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DOI: 10.3791/56118-v
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Das Hauptziel dieser Studie war die Nadel anpassen Verglasung (NIV) Verfahren um ganze Zebrafisch Hoden Ovarialgewebe eingetaucht. Darüber hinaus wurde die Reproduzierbarkeit der Methode in fünf verschiedenen Zebrafisch-Sorten getestet.
Die Kryokonservierung bietet die Möglichkeit, lebende Zellen und Gewebe zumindest aus menschlicher Sicht unendlich lange bei niedrigen Temperaturen zu halten. Die Vitrifikation ist eine Form der Kryokonservierung, bei der ultraschnell in einen glasigen, amorphen Zustand abgekühlt wird, ohne dass sich kristallines Eis bildet und ohne die damit verbundenen Schäden. In diesem Video stellen wir das Protokoll für die Vitrifikation ganzer Zebrafischhoden vor, das eine sichere Lagerung bis zu ihrer späteren Verwendung als Quelle von Keimzellen für die Transplantation in geeignete Empfänger ermöglicht.
Das derzeitige Vitrifikationsprotokoll hat einen wesentlichen Vorteil gegenüber den langsamen Einfrierprotokollen in Bezug auf die Manipulation von Keimstammzellen. Und das ist, dass nach der Vitrifikation und Erwärmung die Spermien absterben und sie so angepasst werden, dass sie nicht in der Zellsuspension vorhanden sind. Daher ist eine Isolierung der Keimzellen nach der Erwärmung nicht erforderlich.
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