Trennen von Gemischen durch Ausfällung

1. die Ausfällung von CaCO₃

1. 5 mL 1 M CaCl₂vorbereiten.
2. 5 mL 1 M Na₂CO₃vorbereiten.
3. Dazugeben Sie in einem kleinen Zentrifugenröhrchen (1,5 mL) 750 µL CaCl₂ 750 µL Na₂CO₃.
4. Warten Sie 2 Minuten für die Reaktion auftreten. Die Lösung sollte bewölkt drehen.
5. Zentrifugieren Sie die Mischung bei 10.000 × g für 5 min.
6. Den Überstand abgießen.
7. Das Pellet 1 mL kaltes Wasser hinzufügen.
8. Aufschwemmen der Pellets durch das Mischen in einem Vortex-Mixer für 10 s.
9. Zentrifugieren Sie die Mischung bei 10.000 × g für 5 min.
10. Den Überstand abgießen.

(2) Niederschlag der Milchproteine

1. Gießen Sie die Milch in ein Becherglas und fügen Sie eine Bar unter Rühren hinzu.
2. Warme Milch vorsichtig bis 40 ° C in einer mitreißenden Heizplatte. Nicht über 40 ° c erhitzen
3. Bereiten Sie eine 15 % (V/V) von Essigsäure durch 7,5 mL Essigsäure mischen und verdünnen in genügend Wasser, 50 mL zu erreichen.
4. Tauchen Sie die Elektrode ein pH-Meter in warmer Milch, und überwachen Sie den pH-Wert.
5. Die Essigsäure tropfenweise die Milch fügen Sie bis ein pH-Wert von 4,6 erreicht ist hinzu.
6. Filtration von Milch
   1. Ein Stück Filterpapier Querflöte und legen Sie sie in einen Trichter.
   2. Setzen Sie den Trichter in eine Flasche und die gesäuerte Milch-Gemisch in den Trichter.
   3. Da die Lösung gegossen wird, kann das Filterpapier verstopft. Mit einem Rührstäbchen, Regen Sie die Lösung und Filterpapier gelegentlich auf die Sprünge zu helfen. Wenn es im Laufe der Lösung nicht bessert, ändern Sie das Filterpapier.
   4. Legen Sie ein neues Filterpapier auf die Benchtop und den Transfer so viel Nässe fest, um das neue Filterpapier. Dies sollte mehr Wasseraufnahme aus dem vollen.
   5. Wenn das neue Filterpapier zu nass wird, weiterhin es ändern, bis es minimale Menge von Nässe auf dem Filterpapier gibt. Drücken Sie es leicht, mehr Wasser zu absorbieren, wenn nötig.
   6. Nehmen Sie die getrockneten Feststoff und wieder auszusetzen, in etwa 70 % Ethanol. Filtern Sie die wieder Schritte 2.6.1 auf 2.6.5 Solid.
7. Zentrifugieren der Milch (als Alternative zur Filtration)
   1. Übertragen Sie 50 mL Portionen des Gemisches auf 50 mL Zentrifuge Rohre.
   2. Bei 4.500 × g für 10 min Zentrifugieren Sie und dekantieren Sie des Überstandes.
   3. Das Pellet 50 mL 70 % igem Ethanol hinzufügen.
   4. Mit einem Rührstäbchen, Aufschwemmen der Pellets in das Ethanol.
   5. Zentrifugieren Sie diese Aussetzung nach Schritt 2.7.2.
8. Das Pellet in Puffer für weitere Analysen wie SDS-PAGE Aufschwemmen, ansonsten bei 4 ° c lagern

(3) Rekristallisation des KCl

1. Gewicht von 50 g KCl in einen Erlenmeyerkolben und 100 mL Wasser hinzufügen
2. Erhitzen Sie die Mischung, bis Wasser kocht. Sicherstellen Sie, dass alle KCl Pulver aufgelöst hat. Einige Verunreinigungen dürfen nicht in Wasser auflösen.
3. Erhitzen Sie einen anderen (leeren) Erlenmeyerkolben zusammen mit der Mischung und halten Sie sehr warm.
4. Setzen Sie einen Trichter mit Filterpapier in die warme, leere Flasche.
5. Gießen Sie die Lösung durch das Filterpapier, ungelöste Verunreinigungen zu entfernen. Der Auffangkolben wird warmgehalten, um sicherzustellen, dass keine Temperaturschwankungen während der Filtration, die sonst auftreten, die ein grober Niederschlag bilden wird. In diesem Fall erneut erhitzen Sie die Mischung, bis der Niederschlag löst sich.
6. Nehmen Sie die Flasche mit der Lösung vom Herd.
7. Bewahren Sie es an einem kühlen Ort im Raum und lassen Sie ihn abkühlen langsam für etwa 30 Minuten, oder bis es keine mehr warm an.
8. Sobald auf Raumtemperatur abgekühlt ist, legen Sie die Flasche in ein Eisbad, weiter senken die Temperatur. Alternativ kann man die Flasche in den Kühlschrank oder einem temperierten Raum bei 4 ° c verlassen
9. Kristalle können durch Filtern wie in Schritt 3.4-3.5 geerntet werden (verwenden Sie eine Flasche und Trichter bei Raumtemperatur).