High Precision FRET at Single-molecule Level for Biomolecule Structure Determination

Junyan Ma; Inna S. Yanez-Orozco; Soheila Rezaei Adariani; Drew Dolino; Vasanthi Jayaraman; Hugo Sanabria

doi:10.3791/55623

Hochpräzisions-FRET auf Einzelmolekül-Niveau für die Bestimmung der Biomolekülstruktur

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Biochemistry

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High Precision FRET at Single-molecule Level for Biomolecule Structure Determination

Hochpräzisions-FRET auf Einzelmolekül-Niveau für die Bestimmung der Biomolekülstruktur

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May 13, 2017

DOI: 10.3791/55623-v

Junyan Ma¹, Inna S. Yanez-Orozco², Soheila Rezaei Adariani², Drew Dolino³, Vasanthi Jayaraman³, Hugo Sanabria²

¹Department of Chemistry,Clemson University, ²Department of Physics and Astronomy,Clemson University, ³Department of Biochemistry and Molecular Biology, Center for Membrane Biology, Graduate School for Biomedical Sciences,University of Texas Health Science Center

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Ein Protokoll für hochpräzise FRET-Experimente auf der Ebene der einzelnen Moleküle wird hier vorgestellt. Zusätzlich kann diese Methodik verwendet werden, um drei Konformationszustände in der Ligandenbindungsdomäne des N-Methyl-D-aspartat (NMDA) -Rezeptors zu identifizieren. Die Bestimmung von präzisen Abständen ist der erste Schritt zum Aufbau von Strukturmodellen auf der Basis von FRET-Experimenten.

Das übergeordnete Ziel dieses Protokolls ist es, hochpräzise Abstandsmessungen zwischen den Farbstoffen mit Hilfe der Multiparameter-Fluoreszenzdetektion von F durchzuführen

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