Mangelnde Reinigung Überprüfung in der pharmazeutischen Industrie wegen Unreinheit des Edelstahl-Oberfläche

Das übergeordnete Ziel dieser Arbeit ist es, hohe und reproduzierbare Rückgewinnungsraten von pharmazeutischen Rückständen von der Oberfläche von Edelstahlcoupons zu erzielen, indem die besten Praktiken für die Entwicklung analytischer Reinigungsmethoden für kleine Moleküle, therapeutische Proteine und Antikörper angewendet werden. Diese Methode kann dazu beitragen, wichtige Fragen im Bereich der Reinigungsverifizierung in der pharmazeutischen Industrie zu beantworten, z. B. warum die Reinigungsverifizierung von Produktionsanlagen versagt. Der Hauptvorteil dieser Studie besteht darin, dass sie das Verfahren zur ordnungsgemäßen Reinigung der Oberfläche der Edelstahlcoupons zeigt, die für die Validierung der Analysemethode verwendet werden.

Um dieses Experiment zu starten, bereiten Sie Probenlösungen des Arzneimittels vor, die in einem Verdünnungsmittel Ihrer Wahl gelöst sind, nachdem Sie die Reinigungsgrenze für ein Arzneimittel berechnet haben. Reinigen Sie die Edelstahlcoupons, indem Sie sie mit Wasser abspülen und die Oberfläche zweimal 10 bis 15 Sekunden lang abwischen. Wiederholen Sie dann diesen Spül- und Wischschritt mit Methanol, um alle Rückstände zu entfernen.

Um den fortschrittlichen Reinigungsansatz mit Clean-in-Place-Lösungen durchzuführen, tauchen Sie die Coupons in Hochleistungsflüssigkeitschromatographie oder Wasser in HPLC-Qualität und beschallen Sie sie zwei Minuten lang. Tauchen Sie die Coupons in eine 0,1%ige alkalische Reinigungslösung in HPLC-Wasser und beschallen Sie sie zwei Minuten lang. Tauchen Sie die Coupons erneut in HPLC-Wasser und wiederholen Sie die zweiminütige Beschallung.

Tauchen Sie sie dann in eine 0,1%ige saure Waschmittellösung in HPLC-Wasser und beschallen Sie sie zwei Minuten lang. Beenden Sie mit einer zweiminütigen Beschallung in HPLC-Wasser. Befestigen Sie anschließend die Edelstahlcoupons mit einem doppelseitigen Klebeband auf der Unterseite eines 250-Milliliter-Kunststoffbechers.

Halten Sie den Becher während des Eingriffs fest, um das Aufspießen und Abtupfen zu erleichtern und Unfälle zu vermeiden. Verwenden Sie eine Verdrängerpipette, um ein definiertes Wirkstoffvolumen in der gewünschten Konzentration und Formulierung in einem wirbelnden Muster auf der Couponoberfläche zu infundieren. Sobald die Oberfläche des Coupons trocken ist, tauchen Sie einen trockenen Tupfer in ein Fläschchen mit zwei Millilitern Verdünnungsmittel.

Drücken Sie den Tupfer gegen die Innenseite des Fläschchens, um überschüssiges Lösungsmittel zu entfernen. Wischen Sie die Couponoberfläche mit gleichmäßigen, überlappenden Seitwärtsbewegungen mit einer Seite des Nasstupfers fest ab, bis die gesamte Testfläche von 50 Quadratzentimetern abgewischt ist. Verwenden Sie dieselbe Seite des Tupfers, um den Wischvorgang zu wiederholen.

Tupfen Sie jeden der vier Ränder des Coupons zweimal ab. Drehen Sie den Coupon um 90 Grad und verwenden Sie die andere Seite des Tupfers, wobei Sie nun die Wischrichtung um 90 Grad drehen. Wiederholen Sie die Reinigung mit dieser Seite des Tupfers auf die gleiche Weise und achten Sie darauf, alle vier Ränder des Coupons zweimal abzuwischen.

Schneiden Sie nach dem Abwischen der Oberfläche den Tupferkopf mit einer Schere in das Lösungsmittelfläschchen. Wiederholen Sie danach den gesamten Abstrichvorgang mit einem zweiten Tupfer, während Sie den Coupon um 90 Grad in die gleiche Richtung drehen, die Sie zuvor gewählt haben. Als nächstes beschallen Sie das Fläschchen mit zwei Tupferköpfen fünf Minuten lang.

Wirbeln Sie dann das Fläschchen 10 Sekunden lang ein. Übertragen Sie schließlich die Lösung in ein HPLC-Fläschchen und beschriften Sie sie als Arbeitslösung. Um die Probe zurückzugewinnen, bereiten Sie die Kontrolllösungen vor, indem Sie 200 Mikroliter jeder Coupon-Spiking- oder Probenlösung mit 1.800 Mikrolitern Verdünnungsmittel mischen.

Verwenden Sie diese Lösungen, um die Chromatographie gemäß dem Textprotokoll durchzuführen. Berechnen Sie die Wiederfindung der Tupfer-Arbeitslösung auf der Grundlage der relativen Fläche unter den Peaks der Arbeits- und Kontrolllösungen. Wiederholen Sie diesen Vorgang für drei Coupons, um die durchschnittliche Rückgewinnung und die relative Standardabweichung zu berechnen.

Bevor die Coupons bereinigt wurden, waren die Rückgewinnungsergebnisse für verschiedene Spike-Stufen inkonsistent, unabhängig vom Wirkstoff- oder API-Hilfsstoffverhältnis, von verschiedenen Analysten oder sogar von einem anderen Tag für denselben Analysten. Die Mehrzahl der Wiederfindungsergebnisse wies eine hohe relative Standardabweichung auf. Die beobachtete Variabilität in der Wiederfindung wurde nicht beseitigt, als mehrere verschiedene Parameter angepasst wurden, darunter die Abstrichtechnik, das Verdünnungsmittel, das Spike-Lösungsmittel, der pH-Wert des Spikes und des Verdünnungsmittels, die Spiking-Technik und die Extraktionstechnik.

Die Differenz zwischen der individuellen Rückgewinnung auf jeder Kuponoberfläche und der durchschnittlichen Rückgewinnung zeigt, dass die durchschnittliche Rückgewinnung von einer Kuponoberfläche zur anderen unterschiedlich ist, daher ist es sehr wahrscheinlich, dass die beobachtete Variabilität von den Unterschieden zwischen den Kuponoberflächen herrührt. Nach Befolgung der in diesem Protokoll beschriebenen Coupon-Bereinigung waren die Wiederfindungsergebnisse von einem Versuch zum anderen reproduzierbar, mit minimalem Unterschied in der Wiederfindung zwischen den Coupons. Die hier durchgeführte Coupon-Reinigung führte zu Gewinnungsraten von mehr als 90 %Darüber hinaus waren die relativen Standardabweichungswerte für jedes Spiking-Level akzeptabel und geringer als die vor der Reinigung erzielten Ergebnisse.

Einmal gemeistert, kann die Reinigung der Coupons in weniger als 30 Minuten durchgeführt werden, wenn sie richtig durchgeführt wird. Wenn Sie dieses Verfahren versuchen, ist es wichtig, sich daran zu erinnern, wie Sie richtig aufspießen und wiederherstellen können, ohne die interessierende Analyse zu verlieren. Nachdem Sie sich dieses Video angesehen haben, sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie Sie Edelstahloberflächen richtig reinigen, um eine hohe und reproduzierbare Rückgewinnung der Rückstände zu erzielen.

Nach ihrer Entwicklung ebnete diese Technik Forschern in der pharmazeutischen Industrie den Weg, zuverlässige Reinigungsdaten für Herstellungsprozesse zu liefern.