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DOI: 10.3791/55835-v
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Eine abgekürzte Fraktionierung-Protokoll für die Bereicherung der Waschmittel-unlösliche Aggregate von Post-mortem Gehirn wird beschrieben.
Das übergeordnete Ziel dieses Fraktionierungsprotokolls ist die Anreicherung von Detergenzien-unlöslichen Proteinaggregaten aus menschlichem postmortalem Hirngewebe. Diese Methode kann also dazu beitragen, Schlüsselfragen im Bereich der Neurodegeneration zu beantworten, wie z.B. die Identifizierung und Charakterisierung von fehlgefalteten Proteinaggregaten bei Krankheiten. Der Hauptvorteil dieser Technik ist die fasziale Anreicherung und Isolierung von detergenzien-unlöslichen Proteinaggregaten aus dem Hirngewebe innerhalb eines kurzen Zeitrahmens.
Dieses Verfahren wird von Tram Nguyen, einem Techniker aus meinem Labor, vorgeführt. Gewinnen Sie gefrorenes postmortales Hirngewebe aus gesunder Kontrolle und pathologisch bestätigter Alzheimer-Krankheit. Verwenden Sie eine Pinzette und eine Rasierklinge, um etwa 250 Milligramm Teile der grauen Substanz aus jeder Gewebeprobe herauszuschneiden. Lassen Sie das Gehirnsegment eine Minute lang auftauen.
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