup Überleben nach Wurzelspitzenresektion. </li><li> Nach jeder Operation, legen die chirurgischen Werkzeuge in Kontakt mit den Wülsten des heißen Wulst Sterilisator für etwa 20 sec für die vollständige Sterilisation. Lassen Sie die chirurgische Instrumente auf RT vor jeder Operation zu kühlen. </li><li> Nach Abschluss der Operationen für alle Welpen in einem Wurf, mischen Sie die Welpen mit Bettwäsche und Kot der Mutter, bevor sie dann wieder in Nest der Mutter. HINWEIS: Im Allgemeinen sind ICR / CD-1-Mäusen besser Pflegemütter als C57BL / 6, aber auch bei stillenden Müttern mit dem gleichen genetischen Hintergrund, variieren Förderung Instinkte. Wenn Ändern einer stillenden Mutter ist notwendig, um die Sterblichkeit durch mütterliche Kannibalisierung zu reduzieren, entfernen Sie die P0 Welpen auf eine stillende Mutter und führen Sie dann Wurzelspitzenresektion an P1. Entweder den Schein-Operation oder die apikale r nur durchführenesection in einem Wurf von Welpen, weil das Mischen Schein und chirurgische Jungtieren konnte die Überlebensraten der chirurgischen Gruppe von Welpen 6 zu verringern. </li></ol> 5. Post-OP-Analyse <ol><li> Einen Tag nach der Operation, die Welpen zu überwachen, stellen Sie sicher, dass es keinen Unterschied zwischen Schein und chirurgische Gruppen und zählen die Anzahl der Welpen, um die Überlebensrate zu messen. Wenn die Operationen richtig durchgeführt wird, sollte die Überlebensraten ähnlich und mehr als 60% sowohl in der Schein-und chirurgischen Gruppen sein. </li><li> Herz Isolierung und Fixierung. <ol><li> Euthanize die Welpen an den Tagen 1 und 2 nach der Operation über die Enthauptung und Tag 21 nach der Operation von CO2 mit der Versicherung des Todes durch Genickbruch, dann reinigen Sie die Brust mit einem 70% igem Alkohol prep. </li><li> Einzuschneiden die Mittellinie Haut und Muskeln der Brust und öffnen Sie die Brust. </li><li> Verbrauchsteuern Das gesamte Herz aus dem Brustraum und befestigen Sie das gesamte Herz einer jeden Probe in 5 ml 4% Paraformaldehyd O / N bei RT. </li></ol></li><li> Am nächsten Tag, übertragen Sie die Proben auf 70% Ethanol. Die Proben können bis zu einer Woche vor dem Paraffineinbettung gespeichert werden. </li><li> Slice 5 um dicke Paraffinschnitte durch das gesamte Herzkammer und führen Sie Standard Hämatoxylin und Eosin (H &amp; E) und Massons Trichrom-Färbung, um die regenerative Antwort 5, 7 zu untersuchen. Insbesondere H &amp; E-Färbung wird verwendet, um Muskelersatz zu prüfen und Massons Trichrom-Färbung verwendet um fibrotische Reaktionen 5 zu untersuchen. </li><li> Wählen Sie den Bereich von Interesse und mindestens drei Foci pro Probe manuell mit einem Dia-Scanner eingestellt. Bild und analysieren die Färbung Folien bei 40-facher Vergrößerung nach den Anweisungen des Herstellers mit Standardparametern. </li></ol>

<ol><li>Lin, Z., Pu, W. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strategies+for+cardiac+regeneration+and+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Strategies for cardiac regeneration and repair.</a> Sci Transl Med. 6, 231-239 (2014).</li>
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<li>Gonzalez-Rosa, J. M., Martin, V., Peralta, M., Torres, M., Mercader, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extensive+scar+formation+and+regression+during+heart+regeneration+after+cryoinjury+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Extensive scar formation and regression during heart regeneration after cryoinjury in zebrafish.</a> Development. 138, 1663-1674 (2011).</li>
</ol>

Publikationskosten für diesen Artikel wurden von einem Geschenk von Fine Science Tools, um Dr. Jian Hou gesponsert.

Die kardiale Regeneration zeigt Potenzial für die Behandlung und Prävention von Herzinsuffizienz1, 2. Tiermodelle sind unverzichtbar und spielen eine entscheidende Rolle für das Verständnis, wie die kardiale Regeneration abläuft3-6. Viele Amphibien und Fische regenerieren Herzgewebe als Reaktion auf Verletzungen, was einen Einblick in unser Verständnis von Herz-Kreislauf-Erkrankungen beim Menschen gibt13, 14. Im Hinblick auf die Evolution sollte die Pathophysiologie jedoch zwischen einem ...

Eine verlängerte menschliche Lebenserwartung führt zu verschiedenen alters- und lebensstilbedingten Krankheiten, einschließlich Herzinsuffizienz, einer der Haupttodesursachen. Ohne Ersatz verlorener oder dysfunktionaler Herzmuskelzellen können die derzeitigen Therapeutika die Herzfunktion jedoch nur vorübergehend verbessern1, 2. Daher ist es notwendig, innovative Strategien für die Herzregeneration und -reparatur zu entdecken und zu entwickeln. Das Herz eines erwachsenen Säugetieres hat ein begrenztes Regenerationspotenzial. Studien an niederen Wirbeltieren wie Urodele-Amphibien und Teleostfischen haben beispiellose Einblicke in die molekularen und zellulären Mechanismen geliefert, die der Herzregeneration zugrunde liegen3, 4. Vor kurzem ist ein neonatales Mausmodell der Herzregeneration entstanden, das die Identifizierung und Charakterisierung evolutionär konservierter pathophysiologischer Ereignisse ermöglichen könnte, die für die menschliche Herzregeneration erforderlich sind5. 
Apikale Resektion bezieht sich auf die chirurgische Entfernung der linksventrikulären Spitze. Dieses Verfahren ist aufgrund seiner hohen Letalität bei älteren Mäusen auf 1 bis 7 Tage alte (P1 bis P7) Mäuse beschränkt6. Es wird erwartet, dass der kardiale Regenerationsprozess bei neonatalen Mäusen nach apikaler Resektion wie folgt abläuft: (I) schnelle und effektive Bildung eines Hämatoms, um die Spitze zu versiegeln und eine Blutung zu verhindern; (II) Regeneration von Kardiomyozyten und Wiederherstellung der systolischen Funktion5, 7. Jüngste Arbeiten haben eine Debatte über die Bedeutung und Effizienz dieses Modells8-11 angeregt. Daher ist es wichtig, die apikale Resektion klar und detailliert darzustellen. Zu diesem Zweck beschreibt dieses Protokoll anschaulich und spezifisch ein Video, wie ich die apikale Resektion auf der Grundlage eines früheren Protokollsdurchgeführt habe 6. 
Das Verständnis der molekularen Mechanismen, die der kardialen Regeneration zugrunde liegen, ist wichtig für die Behandlung von Herzerkrankungen, die durch Verlust und/oder verletzte Kardiomyozyten gekennzeichnet sind, wie z.B. Herzinsuffizienz1, 2. Angesichts der aktuellen und vielversprechenden Fortschritte der apikalen Resektion in der Erforschung der kardialen Regeneration könnte diese Studie den Einsatz dieser Technik und ihre Verwendung in der kardiologischen Regenerationsforschung fördern.

<table><tbody><tr><td>Olsen-Hegar Nadelhalter mit Schere, 1,5 mm</td><td>Fine Science Tools</td><td>12002-12</td><td></td></tr><tr><td>Vannas Federschere - 2 mm Cutting</td><td>Edge Fine Science Tools</td><td>15000-03</td><td>Iridektomieschere</td></tr> Hot <tr><td>Bead Sterilisator</td><td>Fine Science Tools</td><td>18000-45</td><td></td></tr><tr><td>Irispinzette, gerade, gezahnt</td><td>Fine Science Tools</td><td>11064-07</td><td></td></tr><tr><td>Iris-Pinzette, gebogene, gezackte</td><td>Fine Science Tools</td><td>11065-07</td><td></td></tr><tr><td>Shea-Schere - gebogen/stumpf-stumpf/12 cm</td><td>Fine Science Tools</td><td>14105-12</td><td></td></tr><tr><td>Nahtbindezange mit rundem Griff, gerade</td><td>Fine Science Tools</td><td>18025-12</td><td></td></tr><tr><td>Vannas Federschere mit rundem Griff</td><td>Fine Science Tools</td><td>15400-12</td><td></td></tr><tr><td>Fine Hämostat</td><td>Fine Science Tools</td><td>13007-12</td><td></td></tr><tr><td>Lupenleuchte</td><td>Luxolamp Corp</td><td>IM120&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Heizlampe</td><td>Brandt Equipment llc</td><td>51152/3</td><td></td></tr><tr><td>6-0 Prolene Nahtmaterial</td><td>Ethicon</td><td>8889H</td><td></td></tr><tr><td>Hautkleber-Vetbond Tissue Adhesive&nbsp;</td><td>3M&nbsp;</td><td>1469</td><td></td></tr><tr><td>Sterile Applikatoren mit Baumwollspitze</td><td>Dynarex</td><td>4305</td><td></td></tr><tr><td>WEBCOL Alkohol-Vorbereitungspad</td><td>Covidien</td><td>6818</td><td>Medium 2-lagig, 200/BOX, gesättigt mit 70% Isopropylalkohol</td></tr><tr><td>Curity Allzweckschwämme</td><td>Covidien</td><td>9024</td><td>Vlies 4-lagig, 4"x4" (10,2cm&mal; 10,2 cm)</td></tr><tr><td>Schutzblatt für die Tischplatte</td><td>KIMTECH SCIENCE</td><td>7546</td><td>18" x 19,5" (45,72 cm x 49,53 cm) x 50</td></tr><tr><td>0,9 % Natriumchlorid, 250 ml</td><td>Hospira Inc.</td><td>NDC 0409-6138-22</td><td></td></tr><tr><td>Betadin-Lösungsstäbchen</td><td>Purdue Products L.P.</td><td>NDC 67618-153-03</td><td></td></tr><tr><td>Autoklav</td><td>TOMY Digital Biology</td><td>SX-700</td><td>HOCHDRUCK-DAMPFSTERILISATOR</td></tr><tr><td>Objektträgerscanner</td><td>HAMAMATSU</td><td>NanoZoomer 2.0-RS</td><td></td></tr></tbody></table>

wurzelspitzenresektion mausmodell zur frühen säugetierherzregeneration studieren

Apical Resection Mouse Model to Study Early Mammalian Heart Regeneration

Herz-Kreislauf-Krankheit plagt die ganze Welt durch intensive Lifestyle-Änderungen. Herzregeneration birgt ein großes Versprechen für die Reparatur und Wiederherstellung der Herzmuskelzellen wegen Verletzung und Krankheit verloren. Im Gegensatz zu der robusten kardialen Regeneration von bestimmten niederen Wirbeltieren, erwachsenen Säugetier-Herzen zeigen in der Regel eine minimale Kapazität für Herz Regeneration und Reparatur. Allerdings haben jüngste Studien beträchtliche wissenschaftliche Interesse mit der Feststellung, dass zwischen postnatalen Tag 1-7 (P1 bis P7), behält der neonatalen Mäuseherz signifikante Regenerationspotential nach Wurzelspitzenresektion (dh Amputationen und Belichtung des linken ventrikulären Apex) ausgelöst. Eine wichtige Kontroverse über diesen Befund könnte durch die vielfältigen Operation bezogene Verfahren bei den Bemühungen zu replizieren oder zu erweitern auf diese wichtige Erkenntnis verwendet wird. Diese Anweisungen dynamisch für Wurzelspitzenresektion in einem Mausmodell zeigen die Materialien und Methodik. Die wesentlichen Schritte dieses Nagetier Survival Chirurgie beinhalten Hypothermie Anästhesie, Thorakotomie, chirurgische Amputation der Herzkammerspitze, und das Nahtmaterial und Rückgewinnung von Mäusen. Die beschriebene könnte die Anwendung der Wurzelspitzenresektion Mausmodells für die kardiovaskuläre Forschung zu erweitern Ansatz.

Maus Welpen eingeschläfert 1, 2, und 21 Tage nach der Wurzelspitzenresektion, und ihre Herzen wurden für die H &amp; E und Massons Trichrom gesammelt. Blaue Farbe in Massons Trichrom-Färbung zeigt die Ablagerung von epikardialen extrazellulären Matrix 5. Mit erfolgreichen Wurzelspitzenresektion, ist ein Blutgerinnsel effektiv gebildet, um die LV 1 Tag nach Wurzelspitzenresektion abzudichten, wie in 1A gezeigt. Eine allmähliche Resorption des Blutgerinnsels und frühen Herzfibrose beobachtet wi...

In dieser Studie wird ein Schritt-für-Schritt-Videoprotokoll der apikalen Resektion demonstriert. Die apikale Resektion ist ein kürzlich vorgestellter chirurgischer Ansatz in der Forschung zur Herzregeneration von Säugetieren. Diese Studie kann die Anwendung der apikalen Resektion als Standardmethode in der Erforschung des Mechanismus, der der Herzregeneration zugrunde liegt, fördern.

Wurzelspitzenresektion Mausmodell zur frühen Säugetierherzregeneration Studieren

Cardiovascular disease plagues the whole world due to intensive lifestyle changes. Heart regeneration holds great promise for repairing and restoring ...

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens besteht darin, die apikale Resektion bei neugeborenen Mäusen anzuwenden, um die frühe Regeneration des Säugetierherzens zu untersuchen. Diese Methode kann dazu beitragen, zentrale Fragen auf dem Gebiet der Herzerneuerung zu beantworten, beispielsweise, welche molekularen und zellulären Mechanismen der frühen Regeneration des Säugetierherzens zugrunde liegen. Der wesentliche Vorteil dieser Technik liegt darin, dass das Mausmodell der apikalen Resektion einen vergleichsweise einfachen und direkten Ansatz zur Untersuchung der frühen Herzerneuerung bei Säugetieren bietet.Bevor Sie mit dem Verfahren beginnen, überführen Sie alle C57 Black Six-Welpen des ersten postnatalen Tages von ihrer säugenden Mutter in einen sauberen Maus-Käfig mit frischem Einstreu und Nestmaterial. Überführen Sie dann nacheinander jedes Neugeborene von einer Eisunterlage in den Operationsbereich und fixieren Sie Arme, Beine und Schwanz in Rückenlage. Desinfizieren Sie die Brust mit Betadine, gefolgt von einer sanften Reinigung mit einem 70 %igen Alkoholtupfer.Nun führen Sie einen Hautschnitt entlang des vierten inneren Interkostalraums des Brustkorbs durch. Verwenden Sie eine Feder-Schere, um eine Inzision an der Herzspitze vorzunehmen. Um das Herz freizulegen, führen Sie mit der Feder-Schere eine Inzision an der Herzspitze durch, gefolgt von einer stumpfen Präparation der inneren Interkostalmuskulatur.Sterile 6-0-Nähte verwenden, um Rippen und Muskulatur zusammenzunähen. Hautkleber verwenden, um den Hautschnitt vorsichtig zu verschließen, und das Neugeborene etwa drei Minuten lang unter einer Wärmelampe regenerieren lassen. Anschließend mit einem alkoholischen Reinigungstupfer (70 %) alle Blut- und Kleberreste vom Welpen entfernen und das Tier zu seinen Wurfgeschwistern zurückbringen.Nachdem alle Operationen durchgeführt wurden, mischen Sie die Welpen mit der Einstreu und den Ausscheidungen der Mutter, bevor Sie die Neugeborenen in das Nest der Mutter zurückbringen. Einen Tag nach der Operation zählen Sie die Anzahl der Schein- und operierten Welpen, um die Überlebensrate innerhalb jeder Gruppe zu bestimmen. Zum jeweils geeigneten Zeitpunkt nach der Operation reinigen Sie für jedes Tier nacheinander die Brust mit 70 % Ethanol und schneiden die mittig verlaufende Haut und Muskulatur der Brust ein.Entfernen Sie das gesamte Herz aus der Brusthöhle und fixieren Sie das Gewebe in fünf Millimetern vierprozentigem Paraformaldehyd über Nacht bei Raumtemperatur. Am nächsten Tag überführen Sie die Proben bis zu einer Woche lang in 70 %igen Ethanol, bevor die Paraffineinbettung erfolgt. Nach dem Anfertigen von fünf Mikrometer dicken Paraffinschnitten durch die gesamte Ventrikelregion färben Sie die Proben mit Hämalin und Eosin sowie Massonscher Dreifachfärbung, um die Muskelersatz- und fibrotischen Reaktionen in den resezierten Herzen jeweils zu untersuchen.Manuell mithilfe eines Slide-Scanners mindestens drei Foci pro Probe gewinnen. Anschließend die Probenbilder mit einer 40fachen Vergrößerung gemäß den Herstelleranweisungen unter Verwendung der Standardparameter des Scanners analysieren. Bei einer erfolgreichen apikalen Resektion bildet sich innerhalb eines Tages nach der apikalen Resektion ein Blutgerinnsel, das effektiv den linken Ventrikel verschließt.Es wird dann eine fortschreitende Resorption des Blutgerinnsels und eine frühe kardiale Fibrose beobachtet, die allmählich durch Herzmuskelgewebe ersetzt wird, bis die vollständige Regeneration des Myokards 21 Tage nach der Resektion erfolgt ist. Tatsächlich sind drei Wochen nach der Operation morphologische Analysen zufolge keine Unterschiede zwischen den resezierten und den kontrolloperierten Herzen erkennbar. Bei der Durchführung dieses Verfahrens ist es wichtig, sterile Bedingungen einzuhalten. Nach Durchführung dieses Verfahrens können weitere Maßnahmen wie die Markierung und die lineare Analyse durchgeführt werden, um zusätzliche Fragen zur Kardiomyozytenproliferation und zur apikalen Resektion zu beantworten. Nach dem Anschauen dieses Videos sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie man eine apikale Resektion bei neugeborenen Mäusen durchführt.

apical-resection-mouse-model-to-study-early-mammalian-heart

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Forschung

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Medizin

In diesem Video demonstrieren wir das Verfahren zur chirurgischen Entfernung der linksventrikulären Spitze eines neugeborenen Mausherzens.

Apikale Resektion eines Neugeborenen-Mausmodells: Ein chirurgisches Verfahren zur Amputation der ventrikulären Spitze zur Untersuchung des regenerativen Potenzials in einem neu geborenen Mausherz

Herzinsuffizienz ist die Hauptursache für Krankenhausaufenthalte und eine der Haupttodesursachen. Ein Modell der permanenten Ligatur der linken anterioren absteigenden Koronararterie bei Mäusen wird angewendet, um den ventrikulären Umbau und die kardiale Dysfunktion nach einem Myokardinfarkt zu untersuchen. Die Technik der invasiven hämodynamischen Messungen an Mäusen wird vorgestellt.

Permanent Ligation des linken vorderen absteigenden Koronararterie bei Mäusen: Ein Modell der Post-Myokardinfarkt Umbau und Herzinsuffizienz

Dieses Protokoll beschreibt ein hochgradig reproduzierbares Modell der kardiologischen Regeneration durch chirurgische Induktion eines Myokardinfarkts im linken Ventrikel von Mäusen nach der Geburt am Tag 1. Die Methode beinhaltet die Induktion einer hypothermischen Anästhesie und Ligatur der linken vorderen absteigenden Koronararterie.

Myokardinfarkts bei neugeborenen Mäusen, ein Modell von Cardiac Regeneration

Die Proliferation von Cardiomyozyten nach einer Verletzung ist ein dynamischer Prozess, der eine Symphonie extrazellulärer Hinweise aus Nicht-Myozyten-Zellpopulationen erfordert. Mit Lineage-Tracing, passiven CLARITY und dreidimensionalen konfokalen Mikroskopie-Techniken mit ganzer Montage können wir den Einfluss einer Vielzahl von Zelltypen auf die Herzreparatur und -regeneration analysieren.

Erfassung der Herzverletzungsreaktion von gezielten Zellpopulationen über cleared Heart Three-Dimensional Imaging

Dieses Protokoll zielt darauf ab, ein biogedrucktes 3D-Pflaster auf das Epikardium von infarktierten Mäusen zu transplantieren, die Herzinsuffizienz modellieren. Es enthält Details über Anästhesie, die chirurgische Brustöffnung, permanente Ligation der linken vorderen absteigenden (LAD) Koronararterie und die Anwendung eines biobedruckten Pflasters auf den Infarktbereich des Herzens.

Transplantation eines biobedruckten 3D-Patches in einem Murine-Modell des Myokardinfarkts

Eine neuartige Technik zur Rekonstruktion des Blutkreislaufs in einem heterotopen abdominalen Mausherztransplantationsmodell wird demonstriert.

Rekonstruktion des Blutkreislaufs in einem abdominalen Mausherztransplantationsmodell

Wir bieten ein Protokoll für die Trennung und Transplantation von neonatalen kardialen Makrophagen in ein erwachsenes Mausherz, das ein vielversprechender Weg zur Förderung der Herzreparatur sein könnte.

Transplantation von neonatalen Maus-Herzmakrophagen in erwachsene Mäuse

Die ultraschallgesteuerte Zellabgabe um die Stelle des Myokardinfarkts bei Mäusen ist eine sichere, effektive und bequeme Art der Zelltransplantation.

Ultraschallgesteuerte induzierte pluripotente Stammzell-abgeleitete Kardiomyozyten-Implantation bei myokardinfarktierten Mäusen

In dieser Arbeit beschreiben wir ein Protokoll zur Isolierung einer ausreichenden Anzahl einzelner nicht-kardiomyozyten mit hoher Viabilität aus einem Mausherzen nach einem Myokardinfarkt (MI). Dies kann für die anschließende Einzelzellsequenzierung, Durchflusszytometrie-Analyse und primäre Zellkultur verwendet werden.

Herstellung einer Nicht-Kardiomyozyten-Zellsuspension für die Einzelzell-RNA-Sequenzierung aus einem erwachsenen Mausherzen nach Myokardinfarkt

Xenopus tropicalis ist ein ideales Modell für die regenerative Forschung, da viele seiner Organe eine bemerkenswerte Regenerationsfähigkeit besitzen. In dieser Arbeit stellen wir eine Methode zur Konstruktion eines Herzverletzungsmodells in X. tropicalis mittels Apexresektion vor.

Ein apikales Resektionsmodell im adulten Xenopus tropicalis-Herzen

Lernen Sie die Wurzelspitzenresektion bei neugeborenen Mäusen zur Untersuchung früher Herzregeneration. Diese Methode ermöglicht die Analyse zellulärer und molekularer Reparaturmechanismen.

Wurzelspitzenresektion Mausmodell zur frühen Säugetierherzregeneration Studieren

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