Name: Quantifizierung der Verzweigungsdichte in Ratten-Mamma-Gland-Vollkonserven unter Verwendung der Sholl-Analysemethode (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-07-12T13:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 2 s
Description: Erfahren Sie die modifizierte Sholl-Analyse zur objektiven Quantifizierung der Verzweigungsdichte in Ratten-Mamma-Drüsen-Vollkonserven. Diese Methode mit ImageJ ermöglicht präzise Entwicklungsstudien.

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Die Autoren möchten Dr. Michael Easterling (Social and Scientific Systems, Inc., Durham, NC) für seine Unterstützung bei der Validierung dieser Methode und Dr. Tiago Ferreira (McGill University, Montreal, Quebec, Kanada) für seine kontinuierliche ansprechen Unterstützung bei der Sholl-Anmeldung.

<ol><li>Sholl, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dendritic+organization+of+the+neurons+in+the+visual+and+motor+cortices+of+the+cat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Anat%22%5BJournal%5D)">Dendritic organization of the neurons in the visual and motor cortices of the cat.</a> J Anat. 87 (4), 387-406 (1953).</li>
<li>Ferreira, T. A., Iacono, L. L., Gross, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serotonin+receptor+1A+modulates+actin+dynamics+and+restricts+dendritic+growth+in+hippocampal+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Serotonin receptor 1A modulates actin dynamics and restricts dendritic growth in hippocampal neurons.</a> Eur J Neurosci. 32 (1), 18-26 (2010).</li>
<li>Stanko, J. P., Easterling, M. R., Fenton, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+Sholl+analysis+to+quantify+changes+in+growth+and+development+in+rat+mammary+gland+whole+mounts%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Application of Sholl analysis to quantify changes in growth and development in rat mammary gland whole mounts.</a> Reprod Toxicol. 54, 129-135 (2015).</li>
<li>Assis, S., Warri, A., Cruz, M. I., Hilakivi-Clarke, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+Mammary+Gland+Morphology+and+Breast+Cancer+Risk+in+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Changes in Mammary Gland Morphology and Breast Cancer Risk in Rats.</a> J. Vis. Exp. (44), e2260(2010).</li>
<li>Plante, I., Stewart, M. K., Laird, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+Mammary+Gland+Development+and+Function+in+Mouse+Models%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Evaluation of Mammary Gland Development and Function in Mouse Models.</a> J. Vis. Exp. (53), e2828(2011).</li>
<li>Ferreira, T. Sholl Analysis. ImageJ. , Available from:
 <a target="_blank" href="http://imagej.net/Sholl_Analysis">http://imagej.net/Sholl_Analysis</a> (2012).</li>
<li>Ferreira, T., Rasband, W. ImageJ User Guide. IJ 1.46r. ImageJ. , Available from:
 <a target="_blank" href="https://imagej.nih.gov/ij/docs/guide/146.html">https://imagej.nih.gov/ij/docs/guide/146.html</a> (2012).</li>
<li>Tucker, D. K., Foley, J. F., Hayes-Bouknight, S. A., Fenton, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+High-quality+Hematoxylin+and+Eosin-stained+Sections+from+Rodent+Mammary+Gland+Whole+Mounts+for+Histopathologic+Review%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Pathol%22%5BJournal%5D)">Preparation of High-quality Hematoxylin and Eosin-stained Sections from Rodent Mammary Gland Whole Mounts for Histopathologic Review.</a> Toxicol Pathol. 44 (7), 1059-1064 (2016).</li>
<li>Fenton, S. E., Hamm, J. T., Birnbaum, L. S., Youngblood, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Persistent+abnormalities+in+the+rat+mammary+gland+following+gestational+and+lactational+exposure+to+2%2C3%2C7%2C8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin+%28TCDD%29%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Sci%22%5BJournal%5D)">Persistent abnormalities in the rat mammary gland following gestational and lactational exposure to 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD).</a> Toxicol Sci. 67 (1), 63-74 (2002).</li>
<li>Murray, T. J., Maffini, M. V., Ucci, A. A., Sonnenschein, C., Soto, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+mammary+gland+ductal+hyperplasias+and+carcinoma+in+situ+following+fetal+bisphenol+A+exposure%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Induction of mammary gland ductal hyperplasias and carcinoma in situ following fetal bisphenol A exposure.</a> Reprod Toxicol. 23 (3), 383-390 (2007).</li>
<li>Moral, R., Santucci-Pereira, J., Wang, R., Russo, I. H., Lamartiniere, C. A., Russo, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+utero+exposure+to+butyl+benzyl+phthalate+induces+modifications+in+the+morphology+and+the+gene+expression+profile+of+the+mammary+gland%3A+an+experimental+study+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Health%22%5BJournal%5D)">In utero exposure to butyl benzyl phthalate induces modifications in the morphology and the gene expression profile of the mammary gland: an experimental study in rats.</a> Environ Health. 10 (1), 5(2011).</li>
<li>Johnson, M. D., Mueller, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three+dimensional+multiphoton+imaging+of+fresh+and+whole+mount+developing+mouse+mammary+glands%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cancer%22%5BJournal%5D)">Three dimensional multiphoton imaging of fresh and whole mount developing mouse mammary glands.</a> BMC Cancer. 13, 373(2013).</li>
<li>Enoch, R. R., Stanko, J. P., Greiner, S. N., Youngblood, G. L., Rayner, J. L., Fenton, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mammary+gland+development+as+a+sensitive+end+point+after+acute+prenatal+exposure+to+an+atrazine+metabolite+mixture+in+female+Long-Evans+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Health+Persp%22%5BJournal%5D)">Mammary gland development as a sensitive end point after acute prenatal exposure to an atrazine metabolite mixture in female Long-Evans rats.</a> Environ Health Persp. 115 (4), 541-547 (2007).</li>
<li>Hovey, R. C., Coder, P. S., Wolf, J. C., Sielken, R. L., Tisdel, M. O., Breckenridge, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+assessment+of+mammary+gland+development+in+female+Long+Evans+rats+following+in+utero+exposure+to+atrazine%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Sci%22%5BJournal%5D)">Quantitative assessment of mammary gland development in female Long Evans rats following in utero exposure to atrazine.</a> Toxicol Sci. 119 (2), 380-390 (2011).</li>
<li>Mandrup, K. R., Hass, U., Christiansen, S., Boberg, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perinatal+ethinyl+oestradiol+alters+mammary+gland+development+in+male+and+female+Wistar+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Inter+J+of+Androl%22%5BJournal%5D)">Perinatal ethinyl oestradiol alters mammary gland development in male and female Wistar rats.</a> Inter J of Androl. 35 (3), 385-396 (2012).</li>
</ol>

Die Autoren haben nichts zu offenbaren.

Von der Geburt bis zur Pubertät ist das Brustdrüsenwachstum allometrisch. Nach der Pubertät entwickelt sich die Brustdrüse durch umfangreiche duktale Verzweigung und Dehnung, die sich fortsetzen, bis das Mammaepithel das gesamte Fettkissen einnimmt. Verzweigungscharakteristiken sind ein wichtiger Aspekt der Entwicklung von Brustdrüsen, und die Fähigkeit, diese Eigenschaften objektiv zu quantifizieren, kann sehr nützlich sein, um die normale Entwicklung der Mamma zu beurteilen und eine abnormale Entwicklung nach frühzeit...

Die Brustdrüsenverzweigung ist ein charakteristisches Merkmal, das allgemein als Indikator der Drüsenentwicklung beurteilt wird, aber es ist schwer objektiv zu quantifizieren. Im Jahr 1953 beschrieb Sholl 1 eine Methode zur Messung der neuronalen dendritischen Arborisierung in den visuellen und motorischen Kortizes der Katze, und ein Plugin für diese Technik wurde von Ferriera et al 2 entwickelt . Da sowohl Neuronen als auch Brustdrüsen eine ähnliche baumartige Struktur aufweisen, wurde das Plugin zur Quantifizierung von Mamma-Epithel-Verzweigungsdichten in 2D-Bildern der peripubertären Ratten-Brustdrüse verwendet. Die peripubertäre Bühne wurde für die Analyse ausgewählt, weil die Entwöhnung eine Lebensphase ist, die oft in akademischen Laboratorien und Testrichtlinien untersucht wird. Die Sholl-Analyse ist ein Plugin, das mit FIJI verteilt wird, welches das Open-Source-Bildverarbeitungspaket ImageJ ist, mit zusätzlichen Plugins. Das Plugin schafft eine Reihe von konzentrischen Ringen, die ein Predef umkreisen(Typischerweise das Soma eines Neurons oder der Ursprung des Primärkanals einer Milchdrüse) und erstreckt sich bis zum distalsten Teil des Objekts (der umschließende Radius). Es zählt dann die Anzahl der Kreuzungen (N), die auf jedem der Ringe auftreten. Das Plugin gibt auch einen Sholl-Regressionskoeffizienten ( k ) zurück, der eine Messung der Rate des Zerfalls der Epithelverzweigung ist. Mit ImageJ wird ein skelettiertes Bild einer Brustdrüsen-Ganzmasse erstellt und der Mamma-Epithelbereich (MEA) gemessen. Das Bild wird mit dem Sholl-Analyse-Plugin analysiert und Werte für N und k , unter anderen hier nicht genutzten Werten, werden zurückgegeben. Die Mamma-Epithel-Verzweigungsdichte wird durch Berechnung von N / MEA bestimmt. Das Ausmaß, in dem die Verzweigung in den äußeren Regionen des Drüsenepithels fortdauert, ist die Verzweigungskomplexität und ist ein Indikator für ein gleichmäßiges distales Epithelwachstum. Da k ein Maß für die distale Abnahme des Epiths istEliale Verzweigung, ist es ein wirksames Maß für die Verzweigungskomplexität und ein zuverlässiger Indikator für die Entwicklung von Mamma. Dieses Protokoll beschreibt eine computergestützte Methode zur Erzeugung von skelettierten Bildern von Brustdrüsen-Vollkästen und quantitativen Auswerten von Mamma-Verzweigungseigenschaften bei peripubertalen männlichen und weiblichen Ratten. Diese Methode ist relativ schnell und erfordert nicht die Verwendung von spezialisierten Mikroskopie Ausrüstung. Entwicklung und Validierung dieser Methode sind in Stanko et al. (2015) 3 Dieser Bericht beschreibt auch die Vorbereitung der Ratten-Brustdrüsen-Ganzheit. Ähnliche Mamma-Vollmontageverfahren wurden in de Assis et al. Beschrieben . (2010) 4 und Plante et al. (2011) 5 .

<table><tbody><tr><td>Präparierbrett</td><td>NA</td><td>NA Geeignet</td><td>ist ein Stück Styropor ca. 10"x12".</td></tr>Geeignet ist das <tr><td>Präparieren von T-Pins</td><td>Daigger</td><td>EF7419A</td><td></td></tr><tr><td>Sprühflasche mit Ethanol</td><td>NA</td><td>NA</td><td>70% Ethanol.</td></tr><tr><td>Gebogene Präparierschere</td><td>Fine Science Tools</td><td>14569-09</td><td></td></tr><tr><td>Gerade Präparierschere</td><td>Fine Science Tools</td><td>14568-09</td><td></td></tr><tr><td>Gebogene Pinzette</td><td>Fine Science Tools</td><td>11003-12</td><td></td></tr><tr><td>Superfrost Plus 24 x 75 x 1 mm Objektträger</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>4951PLUS-001</td><td>Thermo Scientific Superfrost Plus & Colorfrost Plus Objektträger halten Gewebeschnitte dauerhaft fest, ohne dass teure Beschichtungen in IHC- und anatomischen Pathologieanwendungen erforderlich sind. Diese Behandlung reduziert den Gewebeverlust während der Färbung sowie die stundenlange Vorbereitung des Objektträgers. Objektträger ziehen gefrorene Gewebeschnitte und zytologische Präparate elektrostatisch an und weisen eine silanähnliche Chemie auf, sind jedoch optimiert, um die Anwendungsleistung zu verbessern. https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/4951PLUS4.&nbsp;</td></tr><tr><td>Fisherfinest Premium Deckglas 24 x 60 x 1 mm</td><td>Fisher scientific</td><td>12-548-5P</td><td></td></tr><tr><td>Bemis Parafilm M Labor-Verpackungsfolie</td><td>Fisher scientific</td><td>13-374-12</td><td></td></tr><tr><td>Chloroform</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C2432</td><td></td></tr><tr><td>Eisessig</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9967</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol absolut, &ge; 99,8% (GC)&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>24102</td><td></td></tr><tr><td>Xylol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>214736</td><td></td></tr><tr><td>Karmin-Alaun&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C1022</td><td></td></tr><tr><td>Aluminium-Kaliumsulfat&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A6435</td><td></td></tr><tr><td>Permount Eindeckmedien</td><td>Fisher Scientific</td><td>SP15</td><td></td></tr><tr><td>Makroskop</td><td>Leica</td><td>Z16 APO</td><td>Dies ist die Bilderfassungshardware und -software, die in diesem Labor verwendet wird. Da es viele verschiedene Möglichkeiten gibt, können die Methoden und Anwendungen von Labor zu Labor variieren.</td></tr><tr><td>Digitalkamera</td><td>Leica</td><td>DFC295</td><td></td></tr><tr><td>Kamerasoftware</td><td>Leica</td><td>Leica Application Suite v3.1&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>ImageJ Software</td><td>Open Source</td><td>http://imagej.net/Welcome Sholl-Analyse</td><td></td></tr><tr><td>&nbsp;</td><td>Open-Source-http://imagej.net/Sholl_Analysis</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

quantifizierung der verzweigungsdichte in ratten-mamma-gland-vollkonserven unter verwendung der sholl-analysemethode

Quantifying Branching Density in Rat Mammary Gland Whole-mounts Using the Sholl Analysis Method

Eine zunehmende Anzahl von Studien nutzt die Nagetier-Brustdrüse als Endpunkt für die Beurteilung der Entwicklungstoxizität einer chemischen Exposition. Die Effekte, die diese Expositionen auf die Entwicklung von Brustdrüsen haben, werden typischerweise unter Verwendung von entweder grundlegenden Dimensionsmessungen oder durch Auswertung von morphologischen Merkmalen ausgewertet. Die breite Palette von Methoden zur Interpretation von Entwicklungsänderungen könnte jedoch zu inkonsistenten Übersetzungen in Laboratorien führen. Eine gängige Bewertungsmethode ist erforderlich, damit aus den Daten, die über Studien hinweg verglichen werden, richtige Interpretationen entstehen können. Die vorliegende Studie beschreibt die Anwendung der Sholl-Analyse-Methode zur Quantifizierung der Mamma-Drüsen-Verzweigungseigenschaften. Die Sholl-Methode wurde ursprünglich für die Verwendung bei der Quantifizierung von neuronalen dendritischen Mustern entwickelt. Durch die Verwendung von ImageJ, einem Open-Source-Bildanalyse-Softwarepaket und einem für diese Analyse entwickelten Plugin, der Verzweigungsdichte der Brustdrüse und der Komplexität von amAmmary Drüse aus einer peripubertären weiblichen Ratte wurden bestimmt. Die hier beschriebenen Methoden ermöglichen die Verwendung der Sholl-Analyse als wirksames Instrument zur Quantifizierung eines wichtigen Merkmals der Brustdrüsenentwicklung.

Die in diesem Protokoll analysierten Werte für den gemessenen eingeschlossenen Radius, MEA, N, k und die berechnete Verzweigungsdichte für die Brustdrüse sind in Tabelle 1 angegeben . Die Sholl-Analyse erzeugt lineare und halb-log-Plots der Anzahl der Kreuzungen bei jedem Radius ( Abbildung 9 ) und, falls ausgewählt, eine Wärmekarte der Kreuzungen ( Abbildung 10 ). Weniger entwickelte Drüsen weisen weni...

Die Brustdrüsenentwicklung im Nagetier wurde typischerweise mit deskriptiven Beurteilungen oder durch Messung von physikalischen Grundattributen ausgewertet. Die Verzweigungsdichte ist ein Indikator für die Entwicklung von Mamma, der objektiv schwer zu quantifizieren ist. Dieses Protokoll beschreibt eine zuverlässige Methode für die quantitative Beurteilung der Mamma-Drüsen-Verzweigungseigenschaften.

Quantifizierung der Verzweigungsdichte in Ratten-Mamma-Gland-Vollkonserven unter Verwendung der Sholl-Analysemethode

An increasing number of studies are utilizing the rodent mammary gland as an endpoint for assessing the developmental toxicity of a chemical exposure. The ...

Das übergeordnete Ziel dieser computergestützten Methode besteht darin, die Verzweigungsdichte und den Verzweigungsverfall der Brustdrüse – zwei wichtige Entwicklungsindikatoren bei Nagetieren – objektiv zu quantifizieren, indem eine modifizierte Sholl-Analyse auf Ganzpräparat-Aufnahmen der Brustdrüse angewendet wird. Diese Methode kann dazu beitragen, offene Fragen im Bereich der Brustdrüsenbiologie zu beantworten, beispielsweise wie chemische Expositionen die Entwicklung der Brustdrüse beeinflussen können. Der entscheidende Vorteil dieser Technik liegt darin, dass sie Open-Source-Software verwendet, um grundlegende Merkmale der Brustdrüsenentwicklung objektiv zu quantifizieren.Verwenden Sie für dieses Verfahren Bilder von Ganzpräparaten, die das drüsenförmige Epithel bei einer festen Vergrößerung zeigen. Öffnen Sie zunächst ein Bild in ImageJ. Wählen Sie anschließend das Freihand-Werkzeug aus.Umranden Sie das dr&uuml;senf&ouml;rmige Epithel und l&ouml;schen Sie den umgebenden Bereich. Umranden Sie anschlie&szlig;end den Lymphknoten und entfernen Sie diesen Bildteil mit dem Ausschneidebefehl. Falls der Hintergrund des Bildes schwarz ist, muss dieser in wei&szlig; umgewandelt werden.Klicken Sie auf Bearbeite

quantifying-branching-density-rat-mammary-gland-whole-mounts-using

Research

Forschung

JoVE Journal

Developmental Biology

Entwicklungsbiologie

Unser Protokoll beschreibt, wie die Ratte abdominale Brustdrüse sezieren und wie Brustdrüse ganzen mounts vorzubereiten. Es beschreibt auch, wie Brustdrüse Morphologie mit drei Endpunkten (Anzahl der terminalen Ende Knospen-, Epithel-Dehnung und Differenzierung) zu analysieren und diese Ergebnisse nutzen, um Brustkrebs Risiko bei Ratten, die zu Änderungen der Ernährung ausgesetzt waren...

Änderungen der Brustdrüsen Morphologie und Breast Cancer Risk in Ratten

Diese Methode beschreibt, wie zu sezieren und zu bewerten Brustdrüse Entwicklung und Funktion von Mäusen. Abgeschnittene Milchdrüsen sind für den Grad der Entwicklung mit whole mount beurteilt, während Milchspendereflex wird ausgewertet, wobei Oxytocin-basierte myoepithelialen Zelle Kontraktion Assay.

Evaluation der Brustdrüse Entwicklung und Funktion in Mausmodellen

Wir präsentieren einen Bildregistrierungsansatz für die 3-dimensionale (3D) histologische Volumenrekonstruktion, der die Untersuchung der Veränderungen eines Organs auf der Ebene von Makrostrukturen ermöglicht, die aus Zellen bestehen. Mit diesem Ansatz untersuchten wir die 3D-Veränderungen zwischen Wildtyp- und Igfbp7-null-Brustdrüsen.

Die Rekonstruktion der 3-Dimensional Histologie Volume und seine Anwendung auf Maus Milchdrüsen Studieren

Interzelluläre Übergänge sind Requisiten für Brustdrüsen-Bühnenspezifische Funktionen und Entwicklung. Dieses Manuskript liefert ein detailliertes Protokoll für die Untersuchung von Protein-Protein-Wechselwirkungen (PPIs) und Co-Lokalisierung mit Hilfe von murinen Brustdrüsen. Diese Techniken erlauben die Untersuchung der Dynamik der physikalischen Assoziation zwischen interzellulären Übergängen in verschiedenen Entwicklungsstadien.

Analyse von Protein-Protein-Wechselwirkungen und Co-Lokalisierung zwischen Komponenten von Gap, Tight und Adherens Junctions in Murine Mamma Drüsen

Wir entwickelten eine Methode zur erfolgreichen Entfernung, Verarbeitung, Sektion und Flecken, zur histopathologischen Auswertung, Mammagewebe, das ursprünglich auf Rutschen als ganze Reittiere fixiert worden war. Diese Methode kann die Sammlung und Auswertung von Brustdrüsen-Vollbehältern in Reproduktions- und Entwicklungsprüfungsstudien fördern.

Sektion Mammary Gland Ganze Mounts für Läsion Identifizierung

Hier präsentieren wir ein Protokoll für die Isolierung des gesamten, intakte Maus Milchdrüsen um Ausdruck der extrazellulären Matrix (ECM) und duktale Morphologie zu untersuchen. Maus #4 Bauch-Drüsen wurden von ca. 8-10 Wochen alten weiblichen nulliparous Mäusen, in neutral gepuffertem Formalin fixiert, geschnitten und gefärbt mit Immunohistochemistry für ECM Proteine extrahiert.

Isolierung von intakt, ganze Maus Milchdrüsen zur Analyse der extrazellulären Matrix Ausdruck und Drüse Morphologie

Wir präsentieren eine recht einfache und empfindliche Methode zur genauen Quantifizierung der Gallengangsdichte in der Mausleber. Diese Methode kann bei der Bestimmung der Auswirkungen von genetischen und ökologischen Modifikatoren und der Wirksamkeit potenzieller Therapien in Mausmodellen von Gallenerkrankungen helfen.

Bestimmung der Gallengangsdichte in der Mausleber

Dieser Artikel beschreibt eine Transplantationsmethode, um Spenderratten-Epithelzellen in das interskapulierliche weiße Fettpolster von Empfängertieren zu transplantieren. Diese Methode kann verwendet werden, um wirtliche und/oder Spendereffekte auf die Entwicklung von Brustepithel zu untersuchen und eliminiert die Notwendigkeit einer Vorabklärung, wodurch die Nützlichkeit dieser Technik erweitert wird.

Ratte Mammary Epithel Cell Transplantation in das interskapulierische weiße Fettpad

Dieses Protokoll beschreibt ein neuartiges Brustbildfenster mit einem austauschbaren Deckel (R.MIW). Die intravitale Mikroskopie nach Implantation des R.MIW ermöglicht eine Längs- und Mehrtagesbildgebung der gesunden und erkrankten Brustdrüse mit zellulärer Auflösung während der verschiedenen Entwicklungsstadien.

Längsschnittliche intravitale Mikroskopie unter Verwendung eines Brustbildgebungsfensters mit austauschbarem Deckel

Es wird ein Verfahren zur Abgabe einer chemischen ablativen Lösung an den Brustduktalbaum der Ratte zur bildgeführten präventiven Behandlung von Brustkrebs beschrieben. Brustepithelzellen können mit minimalen Kollateralgewebeschäden durch Kanülierung direkt in die Brustwarzenöffnung und intraduktale Infusion einer 70% Ethanol-basierten ablativen Lösung gezielt angegriffen werden.

Röntgenvisualisierung einer intraduktalen ethanolbasierten ablativen Behandlung zur Prävention von Brustkrebs in Rattenmodellen

Hier beschreiben wir ein einfaches und wirtschaftliches Protokoll zur unvoreingenommenen Quantifizierung der pulmonalen mikrovaskulären Dichte für das Lungengewebe ganzer Mäuse unter Verwendung einer Einzelfärbung von Isolectin B4.

Quantifizierung der pulmonalen mikrovaskulären Dichte bei Mäusen über Läppchen hinweg

Erfahren Sie die modifizierte Sholl-Analyse zur objektiven Quantifizierung der Verzweigungsdichte in Ratten-Mamma-Drüsen-Vollkonserven. Diese Methode mit ImageJ ermöglicht präzise Entwicklungsstudien.

Quantifizierung der Verzweigungsdichte in Ratten-Mamma-Gland-Vollkonserven unter Verwendung der Sholl-Analysemethode

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