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DOI: 10.3791/55315-v
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Das primäre cilium ist von fundamentaler Bedeutung in neuralen Vorläuferzellproliferation, die neuronale Differenzierung, und adulten neuronalen Funktion. Hier beschreiben wir ein Verfahren ciliogenesis und den Handel mit Signalproteinen zu Zilien in neuralen Stamm- / Progenitorzellen und differenzieren Neuronen unter Verwendung von primären Kulturen Neurosphäre zu studieren.
Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, neurosphärenbasierte Kultivierungsmethoden für primäre neurale Stamm- und Vorläuferzellen zu nutzen, um die primäre Zilienbiogenese und den Transport zu untersuchen. Diese Methode kann helfen, Schlüsselfragen im Bereich der primären Zilien zu beantworten, wie z.B. die Biogenese der Zilien und den Transport von Zilienmolekülen zu den primären Zilien. In primären neuralen Stammzellen, neuralen Vorläuferzellen und Neuronen.
Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass wir die primären Zellkriterien der neuralen Stammzellen, neuralen Vorläuferzellen und Neuronen verwenden können, um die Biogenese und die Ziliarwege im Kontext des primären Ziliums zu analysieren. Im Allgemeinen werden Personen, die mit dieser Methode noch nicht vertraut sind, Schwierigkeiten haben, da die Kultivierung neuraler Stammzellen für Anfänger eine technische Herausforderung darstellt. Wir werden zeigen, dass eine Demonstration dieser Methode von entscheidender Bedeutung ist, da die Dissektion des lateralen Ventrikels und Schritte wie die Kultivierung von Neurosphären und die Quantifizierung primärer Zilien durch Beobachtung der kritischen Schritte leicht zu erlernen sind.
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