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DOI: 10.3791/54626-v
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Hier zeigen wir, wie man die Regeneration in der Sternseeanemone Nematostella vectensis, einem Modell-Nesseltierchen, induziert und überwacht. Wir zeigen, wie die Regeneration mit Hilfe eines morphologischen Staging-Systems amputiert und kategorisiert werden kann, und wir verwenden dieses System, um die Notwendigkeit der Autophagie in regenerierenden Polypenstrukturen aufzudecken.
Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, die vorhersagbare Reihe morphologischer Veränderungen zu veranschaulichen, die während der Regeneration eines vollständigen Polypen aus einem winzigen Gewebeabschnitt auftraten, der von der aboralen Spitze von Nematostella vectensis entfernt wurde. Diese Methode kann helfen, Schlüsselfragen der Regenerationsbiologie zu beantworten, z. B. wie sich Zellen an der Stelle einer Wunde reorganisieren und einsetzen, um die fehlenden Strukturen wieder herzustellen. Die Idee zu dieser Methode hatte ich zuerst, weil ich sehen wollte, wie sich ein relativ komplexer Polyp mit der geringsten Menge an morphologischer Information wieder zusammensetzen kann. Die visuelle Demonstration dieser Methode ist von entscheidender Bedeutung, da das Fortschreiten des Stadiums nach der ersten Verwundung manchmal durch eine Schleimhaut verdeckt wird.
Im Allgemeinen werden Personen, die neu in dieser Methode sind, Schwierigkeiten haben, eine vollständige Trennung des Gewebes an der Wundstelle zu erreichen, da der Polyp weich, klebrig und gallertartig ist. Beginnen Sie dieses Verfahren mit der Konditionierung von Nematostella vectensis, wie im Textprotokoll beschrieben. Bei dieser Technik ist es besonders wichtig, dass die ausgewählten Tiere gleich groß sind und die gleiche Kulturgeschichte haben, wie z. B. identische Fütterung und andere Zustandsparameter.
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