Name: Mess Druck Volumen Loops in der Maus (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-05-02T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 15 s
Description: Lernen Sie die Messung von Druck-Volumen-Loops bei Mäusen zur detaillierten Beurteilung der Herzfunktion. Diese Methode ermöglicht die physiologische Charakterisierung genetisch veränderter Tiermodelle.

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Der Autor möchte die Finanzierung von NHLBI (K08 HL102066 und R01 HL114832) anzuerkennen.

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<li>Meyers, T. A., Townsend, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+right+ventricular+fibrosis+and+reduction+in+biventricular+cardiac+reserve+in+the+dystrophin-deficient+mdx+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Early right ventricular fibrosis and reduction in biventricular cardiac reserve in the dystrophin-deficient mdx heart.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 308 (4), H303-H315 (2015).</li>
<li>Townsend, D., Yasuda, S., Li, S., Chamberlain, J. S., Metzger, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emergent+dilated+cardiomyopathy+caused+by+targeted+repair+of+dystrophic+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Emergent dilated cardiomyopathy caused by targeted repair of dystrophic skeletal muscle.</a> Mol Ther. 16 (5), 832-835 (2008).</li>
<li>Townsend, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+administration+of+micro-dystrophin+restores+cardiac+geometry+and+prevents+dobutamine-induced+cardiac+pump+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Systemic administration of micro-dystrophin restores cardiac geometry and prevents dobutamine-induced cardiac pump failure.</a> Mol Ther. 15 (6), 1086-1092 (2007).</li>
<li>Strakova, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dystrobrevin+increases+dystrophin%27s+binding+to+the+dystrophin-glycoprotein+complex+and+provides+protection+during+cardiac+stress%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Cell+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Dystrobrevin increases dystrophin's binding to the dystrophin-glycoprotein complex and provides protection during cardiac stress.</a> J Mol Cell Cardiol. 76, 106-115 (2014).</li>
<li>Yasuda, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dystrophic+heart+failure+blocked+by+membrane+sealant+poloxamer%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Dystrophic heart failure blocked by membrane sealant poloxamer.</a> Nature. 436 (7053), 1025-1029 (2005).</li>
<li>Townsend, D., Daly, M., Chamberlain, J. S., Metzger, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-dependent+dystrophin+loss+and+genetic+reconstitution+establish+a+molecular+link+between+dystrophin+and+heart+performance+during+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Age-dependent dystrophin loss and genetic reconstitution establish a molecular link between dystrophin and heart performance during aging.</a> Mol Ther. 19 (10), 1821-1825 (2011).</li>
<li>Townsend, D., Yasuda, S., McNally, E., Metzger, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+pathophysiological+mechanisms+of+cardiomyopathy+in+hearts+lacking+dystrophin+or+the+sarcoglycan+complex%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Distinct pathophysiological mechanisms of cardiomyopathy in hearts lacking dystrophin or the sarcoglycan complex.</a> FASEB J. 25 (9), 3106-3114 (2011).</li>
<li>Pacher, P., Nagayama, T., Mukhopadhyay, P., Bátkai, S., Kass, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+cardiac+function+using+pressure-volume+conductance+catheter+technique+in+mice+and+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Measurement of cardiac function using pressure-volume conductance catheter technique in mice and rats.</a> Nat Protoc. 3 (9), 1422-1434 (2008).</li>
<li>Zhang, B., Davis, J. P., Ziolo, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+Catheterization+in+Mice+to+Measure+the+Pressure+Volume+Relationship%3A+Investigating+the+Bowditch+Effect%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Cardiac Catheterization in Mice to Measure the Pressure Volume Relationship: Investigating the Bowditch Effect.</a> J Vis Exp. (100), e52618-e52618 (2015).</li>
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<li>Townsend, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+administration+of+membrane+sealant+prevents+severe+cardiac+injury+and+ventricular+dilatation+in+dystrophic+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Chronic administration of membrane sealant prevents severe cardiac injury and ventricular dilatation in dystrophic dogs.</a> J Clin Invest. 120 (4), 1140-1150 (2010).</li>
<li>Sato, T., Shishido, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ESPVR+of+in+situ+rat+left+ventricle+shows+contractility-dependent+curvilinearity%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">ESPVR of in situ rat left ventricle shows contractility-dependent curvilinearity.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 274 (5 Pt 2), H1429-H1434 (1998).</li>
<li>Sunagawa, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+coronary+arterial+pressure+on+left+ventricular+end-systolic+pressure-volume+relation+of+isolated+canine+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of coronary arterial pressure on left ventricular end-systolic pressure-volume relation of isolated canine heart.</a> Circ Res. 50 (5), 727-734 (1982).</li>
<li>Cingolani, H. E., Pérez, N. G., Cingolani, O. H., Ennis, I. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Anrep+effect%3A+100+years+later%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">The Anrep effect: 100 years later.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 304 (2), H175-H182 (2013).</li>
<li>Baan, J., van der Velde, E. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensitivity+of+left+ventricular+end-systolic+pressure-volume+relation+to+type+of+loading+intervention+in+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Sensitivity of left ventricular end-systolic pressure-volume relation to type of loading intervention in dogs.</a> Circ Res. 62 (6), 1247-1258 (1988).</li>
<li>Rankin, J. S., Olsen, C. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+airway+pressure+on+cardiac+function+in+intact+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">The effects of airway pressure on cardiac function in intact dogs.</a> Circulation. 66 (1), 108-120 (1982).</li>
</ol>

Der Autor hat nichts offenzulegen.

Es gibt drei kritische Schritte in diesem Verfahren: 1) die Anordnung des Endotrachealtubus und geeignete Belüftung, 2) Platzierung des jugulare IV-Katheter, und 3) die richtige Platzierung des PV Katheters in den linken Ventrikel. die entsprechende Atemfrequenz zu bestimmen ist ein wichtiger Teil Beatmungsunterstützung bereitzustellen. Conscious Mäuse im Allgemeinen Alveolarventilation mit schnelle flache Atemzüge halten. In der Regel wird belüftet Mäuse haben viel größeren Hubvolumen. Somit wird ein langsamer wird die...

Kardiovaskuläre Erkrankungen weiterhin in der ganzen Welt 1 eine wesentliche Ursache für Mortalität und Morbidität zu sein. Erkrankungen des Herz präsentieren besonders schwierigen Herausforderungen in die Entwicklung neuer Therapien. Fortschritte in der Genetik bieten die Möglichkeit eine Vielzahl von potentiellen genetischen Beiträger zur Entwicklung von Herzerkrankungen zu identifizieren. Die integrative Natur des Herz-Kreislauf-System erfordert, dass diese genetische Ziele in intakten Tiermodellen geprüft. Die genetischen Flexibilität und geringe Kosten Gehäuse der Maus haben sie an die Spitze für die Beurteilung der physiologischen Rolle eines gegebenen Gens gebracht. Die geringe Größe der Maus stellt einige einzigartige Herausforderungen für die Beurteilung der Herzfunktion. Es gibt verschiedene Modalitäten, die Informationen bezüglich der Herzfunktion liefern kann, sondern nur die gleichzeitige Messung von ventrikulären Druck und Volumen ermöglicht Druck-Volumen (PV) loop Analyse der Ventrikelfunktion. PV-Schleifen alleow Herzfunktion wird unabhängig von seiner Verbindung mit dem Gefäßsystem analysiert; ein wichtiger Faktor für die funktionelle Rolle eines bestimmten genetischen Elements zu bestimmen. Die Bewertung der Druck-Volumen - Schleifen ist seit vielen Jahren sowohl experimentell als auch klinisch eingesetzt und umfangreiche Literatur existiert in Bezug auf die Analyse dieser Daten setzt 2,3. Die Anpassung der PV - Loop - Technologie an die Maus einen wichtigen Fortschritt für das Verständnis von murinen Herzphysiologie 4-6 hat. Katheter basierend PV loop Technologien Paar einen Druckwandler und die Verwendung von Leitwert ventrikulären Volumen abzuschätzen. Das ventrikuläre Volumen wird durch Prüfen Änderungen in einem elektrischen Feld, erzeugt durch den Katheter bestimmt. Dieses Verfahren modelliert die Ventrikel als Zylinder, dessen Höhe durch den Abstand zwischen den Elektroden auf dem Katheter und dem Radius definiert ist, wird durch Leitung eines elektrischen Feldes durch das Blut berechneteder Ventrikel 7-9. Das Leitfähigkeitssignal durch den Katheter gemessen, hat zwei Komponenten. Die erste ist die Leitung durch das Blut; Dies ändert sich mit dem Volumen des Ventrikels und bildet das Primärsignal verwendet ventrikuläre Volumen zu bestimmen. Die zweite Komponente resultiert aus Leitung durch und entlang der Wand des Ventrikels. Dies wird parallel Leitfähigkeit genannt und muss, um die absolute ventrikuläre Volumen zu bestimmen, entfernt werden. Es gibt zwei kommerziell erhältlichen Systeme für die Erfassung von Druck-Volumen - Daten im Forschungslabor und das Verfahren für die Berechnung und die Parallelleitfähigkeit entfernen ist der Hauptunterschied zwischen ihnen 6,10,11. Konduktanz Katheter erfordern die Injektion von hypertonischer Kochsalzlösung für die Berechnung der Parallelleitfähigkeit. Diese Injektion verändert vorübergehend die Leitfähigkeit des Blutes im Ventrikel, während die Leitfähigkeit der Wand konstant bleibt. Aus diesen Daten ist es möglich, die zu bestimmenBestandteil des Leitwert-Signal, das aus dem Blut stammt, und was kommt von der Ventrikelwand. Dieser Ansatz geht davon aus, dass parallel Leitfähigkeit nicht während des Herzzyklus variiert. Die Admittanz Verfahren beruht auf Phasenänderungen in dem elektrischen Feld, um den Beitrag der Ventrikelwand zum Gesamtvolumen Signal zu beurteilen. Dieses Verfahren beruht auf einer Vielzahl von vorbestimmten Konstanten für die Leitfähigkeit des Blutes und Myokard das Endvolumen zu bestimmen, sondern macht kontinuierliche Maßnahmen parallel Leitfähigkeit während des Herzzyklus. Beide Systeme bieten gute Schätzungen der linksventrikulären Volumen und die Unterschiede zwischen ihnen sind nicht geeignet, physiologisch signifikant ist. Das zylindrische Modell des Ventrikels und anderen Annahmen machen diese katheterbasierte Ansätze nicht so genau wie die anderen Modalitäten, aber diese Daten werden auf einer Beat-by-Beat-Basis zur Verfügung gestellt, die für die Beurteilung der lastunabhängigen Maßnahmen der Herzfunktion wesentlich ist. Das hier beschriebene Verfahren ist in meinem Labor verwendet und hat sich für eine große Anzahl von Studien zur Verfügung gestellten Daten , die grundlegenden pathophysiologischen Mechanismen der dystrophischen Kardiomyopathie Prüfung 18.12. Die folgende Vorgehensweise skizziert ist eine von zwei, die verwendet werden können, um PV Schleifendaten erhalten. Während viele der Grundsätze für die beiden Ansatz anwendbar sind, wird dieses Protokoll auf eine offene Brust apikal Ansatz konzentrieren; ein geschlossener Brust - Protokoll wurde an anderer Stelle ausführlich 19,20. Während das Verfahren im Detail beschrieben werden, die wichtige übergeordneten Prinzipien sind das Herz mit minimalem Schaden entweder an das Herz oder die Lunge zu belichten. Während des Protokolls ist es wichtig, sich daran zu erinnern, dass dies ein nicht-Überleben Verfahren ist und dass eine gute Belichtung des Herzens, die ist von entscheidender Bedeutung für die richtige Platzierung des Katheters.

<table><tbody><tr><td>Dumont 5/45 (2)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11251-33</td><td></td></tr><tr><td>Gefäßdilatationszange</td><td>Fine Science Tools</td><td>18153-11</td><td></td></tr><tr><td>Castroviejo Mikrodissektion Federschere</td><td>Roboz Instruments</td><td>RS-5668</td><td></td></tr><tr><td>Octogon Pinzette - gezahnt/gebogen</td><td>Fine Science Tools</td><td>11041-08</td><td></td></tr><tr><td>Octogon Pinzette - gezackt/gerade</td><td>fein Science Tools</td><td>11040-08</td><td></td></tr><tr><td>Dissektorschere - schwere Klinge</td><td>Fine Science Tools</td><td>14082-09</td><td></td></tr><tr><td>Transpore Chirurgisches Klebeband</td><td>3M</td><td>1527-1</td><td></td></tr><tr><td>3-0 Seidennaht</td><td>Fine Science Tools</td><td>18020-30</td><td></td></tr><tr><td>TOPO Beatmungsgerät</td><td>Kent Scientific</td><td>TOPO</td><td></td></tr><tr><td>Martin ME 102 Elektrochirurgische Einheit</td><td>Harvard Apparat</td><td>PY2 72-2484</td><td></td></tr><tr><td>Spritzenpumpe</td><td>Lucca Technologies</td><td>GenieTouch</td><td></td></tr><tr><td>Stereomikroskop mit Galgenstativ</td><td>Nikon</td><td>SMZ-800N</td><td></td></tr><tr><td>Thermoelement-Thermometer</td><td>Cole Parmer</td><td>EW-91100-40</td><td></td></tr><tr><td>T/Pumpe Warmwasser-Umwälzpumpe</td><td>Kent Scientific</td><td>TP-700</td><td></td></tr><tr><td>ADVantage Druck-Volumen-System</td><td>Transsonisch</td><td>ADV500</td><td></td></tr><tr><td>Datenerfassung und -analyse</td><td>DSI</td><td>Ponemah ACQ-16</td><td></td></tr></tbody></table>

mess druck volumen loops in der maus

Measuring Pressure Volume Loops in the Mouse

die Ursachen und den Verlauf von Herzerkrankungen zu verstehen, stellt eine erhebliche Herausforderung für die biomedizinische Gemeinschaft. Die genetische Flexibilität der Maus bietet ein großes Potenzial Herzfunktion auf molekularer Ebene zu erforschen. Die Maus geringe Größe hat, um die Durchführung detaillierter kardiale Phänotypisierung einige Herausforderungen in Bezug präsentieren. Die Miniaturisierung und andere Fortschritte in der Technologie haben viele Methoden der Herz Beurteilung möglich, in der Maus. Davon stellt die simultane Erfassung von Druck und Volumendaten ein detailliertes Bild der Herzfunktion, die nicht durch eine andere Modalität ist. Hier ein detailliertes Verfahren für die Erfassung von Druck-Volumen-Schleifendaten beschrieben. Eingeschlossen ist eine Diskussion über die Prinzipien, die Messungen und die möglichen Fehlerquellen zugrunde liegen. Betäubungsmittel-Management und chirurgische Ansätze werden ausführlich diskutiert, da sie beide entscheidend für die Erzielung hoher Qualität hämodynamische Messung sinds. Die Grundsätze der hämodynamischen Protokollentwicklung und relevante Aspekte der Datenanalyse werden ebenfalls angesprochen.

Per Konvention Volumen ist auf der X-Achse und der Druck auf der Y-Achse aufgetragen , wie in 1. Die Druck-Volumen - Schleifen aus Plotten Druck gegen Volumen ein Rechteck ähneln sollen, die vertikalen Kanten darstellt isovolumetrischen Druckänderungen (dh wenn beide Mitral- und Aortenklappen sind geschlossen). Die untere horizontale repräsentiert durch die Mitralklappe und dem oberen horizontalen Abschnitt darstellt ventrikulären Entleerung durch die Aortenklap...

Diese Handschrift beschreibt ein detailliertes Protokoll für die Erfassung von Druck-Volumen-Daten von der Maus.

Mess Druck Volumen Loops in der Maus

Understanding the causes and progression of heart disease presents a significant challenge to the biomedical community. The genetic flexibility of the ...

Das übergeordnete Ziel der Messung von Druck-Volumen-Kurven bei der Maus besteht darin, eine detaillierte Beurteilung der Herzfunktion zu erhalten. Diese Methode eignet sich zur physiologischen Charakterisierung von Mäusen mit spezifischen genetischen Modifikationen, wodurch wiederum Erkenntnisse über die Rolle bestimmter Proteine in der Herzfunktion gewonnen werden können. Der Hauptvorteil dieser Technik liegt darin, dass sie eine detaillierte Beurteilung der kontraktilen Funktion ermöglicht, die mit anderen Methoden nicht verfügbar ist.Nachdem die Maus für die Operation vorbereitet wurde, beginnen Sie mit einem Schnitt am Sternumansatz, der sich von etwa fünf Millimetern rechts der Mittellinie bis etwa fünf Millimetern links der Mittellinie erstreckt. Führen Sie einen zweiten Schnitt entlang der rechten Kante des ersten Schnitts in rostraler Richtung bis etwa zwei Millimeter unterhalb der Unterkante des Unterkiefers. Anschließend führen Sie einen dritten Schnitt von der rostralen Endstelle des zweiten Schnitts bis etwa fünf Millimeter rechts der Mittellinie aus.Und ziehen Sie die resultierende Hautlappen nach rechts, um die darunterliegenden Gewebe freizulegen. Als Nächstes dissezieren Sie unter einem Stereomikroskop die parotideale und submandibuläre Speicheldrüse in der Mittellinie, um die darunterliegende Muskulatur, die die Trachea überzieht, freizulegen. Trennen Sie dann die rechte und linke Muskel des Sternohyoideus stumpf voneinander ab.Wenn die Luftröhre sichtbar ist, führen Sie ein zehn Zentimeter langes Stück Dreier-Null-Seidennadel unter das Halsgewebe ein, wobei darauf geachtet werden muss, die Speiseröhre nicht mit einzubeziehen. Machen Sie mit einer 20-Gauge-Nadel einen weiten Schnitt in die Lücke direkt kaudal zur Larynx, vor dem ersten Trachealring. Entfernen Sie dann unverzüglich die Anästhesiemaske vom Tier und führen Sie das Endotrachealtubus vorsichtig in die Luftröhre ein.Nachdem der Schlauch befestigt wurde, verlängern Sie den linken Rand des ursprünglichen Hautschnitts bis zum Processus xiphoideus und über die Mittellinie hinweg etwa 1,5 cm rechts der Mittellinie. Verwenden Sie anschließend die stumpfe Dissektion, um die Hautklappe lateral zurückzuziehen, wodurch die darunterliegende Muskulatur freigelegt wird. Isolieren Sie mit Dilatationsklemmen für Gefäße die Ansatzstelle des Musculus pectoralis major auf der rechten Seite in der Nähe des kaudalen Bereichs des Sternums.Die Muskulatur kauterisieren und durchtrennen. Anschließend das Musculus pectoralis major entlang seiner Ansatzstelle am Sternum durchschneiden. Danach den Musculus latissimus dorsi auf derselben Seite unterminieren.Ziehen Sie das Schnittende kranialwärts, um die Rippen freizulegen. Benutzen Sie dann ein Paar scharfe Pinzetten, um vorsichtig durch die Interkostalmuskelschichten zu dissezieren und so in den Brustkorb einzudringen. Sobald der Pleuraraum geöffnet wurde, führen Sie vorsichtig die stumpfen Gefäßdilatatoren ein und heben die Brustwand mit sanfter Aufwärtskraft an. Schneiden Sie nun lateral entlang der Interkostalmuskulatur, wobei darauf geachtet werden muss, den Lungenlappen nicht zu verletzen, und verlängern Sie den Schnitt medial, wobei Sie drei bis vier Millimeter lateral der Mittellinie bleiben, um die parallele zum Sternum verlaufende Arteria mammaria interna zu schonen. Führen Sie dann einen mit Salzlösung getränkten kleinen Wattestäbchenapplikator durch den Schnitt in Richtung Mittellinie ein und üben Sie sanften Zug nach oben aus, um die Brustwand von den darunterliegenden Strukturen abzuheben. Verwenden Sie vorsichtig ein Elektrokauter, um durch die Brustwand zu schneiden, beginnend am medialen Rand des Schnittes und endend etwa einen Zentimeter lateral der Mittellinie auf der linken Seite.Nachdem das Gewebe gründlich kauterisiert wurde, schneiden Sie vorsichtig mit einer Schere durch das Sternum. Die Herzspitze sollte deutlich sichtbar sein. Durch stumpfe Dissektion wird dann das Perikard gelöst und die Vena cava caudalis identifiziert.Um den Jugularvenenkatheter zu legen, positionieren Sie einen mit einer Spritze, die zehnprozentiges Albumin enthält, verbundenen 30-Gauge-Katheter so, dass die Nadel von selbst auf der Jugularvene aufliegt, mit der Schräge nach oben. Um die Jugularvene sichtbar zu machen, halten Sie die Nadel mit einer Pinzette in der einen Hand und ziehen mit einer Gewebepinzette in der anderen Hand die Speicheldrüse zurück. Üben Sie sanften Zug auf das umgebende Gewebe der dorsalen Jugularvene aus, um Spannung an der Gefäßwand zu erzeugen.Dann führen Sie die Nadel vorsichtig unter flachem Winkel in die Vene ein und schieben die Spitze drei bis vier Millimeter in das Gefäß hinein. Sobald der Katheter positioniert ist, befestigen Sie die Nadel mit chirurgischem Kleber an den darunterliegenden Speicheldrüsen und beginnen Sie mit der Infusion der Albuminlösung. Um den Druck-Volumen-Katheter zu platzieren, stellen Sie zunächst eine Spritze mit equilibrierter Kochsalzlösung und dem Druck-Volumen-Katheter neben die Maus, wobei die Katheterspitze in etwa auf gleicher Höhe wie das Herz liegt, und nullen Sie die Druckanzeige.Als Nächstes wird mit einem kleinen, mit Kochsalzlösung getränkten Wattestäbchen das Herz so positioniert, dass die Herzspitze (Apex) gut sichtbar ist. Anschließend führen Sie mit einer 25-Gauge-Nadel einen Stich möglichst nahe am Zentrum der Herzspitze durch. Unmittelbar nach dem Herausziehen der Nadel wird der Katheter vorsichtig, aber zügig durch die Inzision eingeführt. Danach können die Druck-Volumen-Kurven des Ventrikels gemessen werden.Nach der Platzierung des Katheters die Anästhesie reduzieren, um die kardial depressiven Effekte sichtbar zu machen, die die Anästhesie möglicherweise verursacht. Falls während des Eingriffs ein übermäßiger Blutverlust aufgetreten ist, kann einfach das Volumen des infundierten Albumins erhöht werden. Üblicherweise wird das Volumen auf der X-Achse und der Druck auf der Y-Achse abgetragen.Druck-Volumen-Kurven, die durch Auftragen des Drucks gegen das Volumen entstehen, sollten einem Rechteck ähneln, wobei die vertikalen Kanten die isovolumetrischen Druckänderungen darstellen. Die untere horizontale Seite stellt die ventrikuläre Füllung über die Mitralklappe dar und die obere horizontale Seite die ventrikuläre Entleerung über die Aortenklappe. Bei einer gesunden Wildtyp-Maus werden linksventrikuläre Druckwerte von 90 bis 110 Millimeter Quecksilbersäule erwartet, zusammen mit einer maximalen Rate des maximalen Druckanstiegs (dp/dt) von 8000 bis 12000 Millimeter Quecksilbersäule pro Sekunde.Weiterhin ist eine der häufigsten Messartefakte, die die Analyse von Druck-Volumen-Daten erschweren können, die Katheterfixierung, die sich als Druckspitze am Ende der Systole manifestiert und wahrscheinlich auf die direkte Kompression des Drucksensors durch einen Papillarmuskel oder eine andere dynamische Struktur im Ventrikel zurückzuführen ist. Während dieses Verfahrens ist es wichtig, kontinuierlich die Maus zu überwachen, um eine ausreichende Anästhesietiefe sicherzustellen. Sobald die Technik beherrscht ist, kann sie je nach verwendeten Protokoll nach der Katheterplatzierung in etwa einer Stunde abgeschlossen werden.Nach Abschluss dieses Verfahrens können Infusionen experimenteller Substanzen verwendet werden, um deren Auswirkungen auf die Herzfunktion zu bewerten. Nach dem Anschauen dieses Videos sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie man einen Druck-Volumen-Katheter im linken Ventrikel der Maus chirurgisch platziert und hochwertige Druck-Volumen-Kurven für die kardiale Analyse erhält.

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Research

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JoVE Journal

Biology

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