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DOI: 10.3791/55364-v
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Hier präsentieren wir ein Protokoll Mikroglia aus postnataler Maus Welpen (Tag 1) für in - vitro - Experimente zu isolieren. Diese improvisierte Isolierungsmethode erzeugt sowohl hohe Ausbeute und Reinheit, einen bedeutenden Vorteil gegenüber alternativen Methoden, die für die Zwecke der Erläuterung Mikroglia biology breites Spektrum Experimente ermöglicht.
Das übergeordnete Ziel der magnetischen Mikroglia-Isolierung von CD11b ist es, eine hochreine Endausbeute an postnatalen Mikroglia in relativ kurzer Zeit zu erreichen, um vielseitige In-vitro-Experimente durchführen zu können. Diese Methode kann helfen, Schlüsselfragen im Bereich der Neurowissenschaften zu beantworten, wie z. B. die Signalmechanismen, die für neuronale Entzündungen relevant sind. Der Hauptvorteil dieser Technik gegenüber den derzeit verfügbaren Methoden besteht darin, dass die Isolierung etwa 30 Minuten dauert, ohne dass Abstriche bei der Reinheit, Ausbeute oder Lebensfähigkeit gemacht werden.
Beginnen Sie damit, frisch enthauptete Köpfe von ein bis zwei Tage alten Mäusewelpen in eine laminare Luftstromhaube zu übertragen. Verwenden Sie dann eine gerade 4,5-Zoll-Mikropräparierschere, um einen kleinen Schnitt in den Schädel und die Hirnhäute zu machen, indem Sie die Spitzen in die durch die Enthauptung gebildete Öffnung einführen und von kaudal nach rostral schneiden. Nachdem du den Schnitt gemacht hast, schäle eine der Halbkugeln zur Seite.
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