Name: Cefoperazon behandelten Maus-Modell der klinisch relevanten Clostridium difficile Dehnungs R20291 (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-12-10T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 51 s
Description: Erfahren Sie das Cefoperazon-Mausmodell für Clostridium difficile-Infektionen mit dem Stamm R20291. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung von Krankheitsverlauf, Toxinaktivität und histopathologischen Veränderungen.

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Die Autoren danken Trevor Lawley vom Wellcome Trust Sanger Institute für C. difficile R20291 Sporen und James S. Guy vom North Carolina State University College of Veterinary Medicine für Vero-Zellen, die beide in diesem Manuskript verwendet wurden. Die Tierhistopathologie wurde in der LCCC Animal Histopathology Core Facility an der University of North Carolina in Chapel Hill mit besonderer Unterstützung von Traci Raley und Amanda Brown durchgeführt. Der LCCC Animal Histopathology Core wird teilweise durch einen NCI Center Core Support Grant (2P30CA016086-40) an das UNC Lineberger Comprehensive Cancer Center unterstützt. Wir möchten uns auch bei Vincent Young, Anna Seekatz, Jhansi Leslie und Cassie Schumacher für die hilfreichen Diskussionen über das Vero-Zell-Zytotoxizitäts-Assay-Protokoll bedanken. JAW wird durch das Ruth L. Kirschstein National Research Service Award Research Training Grant finanziert T32OD011130 von NIH finanziert. CMT wird durch den Career Development Award in Metabolomics Grant finanziert, der vom NIGMS des NIH K01GM109236 wird.

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</ol>

Die Autoren haben zu diesem Zeitpunkt nichts offenzulegen.

Dieses Protokoll charakterisiert den klinischen Verlauf von mit Antibiotika behandelten Mäusen, die mit C. difficile R20291 infiziert wurden, einschließlich Gewichtsverlust, bakterieller Besiedlung, Toxin-Zytotoxizität und histopathologischer Veränderungen im Gastrointestinaltrakt. Es gibt mehrere kritische Schritte innerhalb des Protokolls, bei denen die Liebe zum Detail unerlässlich ist. Eine genaue Berechnung des Sporeninokulums von C. difficile ist von entscheidender Bedeutung. Diese Berechnung basi...

Clostridium difficile ist ein anaerob, grampositive, sporenbildenden Bazillus, der lebensbedrohlichen Durchfall 1 verursacht. C. difficile - Infektion (CDI) ist mit einer erhöhten menschlichen Morbidität und Mortalität und die Ergebnisse in mehr als $ 4,8 Mrd. Kosten für das Gesundheitswesen pro Jahr 1-4 verbunden. Im Jahr 2013, kategorisiert die Centers for Disease Control and Prevention C. difficile als dringende Antibiotikaresistenz Risiko, was darauf hinweist , dass es eine dringende Gefahr für die öffentliche Gesundheit 1 darstellt. Derzeit Antibiotika - Behandlung mit Vancomycin und Metronidazol sind die Standardbehandlung für CDI 5 betrachtet. Leider ist Rezidiv von CDI nach erfolgreicher Behandlung mit Antibiotika hoch, in 20 auftretenden - 2,5-7 30% der Patienten. Deshalb ist die Entdeckung neuer Therapeutika gegen diese magensaftresistente Erreger notwendig. Zur Beurteilung Therapeutika gegen C. difficile, einem Tiermodell der Krankheit beim Menschen in ac annähertlinically relevante Belastung benötigt wird. Zunächst wurden Koch-Postulate für C. difficile im Jahr 1977 mit einer Clindamycin-behandelten syrischen Hamstermodell 8 etabliert. Dieses Modell wird auch heute noch verwendet auf Pathogenese 9,10 , die Auswirkungen von C. difficile Toxine zu untersuchen. Allerdings CDI im Hamstermodell führt zu einer hohen Sterblichkeit und nicht die chronische heimtückische Krankheit Manifestationen nähern , die bei Menschen mit CDI 10,11 gesehen werden kann. Auf der Grundlage der Zugänglichkeit und Verfügbarkeit von Reagenz murine Plattformen in Forschung, ist ein Mausmodell der CDI relevant. Im Jahr 2008 wurde mit einem Antibiotikum - Cocktail durch Behandlung von Mäusen eine robuste Mausmodell der CDI etabliert im Trinkwasser (Kanamycin, Gentamicin, Colistin, Metronidazol und Vancomycin) für 3 Tage , gefolgt von einer intraperitonealen Injektion von Clindamycin 12. Dies machte Mäuse anfällig für CDI und schwere Colitis. Abhängening auf der Inokulum Dosis verabreicht werden, können eine Reihe von klinischen Anzeichen und Letalität beobachtet werden dieses Modell. Seit dieser Zeit haben sich verschiedene Antibiotika - Anwendungen untersucht worden, die die murinen Darmmikrobiota verändern, Kolonisationsresistenz bis zu dem Punkt abnimmt , wo C. difficile den Magen - Darm - Trakt besiedeln können ( beschrieben in Best et al. Und Lawley &amp; Young) 13,14. In jüngster Zeit ein breites Spektrum Cephalosporin, Cefoperazon, rendert in dem Trinkwasser gegeben für 5 oder 10 Tage reproduzierbar Mäuse anfällig für CDI 15. Da die Verabreichung von Cephalosporinen der dritten Generation mit einem erhöhten Risiko von CDI beim Menschen assoziiert sind, reflektiert Verwendung des Cefoperazon Modell genauer natürlich vorkommenden Krankheits 16. Cefoperazon behandelten Mäuse anfällig für C. difficile wurden sowohl mit C. difficile - Sporen und vegetativen Zellen von einer Vielzahl von Stämmen Bereich in Frage gestellt worden klinischenRelevanz und Virulenz 17. Trotz einiger der ursprünglichen Studien C. difficile vegetativen Zellen als infektiöse Form verwendet werden C. difficile - Sporen die wichtigste Übertragungsart 18 betrachtet. In den letzten zehn Jahren, C. difficile R20291, ein NAP1 / BI / 027 - Stamm hat, entstanden Epidemien von CDI 19,20 verursacht. Wir versuchten , den klinischen Verlauf der Erkrankung zu bestimmen , wann Cefoperazon-behandelten Mäusen mit klinisch relevanten und genetisch tractable C. difficile - Stamm, R20291 herausgefordert wurden. Dieses Protokoll beschreibt die klinischen Verlauf, einschließlich Gewichtsverlust, bakterielle Kolonisation Toxin - Zytotoxizität und histopathologische Veränderungen im Gastrointestinaltrakt von Mäusen , die mit C. difficile - Sporen R20291 in Frage gestellt. Insgesamt erweist sich dieses Mausmodell eine wertvolle experimentelle Plattform für CDI annähert Krankheit beim Menschen zu sein. Dieses gekennzeichnet Mausmodell kann somit genutzt werden, um die Auswirkungen zu beurteilenneuartiger Therapeutika auf der Verbesserung der klinischen Erkrankung und über die Wiederherstellung der Kolonisierung Widerstand gegen C. difficile.

<table><tbody><tr><td>#62 Perisept Sporidicial Desinfektionsmittel Reiniger&nbsp;</td><td>SSS Navigator</td><td>48027</td><td>Dieses Produkt erfordert eine Verdünnung wie vom Hersteller empfohlen</td></tr><tr><td>0,22 & mu; m Filter</td><td>Fisherbrand</td><td>09-720-3</td><td>Alternative zur Filterplatte für einzelne Proben, die im Vero Cell Assay</td></tr><tr><td>getestet wurden 0,25% Trypsin-EDTA</td><td>Gibco</td><td>25200-056</td><td>Muss im Wasserbad bei 37 ° Celsius erhitzt werden; C vor Gebrauch</td></tr><tr><td>0,4 % Trypanblau</td><td>Gibco</td><td>15250-061</td><td></td></tr><tr><td>1 % Peniciilin/Streptomycin</td><td>Gibco</td><td>15070-063</td><td></td></tr><tr><td>10 % hitzeinaktiviert FBS</td><td>Gibco</td><td>16140-071</td><td>Muss im Wasserbad bei 37 μg erhitzt werden; C vor Gebrauch</td></tr><tr><td>1 ml Kunststoffspritze&nbsp;</td><td>BD Medical Supplies</td><td>309628</td><td></td></tr><tr><td>1x PBS</td><td>Gibco</td><td>10010-023</td><td></td></tr><tr><td>2 ml Mikrozentrifuge Schraubverschluss</td><td>Corning</td><td>430917</td><td></td></tr><tr><td>96 Well Zellkultur Flachbodenplatte</td><td>Costar Corning</td><td>CL3595</td><td></td></tr><tr><td>96 Well Filterplatte</td><td>Millipore</td><td>MSGVS2210</td><td></td></tr><tr><td>Klebedichtung</td><td>ThermoScientific</td><td>AB-0558</td><td></td></tr><tr><td>Bacto Agar</td><td>Becton Dickinson</td><td>214010</td><td>Teil von TCCFA-Platten (siehe unten)</td></tr><tr><td>Bacto Proteose Pepton</td><td>Becton Dickinson</td><td>211684</td><td>Teil von TCCFA-Platten (siehe unten)</td></tr><tr><td>Cefoperazone</td><td>MP Bioworks</td><td>199695</td><td></td></tr><tr><td>Cefoxitin</td><td>Sigma</td><td>C47856</td><td>Teil von TCCFA-Platten (siehe unten)</td></tr><tr><td>Clostridium difficile Antitoxin Kit</td><td>Tech Labs</td><td>T5000</td><td>Wird als Kontrolle für Vero Cell Assay</td></tr><tr><td>verwendet Clostridium difficile Toxin A</td><td>List Biological Labs</td><td>152C</td><td>Positivkontrolle für Vero Cell Assay</td></tr><tr><td>D-Cycloserin</td><td>Sigma</td><td>C6880</td><td>Teil von TCCFA-Platten (siehe unten)</td></tr><tr><td>Destilliertes Wasser</td><td>Gibco</td><td>15230</td><td></td></tr><tr><td>DMEM 1x Medium</td><td>Gibco</td><td>11965-092</td><td>Muss im Wasserbad bei 37 & Grad erhitzt werden; C vor der Verwendung</td></tr><tr><td>Fruktose</td><td>Fisher</td><td>L95500</td><td>Teil von TCCFA-Platten (siehe unten)</td></tr><tr><td>Hämozytometer</td><td>Bright-Line, Sigma</td><td>Z359629</td><td></td></tr><tr><td>KH2PO4</td><td>Fisher</td><td>P285-500</td><td>Teil von TCCFA-Platten (siehe unten)</td></tr><tr><td>MgSO4 (wasserfrei)</td><td>Sigma</td><td>M2643</td><td>Teil von TCCFA-Platten (siehe unten)</td></tr><tr><td>Millex-GS 0,22 &mu; m Filter</td><td>Millex-GS</td><td>SLGS033SS</td><td>Filter für TCCFA-Platten&nbsp;</td></tr><tr><td>Na2HPO4</td><td>Sigma</td><td>S-0876</td><td>Teil der TCCFA-Platten (siehe unten)</td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Fisher</td><td>S640-3</td><td>Teil der TCCFA-Platten (siehe unten)</td></tr><tr><td>Nummer 10 Einweg-Skalpellklinge</td><td>Miltex, Inc</td><td>4-410</td><td></td></tr><tr><td>PCR-Platten</td><td>Fisherbrand</td><td>14230244</td><td></td></tr><tr><td>Petrischale aus Kunststoff</td><td>Kord-Valmark Marke</td><td>2900</td><td></td></tr><tr><td>Steriler L-förmiger Zellspreader aus Kunststoff</td><td>Fisherbrand</td><td>14-665-230</td><td></td></tr><tr><td>Spritzen-Stepper</td><td>Dymax Corporation</td><td>T15469</td><td></td></tr><tr><td>Taurocholat</td><td>Sigma</td><td>T4009</td><td>Teil von TCCFA-Platten (siehe unten)</td></tr><tr><td>Ultrareines destilliertes Wasser</td><td>Invitrogen</td><td>10977-015</td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6J Mäuse</td><td>Das Jackson Laboratory</td><td>664</td><td>Die Mäuse sollten 5 - 8 Wochen alt sein</td></tr><tr><td>Olympus BX43F Lichtmikroskop</td><td>Olympus Life Science</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DP27 Kamera</td><td>Olympus Life Science</td><td></td><td></td></tr><tr><td>cellSens Dimension Software&nbsp;</td><td>Olympus Biowissenschaften</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

cefoperazon behandelten maus-modell der klinisch relevanten<em&gt; clostridium difficile</em&gt; dehnungs r20291

Cefoperazone-treated Mouse Model of Clinically-relevant Clostridium difficile Strain R20291

Clostridium difficile ist ein anaerober, grampositiver, sporenbildender enterischer Erreger, der mit zunehmender Morbidität und Mortalität einhergeht und daher eine dringende Bedrohung für die öffentliche Gesundheit darstellt. Die Rezidivrate einer C. difficile-Infektion (CDI) nach erfolgreicher Behandlung mit Antibiotika ist hoch und tritt bei 20-30% der Patienten auf, was die Entdeckung neuer Therapeutika gegen diesen Erreger erforderlich macht. Aktuelle Tiermodelle von CDI führen zu hohen Sterblichkeitsraten und entsprechen damit nicht den chronischen, heimtückischen Krankheitsmanifestationen, die beim Menschen mit CDI beobachtet werden. Um Therapeutika gegen C. difficile zu evaluieren, wird ein Mausmodell benötigt, das die menschliche Krankheit unter Verwendung eines klinisch relevanten Stammes approximiert. Dieses Protokoll skizziert das Cefoperazon-Mausmodell für CDI unter Verwendung eines klinisch relevanten und genetisch manipulierbaren Stammes, R20291. Techniken zur klinischen Krankheitsüberwachung, zur bakteriellen Zählung von C. difficile, zur Zytotoxizität von Toxinen und zu histopathologischen Veränderungen während der CDI in einem Mausmodell sind im Protokoll detailliert beschrieben. Im Vergleich zu anderen Mausmodellen der CDI ist dieses Modell bei der verabreichten Dosis nicht einheitlich letal, was die Beobachtung eines verlängerten klinischen Infektionsverlaufs ermöglicht, der mit der menschlichen Krankheit übereinstimmt. Daher erweist sich dieses Cefoperazon-Mausmodell von CDI als wertvolle experimentelle Plattform, um die Auswirkungen neuartiger Therapeutika auf die Verbesserung klinischer Erkrankungen und auf die Wiederherstellung der Kolonisationsresistenz gegen C. difficile zu bewerten.

Während einer repräsentativen Studie, 5 Wochen alte C57BL / 6-WT-Mäuse wurden mit Cefoperazon in ihrem Trinkwasser vorbehandelt (0,5 mg / ml) für 5 Tage und erlaubt eine 2-Tages-auswaschen mit regelmäßigen Trinkwasser. Mäuse wurden mit 10 &amp; sup5 ; Sporen von C. difficile R20291 via Schlundsonde am Tag 0 (1A) herausgefordert. Die Mäuse wurden für 14 Tage für die Gewichtsabnahme und klinischen Zeichen (Lethargie, Appetitlosigkeit, Durchfall und gekr...

Dieses Protokoll beschreibt die Cefoperazon Maus - Modell von Clostridium difficile - Infektion (CDI) eine klinisch relevante und genetisch-lenkbar - Stamm verwenden, R20291. Schwerpunkt auf der klinischen Krankheitsüberwachung, C. difficile Bakterien-Enumeration, Toxin Zytotoxizität und histopathologischen Veränderungen im gesamten CDI in einem Mausmodell werden im Protokoll aufgeführt.

Cefoperazon behandelten Maus-Modell der klinisch relevanten<em&gt; Clostridium difficile</em&gt; Dehnungs R20291

Clostridium difficile is an anaerobic, gram-positive, spore-forming enteric pathogen that is associated with increasing morbidity and mortality and ...

Das übergeordnete Ziel dieses Protokolls ist es, eine Schritt-für-Schritt-Anleitung zur Durchführung des Cefoperazon-Mausmodells der Clostridium-difficile-Infektion bereitzustellen, wobei besonderer Schwerpunkt auf der klinischen Krankheitsüberwachung, der Bakterienzählung, der Toxinzytotoxizität und den histopathologischen Veränderungen nach der Infektion liegt. Dieses detaillierte Protokoll wird Forschern helfen, ein Mausmodell der Clostridium-difficile-Infektion genau durchzuführen, was für die Untersuchung der Pathogenese dieses Bakteriums und die Bewertung neuartiger Therapeutika unerlässlich ist. Der Hauptvorteil der Verwendung dieses Mausmodells besteht darin, dass die Exposition gegenüber einem Antibiotikum über fünf Tage hinweg die Mäuse anfällig für die Besiedlung durch C. difficile macht und einen über längere Zeit andauernden klinischen Infektionsverlauf ermöglicht, der dem menschlichen Krankheitsbild entspricht.Beginnen Sie damit, den gewünschten C. difficile-Stamm zu entnehmen und zu wirbeln. Verdünnen Sie den Stamm in einem sterilen Wasser in einem Schraubverschlussröhrchen in einer laminaren Flusswerkbank auf eine Konzentration von zehn hoch fünf Sporen pro 25 Mikroliter. Kennzeichnen Sie die Mischung als Sporeninokulum und stellen Sie das Röhrchen 20 Minuten lang in ein Wasserbad mit 65 Grad Celsius.Als Nächstes pipettieren Sie im laminaren Flusswerk 50 Mikroliter des erhitzten Sporeninokulums in ein steriles Mikrozentrifugenröhrchen und bringen es in die anaerobe Kammer, bis es weiterverwendet wird. Füllen Sie das verbleibende Sporeninokulum in eine Ein-Milliliter-Spritze, die mit einer sterilen, gummibeschwerten Magensonde verbunden ist. Im laminaren Flusswerk nehmen Sie eine Versuchmaus und immobilisieren den Kopf, indem Sie das Tier vorsichtig am losen Hautgewebe von Nacken und Rücken fixieren.Unter Verwendung des Zeigefingers und sicherstellend, dass das Tier nicht laut wird oder Anzeichen von Belastung zeigt, immobilisieren Sie den Kopf des Tieres weiter und dehnen Sie die Speiseröhre. Halten Sie die Maus in aufrechter, vertikaler Position und führen Sie die Magensonde vorsichtig in die Seitenpartie des Mundes ein. Leiten Sie die Magensonde entlang des Gaumendaches und schieben Sie sie langsam in die Speiseröhre voran.Wenn die Nadel etwa zur Hälfte in die Speiseröhre eingeführt ist, injizieren Sie 25 Mikroliter Sporeninokulum und ziehen Sie die Nadel dann vorsichtig zurück. Stellen Sie das Tier in seinen Käfig zurück und beobachten Sie es auf Anzeichen von Husten oder Atembeschwerden, die auf eine versehentliche tracheale Applikation hindeuten könnten. Nehmen Sie anschließend die zuvor in der anaeroben Kammer gelagerte Aliquotprobe des Sporeninokulums sowie das verbleibende Sporeninokulum aus der Magensonde und stellen Sie serielle Verdünnungen im Verhältnis 1:10 in jeweils 180 Mikroliter 1x PBS her.Führen Sie vier bis fünf dieser Verdünnungen durch. Übertragen Sie unter aseptischen Bedingungen jeweils 100 Mikroliter jeder seriellen Verdünnung auf eine einzelne TCCFA-Platte. Verteilen Sie die Verdünnungsinokula mithilfe eines neuen sterilen L-förmigen Spatels jedes Mal gleichmäßig auf jeder Platte.Die Platten 24 Stunden lang unter anaeroben Bedingungen bei 37 Grad Celsius inkubieren. Anschließend die C.difficile-Kolonien auf jeder Verdünnungsplatte zählen und die koloniebildenden Einheiten berechnen, um die den Mäusen verabreichte infektiöse Dosis zu ermitteln. Um fäkale Proben von Mäusen zur Beurteilung zu sammeln, halte die Versuchsmaus zunächst leicht, aber fest am losen Hautgewebe des Nackens und des Rückens, wobei sichergestellt werden muss, dass sich das Tier nicht in Not befindet.Mit dem kleinen Finger vorsichtig den Schwanz des Tieres anheben, um den Anus freizulegen. Halten Sie ein steriles Mikrozentrifugenröhrchen mit bekanntem Gewicht direkt unter den Anus des Tieres, wobei sichergestellt werden muss, dass das Röhrchen die Maus nicht direkt berührt. Wenn das Tier defäkiert, sammeln Sie den Kotballen im Röhrchen ein.Bewahren Sie das Röhrchen bei Raumtemperatur auf, bis alle erforderlichen Proben gesammelt sind. Wiegen Sie die Röhrchen mit den Fäkalien auf einer Analysenwaage und notieren Sie die Masse auf vier Dezimalstellen genau. Berechnen Sie das Gewicht des Fäkalkügelchens, indem Sie das Gewicht des Röhrchens subtrahieren.Berechnen Sie als Nächstes eine Verdünnung im Verhältnis 1:10 des Inhalts und resuspendieren Sie ihn in 1x PBS. Verwenden Sie die Pipettenspitze, um den Fäkalieninhalt vorsichtig in Lösung zu bringen. Inkubieren Sie die Proben bei Raumtemperatur für 30 Minuten, um die Sedimentation des Inhalts zu ermöglichen.Unter anaeroben Bedingungen halten Sie die Lösungen aufrecht und stellen Sie serielle Verdünnungen jeder Probe in 1x PBS her. Überführen Sie 100 Mikroliter jeder seriellen Verdünnung auf TCCFA-Platten. Verwenden Sie einen sterilen L-förmigen Spreader und tragen Sie das Medium gleichmäßig auf die Platten auf.Inkubieren Sie die Platten 24 Stunden lang unter anaeroben Bedingungen bei 37 Grad Celsius. Zählen Sie abschließend die C.difficile-Kolonien und berechnen Sie die koloniebildenden Einheiten pro Gramm Fäkalienmaterial. Diese Abbildung zeigt das Körpergewicht der Mäuse an den Tagen nach der Infektion mit C.difficile R20291.Am Tag null wird das Ausgangsgewicht auf 100 festgelegt. Das durchschnittliche Körpergewicht der Mäuse wurde danach täglich über einen Zeitraum von 14 Tagen gemessen. Bei den infizierten Mäusen wurde von Tag zwei bis Tag sieben nach der Infektion ein signifikanter Gewichtsverlust beobachtet.Die Mäuse schienen sich ab diesem Zeitpunkt zu erholen und an Gewicht zuzunehmen. Hier ist die C. difficile-Belastung im Stuhl in den Tagen nach der Infektion dargestellt. 24 Stunden nach der Infektion waren alle Mäuse mit 107 KBE pro Gramm Stuhl besiedelt.Diese Belastung hatte sich ab Tag sieben verringert, obwohl C. difficile weiterhin vorhanden ist. Die histopathologische Untersuchung der Mäuse im Verlauf der Infektion zeigte die signifikantesten pathologischen Veränderungen im Blinddarm. Die gesamten histologischen Scorewerte des Blinddarms unterschieden sich signifikant zwischen Tag null sowie den Tagen zwei und vier nach der Infektion.Im Allgemeinen können Personen, die neu in diesem Mausmodell sind, Schwierigkeiten haben, die Berechnung und Herstellung des Sporeninokulums, das zur Infektion der Mäuse verwendet wird, sowie die Berechnung der fäkalen C.difficile-Bakterienlast durchzuführen. Bei der Durchführung dieses Protokolls ist es wichtig zu beachten, dass Änderungen der Dosis oder des Stammes der C.difficile-Sporen, die den Mäusen verabreicht werden, den Ausgang dieses Modells beeinflussen können.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie und Infektion

Quelle: Winston, J. A. et al. Cefoperazon-behandeltes Mausmodell des klinisch relevanten Clostridium difficile Stamms R20291.  J. Vis. Exp. (2016)Dieses Video demonstriert das Verfahren zur Inokulation von antibiotika-vorbehandelten Mäusen mit Clostridium difficile-Sporen , um ein murines Infektionsmodell zur Untersuchung von Pathogenese und Wirtsreaktionen zu etablieren.

Etablierung eines Mausmodells der Clostridium difficile-Infektion

Quelle: Winston, J. A. et al. Cefoperazon-behandeltes Mausmodell des klinisch relevanten Clostridium difficile Stamms R20291. J. Vis. Exp. (2016)Dieses Video demonstriert die Quantifizierung von Clostridium difficile in Fäkalproben aus einem infizierten Mausmodell mittels selektiver Kulturtechniken. Es beschreibt die Verfahren zur Probenentnahme, anaeroben Verarbeitung, serieller Verdünnung und Koloniezählung, um die bakterielle Besiedlung und die Wirts-Pathogen-Interaktionen zu bewerten.

Quantifizierung von Clostridium difficile in Fäkalproben aus einem infizierten Mausmodell

Citrobacter rodentium Infektion bietet ein wertvolles Modell zur enteralen bakterielle Infektionen zu untersuchen sowie Host Immunantwort und Kolitis bei Mäusen. Dieses Protokoll beschreibt die Messung der Barriere Integrität, pathogenen Belastung und histologische Beschädigung, die eine für die gründliche Charakterisierung von Erreger und Wirt Beiträge murine infektiöse Kolitis.

Die<em&gt; Citrobacter rodentium</em&gt; Mouse Model: Studieren Erreger und Wirt Beiträge zur Infectious Colitis

Multi-Bildgebung ist ein wertvoller Ansatz zur Untersuchung bakterieller Besiedlung in kleinen Tiermodellen. Dieses Protokoll beschreibt Infektion von Mäusen mit...

4D Imaging von Multimodalität<em&gt; Citrobacter rodentium</em&gt; Infektionen bei Mäusen

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Aufbau und Charakterisierung von UTI und CAUTI in einem Mausmodell

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Ein Protokoll zur Charakterisierung der morphologischen Veränderungen von<em&gt; Clostridium difficile</em&gt; In Antwort auf Antibiotika-Behandlung

Präsentiert hier ist eine sichere und effektive Methode, um Zebrafischlarven mit fluoreszierend markierten anaeroben C. difficile durch Mikroinjektion und nichtinvasive Mikrogavage zu infizieren.

Entwicklung eines Larval Zebrafish Infection Model für Clostridioides difficile

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Modellierung von aufsteigenden vaginalen Infektionen, Frühgeburten und neonataler Morbidität bei Mäusen

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Besiedlung mit Murine pks+ Escherichia coli unter nicht-entzündlichen Bedingungen

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Cefoperazon behandelten Maus-Modell der klinisch relevanten

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