Identifizierung kritischer Bedingungen für die Immunfärbung in der Erbsenblattlaus Embryos: Erhöhung Gewebepermeabilität und abnehmender Hintergrundfärbung

Das übergeordnete Ziel dieses Immunfärbeprotokolls ist es, die Proteinexpression in den Blattlausembryonen nachzuweisen. Es werden kritische Bedingungen identifiziert, die die Gewebepermeabilität erhöhen und die Hintergrundfärbung verringern, was beides seit langem bestehende Probleme bei der Färbung von embryonalem Gewebe von Blattläusen sind. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass sie spezifische Bedingungen für eine effektive Penetration von Antikörpern und eine Verringerung der Hintergrundfärbung bietet, die normalerweise nicht in einem Standard-Immunfärbeprotokoll beschrieben werden.

Wir hatten die Idee zu diesem Maß zum ersten Mal, als wir untersuchten, wie Keimzellen in einer Erbsenblattlaus, einer Vielzahl von Insektenmodellen, für Genomik- und Umweltstudien spezifiziert werden. Der Laborstamm der Erbsenblattlaus, A. pisum, wurde ursprünglich in Zentraltaiwan gesammelt und wird seit mehr als 300 Generationen auf Wirtspflanzen gezüchtet.