Eine quantitative Glycomics und Proteomics Kombinierte Reinigungsstrategie

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8. März 2016

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Es wurde ein Hochdurchsatzprotokoll für die kombinierte Proteomik- und Glykomik-Aufreinigung und die LC-MS/MS-Quantifizierung im Plasma entwickelt. Die Deamidierungsanalyse von N-verknüpften Glykosylierungsmotiven war spezifisch für deglykosylierte Stellen. Eine genaue Quantifizierung der N-Glykane wurde durch die Kopplung der filtergestützten N-Glykan-Trennung an die Individualitätsnormalisierung bei der Markierung mit der Glykanhydrazid-Tag-Strategie erreicht.

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N-Glykan-Aufreinigung

Chapters in this video

0:05

Titel

1:10

Denaturierung und Alkylierung von Proteinen und Glykoproteinen

2:15

Enzymatischer Abbau von N-verknüpften Glykanen

3:29

Elution von N-Glykanen und filtergestützte Probenvorbereitung (FASP) sowie enzymatischer Abbau von Proteinen

6:37

Derivatisierung von N-verknüpften Glykanen mit hydrophoben Hydrazid-Tags

9:27

Ergebnisse: Analyse der kombinierten Glykomik- und Proteomik-Reinigungsstrategie

10:44

Schlussfolgerung

8:19

Ultra-Hochdruck-Flüssigkeitschromatographie und massenspektrometrische Analyse

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