24. April 2017
Verhaltenstests sind der Goldstandard für die Ergebnisse nach Gehirnverletzung zu bestimmen und können das Vorhandensein von Entwicklungsstörungen bei Säuglingen und Kindern identifizieren. Die Entwicklung des Nervenreflex ist ein Frühindikator dieser Anomalien. Eine Vielzahl von leicht erreicht Entwicklungs Reflex-Tests in den Neugeborenen-Nagetier wurden hier entwickelt und beschrieben.
Das übergeordnete Ziel dieser neonatalen Rattenreflexmethode ist es, zu lernen, wie man diese Aufgaben schnell, genau und vergleichbar ausführt. Diese Methode kann zentrale Fragen im Bereich der Nervenentwicklungsstörungen wie der Zerebralparese beantworten. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass sie eine Möglichkeit bietet, frühe Entwicklungsreflexe bei neugeborenen Rattenwelpen zu testen.
Wie Menschen haben auch neugeborene Nagetiere frühe Entwicklungsreflexe, die ein Fenster in die spätere Entwicklung bieten. Personen, die neu in dieser Methode sind, werden Schwierigkeiten haben, da die Reflexe schnell auftreten und schwer zu treffen sein können. Es ist wichtig, so konsequent wie möglich zu sein.
Die Auswirkungen dieser Technik erstrecken sich auf die Therapie und Diagnose von Zerebralparese und Entwicklungsstörungen. Die Bestimmung des Reflexverhaltens ist der Goldstandard für die Feststellung und Wirksamkeit therapeutischer Interventionen. Die visuelle Demonstration dieser Methode ist von entscheidender Bedeutung, da die Schritte durch geschriebene Wörter schwer zu erlernen sind.
Zu Beginn gewöhnen Sie die Ratten an die Umwelt und den Umgang mit dem Menschen, wie im begleitenden Textprotokoll beschrieben. Sobald Sie sich akklimatisiert haben, paaren Sie die Ratten, um einen Wurf Welpen für Tests zu produzieren. Beginnen Sie am dritten Tag nach der Geburt, bringen Sie die Welpen jeden Tag zu einer konstanten Zeit in einen ruhigen Raum.
Lassen Sie sie sich mindestens eine Stunde lang akklimatisieren, bevor Sie eine Reihe von neurologischen Entwicklungsreflextests durchführen. Stellen Sie im Raum eine Heizlampe oder ein Wärmekissen auf, um die Körpertemperatur des Welpen auf 36,5 Grad Celsius zu halten. Notieren Sie auch jeden Tag das Gewicht des Welpen.
Richten Sie als Nächstes eine Videokamera mit einer Verschlusszeit von mindestens 1/1000 Sekunde ein, um die Reflextests Bild für Bild zu analysieren. Positionieren Sie die Kamera so, dass sie sich bei jedem Test direkt über oder neben dem Rattenwelpen und den Testmaterialien befindet. Führen Sie den Test für jeden der folgenden Tests jeden Tag durch, bis der Welpe in der Lage ist, die Aufgabe an zwei aufeinanderfolgenden Tagen auszuführen.
Das Datum des ersten Auftretens ist das Datum, das für die Datenquantifizierung aufgezeichnet werden sollte. Führen Sie ab dem dritten postnatalen Tag den Greifreflextest für die Vordergliedmaßen durch. Legen Sie für diesen Test einen stumpfen Stab nacheinander auf die Handfläche jeder Vorderpfote des Welpen und üben Sie manuell leichten Druck aus.
Durch den Druck sollte die Vorderpfote leicht verschoben werden, um sicherzustellen, dass der Kontakt hergestellt wird und die Welpen die Rute spüren können. Das Greifen erscheint als Beugung aller Finger um den Stab herum. Die erfolgreiche Aneignung dieses Reflexes erfolgt, wenn beide Vorderpfoten zwei Tage hintereinander die Rute greifen.
Legen Sie als Nächstes einen stumpfen Stab gegen die Sohle jeder Hinterpfote und üben Sie manuell leichten Druck aus, um den Reflextest für den Griff der Hinterbeine durchzuführen. Durch den leichten Druck sollte die Hinterpfote leicht verschoben werden, um sicherzustellen, dass der Kontakt hergestellt wird und die Welpen die Rute spüren können. Das erfolgreiche Greifen des Stabes erscheint als Beugung der Finger um den Stab.
Der Erwerb dieses Reflexes tritt auf, wenn beide Hinterpfoten den Stab zwei Tage hintereinander greifen. Führen Sie ebenfalls ab dem dritten postnatalen Tag den Aufrichtreflextest durch. Halten Sie den Welpen für diesen Test fest in Rückenlage, so dass alle vier Pfoten aufrecht stehen.
Lassen Sie den Welpen los und starten Sie sofort den Timer. Die Aufrichtung ist erreicht, wenn der Welpe in der Lage ist, sich auf alle vier Pfoten zu drehen oder umzudrehen und jede Pfote senkrecht zum Körper steht. Geben Sie jedem Welpen maximal 15 Sekunden Zeit, um dieses Ziel zu erreichen.
Führen Sie ab dem vierten postnatalen Tag den Reflextest für die Platzierung der Hintergliedmaßen durch. Halten Sie den Welpen für diesen Test am Oberkörper senkrecht in die Luft. Streicheln Sie vorsichtig mit einer stumpfen Oberfläche, z. B. der Kante eines Tisches, über den Rücken der Hinterpfote.
Ein korrekter Platzierungsreflex ist, wenn der Rattenwelpe die stimulierte Hintergliedmaße zurückzieht, gefolgt von der Platzierung der Hintergliedmaße auf dieser Oberfläche. Führen Sie ebenfalls ab dem vierten postnatalen Tag den Klippenvermeidungstest durch. Setze den Rattenwelpen für diesen Test an den Rand einer ebenen Fläche, so dass die Vorderpfoten und die Schnauze des Jungspünden über den Rand ragen.
Das richtige Ergebnis ist eine schützende Reaktion, bei der sich der Rattenwelpe vom Rand der Klippe abwendet. Beginnen Sie mit der Beurteilung des Gangbildes am sechsten Tag nach der Geburt. Platzieren Sie für diesen Test die Welpen in der Mitte eines Kreises mit einem Durchmesser von 15 Zentimetern und lassen Sie den Welpen 30 Sekunden lang den Kreis verlassen.
Ein erfolgreicher Gang liegt vor, wenn der Rattenwelpe in weniger als 30 Sekunden in der Lage ist, beide Vorderpfoten außerhalb des Kreises zu bewegen. Beginnen Sie mit der Analyse des Hörschrecks am 10. Tag nach der Geburt. Hier wird etwas, wie z.B. eine Glocke, benötigt, die in der Lage ist, ein lautes Geräusch zu erzeugen.
Positionieren Sie die Glocke direkt über dem Welpen. Läuten Sie die Glocke und beurteilen Sie dann, ob eine Schreckreaktion vorliegt oder nicht. Eine positive Schreckreaktion wird beobachtet, wenn der Welpe eine ruckartige Bewegung weg vom Geräusch zeigt.
Setzen Sie die Welpen ab dem 12. Tag nach der Geburt auf eine rutschfeste, offene Oberfläche und beobachten Sie die Haltung, die der Welpe einnimmt, wenn er sich bewegt. Eine unreife Haltung spiegelt sich durch das Ziehen des Bauches bei der Bewegung und das senkrechte Zeigen beider Vorder- und Hinterpfoten relativ zum Körper wider. Eine reife Haltung wird erreicht, wenn der Welpe den Bauch von der Oberfläche abheben kann und beide Vorderpfoten und Hinterpfoten gerade oder parallel zum Körper zeigen, wenn er sich bewegt.
Beginnen Sie ebenfalls ab dem 12. Tag nach der Geburt, die Augenlider des Welpen zu beobachten. Notieren Sie den Tag, an dem sich beide Augenlider öffnen. Beginnen Sie am 14. postnatalen Tag mit dem beschleunigten Aufrichtungstest.
Platzieren Sie den Welpen für diesen Test in Rückenlage 30,48 Zentimeter über einem Schaumstofflandeplatz. Lassen Sie den Welpen fallen und beobachten Sie seine Fähigkeit, sich aufzurichten. Richtiges Aufrichten bezieht sich darauf, wenn der Welpe in der Lage ist, sich in die Bauchlage zu drehen und auf seinen Pfoten zu landen.
Neugeborene, die einer In-utero-Entzündung ausgesetzt waren, wurden deutlich kleiner geboren als Kontrollen. Eine Nahrungsergänzung mit Brokkolisprossen konnte das Geburtsgewicht dieser Welpen erhöhen. Zusammen mit dem Geburtsgewicht sind die neurologischen Entwicklungsreflextests ein prädiktives Maß für die abnormale kortikale Entwicklung und Reifung, was unter Umständen, unter denen eine offensichtliche Neuropathologie nicht offensichtlich ist, von Bedeutung sein kann.
Nach der Geburt zeigte die Untersuchung des neonatalen Reflexes der Hintergliedmaßen in diesen Gruppen eine signifikante Verzögerung beim Erwerb dieses Reflexes bei Jungtieren, die einer In-utero-Entzündung ausgesetzt waren, im Vergleich zu Kontrollen. Eine Nahrungsergänzung mit Brokkolisprossen verhinderte die Verzögerung. Die Ergebnisse des neonatalen Reflex-Klippenvermeidungstests zeigten, dass Welpen, die einer In-utero-Entzündung ausgesetzt waren, signifikant verzögert eine Schutzreaktion entwickelten.
Auch hier verhinderte der Verzehr von Brokkolisprossen eine signifikante Verzögerung. Das gleiche Ergebnis wurde bei der Untersuchung des Reflexgangs bei Neugeborenen beobachtet. Während dieses Verfahrens können andere Methoden wie tägliche Gewichtsaufzeichnungen durchgeführt werden, um zusätzliche Fragen wie die tägliche Wachstumsrate, das Aufholwachstum, die Schwere der Verletzung und die Auswirkungen der Wachstumseinschränkung zu beantworten.
Nach ihrer Entwicklung ebnete diese Technik den Weg für Forscher auf dem Gebiet der Neurowissenschaften, um Entwicklungsreflextests bei neugeborenen Nagetieren zu erforschen. Nachdem Sie sich dieses Video angesehen haben, sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie man frühe Entwicklungsreflextests bei neugeborenen Rattenwelpen durchführt. Darüber hinaus sollten Sie die Bedeutung früher Verhaltensreflexe verstehen, da sie einen frühen Biomarker für Verletzungen und die Wirkung therapeutischer Interventionen darstellen.
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Dieser Artikel stellt eine Methodik zur Bewertung früher Entwicklungsreflexe bei neonatalen Ratten vor, die Einblicke in mögliche Entwicklungsstörungen geben kann. Die Technik zielt darauf ab, eine genaue und konsistente Untersuchung dieser Reflexe zu ermöglichen, die für das Verständnis von Nervenentwicklungsproblemen entscheidend sind.
Neurodevelopmental reflex testing in neonatal rat pups provides an early biomarker for detecting brain injury and evaluating therapeutic interventions in preclinical models. This approach supports mechanistic de-risking by linking behavioral phenotypes to neurodevelopmental outcomes, enabling predictive confidence in target validation for CNS disorders. The methodology enhances translational continuity from discovery through preclinical stages by offering quantifiable, reproducible reflex metrics.
The method integrates into the discovery continuum from early biology to lead identification, providing behavioral phenotyping that complements molecular and histological assessments in CNS drug development.