Name: Schnelle molekulare Erkennung und Differenzierung von Influenza-Viren A und B (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-01-30T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 38 s
Description: Erfahren Sie die schnelle molekulare Erkennung von Influenza A und B mittels isothermer Amplifikation und Molecular-Beacon-Sonden. Diese Methode liefert Ergebnisse in 15 Minuten für die klinische Diagnostik.

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Wir danken den Mitarbeitern des Clinical Microbiology Service des Memorial Sloan-Kettering Cancer Center für ihre Hilfe beim Sammeln klinischer Proben. Diese Studie wurde teilweise durch eine Forschungsvereinbarung zwischen MSKCC und Alere Scarborough (SK2013-0262) unterstützt.

ETHIK STATEMENT: Die Verwendung von übrig gebliebenen klinischen Proben zugelassen ist und nach den Richtlinien des Memorial Sloan Kettering Cancer Center Institutional Review Board. 1. Vor dem Assay Lauf HINWEIS: Das Influenza-A-und B-Test wird für Nasen-Rachen-Abstrichproben und für Nasen-Rachen-Abstrichen in viralen Transportmedien gespeichert zugelassen. Tupfer sind im Kit enthalten und sollte für eine optimale Leistung verwendet werden. Jedoch, Rayon, Schaum, beflockte Tupfer oder Polyester Nasenabstrichen können auch Nasentupferproben zu sammeln, verwendet werden. <ol><li> Um eine Nasenabstrichprobe sammeln, legen Sie den Tupfer in das Nasenloch, die am meisten sichtbaren Drainage oder das ist am stärksten belasteten. Mit sanften Drehung, drücken Sie den Tupfer in das Nasenloch bis auf Widerstand stoßen und mehrmals gegen die Nasenwand drehen, bevor sie aus dem Nasenloch langsam entfernen. Lagern Sie die Tupfer und transportieren sie in Fläschchen mit 3 ml Virustransportmedien (VTM). HINWEIS: Eine sorgfältige Aufmerksamkeit auf appropriate Probenentnahme muss als unzureichend Probenentnahme entnommen werden kann, zu falschen Ergebnissen führen. HINWEIS: Abstrichproben sollten so bald wie möglich nach der Entnahme getestet werden. Sie können jedoch bei Raumtemperatur für bis zu 2 Stunden oder gekühlt bei 2-8 ° C bis zu 24 Stunden aufbewahrt werden, wenn der Test nicht sofort verfügbar ist. Frisch sind gesammelt Proben für eine optimale Testleistung ideal. Eine unsachgemäße Handhabung von Proben, Lagerung und / oder Transport können zu fehlerhaften Ergebnissen führen. HINWEIS: Als Vorsichtsmaßnahme, Einzelpersonen der Durchführung dieser Prüfung sollten alle Proben zu behandeln, als potenziell infektiös durch allgemeine Vorsichtsmaßnahmen Folgendes, wenn Umgang mit den Proben. </li><li> Bringen Sie alle Proben auf Raumtemperatur vor dem Test. HINWEIS: Alle Testkomponenten für den einmaligen Gebrauch sind nur und sollte nicht verwendet werden, um mehrere Tests durchzuführen. Kitkomponenten nicht unterschiedlicher Chargen mischen. Nicht Kitreagenzien nach dem Verfallsdatum nicht mehr verwenden. </li><li> Bringen Sie den blauen Probeaufnahme zu room Temperatur vor der Prüfung. Die orange Testbasis kann ohne die Notwendigkeit, auf Raumtemperatur erwärmen, getestet werden. </li><li> Lassen Sie alle Teststücke in der Folienverpackung erst unmittelbar vor dem Gebrauch. Schalten Sie das Gerät durch Drücken der Power-Taste an der Seite des Gerätes. Geben Sie die User-ID ein und drücken Sie &quot;OK&quot;. </li></ol> 2. Durchführung des Tests <ol><li> Um den Testprozess zu beginnen, berühren &#39;Run Test &quot;auf der Instrumentenanzeige. Geben Sie die Patienten-ID, indem Sie auf dem Bildschirm, Tastatur oder Barcode-Scanner ein und drücken Sie &quot;OK&quot;. Öffnen Sie den Deckel und legen Sie die orange Testbasis in den Testgrundhalter orange. </li><li> Bestätigen Sie, dass der richtige Test auf dem Bildschirm angezeigt wird, und drücken Sie &quot;OK&quot;. Legen Sie die blauen Probeaufnahme in den blauen Probenaufnahmehalter. HINWEIS: Schalten Sie den Proben Empfänger nicht öffnen, bevor sie in das Gerät legen, da dies die Elutionspuffer verhindern die richtige Betriebstemperatur erreicht und können die Testleistung auswirken. </li&gt; <li> Warten Sie auf die Probeaufnahme, um sich aufzuwärmen. Wenn vom Gerät aufgefordert, die Foliendichtung entfernen und den Patiententupfer setzen in die Probenaufnahmeeinrichtung getestet werden. HINWEIS: Wenn die Folie zu entfernen, zwei Finger auf den Rand des Sample-Empfänger, um sicherzustellen, dass es an seinem Platz bleibt. </li><li> Energisch den Tupfer für 10 Sekunden in der Flüssigkeit mischen, wird der Tupfer gegen die Seite durch Drücken der Probenaufnahme, wie Sie es mischen, um die Probe aus dem Tupfer entfernen. Drücken Sie auf &quot;OK&quot;, um fortzufahren. Wenn die Prüfung in viralen Transportmedium gespeichert Tupfer, fügen Sie die VTM für 10 sec vortexen dann 200 &amp; mgr; l der Probe Empfänger. </li><li> Drücken Sie die weiße Transferpatrone in den blauen Probeaufnahme. Weiter auf der Probeaufnahme drücken, bis die orangefarbene Anzeige steigt. </li><li> Heben und dann die Transfereinheit an der Testbasis verbinden. Beachten Sie die orangefarbene Anzeige absteigen, wenn die Patrone Übertragung korrekt angebracht ist. Den Deckel schließen und nicht erst öffnen, wenn der &quot;Test Complete&quot;Meldung erscheint auf dem Bildschirm. </li></ol> 3. Qualitätskontrolle <ol><li> Tippen Sie auf &quot;Run QC Test &#39;auf dem Home-Bildschirm. Wählen Sie den QC-Test zu starten. Bestätigen Sie den Testtyp der QC-Probe für den Test vorgesehen übereinstimmen durch Berühren &quot;OK&quot;, und im Anschluss an die auf dem Bildschirm Tests abgeschlossen auffordert. </li></ol> 4. Ergebnisauswertung <ol><li> Nachdem der Testlauf abgeschlossen ist, beachten Sie die Ergebnisse des Tests auf dem Bildschirm mit Interpretationen auf die Anwesenheit von Influenza A, B, unbekannte Subtypen angezeigt. Für ungültige Ergebnisse wiederholen Sie den Test. </li></ol> 5. Wartung und Reinigung <ol><li> Reinigen Sie das Gerät und die umliegende Bankbereich täglich mit 70% Ethanol oder 10% Bleichlösung. Sprühen Sie die Reinigungslösung auf einem feuchten, fusselfreien Tuch zu reinigen. Gießen Sie die Lösungen nicht direkt auf dem Instrument. </li></ol>

<ol><li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Prevention+control+of+seasonal+influenza+with+vaccines.+Recommendations+of+the+Advisory+Committee+on+Immunization+Practices--United+States%2C+2013-2014%22">Prevention control of seasonal influenza with vaccines. Recommendations of the Advisory Committee on Immunization Practices--United States, 2013-2014</a>. , Report No. 1057-5987 1-43 (2013).</li>
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<li>Hurt, A. C., Alexander, R., Hibbert, J., Deed, N., Barr, I. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performance+of+six+influenza+rapid+tests+in+detecting+human+influenza+in+clinical+specimens%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Virology%22%5BJournal%5D)">Performance of six influenza rapid tests in detecting human influenza in clinical specimens.</a> Journal of Clinical Virology. 39 (2), 132-135 (2007).</li>
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<li>Harper, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Seasonal+influenza+in+adults+and+children--diagnosis%2C+treatment%2C+chemoprophylaxis%2C+and+institutional+outbreak+management%3A+clinical+practice+guidelines+of+the+Infectious+Diseases+Society+of+America%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Infect+Dis%22%5BJournal%5D)">Seasonal influenza in adults and children--diagnosis, treatment, chemoprophylaxis, and institutional outbreak management: clinical practice guidelines of the Infectious Diseases Society of America.</a> Clin Infect Dis. 48 (8), 1003-1032 (2009).</li>
<li>Hannoun, C., Tumova, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survey+on+influenza+laboratory+diagnostic+and+surveillance+methods+in+Europe%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Epidemiology%22%5BJournal%5D)">Survey on influenza laboratory diagnostic and surveillance methods in Europe.</a> European Journal of Epidemiology. 16 (3), 217-222 (2000).</li>
<li>Leonardi, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+identification+of+2009+H1N1+influenza+A+virus+using+fluorescent+antibody+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Clin+Pathol%22%5BJournal%5D)">Rapid identification of 2009 H1N1 influenza A virus using fluorescent antibody methods.</a> Am J Clin Pathol. 134 (6), 910-914 (2010).</li>
<li>Chartrand, C., Leeflang, M. M. G., Minion, J., Brewer, T., Pai, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accuracy+of+Rapid+Influenza+Diagnostic+TestsA+Meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Internal+Medicine%22%5BJournal%5D)">Accuracy of Rapid Influenza Diagnostic TestsA Meta-analysis.</a> Annals of Internal Medicine. 156 (7), 500-511 (2012).</li>
<li>Lee, G. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+a+rapid+diagnostic+test%2C+NanoSign%28R%29+Influenza+A%2FB+Antigen%2C+for+detection+of+the+2009+pandemic+influenza+A%2FH1N1+viruses%5BTitle%5D)+AND+%22Virol+J%22%5BJournal%5D)">Evaluation of a rapid diagnostic test, NanoSign(R) Influenza A/B Antigen, for detection of the 2009 pandemic influenza A/H1N1 viruses.</a> Virol J. 7, 244(2010).</li>
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<li>Pierce, V. M., Elkan, M., Leet, M., McGowan, K. L., Hodinka, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+the+Idaho+Technology+FilmArray+system+to+real-time+PCR+for+detection+of+respiratory+pathogens+in+children%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Comparison of the Idaho Technology FilmArray system to real-time PCR for detection of respiratory pathogens in children.</a> J Clin Microbiol. 50 (2), 364-371 (2012).</li>
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<li>Chidlow, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Duplex+real-time+reverse+transcriptase+PCR+assays+for+rapid+detection+and+identification+of+pandemic+%28H1N1%29+2009+and+seasonal+influenza+A%2FH1%2C+A%2FH3%2C+and+B+viruses%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Duplex real-time reverse transcriptase PCR assays for rapid detection and identification of pandemic (H1N1) 2009 and seasonal influenza A/H1, A/H3, and B viruses.</a> J Clin Microbiol. 48 (3), 862-866 (2010).</li>
<li>Bell, J. J., Selvarangan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+the+Alere+I+influenza+A%26B+nucleic+acid+amplification+test+by+use+of+respiratory+specimens+collected+in+viral+transport+medium%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Evaluation of the Alere I influenza A&B nucleic acid amplification test by use of respiratory specimens collected in viral transport medium.</a> J Clin Microbiol. 52 (11), 3992-3995 (2014).</li>
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<li>Chapin, K. C., Flores-Cortez, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performance+of+the+Molecular+Alere+i+Influenza+A%26B+Test+Compared+to+That+of+the+Xpert+Flu+A%2FB+Assay%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Performance of the Molecular Alere i Influenza A&B Test Compared to That of the Xpert Flu A/B Assay.</a> Journal of Clinical Microbiology. 53 (2), 706-709 (2015).</li>
</ol>

Die Autoren haben nichts offenzulegen.

Influenzaviren sind signifikant weltweit Ursachen von Morbidität und Mortalität. Eine schnelle und genaue Diagnose der Influenza ist eine der wichtigsten Schlüssel zur Grippe-Ausbrüche während Atem Saison zu verwalten. Andere Antigen-basierte Tests sind schnell und einfach durchzuführen; sie haben jedoch geringe Empfindlichkeiten 13. Auf der anderen Seite haben die traditionellen molekularen Tests Empfindlichkeit verbessert, benötigen aber mehr erfahrenen Labortechniker durchführen und sind teure...

Influenza - Virusinfektionen führen zu einer signifikanten Menge von Morbidität und Mortalität jedes Jahr 1, 2, 3. Unkompliziert Influenza wird durch Verfassungs- und respiratorische Symptome wie Fieber, Muskelschmerzen, Kopfschmerzen, und nicht produktiven Husten 4, 5 aus. Ältere Menschen, Kleinkinder, immungeschwächten Patienten und Patienten mit zugrunde liegenden Komorbiditäten sind zu einem höheren Risiko für schwere Komplikationen wie Lungenentzündung, Myokarditis, Zentralnervensystem - Krankheit oder Tod 6, 7. Influenza - Infektion ist einzigartig von anderen respiratorischen Viren in diesem Prompt Verabreichung von antiviralen Therapie innerhalb von 48 Stunden nach Einsetzen der Symptome kann die Schwere der Erkrankung und der Länge 8 zu reduzieren. Schnelle Identifikation von Influenza auch gewesen9, 10 gezeigt , die Verwendung von Antibiotika unnötig zu verringern. Ferner hospitalisierten Patienten mit Influenza-Infektionen müssen in isolierten Räumen mit entsprechenden Infektionsschutzmaßnahmen gesetzt werden. Jedoch durch nicht-Influenzaviren verursacht Atemwegserkrankungen kann schwierig sein, klinisch von Influenza unterscheiden. Aus diesem Grunde ist eine schnelle und genaue diagnostische Tests für Influenza sehr wichtig für die klinische Behandlung der Patienten. Mehrere Tests sind für den Nachweis und die Identifizierung von Influenza-Viren zur Verfügung. Schnelle Influenza - Antigen - Nachweistests (RIDTs) sind weit verbreitet in der klinischen Praxis als Point-of-Care - Tests verwendet , weil sie einfach zu bedienen sind und liefern Ergebnisse innerhalb von 15 bis 30 min 11, 12; jedoch variieren ihre Empfindlichkeiten stark (10-80%) in Abhängigkeit von dem Hersteller und der Population getestet, und die influenza Typ und SUBTY13 pe, 14, 15. Direkte Fluoreszenzassays (DFAs) eine überlegene Empfindlichkeit gegenüber RIDTs, aber die Verarbeitungszeit größer (~ 3 h) , und muss von erfahrenen Technikern 16, 17 abgeschlossen werden. Viral Kultur hat für Influenza - Diagnostik der Gold - Standard und hat eine verbesserte Empfindlichkeit über beide RIDTs und DFAs 18. Allerdings Influenzaviruskultur kann überall 2-14 d in Anspruch nehmen, ihre Nützlichkeit verringern in 19 Patienten - Management unterstützen. Schließlich haben die Nukleinsäureamplifikation Tests (NAAT) Kulturtechniken wie der neue Goldstandard in der Influenza-Diagnostik ersetzt. NAAT werden als zum Detektieren influenza in wenigen Stunden die größte Empfindlichkeit zu haben. NAAT sind jedoch die teuersten Assays und erfordern spezielle Ausrüstung und Technologen 5 auszuführen <snach oben&gt;, 20, 21, 22, 23, 24, 25. Das Influenza-A-und B-Test hier beschrieben wird, ist die erste CLIA-verzichtet Molekular schnelle Grippe-Test, die leicht verfügbar ist. Dieser Test funktioniert durch eine Nicking Endonuklease Amplifikationsreaktion (NEAR) unter Anwendung, die durch Zielerfassung mit molekularen Signalsonden gefolgt isothermen Amplifikation mit Influenza-spezifischen Primer verwendet. Dieser Test unterscheidet Influenza A von B, erfordert 2 Minuten einzurichten und eine Probe verarbeiten und erfordert insgesamt 15 Minuten zu beenden. Hier präsentieren wir das Protokoll für die Influenza A &amp; B-Test. Darüber hinaus bieten wir ein Beispieldaten die Leistung des Influenza-A-und B-Test auf archivierten Nasen-Rachen-Abstrich (NPS) Exemplare, gespeichert in der viralen Transportmedium zu vergleichen (VTM) zu einem anderen respiratorischen Erreger Panel-Untersuchung.

<table><tbody><tr><td>Alere i Instrument</td><td>Alere</td><td>NAT-000 (Global), NAT-024 (US)</td><td></td></tr><tr><td>Alere i Influenza A & B 24 Test Kit</td><td>Alere</td><td>425-000 (Global), 425-024 (US)</td><td></td></tr><tr><td>Alere i Barcode Scanner</td><td>Alere</td><td>EQ001001</td><td></td></tr><tr><td>Alere Universal Printer</td><td>Alere</td><td>55115 (Global), Alereiprinter&nbsp;( US)</td><td></td></tr><tr><td>200 &Mikro; L Präzisionspipette</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>200 &Mikro; l Einweg-Pipettenspitzen</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Virales Transportmedium</td><td>Remel</td><td>M4-RT</td><td></td></tr></tbody></table>

schnelle molekulare erkennung und differenzierung von influenza-viren a und b

Rapid Molecular Detection and Differentiation of Influenza Viruses A and B

Influenza ist eine ansteckende durch Influenzaviren A und B in Menschen verursacht respiratorische Erkrankung und verursacht eine erhebliche Menge an Morbidität und Mortalität jedes Jahr. Das Influenza-A-und B-Test war der erste CLIA-verzichtet Molekular schnelle Grippe-Test zur Verfügung. Die Influenza A- und B-Test funktioniert durch Verwendung isothermen Amplifikation mit Influenza-spezifischen Primern durch die Zielerfassung mit molecular beacon Sonden folgten. Hier wird die Leistung des Influenza-A-und B-Test auf gefrorenen archivierten Nasen-Rachen-Abstrich (NPS) Proben in Virustransportmedium (VTM) gespeichert wurden einem Atem Panel-Untersuchung verglichen. Die Leistung des Influenza A- und B-Assay wurde durch Vergleich der Ergebnisse der Atemtafel Referenzmethode bewertet. Die Empfindlichkeit für die gesamte Influenza-Virus A betrug 67,5% (95% CI (CI), 56,6-78,5) und eine Spezifität von 86,9% (CI, 71,0 bis 100). Für B-Tests Influenza-Virus, die Sensitivität und Spezifität waren 90,2% (CI, 68,5 bis 100) Und 98,8% (CI, 68,5 bis 100), respectively. Dieses System hat den Vorteil einer erheblich kürzeren Prüfzeit als alle anderen derzeit verfügbaren molekularen Assays und der einfachen, Pipettenfreien Verfahren läuft auf einer voll integrierten, geschlossenen, mit kleinem Platzbedarf System. Insgesamt hat das Influenza-A-und B-Test in dieser Studie untersuchte das Potenzial als Point-of-Care schnelle Influenza diagnostischen Test zu dienen.

In dieser Studie wurden archivierten NPS Proben von Patienten stationär gesammelt 15, am Memorial Sloan-Kettering Cancer Center (MSKCC) während einer Influenza-Ausbruch zwischen Dezember mit grippeähnlichen Symptomen präsentiert 2012 und 1. März 2013. Die NPS Exemplare in 3 ml vorgelegt wurden von VTM und als Teil der klinischen Routine mit einem molekularen Test getestet, die eine Gruppe von Atemwegsviren (RP), einschließlich Influenza A, A-1, A-3 und B. Während der Studie, 3675 NPS Pro...

Wir beschreiben eine schnelle, molekülbasierten Influenza A und B-Assay. Die Influenza-Test weist jedes Ziel innerhalb von 15 Minuten durch den Einsatz von isothermen Amplifikation mit Influenza-spezifischen Primer durch Zielerfassung mit molekularen Signalsonden gefolgt. Das Influenza-A-und B-Test ist benutzerfreundlich und benötigt minimale Hands-on-Zeit auszuführen.

Schnelle molekulare Erkennung und Differenzierung von Influenza-Viren A und B

Influenza is a contagious respiratory illness caused by influenza viruses A and B in humans and causes a significant amount of morbidity and mortality ...

Das übergeordnete Ziel dieses Assays ist es, eine Influenzavirusinfektion bei Patienten mit Atemwegserkrankungen zu diagnostizieren oder auszuschließen. Diese Methode kann helfen, wichtige Fragen im Bereich der klinischen Diagnostik zu beantworten, wie z. B. die Diagnose der Hauptursachen von Atemwegsinfektionen. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass es sich um eine schnelle Methode handelt, die in der Terminpflege eingesetzt werden kann.Das Verfahren wird von Sam Kaplan, einem Techniker aus unserem Labor, vorgeführt. Um eine Nasenabstrichprobe zu entnehmen, führen Sie den Tupfer in das Nasenloch ein, das die sichtbarste Drainage aufweist oder am stärksten verstopft ist. Schieben Sie den Tupfer mit sanfter Drehung in das Nasenloch, bis er auf Widerstand trifft, und drehen Sie ihn mehrmals gegen die Nasenwand, bevor Sie ihn langsam aus dem Nasenloch entfernen.Bewahren Sie anschließend den Tupfer auf und transportieren Sie ihn in einem Fläschchen mit drei Millilitern viralem Transportmedium. Bringen Sie dann die Probe und den blauen Probenbehälter vor dem Test auf Raumtemperatur. Die orangefarbene Testbasis kann getestet werden, ohne dass sie auf Raumtemperatur erwärmt

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Research

Forschung

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie und Infektion

Rettung von Influenza A-Viren von Plasmid-DNA ist eine grundlegende und wichtige experimentelle Technik, die Influenza-Forscher an rekombinanten Viren zu erzeugen, um mehrere Aspekte in der Biologie des Influenza-Virus zu untersuchen und als potentielle Vektoren oder Impfstoffe verwendet werden können.

Erzeugung von rekombinanten Influenza Virus von Plasmid-DNA

ampliPHOX kolorimetrischen Nachweis Technologie wird als eine kostengünstige Alternative zu Fluoreszenzdetektion für Mikroarrays vorgestellt. Basierend auf Photopolymerisation, produziert ampliPHOX festen Polymer-Spots, die mit bloßem Auge in nur wenigen Minuten. Die Ergebnisse werden dann abgebildet und automatisch interpretiert mit einer einfachen, aber leistungsstarken Softwarepaket.

ampliPHOX kolorimetrischen Nachweis einer DNA Microarray für Influenza

Ein einfaches Slot-Blot-Methode wurde für die Quantifizierung von Influenza Virus Hämagglutinin und Neuraminidase mit universellen Antikörper, die gegen ihre stärksten konservierten Sequenzen durch bioinformatische Analysen identifiziert entwickelt. Dieser innovative Ansatz kann eine sinnvolle Alternative zu quantitativen Bestimmung aller viralen Hämagglutinin und Neuraminidase.

Quantitative Analysen aller Influenza Typ A Viral Hämagglutininen und Neuraminidasen mit Universal Antikörper in Einfache Slot Blot Assays

Diese Studie beschreibt Diagnose der Aviären Influenza bei Wildvögeln mit einem tragbaren rRT-PCR-System. Die Methode nutzt die Vorteile der gefriergetrockneten Reagenzien auf Wildvögel in einem Nicht-Labor-Einstellung, die typisch für einen Ausbruch Szenario Bildschirm. Verwenden von molekularen Werkzeugen bietet genaue und empfindliche Alternativen für eine schnelle Diagnose.

Schnelle Diagnose der Aviären Influenza Virus bei Wildvögeln: Verwendung eines tragbaren rRT-PCR und gefriergetrocknet Reagenzien in das Feld

Diese Methode beschreibt die Verwendung von Infrarot-Farbstoff basierende Imaging-System für den Nachweis von H1N1 in bronchioalveolar Lavage (BAL) Flüssigkeit von infizierten Mäuse mit einer hohen Empfindlichkeit. Diese Methodik in einem 96 durchgeführt werden kann - oder 384-Well-Platte, erfordert &lt;10 ul Volumen von Testmaterial und hat das Potenzial für die gleichzeitige Screening von mehreren Erregern.

High-Throughput Nachweisverfahren für Influenza-Virus

Das Video zeigt einen Assay zur Quantifizierung der Influenzaviren A und B. Dieser Assay verwendet eine Nicking-Endonuklease-Amplifikation mit Influenza-spezifischen Primern und eine Zieldetektion mit molekularen Beacon-Sonden.

Ein molekularbasierter Assay zur Quantifizierung von Influenza-A- und -B-Viren

Eine integrierte Mikrofluidvorrichtung thermoplastischen Chip zur Verwendung als molekulare Diagnostik entwickelt. Der Chip führt Nukleinsäureextraktion, reverse Transkriptase und PCR. Methoden zur Herstellung und den Betrieb der Chip beschrieben.

Mikrofluidischen Chip Herstellung und Verfahren zur Influenza Detect

Diese Studie beschreibt ein   Imaging-basierte Mikroneutralisationstest auf die antigenen Beziehungen zwischen Viren zu analysieren. Das Protokoll verwendet einen Flachbettscanner und hat vier Schritte, einschließlich der Titration Titration Quantifizierung, Neutralisierung und Neutralisierung Quantifizierung. Der Test funktioniert gut mit aktuellen zirkulierenden Influenza A (H1N1) pdm09, A (H3N2) und B-Viren.

Optimierung eines Assay Quantitative Mikroneutralisations

Wir beschreiben die Verwendung eines phänotypischen fluoreszenzbasierten Neuraminidase-Hemmt die Anfälligkeit von Influenza A und B Viren in die Neuraminidase-Hemmer Klasse von antiviralen Medikamenten zu beurteilen.

Fluoreszenz-basierte Neuraminidase-Inhibitionsassay die Empfänglichkeit der Influenza-Viren an die Neuraminidase-Inhibitor-Klasse von Anti-Virus zu beurteilen

Wir präsentieren ein Protokoll zur Verwendung eines Protein-Mikroarrays, das durch den Druck von Influenza-Antigenen auf nitrozellulosebeschichtete Dias konstruiert wurde, um gleichzeitig Serum für mehrere Antikörper-Isotypen gegen über 250 Antigene aus verschiedenen Virusstämmen zu sonden, Messung der Breite von Serumantikörpern über Virussubtypen hinweg.

Verwendung eines Influenza-Antigen-Mikroarrays zur Messung der Breite von Serum-Antikörpern über Virussubtypen hinweg

Wir präsentieren zwei sondenbasierte, einstufige RT-qPCR-Kits für gängige Atemwegsviren. Der erste Test ist für SARS-CoV-2 (N), Influenza A (H1N1 und H3N2) und Influenza B. Die zweite ist für SARS-Cov-2 (N) und MERS (UpE und ORF1a). Diese Assays können in jedem spezialisierten Labor erfolgreich implementiert werden.

Entwicklung von Multiplex-Real-Time-RT-qPCR-Assays zum Nachweis von SARS-CoV-2, Influenza A/B und MERS-CoV

Erfahren Sie die schnelle molekulare Erkennung von Influenza A und B mittels isothermer Amplifikation und Molecular-Beacon-Sonden. Diese Methode liefert Ergebnisse in 15 Minuten für die klinische Diagnostik.

Schnelle molekulare Erkennung und Differenzierung von Influenza-Viren A und B

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