Confocal Imaging of Neuropeptide Y-pHluorin: A Technique to Visualize Insulin Granule Exocytosis in Intact Murine and Human Islets

Madina Makhmutova; Tao Liang; Herbert Gaisano; Alejandro Caicedo; Joana Alma&#231;a

doi:10.3791/56089

Confocal Imaging von Neuropeptid Y-pHluorin: eine Technik, um Insulin Granulat Exozytose in intak...

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Confocal Imaging of Neuropeptide Y-pHluorin: A Technique to Visualize Insulin Granule Exocytosis in Intact Murine and Human Islets

Confocal Imaging von Neuropeptid Y-pHluorin: eine Technik, um Insulin Granulat Exozytose in intakten murinen und menschliche Inseln visualisieren

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09:41 min

September 13, 2017

DOI: 10.3791/56089-v

Madina Makhmutova¹, Tao Liang², Herbert Gaisano², Alejandro Caicedo¹, Joana Almaça¹

¹Department of Medicine,University of Miami, ²Department of Medicine,University of Toronto

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Wir beschreiben ein Protokoll für die Visualisierung von Insulin Exozytose in intakte Inseln mit pHluorin, eine pH-Sensitive grün fluoreszierendes Protein. Isolierte Inseln sind mit Adenoviren Codierung gekoppelt an die Vesikel Fracht Neuropeptid Y pHluorin infiziert. Dies ermöglicht für den Nachweis von Insulin Granulat Fusion Veranstaltungen konfokalen Mikroskopie.

Das übergeordnete Ziel dieses Assays ist es, die Exozytose von Insulingranula in intakten Pankreasinseln durch konfokale Mikroskopie in Echtzeit sichtbar zu machen. Diese Methode wird Schlüsselfragen im Bereich Diabetes beantworten. Was reguliert zum Beispiel die Insulinexozytose?

Dies ist von entscheidender Bedeutung, da die Granulafusion das wichtigste Ereignis im Leben einer besseren Zelle ist. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass wir intakte Inselzellen verwenden können, wir können Fusionsereignisse in Zellen in ihrer natürlichen Umgebung sehen. Madina Mahkmutova, eine Doktorandin aus unserem Labor, wird die Technik vorführen.

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