MitoCeption: Übertragen von isolierten humanen MSC Mitochondrien an Glioblastom Stammzellen

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, zuvor isolierte Mitochondrien von Spenderzellen wie mesenchymalen Stammzellen auf Zielzellen wie Glioblastom-Stammzellen zu übertragen. Dieses Verfahren kann helfen, zentrale Fragen im Bereich des Stoffwechsels zu beantworten, wie z. B. die metabolischen und biologischen Wirkungen der Mitochondrien, die spontan zwischen Zellen übertragen werden, z. B. durch das Tunneln von Nanoröhren oder Mikrovesikeln. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass die Auswirkungen der Mitochondrien unabhängig von anderen in der Mikroumgebung vorhandenen Faktoren wie Zytokinen oder Metaboliten sowie von anderen Verbindungen beurteilt werden können, die ebenfalls in den tunnelnden Nanoröhren transportiert werden können.

Zu bildgebenden Zwecken können MSC-Mitochondrien und GSC vor dem Mitochondrientransfer mittels MitoCeption mit lebenswichtigen Farbstoffen markiert werden. Nach der Vormarkierung von GSCs mit lebenswichtigen Farbstoffen gemäß dem Textprotokoll sammeln Sie zunächst GSC-Neurosphären in einem 50-Milliliter-Röhrchen durch Zentrifugation bei 270 mal g bei 20 Grad Celsius für fünf Minuten. Verwenden Sie fünf Milliliter HBSS, um die Zellen zu waschen, und drehen Sie das Röhrchen erneut.