Name: Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Modell von Neugeborenen Stroke in P10 Ratten (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-04-21T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 56 s
Description: Lernen Sie das transiente Mittelhirnarterienverschluss-Modell für Neugeborenen-Schlaganfall-Forschung bei P10-Ratten. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung von Verletzungsmechanismen und therapeutischen Strategien im sich entwickelnden Gehirn.

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Die Finanzierung erfolgte durch die NIH K08 NS064094 und UCSF REAC Zuschüsse. Die Autoren danken Nikita Derguin, Zinalda Vexler und Joel Faustino für ihre Unterstützung bei der Entwicklung dieser Technik.

Alle Tierforschung wurde von der University of California, San Francisco Ausschuss für Tierforschung genehmigt und wurde in Übereinstimmung mit dem Leitfaden für die Pflege und Verwendung von Labortieren (US Department of Health and Human Services, Veröffentlichungs - Nr 85-23, 1985 durchgeführt ). Die Tiere wurden eng von Tierärzten der UCSF Institutional Animal Care und Use Committee (IACUC), akkreditiert durch AAALAC überwacht. Eine weibliche Sprague-Dawley-Ratte mit einem 8 Tage alten Wurf (10 Welpen pro Wurf) erhalten. Die Mutter und ihre Welpen wurden Nahrung und Wasser ad libitum gegeben und in einer temperatur- und lichtgesteuerte Tierstation mit täglichen Anreicherung pro IACUC Protokoll untergebracht, bis die Welpen 10 Tage alt waren. Alle chirurgischen Instrumente in diesem Verfahren verwendet wurden autoklaviert Sterilität zu gewährleisten. Sterility von Instrumentenspitzen wird während der Operation beibehalten. 1. Middle Cerebral Artery Occlusion <ol><li> Wiegen Sie die Welpen und ensure, dass es das richtige Gewicht (19-21 g). Anesthetize den Welpen in 3% Isofluran in 100% O 2 und stellen Sie sicher , dass es keine Antwort auf einen Fuß Prise ist. Aufrechterhaltung der Körperoberflächentemperatur zwischen 35,5 ° C und 37 ° C mit der Verwendung von einem Heizkissen unter der chirurgischen Stufe. </li><li> Sichern das Tier in einer Rückenlage mit Klebeband über den Schulterbereichen. Mit einem sterilen Wattestäbchen, Tupfer den vorderen Halsbereich mit Povidon-Iod-Lösung mit einem Tupfer von 70% Ethanol in Wasser bidest, zwischen jeder alternierenden Lösung für vier Tupfer insgesamt. </li><li> Vor Ort infiltriert 0,25% Bupivacain in die geplante Einschnittstelle. Verwendung eines Stereoskop, stellen eine Mittellinienincision 5 bis 7 mm anteriore zervikale Inzision der Arteria carotis communis (CCA) zu belichten. Platzieren 2-4 Retraktoren den Hohlraum offen ist und die Arterie freigelegt zu halten. </li><li> Suchen Sie die Arteria carotis interna (ICA), A. occipitalis (OA) und A. carotis externa (ECA). Bräutigam die Arterien eine klare Sicht zu bekommen. sein Autoeful nicht den Vagusnerv zu stören. HINWEIS: Bei scheinoperierten Welpen wird die inicision offen gelassen und die Arterien freigelegt wird, wonach der Einschnitt geschlossen wird vernäht. Die Gesamtzeit der Anästhesie ist äquivalent zu derjenigen der Okklusion Chirurgie. </li><li> 1,5 cm geschnitten, von 6-0 Seiden geflochtene Nähfaden. Unbraid die Naht, Einzelstränge herausziehen. Achten Sie darauf, dass die einzelnen Stränge sind ordentlich und nicht ausgefranst. Hinweis: Falls erforderlich, smoothe die ausgefransten Ende durch den einzelnen Strang in sterilem Wasser eintaucht und den Strang mit Pinzettenspitzen pflegen. </li><li> Während des Nahtstrang mit 45-Grad-Pinzette, die Zange in einer geschwungenen Bogenbewegung bewegt unter dem ICA zu gehen, so daß die Pinzettenspitzen zwischen den ICA und OA entstehen. HINWEIS: Wenn die Präparation gut gemacht ist, wird dieser Schritt relativ einfach sein. Wenn die ICA und OA berühren, darauf achten, nicht die Arterien reissen, wenn die Zange mit der ICA zu isolieren. Wenn die Blutung auftritt, Druck auf die Arterie mit der Zange bisdie Blutung stoppt. Absorbiert das Blut mit einem sterilen Tupfer. </li><li> Ergreifen Sie das Ende des Nahtfadens, der durch die Zange gehalten wird, und ziehen Sie es so, dass das Ende leicht zugänglich ist. Lassen Sie den Strang aus der Zange und zurück , um die Zange aus unter dem ICA, Umkehren der Bewegung in Schritt 1.5 (1A). </li><li> Binden Sie eine temporäre Ligatur um den ICA an der Basis, in der Nähe, wo sie von der CCA trennen. Hinweis: Es ist wichtig, den Knoten zu binden, so dass das Ende des Stranges, der den Knoten ist lang genug, um (größer als 1 mm, weniger als 3 mm), um bequem zu greifen mit einer Pinzette zum Entfernen gezogen werden, während sichergestellt wird, dass es eine ist, geeignete Menge an Nähfadenstrang auf der anderen Seite des Knotens zum Zurückziehen. </li><li> einfahren sorgfältig die ICA seitlich und mit einem Clip des Stranges, um überschüssige Haut in der Nähe der Achselhöhle Bereich auf der Seite gegenüber dem Einschnitt zu befestigen. Sicherzustellen, dass dieser zurückziehenden Strang straff genug ist, den Blutfluss zu stoppen, bevor zu dem nächsten Schritt fortgefahren wird, bisdas Risiko von unkontrollierten Blutungen minimieren. Beachten Sie, dass die Arterie ist flach und blass. HINWEIS: Nicht über-Rückzug, da es einen teilweise oder vollständigen Riss des ICA verursachen kann. Der Rückzug kann einfach eingestellt wird, bevor die Arteriotomie zu machen, indem Sie auf der Seite gegenüber dem Clip auf den Strang ziehen. </li><li> Verwenden einer Pinzette 45 ° eines anderen unbraided Nähfadenstrang Schleife zu erfassen und sie unter und um das ICA, wie in Schritt 1.5. Position seitlich dieser Strang auf den Rückzug Strang (1B). HINWEIS: Dieser Schritt kann auch vor dem Zurückziehen erfolgen. Wenn Sie sich unsicher über die Qualität des Rückzugs, kann dieser Knoten sehr lose vor dem nächsten Schritt gebunden werden. </li><li> Geschnitten, um eine 0,2 mm Arteriotomie der Mitte zwischen den gebundenen und ungebundenen Ligaturen, näher an die gebundenen Ligatur irrendes. HINWEIS: Blut im abgebundenen Arterie verbleibenden durch die Arteriotomie entleeren kann, aber nicht mehr als 5 &amp; mgr; l nicht überschreiten. Bei andauernden Blutungen, vorsichtig den Rückzug Strang zieht Rückzug zu erhöhen, mit Vorsicht einesLeere die Arterie vor übermäßiger Spannung zu beschädigen. </li><li> Verwendung eines metrischen Lineals, messen die verdeckenden Naht und schneiden die Naht mit einem zusätzlichen Freibetrag von 2-3 mm zur Entfernung des Okkluders während der Reperfusion. Halten Sie den Okkluder mit 45-Grad-Zange und gerade Zange verwenden, um eine Biegung auf die entsprechende Länge zu erstellen, die MCA zu erreichen, ein Haltepunkt für den Aufstieg Markierung. HINWEIS: Eine 10 mm Länge von dem Okklusion Silikonspitzenende der Biegung für P10 Sprague Dawley oder Long-Evans-Ratten-Jungtiere in diesem Gewichtsbereich verwendet. </li><li> Unter Verwendung einer Pinzette 45 °, speisen die silikonbeschichteten Nylon Okklusion Naht in die Arteriotomie und bewegen sich die Naht an die Biegung, die den vorher festgelegten Abstand zu der MCA (1C) markiert. Stellen Sie sicher, dass Fortschritt fühlt sich glatt; sofort stoppen Fortschritt, wenn ein Widerstand zu spüren ist. Während des Vorschiebens zielt die Naht in eine Richtung, die die CC / ECA parallel ist, in Richtung des Kopfes. HINWEIS: Wenn die Naht vorgerückt vom Rücken her, in Richtungdes Tieres Wirbelsäule, kann es in die Pterygopalatinarterie (PTA) laufen. Wenn der Widerstand nach 3-5 mm des Vorschubs zu spüren ist, hat die Naht den PTA-Übergang getroffen. Zurück, um den Okkluder aus der Arterie, bis der Silikonkopf in der Nähe der Arteriotomie ist die Vorschubrichtung vor dem Einstellen. Es ist nicht notwendig, um vollständig den Okkluder aus der Arteriotomie zu entfernen. </li><li> Sichern den Okkluder durch eine temporäre Ligatur Binden, mit dem Strang aus Schritt 1,10 (1D). </li><li> Entfernen Sie den Aufroller Clip. Schneiden Sie die Stränge sowohl der temporären Ligatur, so daß der Strang der Knoten, der gezogen wird, um den Knoten zu entfernen, ist leicht mit geraden Zange greifen und ist länger als der Strang, der gezogen wird, um den Knoten zu. HINWEIS: Die Stränge kurz genug sein müssen, damit sie in dem Hohlraum nach dem Schließen nicht Gewirr. </li><li> Entfernen Sie die Retraktoren und schließen Sie den Hohlraum mit 6-0 geflochtener Seide drei vor vier unterbrochenen Nähten zu erstellen. </li><li> Entfernen Sie den Welpen ausAnästhesie und legen Sie es auf einem Heizkissen in der Raumluft. Überwachen Sie den Welpen, bis sie genügend Bewusstsein zu halten Brustlage wiedererlangt hat und sicherzustellen, dass sie vollständig, bevor es an den Damm erholt zurück. Stellen Sie sicher, dass die Welpen einen Körperoberflächentemperatur zwischen 35,5 ° C und 37 ° C hält. </li><li> Während der Okklusion, diffusionsgewichtete Magnetresonanztomographie (DW-MRI) unter Isofluran-Narkose kann verwendet werden, um die geeignete Induktion der Verletzung zu überprüfen. Abbildung 2 zeigt laufende ischämische Schädigung nachgewiesen durch DW-MRT während tMCAO 9. HINWEIS: Diffusion-gewichteten Spin-Echo-Planar-Bildgebung 10-15 min vor der Reperfusion durchgeführt wird. Das gesamte Gehirn wird mit seriellen 2 mm dicken koronalen Schnitten unter Verwendung der folgende Impulsfolge Einstellungen abgebildet: TR / TE = 5,000 / 60 ms, 4 Mittelwert, Sichtfeld = 35 mm, Datenmatrix = 128x128, Diffusionsgradienten Dauer = 20 ms, 29,7 ms = Trennung, Amplitude = 70mt / m, und B-Faktor = 1,045 s / mm 2.Tiere einen Mangel an kortikaler Beteiligung oder atypischer ischämischer Verletzung aufweisen, wie im Hirnstamm, sind ausgeschlossen. </li></ol> 2. Reperfusion HINWEIS: Occlusion wird 3 h ausgeführt, um eine moderate bis schwere Menge von Verletzungen verursachen die Striatum und Kortex beteiligt sind. <ol><li> Bei ca. 2 h und 50 min nach Verschluss der MCA, betäubt die Welpen in 3% Isofluran in 100% O 2. Pflege eine Körperoberflächentemperatur zwischen 35,5 ° C und 37 ° C mit der Verwendung von einem Heizkissen unter der chirurgischen Stufe. </li><li> Entfernen Sie die unterbrochenen Nähte aus Schritt 1.16 und suchen Sie die Kreuzung, die durch die beiden Ligaturen und das hintere Ende des verdeckenden Naht markiert. HINWEIS: Sham-operierten Tieren induziert und für eine entsprechende Zeitperiode an die okkludierte Tieren unter Narkose bleiben. Der Schnitt wird wieder geöffnet und geschlossen vernäht. Für scheinoperierten Tiere, gehen 2,11 zu treten. </li><li> sorgfältig untiedie seitlichen Knoten zuvor in Schritt 1.14 durch Ziehen des längeren Stranges gebunden. HINWEIS: Wenn es Widerstand ist, den Knoten in ungebundenen, um sicherzustellen, zu stoppen, dass der richtigen Strang des Knotens gezogen wird. Wenn der Widerstand weiter erhöht Vergrößerung für eine bessere Sicht. Seien Sie vorsichtig, wenn Aufhebung der Bindung, wie es möglich ist, die Arterie während dieses Schrittes zu beschädigen. </li><li> Entfernen Sie den Nahtmaterialstrang aus dem Hohlraum. </li><li> aus der Arterie bei genau 3 Stunden nach MCA-Okklusion, langsam die verdeckende Naht zurück. Es wird kein Widerstand. HINWEIS: In den meisten Fällen wird es keine Blutungen. Wenn eine kleine Menge von Blutungen auftritt, Druck auf die Arterie an der Arteriotomiestelle. </li><li> Verwenden einer Pinzette Druck auf die Arteriotomie anzuwenden, da der nächste Schritt für Reperfusion ICA Blutfluß wieder herstellt. </li><li> Sorgfältig löst die mediale knot 2.3 das gleiche Verfahren wie in Schritt verwendet wird. </li><li> Entfernen Sie den Nähfadenstrang aus dem Körper und gelten Blutungen ein Hämostatikum auf die Arteriotomie zu stoppen. </li&gt; <li> Stellen Sie sicher, dass die Blutung zum Stillstand gekommen ist. HINWEIS: Die Rückkehr der ursprünglichen Form und roter Farbe der Arterie bestätigt, dass ICA Blutfluss wieder hergestellt ist. </li><li> Entfernen Sie die Retraktoren und schließen Sie den Hohlraum mit drei vor vier Nähten von 6-0 geflochtenen Seide. </li><li> Entfernen Sie die Welpen aus der Narkose und legen Sie es auf einem Heizkissen in der Raumluft. Überwachen Sie es, bis es war ausreichend wieder zu Bewusstsein zu Brustlage zu halten und vollständige Genesung sicherzustellen, bevor sie an den Damm zurück. Stellen Sie sicher, dass die Welpen einen Körperoberflächentemperatur zwischen 35,5 ° C und 37 ° C hält. </li><li> Überprüfen Sie die Welpen täglich für 5 Tage. die Inzisionsstellen eng für eine angemessene Heilung Recprd ihre Gewichte und inspizieren. Entfernen Sie die Nähte nach 7-14 Tagen. Post-tMCAO Verletzung kann mit MRI abgebildet werden, wenn 9 gewünscht. HINWEIS: Die Tiere können bis zu 1 g Gewicht am ersten Tag verlieren, sondern wird in der Regel das Gewicht ohne Eingriff wieder sein und sich in einer ähnlichen wiegent Bereich zu Kontrollen von Tagen 4-5. In seltenen Fällen kann ein Welpe übermäßiges Gewicht verlieren oder Schwierigkeiten Fütterung hat, orale Gabe erfordert 2-3 Tage für Feeds. </li><li> Bei P21 können Verletzungen zuverlässig mit sensomotorische Verhaltenstests, wie RotaRod oder Zylinderhaltung beurteilt werden. Kognitive Tests können bereits 4-6 Wochen alt durchgeführt werden Einschätzungen wie neuartige Objekterkennung oder das Morris - Wasserlabyrinth 13. </li><li> Euthanize die Ratten durch intraperitoneale Injektion von Euthasol (50 mg / kg) für Hirn Ernte 11, 12. </li><li> Histologische Analyse Verletzungs Volumen oder Reaktion auf Interventionen beurteilen können mit Kresylviolett oder H &amp; E - Färbung (Abbildung 3) 10 durchgeführt werden. </li></ol>

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Die Autoren haben nichts offenzulegen.

Kritische Schritte innerhalb des Protokolls Erstens ist es wichtig , Normothermie von der Einleitung der Narkose bis zum vollständigen Genesung zu halten, da es Auswirkungen sowohl Hypothermie 17 und Hyperthermie 18 auf dem Fortschreiten der Hirnschädigung in beiden unreifen und reifen Tieren bekannt sind. Zweitens, während das Tier zu sichern und Zurückziehen des Einschnitt, optimale Positionierung Atmung zu überwachen und sicherzustellen, dass die Luftröhre frei von Kompression ist unerlässlich. Drittens vermeiden Quetschen oder die Vagusnerv-Stretching, wie diese Veränderungen der Herzfrequenz mit Vagusstimulierung verursachen kann. Viertens, weil das Zurückziehen des ICA notwendig ist, Blutungen während der Arteriotomie zu steuern, muss die Aufmerksamkeit auf den Grad der Spannung während des Rückzugs bezahlt werden, um die Arterie zu beschädigen. Wenn die Arterie von Rückzug reißt, oder wenn es eine schlechte Arteriotomie Einschnitt ist, sollte das Tier von der Analyse des Risiko aufgrund ausgeschlossen werdenvon Blutungen und schlechter Reperfusion. Technische Änderungen und Fehlersuche Mit MRT als Leitfaden kann die Fadenlänge optimiert werden, um sicherzustellen, dass die Silikonspitze richtig die MCA verschliesst die fokale Ischämie zu erstellen. Wenn MRT nicht verfügbar ist, können Welpen vor der Reperfusion eingeschläfert werden für die Präparation der Platzierung der Naht sichtbar zu machen. Stellen Sie die Fadenlänge nach Bedarf. Das Pup Gewicht korreliert stark mit den verschließenden Fadenlänge Anforderungen. Die Okklusionszeit kann modifiziert werden, um den Grad der Verletzungsschwere anzupassen. Darüber hinaus Nahtform und Länge sind kritisch. Für P10 Sprague-Dawley-Ratten und Long Evans mit einem Gewicht von 19-21 g, beträgt 10 mm die optimale Länge des Einsetzens in unserer Erfahrung. Ein weiteres Einsetzen des verdeckenden Naht kann in der Perforation des MCA führen. Darüber hinaus führt die Konsistenz in der Form des verdeckenden Fadens in jeder Operation in einer erhöhten Konsistenz Verletzungs pattern 19, 20. Aus diesem Grund empfehlen wir professionell hergestellten Nähte für diesen Zweck verwendet wird. Es ist auch wichtig zu beachten, dass die Verletzungsmuster zwischen Praktikern aufgrund scheinbar winziger Unterschiede in Technik unterscheiden. Einschränkungen der Technik Die Durchführung dieser Technik in einem kleinen, Nagetier Entwicklung erfordert viel Erfahrung. Wenn es richtig durchgeführt wird, ist der Chirurg in der Lage, ein sehr konsistentes Verletzungsmuster über Tiere verschiedener Größen verursachen und eine Überlebensrate von mehr als 95% zu erreichen. Darüber hinaus sind geeignete chirurgische Instrumente unerlässlich. Chirurgische Instrumente müssen gut gepflegt werden, um sicherzustellen, dass alle Instrumentenspitzen richtig nähern. Bedeutung dieser Technik in Bezug auf bestehende oder alternative Methoden Während Hypoxie-Ischämie oder die Reis-Vannucci Modell 2 </sup&gt;, wird am häufigsten hypoxischischämischer Verletzung im sich entwickelnden Gehirn zu studieren verwendet wird, ist es wichtig, dass dieses Modell von tMCAO unterscheidet sich dadurch, dass von HALLO zu beachten Ischämie transienter fokaler ohne globale Hypoxie ist, durch eine Reperfusion Phase folgt, wenn die Hindernis entfernt wird und der Blutfluss wieder hergestellt wird. Dies bewirkt, dass eine konsistente und reproduzierbare Verletzungen und ist klinisch translationale durch eine Verletzung Muster ähnlich dem in Vollzeit Neugeborenen Schlaganfall gesehen verursacht. Dies ermöglicht die Untersuchung von fokalen Verletzungsmustern und Ausgleichsreaktionen in unversehrten Geweben. Zukünftige Anwendungen nach dieser Technik zu meistern Dieses Modell ist ähnlich wie die häufigste Ursache von Schlaganfällen bei menschlichen Neugeborenen, eine transiente okklusiven Thrombus , die 11, 21 während der perinatalen Periode auftritt. Die Ätiologie ist nicht ganz klar und ist wahrscheinlich multifaktoriell, aber es ist in den meisten Fällen t vermuteto von Embolien ergeben sich aus der Plazenta vorbei 11. Darüber hinaus Anomalien viele Neugeborene mit vermutetem perinatalem Schlaganfall häufig vorhanden mit späterer Anfallsaktivität oder subtiler fokaler neurologischer Untersuchung 22. Dies macht die Verwendung eines einheitlichen, translationale Verletzungsmodell entscheidende Mechanismen der Schädigung Progression und mögliche therapeutische Strategien zu identifizieren.

Schlaganfall während der Neugeborenenperiode ist eine wesentliche Ursache für Tod und Behinderung, in so viele wie 1 in 2300 Lebendgeburten 1 auftreten. Dies führt zu veränderten Zentralnervensystementwicklung und erhöhte Morbidität langfristige, einschließlich einer erhöhten Inzidenz von Epilepsie, Zerebralparese, geistige Retardierung, und andere Arten von Motor oder kognitiver Dysfunktion. Die lebenslangen Auswirkungen des frühen Schlaganfalls machen translationale Tiermodelle wesentlich für die Mechanismen der Schädigung und Reparatur in dieser Population untersuchen, einschließlich den Strategien für das verletzte Gehirn zu schützen oder Reparatur zu verbessern. Verschiedene Ischämie Modelle wurden zu studieren Hirnverletzungen bei erwachsenen Tieren verwendet, und während die Reis-Vannucci (Modified Levine) 2 - Verfahren üblicherweise verwendet wird , hypoxischischämischer Verletzungen in das sich entwickelnde Gehirn, fokale Ischämie-Reperfusion ist eine deutliche Mechanismus der Schädigung zu studieren Brenn Verletzungen verursachen, mit einem verletzten Kern und penumbra und unversehrtes entfernt liegendes Gewebe. Die Koizumi 3 und 4 Longa Modelle wurden in erwachsenen Ratten entwickelt , um transiente Okklusion der Arteria cerebri media über die Arteria carotis communis (CCA) und Arteria carotis externa (ECA) zu erreichen, respectively. In beiden Modellen permanent Ligatur und Kauterisation der Arterie Zweige sind wichtige Blutungen zu minimieren und das chirurgische Verfahren zu straffen, die auch negative Auswirkungen auf das Tier die Fähigkeit, nach einer Verletzung zu füttern und zu Gewichtszunahme führt. Darüber hinaus gibt es verschiedene Verletzungsmechanismen im unreifen Gehirn und spezifische Muster von Verletzungen als Folge gesehen. Mehr photothrombotic Schlaganfall (Rose-Bengal - Methode) 5 und permanente MCA Ligation 6 wurden zu studieren Neugeborenen und Erwachsenen Schlaganfall vor kurzem verwendet. Sowohl photothrombotic Schlaganfall und MCA Ligation schaffen dauerhafte Veränderungen der Hirndurchblutung, die in einem Mangel an reperfus führenIon. Reperfusion ist eine kritische Komponente der Entwicklung und Progression von fokaler Verletzung, mit erhöhter Exzitotoxizität, die Bildung freier Radikale, und die Produktion von Stickoxide zu verzögerten Zelltod führt , die Kaskaden beinhaltet Signalisierung , die 7 von der ischämischen Phase verschieden sind. Hypoxie-Ischämie beinhaltet permanente Ligatur einseitige Karotis durch globalen Hypoxie gefolgt, die auch beim Menschen von der Ursache für hypoxische-ischämische Verletzung unterscheidet und keine konsistenten fokale Verletzungsmuster verursachen, so dass Untersuchung des verletzten Kerns und Penumbra schwieriger. Wir haben zuvor eine nicht-hämorrhagische Ischämie-Reperfusion Hubmodell in unreifen Ratten unter Verwendung von transienter Okklusion der Arteria cerebri media (MCAO) 8, 9, 10 beschrieben. Dies ist eine weniger invasive Methode, die Zugriffe und verschliesst die MCA durch die Arteria carotis interna ohne permanenten ligatiauf oder Kauterisation. Dies stellt ein Modell der Verletzung ähnlich die häufigste Ursache für einen Schlaganfall in der perinatalen Periode 11, 12. Dieses Ischämie-Reperfusion-Modell der Schädigung führt zu Schäden an den ipsilateralen Striatum und parieto-temporale Kortex. Dieses Modell der tMCAO ermöglicht auch die Kontrolle über die Schwere der Verletzung durch die Dauer der Okklusion variiert. Die Untersuchung von Signalwegen und histologischen Veränderungen in den verletzten Kern und Penumbra und in der unversehrten ipsilateralen und kontralateralen Gewebe können die Mechanismen der Schädigung und Reparatur im unreifen Gehirn aufzuklären. Diese Studie wird diese wichtige Verletzungsmodell für das sich entwickelnde Gehirn nachweisen.

<table><tbody><tr><td>Isofluoran</td><td>Henry Schein</td><td>50033</td><td>Anästhetikum, bei 3%&nbsp;</td></tr><tr><td>Trinokulares Surgioskop</td><td>World Precision Instruments</td><td>PSMT5N</td><td></td></tr><tr><td>Heizkissen</td><td>Sunbeam</td><td>000731-500-000 IR-Thermometer</td><td>mit niedriger bis mittlerer Einstellung</td></tr><tr><td></td><td>Extech Instruments</td><td>72-5270</td><td></td></tr><tr><td>Retraktionsset für Kleintiere</td><td>Fine Science Tools</td><td>18200-20</td><td></td></tr><tr><td>CermaCut Schere</td><td>Fine Science Tools</td><td>14958-09</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5SF Pinzette</td><td>Fine Science Tools</td><td>112522-00</td><td>2x</td></tr><tr><td>Dumont #5/45 Pinzette</td><td>Fine Science Tools</td><td>11251-35</td><td>2x</td></tr><tr><td>B-2 Micro Clamp</td><td>Fine Science Tools</td><td>00398-02</td><td></td></tr><tr><td>Regeln für die Klemmanwendung</td><td>Fine Science Tools</td><td>00072-14</td><td></td></tr><tr><td>Micro Vannas Schere</td><td>Fine Science Tools</td><td>15000-03</td><td>2mm</td></tr><tr><td>Schneide Okklusionsnähte</td><td>Doccol</td><td>602123PK10</td><td>701712PK5Re</td></tr><tr><td>Lineal</td><td>Fine Science Tools</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Blutstillungsmittel&nbsp;</td><td>Avitene</td><td>DVL1010590</td><td></td></tr><tr><td>6-0 Perma-Hand Silk Reverse CuttingSuture</td><td>Ethicon</td><td>769G</td><td></td></tr><tr><td>Euthasol</td><td>Virbac</td><td>710101</td><td>0,22 mL/kg</td></tr><tr><td>Applikatoren mit Wattespitze</td><td>Henry Schein</td><td>100-9249</td><td></td></tr><tr><td>Laborband</td><td>VWR</td><td>89097-990</td><td></td></tr></tbody></table>

transient middle cerebral artery occlusion modell von neugeborenen stroke in p10 ratten

Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Model of Neonatal Stroke in P10 Rats

Eine Reihe von Tiermodellen wurden verwendet, um hypoxisch-ischämische Verletzungen, traumatische Verletzungen, globale Hypoxie oder dauerhafte Ischämie sowohl im unreifen als auch im reifen Gehirn zu untersuchen. Ein Schlaganfall tritt beim Menschen häufig in der Perinatalperiode auf, und die transitorische Ischämie-Reperfusion ist die häufigste Form des Schlaganfalls bei Neugeborenen. Die Reperfusionsphase ist eine kritische Komponente des Fortschreitens der Verletzung, die sich über einen Zeitraum von Tagen bis Wochen erstreckt, und der endogenen Reaktion auf die Verletzung. Dieses Rattenmodell des transienten Verschlusses der mittleren Hirnarterie (tMCAO) am postnatalen Tag 10 (p10) erzeugt eine einseitige, nicht-hämorrhagische fokale Ischämie-Reperfusionsverletzung, die zur Untersuchung der Mechanismen der fokalen Schädigung und Reparatur im Vollzeitäquivalent des Gehirns verwendet werden kann. Das Verletzungsmuster, das durch tMCAO erzeugt wird, ist konsistent und hochgradig reproduzierbar und kann mit MRT oder histologischen Analysen bestätigt werden. Die Schwere der Verletzung kann durch Änderungen der Okklusionszeit und andere Methoden, die besprochen werden, manipuliert werden.

Die Schwere der durch tMCAO verursachten Schädigung ist stark abhängig sowohl von der Okklusion Zeit und der Erfahrung des Chirurgen. Eine 90-min Okklusion erzeugt oft ein leichtes Verletzungsmuster zu moderieren, während 3 h eine moderaten bis schweren Verletzungen erzeugt. Schwere der Verletzung kann durch eine Vielzahl von Methoden, einschließlich MRT, Histologie, oder kurz- oder langfristigen Verhaltensanalysen bewertet werden. Abbildung 2 zeigt eine Beispiel für die DW-MRI durchgeführt 75 min in eine 90-min Okklusion, ischämischer Verletzung der Bestätigung der ipsilateralen Hemisphäre beteiligt sind . Diffusionsgewichtete Bildgebung Diffusion in dem ipsilateralen Striatum und die Mehrheit der ipsilateralen Kortex, ohne kontralateralen Veränderungen erhöht demonstriert, während der akuten ischämischen Phase. Dies korreliert mit einem moderaten Niveau der langfristigen Schädigung sowohl die Rinde und die tiefe graue Substanz beteiligt ist. Occlusion der MCA Ergebnisse inZelltod, die für weniger schwere Verletzungen im Striatum beginnt und entwickelt kortikalen und hippokampalen Verletzung für längere Verschlusszeiten und schwere Verletzungen Verschlechterung. Bei der Optimierung der OP - Technik, wie die Naht Einbaulänge zu bestimmen, wird MRI sehr zu empfehlen, da es für die Bestätigung der richtigen Nahtplatzierung und Visualisierung von Ödemen und Verletzungen Progression während der Okklusion 14 erlaubt, 15, 16. Wenn MRT nicht verfügbar ist, H &amp; E oder Kresylviolett Färbung sind einfach und zuverlässig histologische Methoden Verletzungen Morphologie zu bestimmen und kann sowohl in frühen und späten Zeitpunkt verwendet werden, nachdem der tMCAO. Abbildung 3 zeigt ein moderaten bis schweren Verletzungen Muster auf histopathologische Untersuchung nach einer 3 h Okklusion, Zystenbildung demonstriert und Volumen im ipsilateralen Striatum und Kortex. <p class="jove_content" fo:keep-together.within-page="1" unvoreingenommene stereo quantifizierung von cresyl-violett-gef schnitten das verh ipsilateral zur kontralateralen hemisph volumen zu berechnen best ipsilaterale isch reperfusionssch insbesondere wird nachdem tier mit euthasol an wurde gehirn durch transkardiale perfusion in m pbs paraformaldehyd geerntet. folgende nacht nachfixierung und saccharose gesamte auf mgr intervallen geschnitten jeder zw abschnitt ausgew montiert ist cresylviolett gef>10. Selbst bei leichten Verletzungen, Bewegungsänderungen, wie Kreise und Hemiparese, wird während der Okklusion Zeit zur Kenntnis genommen. Mit schweren Verletzungen, werden diese Änderungen nach der Reperfusion bestehen bleiben. Zusätzliche Verhaltenstests können die Schwere der Verletzung zu beurteilen verwendet werden, einschließlich RotaRod oder Zylinderaufzuchttests für Sensomotorik und das Morris-Wasserlabyrinth fürkognitive Funktion 13. <img alt="Abbildung 1" src="/files/ftp_upload/54830/54830fig1.jpg"> Abbildung 1: Live - OP - Bilder des tMCAO Verfahrens. (A) Der erste Nähfadenstrang ist um die ICA geschlungen, wie in Schritt 1.6 beschrieben. (B) Die erste temporäre Ligatur abgebunden und die ICA zurückgezogen wird. Der zweite Nähfadenstrang ist um den ICA geschleift, lateral den ersten Nahtfaden, wie in Schritt 1.9 beschrieben. (C) Das mit Silikon beschichtete Naht Okklusion wird in die Arteriotomie Stelle zugeführt, wie in Schritt 1.12 beschrieben. (D) Die zweite temporäre Ligatur wird bindet die Okkluder in Position zu sichern, wie in Schritt 1.14 beschrieben. Maßstabsbalken = 1 mm. <img alt="Figur 2" src="/files/ftp_upload/54830/54830fig2.jpg"> Abbildung 2: MRT Während OCCLusion Demonstriert die entsprechende Einseitige Verletzung. Von vorne nach hinten, koronalen Bildscheiben des DW-MRI, während einer 90 min Okklusion durchgeführt wird, zeigen erhöhte Diffusion den ipsilateralen Hemisphäre (Pfeile) beteiligt, die mit dem laufenden ischämische Verletzung in der akuten Phase konsistent ist. Nachdruck mit freundlicher Genehmigung von Stroke 11. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54830/54830fig2large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier</a> , um <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54830/54830fig2large.jpg" target="_blank">eine größere Version dieser Figur zu sehen.</a> <img alt="Abbildung 3" src="/files/ftp_upload/54830/54830fig3.jpg"> Abbildung 3: Einseitige Verletzung des Striatum und Cortex bei 4 Wochen nach tMCAO Einbeziehung. Posterior nach anterior, Cresyl-Violett-gefärbten koronalen Hirnschnitten (jeweils 50 &amp; mgr; m) von P38 Tieren geerntet ziemlich schwere Verletzungen zeigen (die Pfeile zeigen ipsilateral Zystenbildung und reduzierte kortikalen undstriatalen Volumen) nach einer 3 h tMCAO bei P10. Das runde Loch auf der linken Seite repräsentiert eine kontralateralen Hemisphäre Kennung. Maßstabsbalken = 5 mm. Nachdruck mit freundlicher Genehmigung von Neurobiologie der Krankheit 12. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54830/54830fig3large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier</a> , um <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54830/54830fig3large.jpg" target="_blank">eine größere Version dieser Figur zu sehen.</a>

Neonataler Schlaganfall ist eine signifikante Ursache für frühe Hirnverletzungen, die ein translationales Modell mit konsistenten fokalen Verletzungsmustern und hoher Reproduzierbarkeit erfordern, um eine Studie zu ermöglichen. Diese Studie beschreibt das detaillierte chirurgische Verfahren zur Schaffung einer nicht-hämorrhagischen, einseitigen fokalen Ischämie-Reperfusionsverletzung bei langzeitäquivalenten Nagetieren.

Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Modell von Neugeborenen Stroke in P10 Ratten

A number of animal models have been used to study hypoxic-ischemic injury, traumatic injury, global hypoxia, or permanent ischemia in both the immature ...

Das übergeordnete Ziel des transienten Verschlusses der mittleren Hirnarterie bei neonatalen Ratten ist es, ein translationales Modell des Schlaganfalls bei reif geborenen Neugeborenen bereitzustellen. Diese Methode kann dazu beitragen, Schlüsselfragen auf dem Gebiet der ischämischen Hirnverletzung bei Neugeborenen zu beantworten, indem sie die Mechanismen von Verletzungen und Reparaturen im sich entwickelnden Gehirn versteht und wie wir diese mit verschiedenen therapeutischen Strategien modifizieren können. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass sie ein physiologisch genaues Modell des fokalen arteriellen ischämischen Schlaganfalls bei Neugeborenen liefert und auch eine Reperfusionskomponente enthält, die ein wichtiger Bestandteil des Verletzungsverlaufs bei menschlichen Neugeborenen ist.Die visuelle Demonstration dieses Modells ist von entscheidender Bedeutung, da die Schritte dieser Operation sehr schwer zu erlernen sein können. Zweidimensionale Darstellungen der arteriellen Anatomie zeigen nicht immer ausreichend die komplexe Natur der 3D-Verzweigung bei der Ratte. Beginnen Sie mit dem Wiegen des Welpen, um sicherzustellen, dass er zwischen 19 und 21 Gramm wiegt.Nachdem Sie den Welpen mit inhalativem Isofluran gemäß den genehmigten Protokollen betäubt haben, stellen Sie sicher, dass es keine Reaktion auf ein Einklemmen des Fußes gibt. Halten Sie die Körperoberflächentemperatur mit einem Heizkissen unter dem chirurgischen Tisch aufrecht. Befestigen Sie das Tier in Rückenlage mit Klebeband über die Schulterregionen.Verwenden Sie sterile Wattestäbchen, um den vorderen Gebärmutterhalsbereich mit 70 % Ethanol abzutupfen, gefolgt von einem Tupfer Povidon-Jodlösung. Als nächstes infiltrieren Sie lokal 0,25% Bupivacain in die geplante Inzisionsstelle. Machen Sie dann, während Sie durch ein Stereoskop arbeiten, einen Mittellinienschnitt von fünf bis sieben Millimetern an der vorderen Halsschlagader, um die Arteria carotis communis freizulegen.Platzieren Sie zwei bis vier Retraktoren, um die Kavität offen und die Arterie freizulegen. Lokalisieren Sie als Nächstes die Arteria carotis interna, die Arteria occipitalis und die Arteria carotis externa. Entfernen Sie Bindegewebe und Fett aus den Arterien, um eine klare Sicht zu erhalten.Nachdem Sie 1,5 Zentimeter 6-0 geflochtenen Seidenfaden geschnitten haben, lösen Sie die Naht und ziehen Sie einzelne Stränge heraus. Achte darauf, dass die einzelnen Stränge sauber und nicht ausgefranst sind. Während Sie den Nahtstrang in einer 45-Grad-Pinzette halten, streichen Sie die Pinzette in einem Bogen unter die ICA, so dass die Spitzen zwischen ICA und OA hervortreten. Fassen Sie als Nächstes das Ende des Nahtstrangs und ziehen Sie es so, dass das Ende leicht zugänglich ist.Lösen Sie den Strang von der Pinzette und ziehen Sie die Pinzette unter dem ICA hervor, um die vorherige Bewegung umzukehren. Binden Sie eine temporäre Ligatur um den ICA an der Basis, die dem Trennpunkt vom CCA am nächsten liegt. Ziehen Sie den ICA vorsichtig seitlich zurück und befestigen Sie den zurückziehenden Strang dann mit einem Clip an der überschüssigen Haut in der Nähe der Achselregion auf der dem Schnitt gegenüberliegenden Seite.Stellen Sie sicher, dass der zurückziehende Strang straff genug ist, um den Blutfluss zu stoppen, bevor Sie mit dem nächsten Schritt fortfahren. Die Arterie sollte flach und blass sein. Verwenden Sie eine 45-Grad-Pinzette, um einen weiteren ungeflochtenen Nahtstrang zu greifen, und schlingen Sie ihn wie zuvor unter und um den ICA.Positionieren Sie diesen Strang quer zum Retraktionsstrang. Schneiden Sie dann eine 0,2-Millimeter-Arteriotomie auf halbem Weg zwischen der gebundenen und der ungebundenen Ligatur und irren Sie sich näher an die gebundene Ligatur. Messen Sie nun mit einem metrischen Lineal 10 Millimeter silikonbeschichtetes Nylonnaht als Verschlussnaht.Schneiden Sie die Naht mit einem zusätzlichen Aufmaß von zwei bis drei Millimetern ab, um sie während der Reperfusion zu entfernen. Halten Sie die Verschlussnaht mit einer 45-Grad-Pinzette fest und verwenden Sie eine gerade Pinzette, um eine Biegung zu erzeugen, die den Endpunkt des Vorschiebens markiert. Führen Sie die Verschlussnaht in die Arteriotomie ein und richten Sie sie parallel zur ECA und zum Kopf hin.Schieben Sie die Naht sanft vor, bis die Biegung erreicht ist. Verwenden Sie dann den Strang, der lateral des Retraktionsstrangs positioniert ist, um eine provisorische Ligatur zu binden, um die Okklusionsnaht zu sichern. Entferne den Retraktorclip und schneide dann die Stränge beider temporärer Ligaturen ab, wobei der Strang, der zum Entfernen des Knotens verwendet wird, länger bleibt als der Strang, mit dem er festgezogen wird.Entfernen Sie die Retraktoren und verschließen Sie den Hohlraum mit geflochtener 6-0-Seide, um drei oder vier unterbrochene Nähte zu erzeugen. Nehmen Sie den Welpen aus der Narkose und legen Sie ihn auf ein Heizkissen an der Raumluft. Überwachen Sie den Jungen, bis er wieder genügend Bewusstsein erlangt hat, um das Brustbein aufrecht zu erhalten, und stellen Sie sicher, dass er vollständig erholt ist, bevor Sie ihn zum Muttertier zurückbringen.Während der Okklusion kann die diffusionsgewichtete Magnetresonanztomographie verwendet werden, um die geeignete Induktion einer Verletzung zu überprüfen. Diese Bilder zeigen eine anhaltende ischämische Verletzung, die durch den Pfeil angezeigt wird und von der DW-MRT während einer transienten MCAO erkannt wurde. Etwa zwei Stunden und 50 Minuten nach dem Verschluss des MCA bereiten Sie das Operationsmaterial vor und beginnen Sie dann mit dem Reperfusionsverfahren, indem Sie wie zuvor anästhesieren.Entfernen Sie die unterbrochenen Nähte und lokalisieren Sie den Übergang, der durch die beiden Ligaturen und das hintere Ende der Verschlussnaht markiert ist. Löse vorsichtig den seitlichsten Knoten der temporären Ligatur, indem du am längeren Strang ziehst, und entferne den Nahtstrang aus der Kavität. Genau drei Stunden nach dem MCA-Verschluss ziehen Sie die Verschlussnaht langsam aus der Arterie zurück.Es sollte keinen Widerstand geben. Verwenden Sie eine Pinzette, um Druck auf die Arteriotomie auszuüben, und lösen Sie dann vorsichtig den medialen Knoten, um den Blutfluss wiederherzustellen. Nachdem Sie den Nahtstrang aus dem Körper entfernt haben, tragen Sie ein Blutstillungsmittel auf die Arteriotomie auf, um die Blutung zu stoppen.Die Rückkehr der ursprünglichen Form und roten Farbe der Arterie bestätigt, dass der ICA-Blutfluss wiederhergestellt wurde. Entfernen Sie die Retraktoren und verschließen Sie den Hohlraum mit 6-0 geflochtener Seide, um drei oder vier unterbrochene Nähte zu erzeugen. Nehmen Sie den Welpen aus der Narkose und lassen Sie ihn sich wie zuvor unter Überwachung erholen, bevor Sie ihn in den Heimkäfig zurückbringen.Untersuchen Sie die Welpen fünf Tage lang täglich. Notieren Sie ihre Gewichte und untersuchen Sie die Inzisionsstellen genau, um eine angemessene Heilung zu gewährleisten. Diese posterioren bis vorderen 50-Mikron-Kresylviolett-gefärbten koronalen Hirnschnitte, die von P-38-Tieren entnommen wurden, zeigen nach einer dreistündigen TMCAO an P-10 eine ziemlich schwere Verletzung.Der Pfeil zeigt die Bildung von ipsilateralen Zysten und ein reduziertes kortikales und striatales Volumen. Das runde Loch auf der linken Seite stellt eine kontralaterale Hemisphärenkennung dar. Wenn Sie dieses Verfahren ausprobieren, ist es wichtig, sich daran zu erinnern, dass dieses Verfahren zwar konzeptionell einfach ist, der Erfolg und die Beherrschung jedoch stundenlange Optimierung und Übung erfordern können.Einmal gemeistert, kann die Okklusion in weniger als 10 Minuten abgeschlossen werden, während die Reperfusion in weniger als fünf Minuten abgeschlossen werden kann.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Chirurgische Induktion der ischämischen Hirnschädigung in der Ratte ist ein weit verbreitetes Modell für Schlaganfall-Forschung. Hier zeigen wir die Induktion fokaler zerebraler Ischämie durch Verschluss der mittleren Hirnarterie. Visualisierung der resultierenden Infarkt durch histologischer Färbung und Magnetresonanz-Tomographie wird ebenfalls angezeigt.

Fokaler zerebraler Ischämie-Modell von Endovascular Suture Verschluss der mittleren Hirnarterie im Rat

Wir zeigen in dem Video ein Verfahren zur Herstellung einer mittleren Zerebralarterie in erwachsenen Mäusen mit einem intraluminalen Monofilament. Wir zeigen auch, wie man das Ausmaß der Hirninfarkt von 2,3,5-Triphenyltetrazoliumchlorid (TTC) Färbung zu bewerten.

Mouse Model of Middle Zerebralarterie

Quelle: Larpthaveesarp, A., et. al. Transientes Modell des Verschlusses der mittleren Hirnarterie des neonatalen Schlaganfalls bei P10-Ratten. J. Vis. exp. (2017)Dieses Video zeigt die Etablierung des Modells des Verschlusses der mittleren Hirnarterie bei einem Rattenwelpen. Die Arteria carotis interna (ICA) wird freigelegt und eine Ligatur wird gesichert, um den Blutfluss zu begrenzen. Durch die ICA wird ein Verschluss eingeführt, um die Arteria cebraralis media zu erreichen. Der Welpe darf...

Erzeugung eines Verschlusses der mittleren Hirnarterie bei einem Rattenwelpen zur Induktion einer lokalen Hirnischämie

Wir beschreiben eine sehr reproduzierbare Methode zur dauerhaften Verschluss von einem Nagetier großen zerebralen Blutgefäßen. Diese Technik kann mit sehr wenig peripheren Schäden, minimale Blutverlust, eine hohe Rate der langfristigen Überleben und konsistente Infarktvolumen Einklang mit der menschlichen klinischen Bevölkerung erreicht werden.

Permanent Cerebral Gefäßverschluss<em&gt; Über</em&gt; Double Blattschraube und Durchtrennung

Verschiedene Mausmodellen der mittleren Hirnarterie (MCAO) sind weit verbreitet in der experimentellen Hirnforschung. Hier zeigen wir das Modell der transkraniellen Dauer distalen MCAO, die im Einklang kortikalen Infarkt von einer Größe, die von der Mehrheit der menschlichen ischämische Schlaganfälle auferlegt Schaden produziert.

Modellierung Schlaganfall bei Mäusen: Permanent Koagulation der distalen A. cerebri media

Verschiedene Modelle des mittleren Hirnarterienverschlusses (MCAo) werden in der experimentellen Schlaganfallforschung eingesetzt. Hier wird ein experimentelles Schlaganfallmodell der transienten MCAo über die Arteria carotis externa (ECA) beschrieben, das darauf abzielt, den menschlichen Schlaganfall nachzuahmen, bei dem der zerebrovaskuläre Thrombus aufgrund einer spontanen Gerinnsellyse oder -therapie entfernt wird.

Modellierung des Schlaganfalls bei Mäusen: Vorübergehender Verschluss der mittleren Hirnarterien über die Arteria carotis externa

Dieses Protokoll demonstriert ein einzigartiges Mausschlagmodell mit einem mittelgroßen Infarkt und einer ausgezeichneten Überlebensrate. Dieses Modell ermöglicht es präklinischen Schlaganfallforschern, die Dauer der Ischämie zu verlängern, gealterte Mäuse zu verwenden und langfristige funktionelle Ergebnisse zu bewerten.

Ein modifiziertes transkranielles Modell für den Verschluss der mittleren Hirnarterie zur Untersuchung von Schlaganfallergebnissen bei gealterten Mäusen

Dieses Protokoll beschreibt das Modell der transienten fokalen zerebralen Ischämie bei Mäusen durch intraluminalen Verschluss der mittleren Hirnarterie. Darüber hinaus werden Beispiele für die Ergebnisbewertung mit Hilfe von Magnetresonanztomographie und Verhaltenstests gezeigt.

Transienter mittlerer Hirnarterienverschluss Modell des Schlaganfalls

Das aktuelle Protokoll beschreibt ein Rattenmodell des Verschlusses/der Reperfusion der mittleren Hirnarterien, das die anatomische Struktur der Hirngefäße bewahrt, ohne Schäden zu verursachen.

Ein Rattenmodell für den Verschluss/die Reperfusion der mittleren Hirnarterie ohne Beschädigung der anatomischen Struktur der Hirngefäße

Ziel dieser Studie war es, eine reproduzierbare Methode zur Durchführung einer Kraniektomie zu etablieren, gefolgt von permanenter, selektiver Okklusion der mittleren Hirnarterie bei Ratten zur Anwendung in experimentellen Studien zu motorischen und räumlichen Gedächtnisdefiziten.

Selektive und permanente Verschluss der mittleren Hirnarterie bei Ratten: Ein experimenteller Ansatz zur Untersuchung motorischer und räumlicher Gedächtnisdefizite

Lernen Sie das transiente Mittelhirnarterienverschluss-Modell für Neugeborenen-Schlaganfall-Forschung bei P10-Ratten. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung von Verletzungsmechanismen und therapeutischen Strategien im sich entwickelnden Gehirn.

Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Modell von Neugeborenen Stroke in P10 Ratten

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