Name: Aufnahme Maus Ultraschall Vocalizations soziale Kommunikation zur Bewertung (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-06-05T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 28 s
Description: Lernen Sie die Aufnahme und Analyse ultraschallbasierter Vokalisationen bei Mäusen zur Untersuchung genetischer Einflüsse auf soziale Kommunikation. Diese standardisierte Methode ermöglicht reproduzierbare Studien zu neurologischen Störungen.

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Diese Arbeit wurde unterstützt von der Fondation de France; von der ANR FLEXNEURIM [ANR09BLAN034003]; von der ANR [ANR- 08-MNPS-037-01-SynGen]; von Neuron-ERANET (EUHF-AUTISM); von der Fondation Orange; von der Fondation FondaMentale; von der Fondation de France; von der Fondation Bettencourt-Schueller. Die Forschung, die zu diesem Artikel geführt hat, wurde auch vom Gemeinsamen Unternehmen Innovative Medizin Initiative im Rahmen der Finanzhilfevereinbarung Nr. 115300 unterstützt, deren Mittel sich aus einem finanziellen Beitrag aus dem Siebten Rahmenprogramm der Europäischen Union (RP7/2007-2013) und einem Sachbeitrag von EFPIA-Unternehmen zusammensetzen. Wir danken Julie Lévi-Strauss für hilfreiche Kommentare zum Manuskript und sechs anonymen Gutachtern, die mit ihren Kommentaren das Manuskript spürbar verbessert haben.

<ol><li>American Psychiatric Association. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Diagnostic+and+Statistical+Manual+of+Mental+Disorders%2C%0A++Fifth+Edition+%28DSM-V%29%22">Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders,
 Fifth Edition (DSM-V)</a>. , (2013).</li>
<li>Ey, E., Leblond, C. S., Bourgeron, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+Profiles+of+Mouse+Models+for+Autism+Spectrum+Disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Autism+Res%22%5BJournal%5D)">Behavioral Profiles of Mouse Models for Autism Spectrum Disorders.</a> Autism Res. 4 (1), 5-16 (2011).</li>
<li>Bourgeron, T., Jamain, S., Granon, S. Animal Models of Autism - Proposed Behavioral Paradigms and Biological Studies. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBourgeron%2C+T+%22Contemporary+Clinical+Neuroscience%3A+Transgenic+and+Knockout+Models+of+Neuropsychiatric+Disorders%22">Contemporary Clinical Neuroscience: Transgenic and Knockout Models of Neuropsychiatric Disorders</a>. , 151-174 (2006).</li>
<li>Scattoni, M. L., Crawley, J., Ricceri, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+vocalizations%3A+A+tool+for+behavioural+phenotyping+of+mouse+models+of+neurodevelopmental+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Biobehav.+Rev%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic vocalizations: A tool for behavioural phenotyping of mouse models of neurodevelopmental disorders.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 33 (4), 508-515 (2009).</li>
<li>Portfors, C. V., Perkel, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+ultrasonic+vocalizations+in+mouse+communication%5BTitle%5D)+AND+%22Cur.+Opin.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">The role of ultrasonic vocalizations in mouse communication.</a> Cur. Opin. Neurobiol. 28, 115-120 (2014).</li>
<li>Arriaga, G., Zhou, E. P., Jarvis, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Of+mice%2C+birds%2C+and+men%3A+the+mouse+ultrasonic+song+system+has+some+features+similar+to+humans+and+song-learning+birds%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+ONE%22%5BJournal%5D)">Of mice, birds, and men: the mouse ultrasonic song system has some features similar to humans and song-learning birds.</a> PLOS ONE. 7, e46610(2012).</li>
<li>Hammerschmidt, K., Schreiweis, C., Minge, C., Pääbo, S., Fischer, J., Enard, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+humanized+version+of+Foxp2+does+not+affect+ultrasonic+vocalization+in+adult+mice%3A+Ultrasonic+vocalization+of+%26%2334%3Bhumanized%26%2334%3B+FoxP2+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">A humanized version of Foxp2 does not affect ultrasonic vocalization in adult mice: Ultrasonic vocalization of &#34;humanized&#34; FoxP2 mice.</a> Genes Brain Behav. , (2015).</li>
<li>Portfors, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Types+and+functions+of+ultrasonic+vocalizations+in+laboratory+rats+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Assoc.+Lab.+Anim.+Sci%22%5BJournal%5D)">Types and functions of ultrasonic vocalizations in laboratory rats and mice.</a> J. Am. Assoc. Lab. Anim. Sci. 46, 28-34 (2007).</li>
<li>Panksepp, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Affiliative+Behavior%2C+Ultrasonic+Communication+and+Social+Reward+Are+Influenced+by+Genetic+Variation+in+Adolescent+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+ONE%22%5BJournal%5D)">Affiliative Behavior, Ultrasonic Communication and Social Reward Are Influenced by Genetic Variation in Adolescent Mice.</a> PLOS ONE. 2, (2007).</li>
<li>Zippelius, H. -M., Schleidt, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultraschall-Laute+bei+jungen+M%C3%A4usen%5BTitle%5D)+AND+%22Naturwissenschaften%22%5BJournal%5D)">Ultraschall-Laute bei jungen Mäusen.</a> Naturwissenschaften. 43, 502(1956).</li>
<li>Whitney, G., Coble, J. R., Stockton, M. D., Tilson, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+emissions%3A+do+they+facilitate+courtship+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol.+Psychol%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic emissions: do they facilitate courtship of mice.</a> J. Comp. Physiol. Psychol. 84, 445-452 (1973).</li>
<li>Holy, T. E., Guo, Z. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+songs+of+male+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+Biol%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic songs of male mice.</a> PLOS Biol. 3, 2177-2186 (2005).</li>
<li>Maggio, J. C., Whitney, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+vocalizing+by+adult+female+mice+%28Mus+musculus%29%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Psychol%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic vocalizing by adult female mice (Mus musculus).</a> J. Comp. Psychol. 99, 420-436 (1985).</li>
<li>Chabout, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adult+Male+Mice+Emit+Context-Specific+Ultrasonic+Vocalizations+That+Are+Modulated+by+Prior+Isolation+or+Group+Rearing+Environment%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+ONE%22%5BJournal%5D)">Adult Male Mice Emit Context-Specific Ultrasonic Vocalizations That Are Modulated by Prior Isolation or Group Rearing Environment.</a> PLOS ONE. 7 (1), e29401(2012).</li>
<li>Hammerschmidt, K., Radyushkin, K., Ehrenreich, H., Fischer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+mice+respond+to+male+ultrasonic+%22songs%22+with+approach+behaviour%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Lett%22%5BJournal%5D)">Female mice respond to male ultrasonic "songs" with approach behaviour.</a> Biol. Lett. 5, 589-592 (2009).</li>
<li>Wöhr, M., Moles, A., Schwarting, R. K. W., D'Amato, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lack+of+social+exploratory+activation+in+male+-opioid+receptor+KO+mice+in+response+to+playback+of+female+ultrasonic+vocalizations%5BTitle%5D)+AND+%22Soc.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Lack of social exploratory activation in male -opioid receptor KO mice in response to playback of female ultrasonic vocalizations.</a> Soc. Neurosci. 6, 76-87 (2011).</li>
<li>Granon, S., Faure, P., Changeux, J. -P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Executive+and+social+behaviors+under+nicotinic+receptor+regulation%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Nat.+Acad.+Sci%22%5BJournal%5D)">Executive and social behaviors under nicotinic receptor regulation.</a> Proc. Nat. Acad. Sci. 100 (16), 9596-9601 (2003).</li>
<li>Schmeisser, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autistic-like+behaviours+and+hyperactivity+in+mice+lacking+ProSAP1%2FShank2%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Autistic-like behaviours and hyperactivity in mice lacking ProSAP1/Shank2.</a> Nature. 486 (7402), 256-260 (2012).</li>
<li>Ey, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Absence+of+Deficits+in+Social+Behaviors+and+Ultrasonic+Vocalizations+in+Later+Generations+of+Mice+Lacking+Neuroligin4%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">Absence of Deficits in Social Behaviors and Ultrasonic Vocalizations in Later Generations of Mice Lacking Neuroligin4.</a> Genes Brain Behav. 11, 928-941 (2012).</li>
<li>Chadman, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimal+Aberrant+Behavioral+Phenotypes+of+Neuroligin-3+R451C+Knockin+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Autism+Res%22%5BJournal%5D)">Minimal Aberrant Behavioral Phenotypes of Neuroligin-3 R451C Knockin Mice.</a> Autism Res. 1, 147-158 (2008).</li>
<li>Scattoni, M. L., Gandhy, S. U., Ricceri, L., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unusual+Repertoire+of+Vocalizations+in+the+BTBR+T+plus+tf%2FJ+Mouse+Model+of+Autism%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+ONE%22%5BJournal%5D)">Unusual Repertoire of Vocalizations in the BTBR T plus tf/J Mouse Model of Autism.</a> PLOS ONE. 3, (2008).</li>
<li>De Chaumont, F., Coura, R. D. -S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Computerized+video+analysis+of+social+interactions+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Methods%22%5BJournal%5D)">Computerized video analysis of social interactions in mice.</a> Nat. Methods. 9, 410-417 (2012).</li>
<li>Leblond, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+and+Functional+Analyses+of+SHANK2+Mutations+Suggest+a+Multiple+Hit+Model+of+Autism+Spectrum+Disorders%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+Genet%22%5BJournal%5D)">Genetic and Functional Analyses of SHANK2 Mutations Suggest a Multiple Hit Model of Autism Spectrum Disorders.</a> PLOS Genet. 8 (2), e1002521(2012).</li>
<li>Berkel, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mutations+in+the+SHANK2+synaptic+scaffolding+gene+in+autism+spectrum+disorder+and+mental+retardation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Genet%22%5BJournal%5D)">Mutations in the SHANK2 synaptic scaffolding gene in autism spectrum disorder and mental retardation.</a> Nat. Genet. 42, 489-491 (2010).</li>
<li>Pinto, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+impact+of+global+rare+copy+number+variation+in+autism+spectrum+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Functional impact of global rare copy number variation in autism spectrum disorders.</a> Nature. 466, 368-372 (2010).</li>
<li>Ey, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+autism+ProSAP1%2FShank2+mouse+model+displays+quantitative+and+structural+abnormalities+in+ultrasonic+vocalisations%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">The autism ProSAP1/Shank2 mouse model displays quantitative and structural abnormalities in ultrasonic vocalisations.</a> Behav. Brain Res. 256, 677-689 (2013).</li>
<li>Scattoni, M. L., Ricceri, L., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unusual+repertoire+of+vocalizations+in+adult+BTBR+T+plus+tf%2FJ+mice+during+three+types+of+social+encounters%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">Unusual repertoire of vocalizations in adult BTBR T plus tf/J mice during three types of social encounters.</a> Genes Brain Behav. 10, 44-56 (2010).</li>
<li>Zorrilla, E. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiparous+species+present+problems+%28and+possibilities%29+to+developmentalists%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">Multiparous species present problems (and possibilities) to developmentalists.</a> Dev. Psychobiol. 30 (2), 141-150 (1997).</li>
<li>Lazic, S. E., Essioux, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+basic+and+translational+science+by+accounting+for+litter-to-litter+variation+in+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Improving basic and translational science by accounting for litter-to-litter variation in animal models.</a> BMC Neurosci. 14 (1), 37(2013).</li>
<li>Hoffmann, F., Musolf, K., Penn, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Freezing+urine+reduces+its+efficacy+for+eliciting+ultrasonic+vocalizations+from+male+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Behav%22%5BJournal%5D)">Freezing urine reduces its efficacy for eliciting ultrasonic vocalizations from male mice.</a> Physiol. Behav. 96, 602-605 (2009).</li>
<li>Neunuebel, J. P., Taylor, A. L., Arthur, B. J., Egnor, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+mice+ultrasonically+interact+with+males+during+courtship+displays%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Female mice ultrasonically interact with males during courtship displays.</a> eLife. 4, (2015).</li>
<li>Burkett, Z. D., Day, N. F., Peñagarikano, O., Geschwind, D. H., White, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VoICE%3A+A+semi-automated+pipeline+for+standardizing+vocal+analysis+across+models%5BTitle%5D)+AND+%22Sci.+Rep%22%5BJournal%5D)">VoICE: A semi-automated pipeline for standardizing vocal analysis across models.</a> Sci. Rep. 5, 10237(2015).</li>
<li>Weissgerber, T. L., Milic, N. M., Winham, S. J., Garovic, V. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beyond+Bar+and+Line+Graphs%3A+Time+for+a+New+Data+Presentation+Paradigm%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+Biol%22%5BJournal%5D)">Beyond Bar and Line Graphs: Time for a New Data Presentation Paradigm.</a> PLOS Biol. 13 (4), e1002128(2015).</li>
<li>Jamain, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduced+social+interaction+and+ultrasonic+communication+in+a+mouse+model+of+monogenic+heritable+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Nat.+Acad.+Sci.+U.+S.+A%22%5BJournal%5D)">Reduced social interaction and ultrasonic communication in a mouse model of monogenic heritable autism.</a> Proc. Nat. Acad. Sci. U. S. A. 105, 1710-1715 (2008).</li>
<li>Won, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autistic-like+social+behaviour+in+Shank2-mutant+mice+improved+by+restoring+NMDA+receptor+function%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Autistic-like social behaviour in Shank2-mutant mice improved by restoring NMDA receptor function.</a> Nature. 486, 261-265 (2012).</li>
<li>Ferhat, A. -T., Le Sourd, A. -M., de Chaumont, F., Olivo-Marin, J. -C., Bourgeron, T., Ey, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+Communication+in+Mice+-+Are+There+Optimal+Cage+Conditions%3F%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+ONE%22%5BJournal%5D)">Social Communication in Mice - Are There Optimal Cage Conditions?</a> PLOS ONE. 10 (3), e0121802(2015).</li>
</ol>

Die Autoren haben nichts offenzulegen.

Das Protokoll hier vorgestellten bietet standardisierte und zuverlässige Art und Weise Maus Ultraschall-Laute im Labor zu sammeln. Diese sehr eingeschränkten Situationen haben den Vorteil der Standardisierung. Sie werden mit Erfolg verwendet , um Stämme oder Genotypen innerhalb Stämme 18,19,26,27 zu vergleichen. Wie in den repräsentativen Ergebnissen dargestellt, ermöglichen diese Verfahren die Identifizierung von atypischen sozialen Kommunikation in Mäusen für SHANK2 mutiert, ein Gen mit Autismus - Spektrum - Störungen in Verbindung gebracht. Vergleiche zwischen den Mausstämmen, zwischen unterschiedlichen Kontexten oder sogar zwischen verschiedenen Labors wird durch die Verfügbarkeit von größeren Datenmengen auf der mouseTube Datenbank ausgelöst werden. Dieses Tool sollte steigern Studien über Maus Ultraschall-vocalizations durch multivariate Analysen ermöglicht. Die Protokolle werden hier beschrieben optimiert Mäuse verschiedener Genotypen innerhalb einer Belastung zu testen, da es in der Mehrzahl der Studien durchgeführt wird, um die genetische c ModellierungEITRAG zu neuropsychiatrischen Störungen. Es wird empfohlen, experimentell jede Studie zu entwerfen, um die besten Kontrollen möglich zu haben. Tatsächlich Wurf Effekte könnten Maske oder künstlich genetische Effekte 28,29 aufzublasen. Es ist daher ratsam, littermate Kontrollen für jeden Genotyp aufzunehmen. Zucht heterozygote Eltern sollten daher bevorzugt werden, da sie die korrekte Abstimmung von mutanten und Kontrollmäuse innerhalb eines Wurfes zu ermöglichen. Dies rechtfertigt die Pfote Tätowierung aller Welpen Kennzeichnung (geblendet Genotyp) Personen alle zwei Tage während der Aufnahmen zu verfolgen. Genotypisierung wird bei der Entwöhnung getan, um Proben Schwanz nehmen. Wenn pup Isolation Anrufe von P2 Aufnahme auf, würden wir nicht empfehlen Proben bereits bei Welpen Schwanz nehmen, da dieser Vorgang ergänzende Manipulation und Stress sehr zeitnah zu einer Aufnahme-Session enthält. Die Protokolle hier vorgeschlagen, um Ultraschall-Laute bei Erwachsenen entlocken ist eine eindeutige Identifizierung des EWI nicht zulassen,tter der vocalizations. Dies erklärt, warum wir die Motivation des Versuchstieres zu manipulieren. Tatsächlich sind die Testmäuse isoliert und nicht der Neuling und die Versuchstiere für eine lange Zeit auf den Testkäfig während gleichgeschlechtlichen Wechselwirkungen gewöhnen. Bei männlichen-weiblichen Wechselwirkungen ist die eingeführte Weibchen nicht isoliert, und der Test männlichen gewöhnt für kürzere Zeit, da die Motivation in diesem sexuellen Kontext höher sein könnte. Diese Manipulationen Motivations sollte die Wahrscheinlichkeit der Testmaus maximieren die vocalizations emittierenden und nicht die eingeführte ein. Männlichen Ultraschall vocalizations in einem sexuellen Kontext, eine einfache Wattestäbchen mit frischen (dh nicht gefroren) Urin eines Brunst weiblichen aufzeichnen kann auch in den Käfig 30 eingeführt werden. Dieses Verfahren erlaubt die Zuordnung von Ultraschall-vocalizations zum Test männlich mit 100% iger Sicherheit, aber es verhindert, dass bestimmte Informationen über den aktuellen sozialen Kontext der Emission dieser vocalizations zu sammeln. Daher bevorzugen wir die Protocol beschrieben hier (mit einem frei beweglichen Brunst weiblich). Wir empfehlen auch immer aus dem gleichen Stamm eingeführt Mäuse zu verwenden, wenn Mäuse aus einem mutierten Stamm zu testen und Vokalisierung, die Daten als ein Paar von Mäusen zu analysieren. Eine kürzlich durchgeführte Studie fördert die Verwendung von Triangulation den Emitter 31 zu lokalisieren. In dieser Studie wurden Frauen fanden auch Ultraschall vocalizations während Begegnungen mit einem männlichen emittieren. Dies könnte durch die Tatsache erklärt werden, dass sie für mindestens zwei Wochen vor der Aufnahme-Session isoliert. Die Verallgemeinerung der Verwendung der Triangulation in dieser Studie vorgeschlagen, sollten jedoch die Identifizierung des Emitters des vocalizations in den meisten Fällen ermöglichen, wenn Videoaufnahmen korrekt synchronisiert sind. Die Isolation Anrufe von Welpen während der Entwicklung aufgezeichnet werden nicht durch Hintergrundgeräusche vom Bettzeug gestört. Üblicherweise wird eine automatische Analyse funktioniert sehr gut die wichtigsten Variablen zu extrahieren. Im Gegensatz dazu von den Erwachsenen aufgenommen vocalizations sind disturbed durch Hintergrundrauschen von den Tieren in den Betten zu bewegen. Automatische Analyse scheitern könnte, und deshalb sollten manuelle Analyse verwendet werden. Dennoch sollten die Bedingungen in den Testkäfig Betten Zugabe liefern, die weniger belastend sind für die Tiere als nackten Boden (die Mäuse nicht gefällt). Weitere Anstrengungen in der Gemeinschaft sind auf die Verbesserung der automatischen Erkennung von Ultraschall vocalizations unter verschiedenen Bedingungen konzentriert, auch die impliziert Hintergrundgeräusche. Zum Beispiel erlaubt die Voice - Software vocalizations zu analysieren, die für das Fehlen von Hintergrundrauschen 32 manuell ausgewählt worden waren. In dieser Software ist die Extraktion der akustischen Variablen automatisch, sondern muss die anfängliche manuelle Auswahl. Es sollte beachtet werden, dass die interindividuelle Variabilität in der Stimmverhalten von Mäusen sehr wichtig ist. Zum Beispiel wird die Anrufrate der erwachsenen Männer in Anwesenheit eines Brunst weiblichen sehr verteilt (Abbildung 1). Wir suggest diese standardisierte Protokolle zu Ultraschall-vocalizations entlocken bereits die Variabilität der experimentellen Kontext mit Bezug zu begrenzen. Dennoch möchten wir auf die Bedeutung hinweisen, der nicht nur den Mittelwert und SEM für die Daten zu liefern , aber am wichtigsten ist, die einzelnen Punkte in Proben von geringer Größe 33. Es ist auch sehr wichtig - wenn nicht notwendig - mindestens 12 Individuen jeder Gruppe / Genotyp aufzuzeichnen repräsentative Daten zu sammeln. In vielen Fällen sollte die interindividuelle Variabilität nicht ausgeblendet werden (in der Regel es nicht sein kann), und es könnte von großer Bedeutung sein, Personen zu identifizieren, die genetische Mutation untersucht tragen aber keine atypischen Phänotyp anzeigt. Solche Personen könnten Hinweise über Kompensationen schaffen, die neue Wege für Therapien von genetischen Störungen öffnen könnten. In den meisten Verhaltens Charakterisierungen von Mausmodellen für neuropsychiatrische Störungen, Stimmverhalten und die sozialen Kontakte sind berücksichtigened auseinander (zB 19,27,34,35). Recent Analyseverfahren bieten nun eine halbautomatische detaillierte Charakterisierung der gesellschaftlichen Ereignissen und Ereignisfolgen während einer Interaktion (mit MiceProfiler zum Beispiel) 36, sowie die Möglichkeit , diese Analyse mit Daten von Audioaufzeichnungen zu kombinieren. Der Hauptvorteil dieser Methode ist es, einen umfassenden Überblick über die soziale Kommunikation in Mausmodellen von ASD zu schaffen, genauer zu erkennen, welche Aspekte der sozialen Kommunikation betroffen sind. Im vorliegenden Protokoll ist die Synchronisation noch manuell, aber dies kann durch die Auslösung der Videoaufzeichnung durch die Audio-Recording-Software verbessert werden. Diese Art von Analysen sollten zum Standard eine umfassendere Sicht der sozialen Kommunikation Defizite in Mausmodellen von neuropsychiatrischen Störungen zur Verfügung zu stellen. Zusätzlich Bisher werden Vokalsignale meist von der Emitterseite analysiert (dh sind Tests gebaut , um die Emission von vo zu bevorzugencal Signale, die von dem getesteten Maus, wie in den vorliegenden Protokolle). Der Schwerpunkt sollte nun auch auf dem Empfänger dieser Signale gesetzt werden, um besser auf die Funktionen dieser akustischen Signale zu identifizieren. Dies sollte durch die Auswertung auch das Verhalten der neuen Ecken Mäuse in den vorliegenden Protokolle bei Erwachsenen (mit MiceProfiler zum Beispiel) 36, unter Verwendung von Wiedergabeexperimente 16 oder durch die Einrichtung von neuen Protokollen erfolgen. Tatsächlich stellen die vorliegenden Protokolle sehr eingeschränkten Situationen, die nicht die genauen ethologischen Bedingungen der Stimmgebung Emission bei Mäusen, beeinträchtigen könnten. Die spontane Emission von Ultraschall vocalizations werden müssen besser charakterisierte unter Verwendung einer kontinuierlichen Audio- und Videoaufnahmen, um mehr Licht auf die spontane Gesangsverhalten von Mäusen zu vergießen.

Patienten mit neuropsychiatrischen Erkrankungen zeigen in der Regel Defizite in der sozialen Kommunikation (zB Patienten mit Autismus - Spektrum - Störungen, Schizophrenie oder Alzheimer - Krankheit) 1. Gentechnisch veränderte Mäuse mehr und häufiger verwendet , um genetische Ursachen dieser Erkrankungen 2 modellieren. Das Studium der sozialen Kommunikation in diesen Mausmodellen ist von großem Interesse für die Mechanismen der genetischen Mutationen zu verstehen, zu atypischen sozialen Dysfunktionen führen und für neue Therapien zu testen. Da Mäuse sind soziale Tiere und die Kommunikation mit der jeweils anderen mit Geruchs-, Tast-, optische und akustische Signale, sie sind geeignete Modelle der sozialen Kommunikation zu bewerten. Maus Ultraschall-vocalizations sind jetzt aktuell als Proxy verwendet für die Modellierung der genetischen Grundlagen der Sprachkommunikation Defizite 3,4 (aber die Existenz der Spracherwerb in dieser Art noch 5,6 diskutiert wird, auch wenn die meisten neueren Studien ARGUe für das Fehlen von Spracherwerb 7). Labormäuse wurden Ultraschall vocalizations in Mutter-Kind - Beziehungen, in männlich-weiblichen sozio sexuellen Interaktionen zu emittieren gefunden, die in gleichgeschlechtlichen sozialen Interaktionen ( zusammengefasst in Bezug auf 8) und in Jugend-Jugend sozialen Interaktionen 9. Maus Welpen emittieren Isolation Anrufe während ihrer ersten beiden Lebenswochen , wenn sie von Damm und littermates isoliert 10. Männer emittieren Ultraschall-Laute , wenn sie in Gegenwart einer Brunst weiblichen (oder Harn-Signale von ihr) 11,12. Männchen und Weibchen emittieren Ultraschall-Stimmgebung , wenn sie mit einem unbekannten Artgenossen des gleichen Geschlechts 13,14 interagieren. Die Organisation und die Funktionen dieser vocalizations sind nicht ganz klar und brauchen weitere Untersuchungen. Das derzeitige Wissen über die funktionalen Aspekt wird in Mütter hören pup Isolation Anrufe, die Erleichterung der Nähe von erwachsenen Weibchen zu erwachsenen männlichen vocalizat zum Hervorrufen des Abrufs Verhalten begrenztIonen 15 und die erhöhte Explorationsverhalten von erwachsenen Männern zu hören erwachsenen weiblichen vocalizations 16. Charakterisierung der Anomalien in Sprachkommunikation in Mausmodellen von neuropsychiatrischen Erkrankungen sollten unter standardisierten Bedingungen durchgeführt werden, wichtigen Beitrag der experimentellen Bedingungen auszuschließen. Eine solche Charakterisierungen, mit der Bewertung der gleichzeitigen sozialen Interaktionen und neurobiologische Studien kombiniert, in verschiedenen genetischen Modelle sollten unser Wissen über die genetischen Beitrag zu den verschiedenen Aspekten der Maus Ultraschall-Kommunikation zu verbessern. Über eine lange Sicht sollte sie weiter Licht geben auf einige neurobiologischen Grundlagen der sozialen Kommunikation in den Menschen. Unser Ziel ist derzeit auf einfache Protokolle Bereitstellung zuverlässiger Ultraschall vocalizations während der Entwicklung auslösen und im Erwachsenenalter für männliche und weibliche Mäuse im Labor. Solche Protokolle sollten die Standardisierung von Aufnahmen erleichtern ultr noch zuverlässiger vergleichenAsonic Stimmgebung Emissionen zwischen Stämmen und Labors. Es sollte auch die Einrichtung solcher Aufnahmen im Labor erleichtern keine vorherige Erfahrung mit der Maus Ultraschall vocalizations Aufnahmen mit. Wir heben auch die aktuelle Möglichkeit Ultraschall vocalizations Daten zu kombinieren mit detaillierten Verhaltensdaten gleichzeitig in erwachsenen Mäusen während der sozialen Interaktionen gesammelt, entscheidende Informationen über sozialen Beeinträchtigungen zu erhalten sowie über den Kontext der Emission von Ultraschall vocalizations. Solche Analysen werden ein neues Licht auf die Organisation und die Funktionen der Maus Ultraschall vocalizations vergießen. Schließlich werben wir auch die Möglichkeit , mit der ganzen wissenschaftlichen Gemeinschaft auf der mouseTube Datenbank Ultraschall-Stimmgebung Aufnahmen zu teilen (http://mousetube.pasteur.fr). Offener Zugang zu Audio-Aufzeichnung von Daten sollten Kenntnisse über Maus Ultraschallkommunikation steigern, indem die Wissenschaftler ihre eigenen Daten mit Ultraschall-Laute in anderen Labo aufgezeichnet zu vergleichenrien (mit ähnlichen oder unterschiedlichen Stämmen / Protokolle), und / oder deren Analysemethoden herauszufordern Dateien mit unter verschiedenen Bedingungen aufgezeichnet.

<table><tbody><tr><td>Nadeln 0,3 mm x 13 mm [30&nbsp; G 1/2"]</td><td>BD Microlance</td><td>304000-grüne</td><td></td></tr> <tr><td>Tattoo-Paste</td><td>Ketchum Manufacturing Inc., Ottawa, Kanada</td><td>329AA-Thermometer</td><td></td></tr> <tr><td></td><td>Fisherbrand, Waltham, USA</td><td>4126 (W255NA)</td><td>-</td></tr><tr><td>selbstgebaute Schallschutzkammer (Welpen)</td><td>Institut Pasteur,</td> <td>Paris-Akustikschaum</td> <td>+ Plexiglas; Innenmaße (B x H x T): 32 cm x 33 cm x 32 cm</td></tr><tr><td>Thermister für kleine Oberflächen + Thermoelement mit einer Sonde</td><td>Harvard Apparatus</td><td>599814 + 601956</td><td></td></tr> <tr><td>geruchloser Stift</td><td>zum Beispiel: Giotto-Tinte</td><td></td> <td>mit Wasser, waschbar: diese Stifte sind für Babys konzipiert</td></tr><tr><td>Ethanol absolut (100%)</td><td>Sigma Aldrich,&nbsp; Saint-Quentin Fallavier, Frankreich</td><td>24103</td><td>verdünntes 1/10</td></tr><tr><td>Kondensator-Ultraschallmikrofon Avisoft-Bioacoustics CM16/CMPA</td><td>Avisoft Bioacoustics, Berlin, Deutschland</td><td>#40011</td><td>ausgestattet mit Verlängerungskabeln der Firma Avisoft</td></tr><tr><td>Ultrasound Gate 416H</td><td>Avisoft Bioacoustics, Berlin, Deutschland</td><td>#34163</td><td>Soundkarte</td></tr><tr><td>Avisoft Recorder USGH</td><td>Avisoft Bioacoustics, Berlin, Deutschland</td><td>#10301; #10302</td><td>Aufnahmesoftware für Windows Vista, 7 und 8</td></tr><tr><td>Avisoft SASLab Pro</td><td>Avisoft Bioacoustics, Berlin, Deutschland</td><td>#10101, 10111; #10102, 10112; &nbsp;</td><td>Windows 10, 8.1, 8, 7 oder Vista einschließlich Intel-basierter Apple Macintosh mit Boot Camp, Parallels oder ähnlicher Virtualisierungssoftware.</td></tr><tr><td>Laptop oder Apple Macintosh mit Boot Camp</td> <td>-</td><td></td> <td>unter Windows 10, 8.1, 8, 7 oder Vista; für den Apple Macintosh wird Boot Camp aufgrund von Speicherbeschränkungen gegenüber Virtualisierungssoftware wie Parallels bevorzugt</td></tr><tr><td>Kunststoffempfänger (PUP-Aufnahmen)</td><td>Lock & Lock, Chatswood, USA</td><td>HPL932D</td><td>Lock & Verriegelung stapelbarer luftdichter Behälter rund 700&nbsp; Ml; Verwendung ohne Abdeckung; Abmessungen: 9&nbsp; cm Durchmesser, 10 cm Höhe</td></tr><tr><td>PBS 1x (pH = 7,4)</td><td>Gibco (Life Technologies)</td><td>10010-023-Objektträger</td><td></td></tr> <tr><td></td><td>Menzel-Gl&auml; Thermo Scientific</td><td>J1800AMNZ</td><td>Superfrost Plus</td></tr><tr><td>May-Gr&uuml; nwald Lösung 500 ml</td><td>RAL R&eacute; actifs, Martillac, Frankreich</td><td>320070-0500-Giemsa</td><td></td></tr> <tr><td>R 500 ml</td><td>RAL R&eacute; actifs, Martillac, Frankreich</td><td>720-1107</td><td>verdünnt 1/20 in Phosphatpufferlösung</td></tr><tr><td>Phosphatpufferlösung (selbst hergestellt)</td><td>-</td><td>-</td><td>pH = 7, 0,1 M: 39 ml NaH2PO4 0,2 M + 61 ml Na2HPO4 0,2 M + 100&nbsp; ml H2O (Endvolumen: 200&nbsp; ml)</td></tr><tr><td>Testkäfig</td><td>Institut Pasteur,</td> <td>Paris-50&</td><td>nbsp; x&nbsp; 25&nbsp; cm, 30&nbsp; cm Höhe; </td></tr><tr><td>Selbstgebaute schalldichte Kammer aus Plexiglas (Aufnahmen für Erwachsene)</td><td>Institut Pasteur,</td> <td>Paris-Akustikschaum</td> <td>+ PVC; Innenmaße (B x H x T): 66 cm x 90 cm x 46 cm</td></tr><tr><td>Videokamera</td><td>Von Noldus Information Technologies, Wageningen, Niederlande</td> <td>-</td> <td>hochauflösende CamTech Super-Hi-Res Videokamera; 25 fps&nbsp;</td></tr><tr><td>EthoVision XT</td><td>Noldus Information Technology, Wageningen, Niederlande</td><td>http://www.noldus.com/animal-behavior-research/products/ethovision-xt</td><td>Videoerfassungssoftware</td></tr><tr><td>Mice Profiler Tracker Plugin von der ICY-Plattform</td><td>Bio Image Analysis, Institut Pasteur, Paris</td><td>http://icy.bioimageanalysis.org/plugin/Mice_Profiler_Tracker</td><td>Tracking-Software zur Analyse von Verhaltensereignissen während sozialer Interaktionen</td></tr></tbody></table>

aufnahme maus ultraschall vocalizations soziale kommunikation zur bewertung

Recording Mouse Ultrasonic Vocalizations to Evaluate Social Communication

Mäuse geben Ultraschalllaute in verschiedenen Kontexten während der Entwicklung und im Erwachsenenalter von sich. Diese stimmlichen Signale werden derzeit als Stellvertreter für die Modellierung der genetischen Grundlagen von Defiziten der stimmlichen Kommunikation verwendet. Die Charakterisierung des Stimmverhaltens von Mausmodellen, die Mutationen in Genen tragen, die mit neuropsychiatrischen Störungen wie Autismus-Spektrum-Störungen assoziiert sind, wird dazu beitragen, die Mechanismen zu verstehen, die zu sozialen Kommunikationsdefiziten führen. Wir stellen hier Protokolle zur Verfügung, um Ultraschalllaute bei Jungtieren und bei erwachsenen Mäusen zuverlässig auszulösen. Diese Standardisierung wird dazu beitragen, die Variabilität zwischen den Studien aufgrund der experimentellen Einstellungen zu reduzieren. Während der gesamten Entwicklung werden Isolationsrufe von einzelnen Jungtieren aufgezeichnet, die von Muttertieren und Wurfgeschwistern isoliert wurden. Im Erwachsenenalter werden Lautäußerungen während gleichgeschlechtlicher Interaktionen (ohne sexuelle Komponente) aufgezeichnet, indem sozial motivierte Männchen oder Weibchen einem unbekannten gleichgeschlechtlichen Artgenossen ausgesetzt werden. Wir stellen auch ein Protokoll zur Verfügung, um Lautäußerungen von erwachsenen Männchen aufzuzeichnen, die einem Brunstweibchen ausgesetzt waren. In diesem Zusammenhang gibt es eine sexuelle Komponente in der Interaktion. Diese Protokolle sind etabliert, um bei Labormäusen eine große Menge an Ultraschalllauten hervorzurufen. Wir weisen jedoch auf die wichtige interindividuelle Variabilität im Stimmverhalten von Mäusen hin, die durch die Erfassung einer minimalen Anzahl von Individuen (mindestens 12 in jeder Bedingung) berücksichtigt werden sollte. Diese Aufnahmen von Ultraschall-Vokalisationen werden verwendet, um die Rufrate, das stimmliche Repertoire und die akustische Struktur der Rufe auszuwerten. Die Daten werden mit der Analyse synchroner Videoaufzeichnungen kombiniert, um einen vollständigeren Überblick über die soziale Kommunikation bei Mäusen zu erhalten. Diese Protokolle werden verwendet, um die Defizite der stimmlichen Kommunikation bei Mäusen zu charakterisieren, denen ProSAP1/Shank2 fehlt, ein Gen, das mit Autismus-Spektrum-Störungen assoziiert ist. Weitere Aufzeichnungen von Ultraschall-Vokalisationen finden Sie auch in der mouseTube-Datenbank, die entwickelt wurde, um den Austausch solcher Daten zu begünstigen.

Mit den vorliegenden Protokollen, sind wir für das Stimmverhalten von Mäusen fehlt ProSAP1 / SHANK2, ein Gen im Zusammenhang mit Autismus - Spektrum - Störungen (ASD) 23-25. ASD durch Defizite in der sozialen Kommunikation und klischee Verhaltensweisen 1 gekennzeichnet. Unsere SHANK2 - / - Mäuse zeigten Hyperaktivität, erhöhte Ängstlichkeit und atypische Sprachkommunikation 18,26. Tatsächlich haben wir festgestellt , dass SHANK2 - / - Mäusen eine atypische Entwicklungsprofil in ihre Emissionsrate von pup Isolation Anrufe im Vergleich mit dem typischen umgekehrten U-förmigen Kurve in ihrem Wildtyp littermates angezeigt SHANK2 -. / - Mäuse zeigten eine erhöhte Anrufrate bei P4 und verringert im Vergleich zu ihren Wildtyp - Geschwister (Abbildung 2) bei P6 anrufen. Wir beobachteten auch eine verringerte Anrufrate bei weiblichen Interaktionen ein SHANK2 beteiligt - / - Weibchen in VERGLEICHn mit Wechselwirkungen ein Wildtyp - littermate beteiligt (Abbildung 2). Wir untersuchten das Repertoire der 5 verschiedenen Anrufkategorien. Es schien zwischen Welpen unterschiedlich zu sein (zum Beispiel hier , P2, P6 und P10) und Erwachsenen (Abbildung 3). Genotype bedingte Unterschiede waren signifikant meist im Erwachsenenalter. Während soziale Interaktionen mit adulten SHANK2 - / - Männchen oder Weibchen mit einem C57BL / 6N weiblich, mehr kurze Anrufe und unstrukturierten Anrufe wurden im Vergleich zu Interaktionen aufgezeichnet ihren Wildtyp - Geschwister beteiligt (3D und E). Weniger komplexe Anrufe und Frequenzsprünge Anrufe auch bei Interaktionen mit einer C57BL / 6N Weibchen mit adulten SHANK2 aufgezeichnet wurden - / - Weibchen im Vergleich zu Wechselwirkungen SHANK2 + / + Weibchen (Abbildung 3E) beteiligt sind . Schließlich haben wir auch manuell akustischen Variablen gemessen. Es gab keinen signifikanten Genotyp bedingte Differenz duRing Entwicklung. Im Gegensatz dazu ist die Dauer der Anrufe während der Interaktionen mit adulten SHANK2 aufgezeichnet - / - waren Frauen kürzer als jene , die während Interaktionen aufgezeichnet ihren Wildtyp - Geschwister (4A) beteiligt sind . Wir konnten zeigen auch , dass die Spitzenfrequenz von Ultraschall vocalizations während pup Entwicklung ohne signifikante Genotyp bedingte Differenz 26 erhöht. Während Wechselwirkungen zwischen SHANK2 - / - Männchen oder Weibchen mit einem C57BL / 6N weiblich, hatte Ultraschall vocalizations eine niedrigere Spitzenfrequenz im Vergleich zu Anrufen während Wechselwirkungen mit ihren Wildtyp - Geschwister (4B) aufgezeichnet. Darüber hinaus erlaubt das vorliegende Protokoll auch den Kontext der Emission von Ultraschall vocalizations zu untersuchen , indem die Daten von Audio - Aufnahmen zu den Verhaltensdaten extrahiert aus MiceProfiler (ICY - Software, Institut Vergangenheit kombinierteur, Paris). So wurden zum Beispiel in weiblich-weiblich-Wechselwirkungen, die meisten Ultraschall-vocalizations emittiert, wenn die Tiere in Kontakt waren und insbesondere den Insassen des neuen Ankömmling des ano-genitale Region Schnupfen, oder zumindest die Insassen hinter dem neuen Ankömmling zu sein. Mäuse auch viele Ultraschall vocalizations emittiert wird, wenn der Insasse näherte sich dem Ankömmling (Bild 5, oben). Weniger vocalizations wurden aufgezeichnet , wenn der Insasse SHANK2 - / - Mäuse in physischen Kontakt waren mit dem neuen Ankömmling (zB die ano-genitale Bereich der Ankömmling Sniffing) , als wenn der Insasse war ein Wildtyp - Maus. Weniger vocalizations wurden ausgelöst , wenn der Insasse hinter dem Neuankömmling einen SHANK2 war - / - Maus , als wenn es war ein Wildtyp - Maus. Mehr vocalizations wurden aufgezeichnet auch wenn der Neuling im Gesichtsfeld des Insassen Maus war, und um so mehr in den Wildarten als in den Mutanten (Abbildung 5, unteres Bild). s = &quot;jove_content&quot; fo: keep-together.within-page = &quot;1&quot;&gt; <img alt="Figur 2" src="/files/ftp_upload/53871/53871fig2.jpg" /> Abbildung 2:. Emissionsrate von Ultraschall vocalizations während der Entwicklung und in erwachsenen männlichen und weiblichen SHANK2 - / - Mäusen und Wildtyp littermates Anrufrate von Welpen (alle zwei Tage von P2 bis P12, n = 18-19 SHANK2 + / +, n = 15-16 SHANK2 - / -) und Erwachsene in der männlich-weiblichen Brunst Wechselwirkungen (n = 15 SHANK2 + / +, n = 16 SHANK2 - / -) und weiblich-weiblich - Wechselwirkungen (n = 15 SHANK2 + / +, n = 13 SHANK2 - / -) in Wildtyp - Mäusen (links) und SHANK2 - / - Mäusen (rechts). Daten werden als Mittelwert +/- SEM dargestellt und einzelnen Punkten (ungepaarten Wilcoxon Tests: * p &lt;0,05, ** p &lt;0,01 *** p &lt;0,001).ge.jpg &quot;target =&quot; _ blank &quot;&gt; Bitte hier klicken, um eine größere Version dieser Figur zu sehen. <img alt="Figur 3" src="/files/ftp_upload/53871/53871fig3.jpg" /> Abbildung 3:. Vocal Repertoire von SHANK2 - / - Mäusen und Wildtyp littermates Proportions der fünf verschiedenen Rufarten von P2 Welpen emittiert (A; n = 20 SHANK2 + / +, n = 18 SHANK2 - / -), P6 Welpen (B; n = 19 SHANK2 + / +, n = 18 SHANK2 - / -), P10 Welpen (C; n = 20 SHANK2 + / +, n = 18 SHANK2 - / -), erwachsene Männer mit einer Brunst weiblich (D ; n = 16 SHANK2 + / +, n = 16 SHANK2 - / -) und adulte Weibchen mit einem anderen weiblichen (E; n = 15 SHANK2 + / +, n = 13 SHANK2 </em&gt; - / -) in Wildtyp - Mäusen (linke Felder) und SHANK2 - / - Mäuse (rechte Felder). Die Daten werden als Mittelwert dargestellt +/- SEM und einzelne Punkte (Chi-Quadrat - Tests: * p &lt;0,05, ** p &lt;0,01, *** p &lt;0,001). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53871/53871fig3large.jpg" target="_blank">Bitte hier klicken</a> , um <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53871/53871fig3large.jpg" target="_blank">eine größere Version dieser Figur zu sehen.</a> <img alt="Abbildung 4" src="/files/ftp_upload/53871/53871fig4.jpg" /> Abbildung 4:. Akustische Variablen aus Ultraschall-Laute in SHANK2 extrahiert - / - Mäusen und Wildtyp - Geschwister (A) Dauer von allen Rufarten verwechselte von P2 Welpen emittiert (n = 20 SHANK2 + / +, n = 18 SHANK2 - / - ), P6 Welpen (n = 19 SHANK2 + / +, n = 18 SHANK2 - / -), P10 Welpen (n = 20 SHANK2 + / + </snach oben&gt;, n = 18 SHANK2 - / -), erwachsene Männer mit einer Brunst weiblichen (n 16 = SHANK2 + / +, n = 16 SHANK2 - / -) und erwachsene Frauen mit einem anderen Weibchen (n = 15 SHANK2 + / +, n = 13 SHANK2 - / -) in Wildtyp - Mäusen (links) und SHANK2 - / - Mäusen (rechts). (B) Der maximale Spitzenfrequenz auf allen Rufarten gemessen verwechselt in P2 Welpen, P6 Welpen, P10 Welpen, erwachsene Männer mit einer Brunst weiblichen und erwachsene Frau mit einem anderen Weibchen (gleiche Ns wie oben). Die Daten werden als Mittelwert dargestellt +/- SEM und einzelne Punkte (ungepaarten Wilcoxon - Tests: * p &lt;0,05, ** p &lt;0,01, *** p &lt;0,001). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53871/53871fig4large.jpg" target="_blank">Bitte hier klicken</a> , um <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53871/53871fig4large.jpg" target="_blank">eine größere Version dieser Figur zu sehen.</a> <img alt="Abbildung 5" src="/files/ftp_upload/53871/53871fig5.jpg" /> Abbildung 5: Kontext. s der Emission von Maus Ultraschall-Laute in weiblich-weibliche erwachsene soziale Interaktionen Anteil der Ultraschall-Laute von Paaren emittiert Beteiligung eine SHANK2 + / + mit einem C57BL / 6N Maus (n = 16, A) und Paare eine SHANK2 beteiligt - / - mit ein C57BL / 6N Maus (n = 13, B) während der folgenden Arten von Verhaltens Ereignisse (rot: Insasse, grün: Ankömmling): soziale Kontakte, oro-oralen Kontakt, ano-genitale Schnüffeln von dem Insassen Maus, elo- Genital schnüffeln von der Ankömmling Maus, Insassen hinter Ankömmling, Ankömmling hinter Insassen, Unbeweglichkeit der Insassen, Unbeweglichkeit der Ankömmling, Ansatz von dem Insassen und die Flucht aus dem neuen Ankömmling, Ansatz von der neuen Ankömmling &amp; Flucht aus dem Insassen, Ansatz und die Flucht aus dem Insassen, Ansatz und die Flucht aus dem neuen Ankömmling, Insasse nach dem Ankömmling, Neuling im Blickfeld des Insassen, Insassen im Blickfeld des Neulings. Daten sind pals Mittelwert +/- SEM und einzelnen Punkten übelgenommen (ungepaarten Wilcoxon Tests: * p &lt;0,05, ** p &lt;0,01). Nicht veröffentlichte Daten. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53871/53871fig5large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier</a> , um <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53871/53871fig5large.jpg" target="_blank">eine größere Version dieser Figur zu sehen.</a> <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td> Rufarten </td><td> Beschreibung </td></tr><tr><td> kurz </td><td> Dauer ≤5 ms und Frequenzbereich ≤6.25 kHz </td></tr><tr><td> einfach </td><td> Dauer&gt; 5 ms und Frequenzbereich ≤6.25 kHz (flach) oder Frequenzmodulation nur in eine Richtung (aufwärts oder abwärts) mit Frequenzbereich&gt; 6,25 kHz </td></tr><tr><td> Komplex </td><td> Frequenzmodulationen in mehr als eine Richtung und Frequenzbereich&gt; 6,25 kHz (moduliert) oder die Aufnahme von einem oder mehreren zusätzlichen Frequenz cls Bestandteil (harmonische oder nicht-lineare Phänomene, aber keine Sättigung), aber keine Einschränkung für Frequenzbereich (Komplex) </td></tr><tr><td> Frequenzsprünge </td><td> Einbeziehung von einem Sprung (ein Frequenzsprung) oder mehr Sprünge (Frequenzsprünge, andere) in der Frequenz ohne zeitliche Abstand zwischen den aufeinanderfolgenden Frequenzkomponenten, mit (gemischt) oder ohne laute Teil innerhalb des reinen Ton-Ruf </td></tr><tr><td> unstrukturierten </td><td> kein reiner Ton Komponente identifiziert werden können; &quot;Lauten&quot; Anrufe </td></tr></tbody></table> Tabelle 1:. Eigenschaften der fünf Arten von Maus Ultraschall vocalizations Beispiele für Kriterien der Dauer, Frequenzbereich, Frequenzmodulationen und Frequenzsprünge verwendet , um 5 Arten verschiedene Anrufultraschall Vokalisationen innerhalb von Maus zu bestimmen.

Ultraschall-Vokalisationen von Mäusen werden als Stellvertreter verwendet, um die genetischen Grundlagen von Defiziten der stimmlichen Kommunikation in Mausmodellen für neuropsychiatrische Erkrankungen zu modellieren. Das vorliegende Protokoll beschreibt drei experimentelle Kontexte, die zuverlässig Ultraschalllaute von Jungtieren (während der gesamten Entwicklung) und adulten Mäusen (gleichgeschlechtliche Interaktionen, Männchen-Brunst-Weibchen-Interaktionen) hervorrufen.

Aufnahme Maus Ultraschall Vocalizations soziale Kommunikation zur Bewertung

Mice emit ultrasonic vocalizations in different contexts throughout development and in adulthood. These vocal signals are now currently used as proxies ...

Das übergeordnete Ziel dieses Protokolls ist es, Ultraschalllaute von Mäusewelpen oder erwachsenen Mäusen aufzuzeichnen und zu analysieren und die Daten dann in der mouseTube-Datenbank öffentlich zugänglich zu machen. Wir haben bereits Mutationen bei Autismus identifiziert, jetzt wollen wir die Rolle dieser Gene verstehen. Wir verwenden Mausmodelle und betrachten insbesondere die Ultraschallvokalisation von Mäusen.Dieses Modell kann helfen, Schlüsselfragen im Bereich der Neurowissenschaften zu verstehen. Zum Beispiel, wie genetische Mutationen die soziale Kommunikation im Mausmodell für neuropsychotische Störungen wie Autismus beeinflussen. Der Hauptvorteil dieses Protokolls besteht darin, dass die Lautäußerungen der Maus zuverlässig ausgelöst werden.Es sollte eine Standardisierung der Kontextinformationen begünstigen, um den Vergleich zwischen den Studien zu verbessern. Diese Methode wird auch das Wissen über die intrasonische Kommunikation von Mäusen mithilfe der mouseTube-Datenbank erweitern. Nachdem Sie die Mäuse vorbereitet und neugeborene Welpen erhalten haben, stellen Sie einen Käfig auf, um ihre Rufe aufzuzeichnen.Verwenden Sie entweder eine schalldichte Box oder eine Styroporbox. Stellen Sie zunächst ein Thermometer auf, um die Innentemperatur zu überwachen. Senken Sie anschließend durch ein Loch in der Oberseite der Box ein Kondensator-Ultraschallmikrofon ab, so dass sich die Membran des Mikrofons etwa 12 bis 15 Zentimeter über dem Boden befindet.Schließen Sie nun das Mikrofon an eine Soundkarte des Computers an. Legen Sie den nicht-experimentellen Welpen in einen sauberen Plastikhalter in der Aufnahmebox und verschließen Sie ihn. Lassen Sie den Spitzenton der Aufnahme die volle verfügbare Amplitude ohne Verzerrung nutzen.Ändern Sie diese Einstellung während des Experiments nicht. Für experimentelle Messungen legen Sie den Welpen nun so vorsichtig und schnell wie möglich in einen sauberen Plastikbecher. Legen Sie dann den Welpen unter das Mikrofon und schließen Sie die Box so sanft und leise wie möglich.Führen Sie dann eine 16-Bit-Aufzeichnung mit 300 Kilohertz durch, um einen qualitativ hochwertigen Datensatz zu erhalten. Entfernen Sie den Welpen nach bis zu fünf Minuten Aufnahme. Notieren Sie sich die Pfoten-Tätowierung und messen Sie dann die Hauttemperatur mit einem digitalen Thermometer.Machen Sie nun mit Tinte auf Wasserbasis eine kleine Markierung auf dem Welpen und bringen Sie ihn in sein Nest zurück. Waschen Sie den Becher zwischen den Tests mit 10 % Ethanol und lassen Sie ihn vollständig trocknen. Verwenden Sie für einen Testkäfig für Erwachsene einen Plexiglaskäfig, der in eine schalldichte Box passt, die mit weißem Licht geringer Intensität beleuchtet wird.Reinigen Sie den Käfig mit Seifenwasser, trocknen Sie ihn ab und füllen Sie ihn mit zwei Zentimetern frischer Einstreu. Befestigen Sie das Mikrofon in einer Ecke des Käfigs und stellen Sie den Winkel des Mikrofons so ein, dass Geräusche aus dem gesamten Käfig aufgenommen werden. Positionieren Sie anschließend eine Videokamera über der Schallschutzkammer, sodass sie die Oberfläche des Prüfkäfigs überblickt, ohne dass das Mikrofon eine Ecke verdeckt.Stellen Sie mit einem nicht-experimentellen Tierpaar die Verstärkung der Aufnahme wie zuvor ein. Führen Sie für das Experiment zuerst ein Tier in den Käfig ein, um die Rolle des Insassen zu übernehmen. Lassen Sie es 20 Minuten lang gewöhnen.Während dieser Zeit kann eine Baseline-Aufzeichnung gemacht werden. Starten Sie dann die Video- und Audioaufnahmen und stellen Sie das zweite Tier des gleichen Geschlechts vor, das die Rolle des Neuankömmlings einnimmt. Synchronisieren Sie die Aufnahmen, indem Sie einen Piepton auslösen, wenn die Sekunde den Käfig berührt.Zeichnen Sie die Interaktionen der Tiere so lange wie nötig auf, z. B. vier Minuten. Um sich auf diesen Test vorzubereiten, nehmen Sie am frühen Morgen des Testtages Vaginalabstriche von jeder Frau, um ihren Status im Brunstzyklus zu bestimmen. Halten Sie das Weibchen am Schwanz fest und lassen Sie es das Käfiggitter greifen.Spülen Sie ihre Vagina mit einer Pipette mehrmals, indem Sie 20 Mikroliter PBS injizieren und auffangen. Achte auf das PBS, wenn es aus der Vagina gespült wird. Wenn es leicht bewölkt ist, enthält es genügend Zelle.Tun Sie dies vorsichtig, um die Bildung von Schleim zu vermeiden. Verteilen Sie die Probe auf einem Objektträger. Bis zu vier können gleichzeitig untersucht werden.Lassen Sie die Proben trocknen, bevor Sie fortfahren. Unter einem Abzug werden die Objektträger drei Minuten lang in einem Bad mit 0,1 molaren May-Grunwald-Lösung in PBS inkubiert. Übertragen Sie dann die Objektträger für eine Minute in ein PBS-Bad.Übertragen Sie dann die Objektträger in ein Bad von 5 Gew.-% Giemsa R in PBS. Spülen Sie die Objektträger nach 10 Minuten eine weitere Minute lang mit frischem PBS aus. Untersuchen Sie dann die fleckigen Objektträger.Zeigt die Probe nur große, verhornte Epithelzellen, die keine Zellkerne haben und sich blau färben, befindet sich das Weibchen in voller Brunst. Nur solche Hündinnen können für den Test verwendet werden. Richten Sie nun den Testkäfig mit dem Rüden als Insassen ein.Lassen Sie es 10 Minuten lang gewöhnen und machen Sie bei Bedarf eine Audioaufnahme. Starten Sie dann die Video- und Audioaufnahmen und stellen Sie das Weibchen in voller Brunst vor. Synchronisieren Sie die Datensätze wie zuvor mit einem Signalton.Lassen Sie die Tiere dann so lange wie nötig interagieren, z. B. für einen Zeitraum von vier Minuten. Wenn die Aufzeichnung abgeschlossen ist, bringen Sie die Mäuse in ihre jeweiligen Käfige zurück. Um Daten auf die mouseTube-Website am Institut Pasteur hochzuladen, loggen Sie sich zunächst ein.Überprüfen Sie, ob die von aufgezeichnete Mausbelastung in der mouseTube-Datenbank vorhanden ist, indem Sie auf die Schaltfläche Stämme klicken. Wenn nicht, bitten Sie die Administratoren, es zu erstellen. Erstellen Sie als Nächstes Tiermotive.Anzugeben sind die Kennzeichen der erfassten Tiere. Sammeln Sie sie in Gruppen, um das spätere Abrufen von Daten zu erleichtern. Geben Sie dann eine Beschreibung des verwendeten Protokolls an.Erstellen Sie nun für jede Aufzeichnungssitzung ein Experiment. Geben Sie das Protokoll, die Gruppe von Personen, die aufgezeichnet wurde, die verwendete Hard- und Software und deren Besonderheiten an. Das Experiment sammelt alle Metadaten, die den Vokalisationsdateien entsprechen.Erstellen Sie als Nächstes den Link zu den Vokalisationsdateien. Wählen Sie zunächst das Experiment in der Liste aus. Kopieren Sie dann die URL der Vokalisierungsdatei und fügen Sie sie in das entsprechende Feld der Spalte Zu verknüpfende Dateien ein.Es ist möglich, dass der Link, den Sie zu dieser Datenbank setzen, nicht wirklich gut ist. Stellen Sie sicher, dass der Server, auf dem Ihre Vokalisierungsdateien gehostet werden, für die Mitglieder der Community von außerhalb Ihrer Institution zugänglich ist. Unter Details im Abschnitt "Hinweise", um sie nach Bedarf bereitzustellen.Geben Sie z. B. an, dass ein Link zu einer Videodatei eingegeben wurde, die einer Audiodatei beigefügt ist. Nachdem Sie die Eingaben vorgenommen haben, validieren Sie diese. Es ist nicht notwendig, jedes Feld für jede Datei auszufüllen.Ändern Sie ggf. die eingegebenen Links. Mäuse, bei denen Shank2, ein Gen, das mit Autismus-Spektrum-Störungen assoziiert ist, nicht exprimiert wurde, wurden charakterisiert. Diese Mäuse zeigten eine atypische vokale Kommunikation, die sich zunächst in einer verminderten Rufrate bei weiblichen Interaktionen bemerkbar machte.Als nächstes wurde das Standardrepertoire von fünf Rufen bewertet, die sich vom Welpenalter bis zum Erwachsenenalter ändern. Die Messungen wurden zuerst mit P2-Welpen durchgeführt. Das Stimmrepertoire veränderte sich bei den P6-Welpen nicht.Auf P10 war das Gesangsrepertoire immer noch das gleiche. Bis zu diesem Zeitpunkt gab es bei den Shank2-Nullmäusen kein großes Defizit. Im Erwachsenenalter zeigten sich jedoch genotypbezogene Unterschiede.Wenn Männchen mit Weibchen in der Brunst interagierten, gab es einen bemerkenswerten Anstieg des Anteils an kurzen und unstrukturierten Rufen von mutierten Männchen. In Rufmustern, die zwischen Weibchen gehört wurden, gaben Shank2-Null-Weibchen mehr kurze und unstrukturierte Rufe ab, sowie weniger komplexe Rufe und weniger häufige Sprungrufe, wenn sie mit normalen Weibchen gepaart wurden. Gepaarte Shank2-Null-Mäuse, männlich oder weiblich, vokalisierten mit einer geringeren Spitzenfrequenz im Vergleich zu Paaren von Wildtyp-Wurfpartnern.Die Synchronisierung der Analyse von Verhaltensereignissen und der Vokalisationsemission ermöglichte die Identifizierung von Beeinträchtigungen im Zusammenhang mit der Emission von Ultraschallvokalisationen bei mutierten Mäusen. Shank2-Null-Mäuse vokalisierten seltener, wenn sie in körperlichem Kontakt mit Neuankömmlingen standen, und insbesondere beim Schnüffeln in der anogenitalen Region. Weitere Lautäußerungen waren zu hören, wenn sich die Neuankömmlinge im Gesichtsfeld der Shank2-Nullmäuse befanden.Nachdem Sie sich dieses Video angesehen haben, sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie man Ultraschall-Vokalisationen von Mäusen aufzeichnet und Daten in die mouseTube-Datenbank hochlädt. Beim Versuch dieses Verfahrens ist es wichtig, daran zu denken, angesichts der Höhe und internen Lebensfähigkeit der Stimmbarriere der Maus genügend Individuen vorkonditioniert aufzunehmen.

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Forschung

JoVE Journal

Behavior

Verhalten

Ultraschall-Vokalisationen (USVs) bei Mäusen unterscheiden sich je nach Alter, Geschlecht, Zustand und genetischem Hintergrund. Unter Verwendung von zwei Ultraschallstrahlern, die gleichzeitig an verschiedenen Orten senden, kann dieser Zwei-Auswahl-Test die Erkennung von Mäusen und die Präferenzreaktionen auf unterschiedliche Merkmale von USVs bewerten.

Bestimmen Ultraschall Vocalization Preferences in Mäuse mit einer Zwei-Choice-Test-Playback

Mäuse produzieren ein komplexes multisyllabisches Repertoire an Ultraschall-Vokalisationen (USVs). Diese USVs sind weithin als Auslesungen für neuropsychiatrische Störungen verwendet. Dieses Protokoll beschreibt einige der Praktiken, die wir gelernt und entwickelt haben, um die akustischen Eigenschaften und die Syntax von Maus-Songs konsequent zu induzieren, zu sammeln und zu analysieren.

Auslösen und Analysieren von männlichen Maus Ultraschall-Vokalisierung (USV) Lieder

Ultraschalllautisationen (USVs) von Laborratten und Mausen sind nützlich zur Untersuchung der Stimm- und neuronalen Funktionen. Dieses Protokoll beschreibt ein Futterbelohnungsparadigma, das zuverlässig appetitliche USVs ohne paarungsbedingte Störungen hervorruft. Es beschreibt Tierkonditionierung, Stimuluspräsentation, Aufzeichnung und akustische Analyse und bietet eine reproduzierbare Methode zur Untersuchung der affektiv-motivationalen und kranialen sensomotorischen Funktionen.

Antizipatorische Nahrungsbelohnungs-Auslösung von appetitiven Ultraschalllautbewegungen bei Laborratten und -mäusen

Frühere Forschungen zur sozialen Dimension von Stress haben sich auf zwei wichtige Variablen konzentriert: soziale Identität und soziale Unterstützung. Dieses Protokoll stellt eine effektive experimentelle Manipulation dieser beiden sozialen Variablen vor und beschreibt ihre Implementierung in einem Standard-Stressinduktionsparadigma (Trierer sozialer Stresstest).

Die soziale Dimension der Stress: experimentelle Manipulationen an sozialer Unterstützung und Sozial Identität in der Trier Social Belastungsprobe

Bisher hat sich die Forschung auf kognitive Strategien konzentriert, die Menschen anwenden, um mit Unsicherheit umzugehen. Diese Forschung untersucht stattdessen einen erfahrungsbasierten Umgang mit Unsicherheit und stellt eine Reihe experimenteller Methoden vor, die zeigen, wie die Erfahrung haptischer Weichheit als Werkzeug zum Umgang mit Unsicherheit dienen kann.

Experimental Research Untersuchen, wie Menschen mit Unsicherheit durch weiche Haptik Sensations Cope

Arbeitsspeicher prognostiziert eine erhebliche Abweichung für eine Vielzahl von kognitiven Aufgaben, einschließlich Sprechen, Lesen und Schreiben. Allerdings sind nur wenige Werkzeuge zur Verfügung, um das Arbeitsspeicher bei Kindern zu beurteilen. Wir präsentieren einen innovativen, computerbasierten Akku, der bei Kindern im schulpflichtigen Alter verschiedene Komponenten des Arbeitsspeichers umfassend beurteilt.

Beurteilen von Arbeitsspeichern bei Kindern: Die umfassende Assessment-Batterie für Kinder - Arbeitsspeicher (CABC-WM)

Ein kabelloses, bidirektionale System für neuronale Mehrkanal-Aufnahmen und Stimulation in Ratten frei Verhalten wird eingeführt. Das System ist leicht und kompakt, so dass nur minimale Auswirkungen auf die Futtersorten Verhaltensrepertoire. Darüber hinaus bietet dieses bidirektionale System ein ausgefeiltes Instrument um kausale Zusammenhänge zwischen Aktivierungsmuster Gehirn und Verhalten zu beurteilen.

Ein kabelloses, bidirektionale Schnittstelle für In Vivo Aufnahme und Stimulation der neuronalen Aktivität in Ratten frei Verhalten

Hier präsentieren wir ein Protokoll für die Verwaltung der Video-referenzierte Bewertung des gegenseitigen sozialen Verhaltens (VrRSB) mit einem Papier oder Online-Version. Diese Umfrage quantifiziert RSB, eine Voraussetzung für soziale Kompetenz, bei Kleinkindern durch "Video-referenziert" Elemente, wobei ein Thema ist im Vergleich zu ein Referenz-Kind in einer drei-Minuten-Video gezeigt.

Verwendung eines Videos Scoring Anker für schnelle serielle Bewertung der sozialen Kommunikation bei Kleinkindern

Dieses Whitepaper beschreibt eine semantisches Priming ERP-Aufgabe mit Hilfe innerhalb der Modalität Paare von Bildern und Worten, um semantische Verarbeitung bei Menschen mit Autismus-Spektrum-Störung (Ass) zu untersuchen.

Ein semantisches Priming veranstaltungsbezogenen potenzielle (ERP) Aufgabe, lexikalisch-semantische und Visuo-semantische Verarbeitung im Autismus-Spektrum-Störung zu studieren

Die visuelle Welt Paradigma überwacht Teilnehmer Augenbewegungen im visuellen Arbeitsbereich anhören oder eine gesprochene Sprache. Dieses Paradigma kann verwendet werden, um die Online-Verarbeitung einer breiten Palette von Psycholinguistische Fragen, einschließlich semantisch komplexe Anweisungen, wie z. B. disjunktive Aussagen zu untersuchen.

Verwendung von Augenbewegungen aufgezeichnet in der visuellen Welt Paradigma, die Online-Verarbeitung von gesprochener Sprache zu erkunden

Lernen Sie die Aufnahme und Analyse ultraschallbasierter Vokalisationen bei Mäusen zur Untersuchung genetischer Einflüsse auf soziale Kommunikation. Diese standardisierte Methode ermöglicht reproduzierbare Studien zu neurologischen Störungen.

Aufnahme Maus Ultraschall Vocalizations soziale Kommunikation zur Bewertung

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