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DOI: 10.3791/55589-v
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Multiparameter-Fluoreszenz-Immunhistochemie kann verwendet werden, um die Anzahl, die relative Verteilung und die Lokalisierung von Immunzellpopulationen in der Tumor-Mikroumgebung zu bestimmen. Dieses Manuskript beschreibt die Verwendung dieser Technik zur Analyse von T-Zell-Subpopulationen bei oropharyngealen Krebs.
Das übergeordnete Ziel dieses Experiments ist es, eine mehrfarbige immunhistochemische Visualisierung und Zählung verschiedener T-Lymphozyten-Subpopulationen in archivierten formalinfixierten, in Paraffin eingebetteten Gewebeschnitten aus oropharyngealen Plattenepithelkarzinomproben durchzuführen. Diese Methode kann dazu beitragen, Schlüsselfragen im Bereich der Immunonkologie zu beantworten, z. B. ob es einen Zusammenhang zwischen Tumorgewebe, das Immunzellen infiltriert, Subpopulationen und der Prognose der Patienten gibt. Mit dieser Technik können Sie mehrere Biomarker in einem Gewebeschnitt sichtbar machen.
Die Implikationen dieser Technik erstrecken sich auch auf die Krebstherapie, da die gleichzeitige Bewertung mehrerer Immunzellen oder immunbezogener Faktoren bei der Patientenstratifizierung für spezifische Immuntherapien hilfreich sein könnte. Beginnen Sie mit der Verwendung einer Mikrozunge, um vier Mikrometer dicke, formalinfixierte, in Paraffin eingebettete Gewebeschnitte zu erhalten, und legen Sie die Gewebebänder auf die Oberfläche eines 45 Grad Celsius heißen deionisierten Wasserbads, sobald sie aufgenommen werden. Um die Schnitte zu erfassen, legen Sie einen Objektträger direkt unter die Gewebeprobe ins Wasser und bewegen Sie den Objektträger vorsichtig schräg nach oben.
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