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JoVE Journal Neuroscience
Rapid and Refined CD11b Magnetic Isolation of Primary Microglia with Enhanced Purity and Versatility

Schnelle und Refined CD11b Magnetic Isolierung von primären Mikroglia mit erhöhter Reinheit und Vielseitigkeit

Full Text
10,456 Views
07:54 min
April 13, 2017

DOI: 10.3791/55364-v

Souvarish Sarkar*1, Emir Malovic*1, Brandon Plante1, Gary Zenitsky1, Huajun Jin1, Vellareddy Anantharam1, Arthi Kanthasamy1, Anumantha G. Kanthasamy1

1Biomedical Sciences & Iowa Center for Advanced Neurotoxicology,Iowa State University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Hier präsentieren wir ein Protokoll Mikroglia aus postnataler Maus Welpen (Tag 1) für in - vitro - Experimente zu isolieren. Diese improvisierte Isolierungsmethode erzeugt sowohl hohe Ausbeute und Reinheit, einen bedeutenden Vorteil gegenüber alternativen Methoden, die für die Zwecke der Erläuterung Mikroglia biology breites Spektrum Experimente ermöglicht.

Das übergeordnete Ziel der magnetischen Mikroglia-Isolierung von CD11b ist es, eine hochreine Endausbeute an postnatalen Mikroglia in relativ kurzer Zeit zu erreichen, um vielseitige In-vitro-Experimente durchführen zu können. Diese Methode kann helfen, Schlüsselfragen im Bereich der Neurowissenschaften zu beantworten, wie z. B. die Signalmechanismen, die für neuronale Entzündungen relevant sind. Der Hauptvorteil dieser Technik gegenüber den derzeit verfügbaren Methoden besteht darin, dass die Isolierung etwa 30 Minuten dauert, ohne dass Abstriche bei der Reinheit, Ausbeute oder Lebensfähigkeit gemacht werden.

Beginnen Sie damit, frisch enthauptete Köpfe von ein bis zwei Tage alten Mäusewelpen in eine laminare Luftstromhaube zu übertragen. Verwenden Sie dann eine gerade 4,5-Zoll-Mikropräparierschere, um einen kleinen Schnitt in den Schädel und die Hirnhäute zu machen, indem Sie die Spitzen in die durch die Enthauptung gebildete Öffnung einführen und von kaudal nach rostral schneiden. Nachdem du den Schnitt gemacht hast, schäle eine der Halbkugeln zur Seite.

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Neuroscience Ausgabe 122 CD11b Mikroglia Primärkultur magnetische Trennung Gehirn Alter Neurodegeneration Neuroinflammation neurodegenerative Erkrankungen

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